Aspectos clínicos, histológicos e de microscopia eletrônica dos granulomas de intubação das pregas vocais

Granulomas são lesões bilaterais e pediculadas das apófises vocais. Etiologias: intubação, refluxo, traumatismos, fonotraumatismo e idiopática. OBJETIVO: Analisar aspectos clínicos e morfológicos dos granulomas de intubação. MATERIAL E MÉTODOS: Estudo retrospectivo dos pacientes submetidos à microcirurgia por granulomas de intubação, atendidos na Instituição onde foi realizado, a partir de 2002. Analisaram-se: idade, sexo, indicação e tempo da intubação, sintomas, laudos de videolaringoscopia e número de biópsia. Realizou-se estudo histológico em todos os casos e de microscopia eletrônica em três deles. RESULTADOS: 10 pacientes (7 F e 3 M), idade entre 2 anos e 72 anos e tempo de intubação entre 4 horas e 21 dias. Rouquidão foi o principal sintoma. A histologia mostrou hiperplasia epitelial, intenso inflamação importante no corion e proliferação vascular. Na MEV observou-se epitélio escamoso com escassa descamação. À MET, junções intercelulares alargadas e desmossomos alterados. No corion havia lagos sanguíneos, intensa inflamação, e fibroblastos com alterações estruturais como núcleos irregulares e cisternas dilatadas. CONCLUSÕES: Granulomas pós-intubação aparecem em qualquer idade, mesmo em intubação por curto período, e causam rouquidão precocemente. As principais alterações morfológicas são observadas no corion, como proliferação vascular, inflamação e alterações estruturais em fibroblastos indicando disfunção e dano celular.

Histological and immunohistochemical study of the expression of p53 and ki-67 proteins in the mucosa of the tongue, pharynx and larynx of rats exposed to cigarette smoke

Introduction: Head and neck cancers are linked to smoking. The most affected sites are the oral cavity, pharynx and larynx. Experimental studies show epithelial lesions caused by cigarette smoke. Objectives: To investigate in rats the effects of acute cigarette smoke exposure on the mucosa of the tongue, pharynx and larynx.Material and method: Wistar rats were allocated into two groups of 20 animals: CG (control) receiving food and water ad libitum and TG (Tobacco) exposed to the smoke of 40 cigarettes/day for 60 days. Biopsy of their tongues, pharynxes and larynxes were subjected to histopathological, histomorphometric and immunohistochemical studies of protein p53 and ki-67.Result: The histological analysis of tongue from the Tobacco group revealed epithelial hyperplasia (90%), basal cell hyperplasia (95%) and mild to moderate dysplasia (85%). In pharynx showed basal cell hyperplasia (85%), dysplasia (25%) and vascular congestion (95%). In larynx showed basal cell hyperplasia (70%), epithelial hyperplasia (55%), congestion (100%) and inflammatory infiltrate (25%). Morphometric analysis revealed that keratin layer thickness was greater in the tobacco group. P53 immunoexpression was negative in both groups. Ki-67 immunoexpression was positive in basal cell nuclei but in parabasal cell nuclei it was positive only in the Tobacco group.Conclusions: The exposure of animals to cigarette smoke for 60 days resulted in benign lesions. The duration of exposure was not enough to cause the development cancer, as confirmed by the negative expression of p53 protein in all slides examined. Analysis of ki-67 expression showed intense epithelial proliferation in response to damage.

Virulence profiles of ten Paracoccidioides brasiliensis isolates obtained from armadillos (Dasypus novemcinctus)

Paracoccidioides brasiliensis is the etiologic agent of paracoccidioidomycosis ( PCM), the most important systemic mycosis in Latin America. The armadillo, Dasypus novemcinctus, has been confirmed as the primary natural reservoir of this fungus. Its geographic distribution is similar to that of human PCM. In this study, virulence profiles of 10 P. brasiliensis isolates from different armadillos and of two clinical isolates were tested in an experimental hamster model. Pathogenicity was evaluated by counting cfu and performing histopathological analysis in the testis, liver, spleen and lung. Circulating specific antibodies were measured using enzyme- linked immunosorbent assay ( ELISA). All isolates from armadillos were virulent in the model, with dissemination to many organs. The clinical isolates, which had long been stored in cultured collections, were less virulent. The isolates were classified into four virulence categories according to number of cfu per gram of tissue: very high, high, intermediate and low. This study confirms that armadillos harbor pathogenic genotypes of P. brasiliensis, probably the same ones that infect humans.

Isolation of coccidioides brasiliensis from armadillos (Dasypus noveminctus) captured in an endemic area of paracoccidioidomycosis

Paracoccidioides brasiliensis, the causative agent of paracoccidioidomycosis (PCM), was first isolated from armadillos from the Amazonian region where the mycosis is uncommon. In the present study, we report on the high incidence of PCM infection in armadillos from a hyperendemic region of the disease. Four nine-banded armadillos (Dasypus novemcinctus) were captured in the endemic area of Botucatu, São Paulo, Brazil, killed by manual cervical dislocation and autopsied under sterile conditions. Fragments of lung, spleen, liver, and mesenteric lymph nodes were processed for histology, cultured on Mycosel agar at 37 degrees C, and homogenized for inoculation into the testis and peritoneum of hamsters. The animals were killed from week 6 to week 20 postinoculation and fragments of liver, lung, spleen, testis, and lymph nodes were cultured on brain heart infusion agar at 37 degrees C. Paracoccidioides brasiliensis was isolated from three armadillos both by direct organ culture and from the liver, spleen, lung, and mesenteric lymph nodes of hamsters. In addition, one positive armadillo presented histologically proven PCM disease in a mesenteric lymph node. The three armadillos isolates (Pb-AL, Pb-A2, and Pb-A4) presented thermodependent dimorphism, urease activity, and casein assimilation, showed amplification of the gp43 gene, and were highly virulent in intratesticularly inoculated hamsters. The isolates expressed the gp43 glycoprotein, the immunodominant antigen of the fungus, and reacted with a pool of sera from PCM patients. Taken together, the present data confirm that armadillos an a natural reservoir of P. brasiliensis and demonstrate that the animal is a sylvan host to the fungus.

Lack of Epstein-Barr virus infection in cervical carcinomas

Context.-The Epstein-Barr virus (EBV) is a ubiquitous microorganism strongly associated with lymphoproliferative disorders and a large number of human neoplasms, mainly undifferentiated nasopharyngeal carcinoma and Burkitt lymphoma. The viral DNA has been detected in other tumors, such as carcinomas from tonsil, salivary glands, and thymus, and malignancies of the female genital tract. Some authors have proposed that EBV could play a role in the carcinogenesis of cervical tumors; however, other studies do not support this hypothesis.Objective.-To assess whether EBV is associated with female genital tract neoplasms.Design.-Sixty-five biopsy specimens (5 in situ carcinomas, 24 invasive squamous cell carcinomas, 6 lymphoepithelioma-like carcinomas, and 30 endocervical adenocarcinomas) were used to perform EBV detection through RNA in situ hybridization.Results.-None of the cervical carcinoma cases studied was positive for EBV infection.Conclusions.-The results suggest that it is still premature to incriminate EBV in the carcinogenesis of cervical carcinoma.

Geographic variation in Epstein-Barr virus-associated Burkitt's lymphoma in children from Brazil

In developing countries, BL has a strong association with EBV infection during childhood. In South America, the data have shown an EBV association intermediate between that reported in the United States (30%) and that in equatorial Africa (95%). Early age at EBV infection and lower socioeconomic status have been related to increased EBV-associated BL in developing countries. In Brazil, there are not enough data on childhood BL related to EBV infection. Our aim was to evaluate the clinicopathologic features and EBV association of 44 children with NHL from the state of Rio de Janeiro, situated in the southeast of Brazil. EBV was detected using RNA in situ hybridization in 36 biopsy specimens. DNA from fresh tumor samples and from paraffin-embedded tissues of patients were analyzed by PCR, in which the first reaction included primers for an EBNA-2 common region while the nested reaction amplified the region discriminating between EBV types I and 2 in separate reactions. EBV was detected in 21 of 29 BLs (72%), and type I virus infected the majority of EBV-positive BLs (18/21). There was a trend for younger age in children with EBV-positive BL compared to EBV-negative BL (median age 4 compared to 6 years, respectively; p = 0.056). Our study confirmed that in the southeast of Brazil BL had an intermediate association with EBV. A higher rate of EBV-associated BL was described in the northeast of Brazil. These differences are probably related to regional socioeconomic status. In conclusion, our study suggests that early infection with EBV in the background of a low socioeconomic condition associated with other environmental factors could contribute to BL in Brazil. (C) 2003 Wiley-Liss, Inc.

Cutaneous pyogranuloma in a cat caused by virulent Rhodococcus equi containing an 87 kb type I plasmid

A 2-year-old intact male domestic shorthaired cat presented with a chronic, nodular, ulcerated, cutaneous lesion on the right thoracic limb. Histological and cytological examination revealed a pyogranulomatous inflammation with basophilic organisms in the macrophages. A virulent form of Rhodococcus equi containing an 87 kb type I (VapA) virulence plasmid was identified from cultures of biopsy samples. This report describes the clinicopathological features, plasmid profile and virulence of this case of R equi infection.

Avaliação da expressão da proteína bcl-2 no carcinoma de mama: estudo em punção aspirativa por agulha fina; correlação com grau histológico em espécimes cirúrgicos correspondentes

INTRODUÇÃO: O gene bcl-2 codifica uma proteína envolvida no processo de controle da apoptose. Inicialmente descrito em linfomas e posteriormente em tecidos epiteliais, sua expressão é freqüentemente encontrada em carcinomas de mama, associada a fatores de prognóstico favorável. Como a punção aspirativa por agulha fina (PAAF) tem sido utilizada como um método confiável na investigação de carcinomas de mama, acessamos a expressão de bcl-2 em material assim obtido e correlacionamos sua positividade com o grau histológico, avaliado em material cirúrgico correspondente, das respectivas pacientes, seguindo a classificação de SBR (Scarff, Bloom e Richardson). OBJETIVOS: Avaliar a expressão de bcl-2 em PAAF e correlacionar com grau histológico. METODOLOGIA: A positividade do bcl-2 foi analisada, por imunocitoquímica, em 118 casos consecutivos de PAAF e correlacionada com grau histológico em material cirúrgico correspondente, segundo classificação de SBR. RESULTADOS: A positividade para bcl-2 foi encontrada em 77 de 118 casos de PAAF (65,25%) e foi inversamente proporcional ao grau histológico (84,37%, p = 0,0022). CONCLUSÃO: A expressão de bcl-2 em PAAF correlaciona-se com fator de bom prognóstico. O índice de positividade encontrado, assim como a correlação inversa com grau histológico, está de acordo com dados publicados previamente. O fácil e rápido manejo do material obtido por PAAF permite a aplicação de técnicas complementares, de maneira confiável, como demonstra este estudo. A positividade do bcl-2 correlacionada com baixo grau histológico, assim como com outros fatores de bom prognóstico, pode, no futuro, proporcionar informação preditiva e prognóstica para pacientes candidatas a tratamento quimioterápico neo-adjuvante.

Síndrome de ativação macrofágica em paciente com lúpus eritematoso sistêmico juvenil

A hemofagocitose reativa ou síndrome de ativação macrofágica (SAM) é uma complicação das doenças inflamatórias sistêmicas, causada por expansão de células T e macrófagos, com produção maciça de citocinas pró-inflamatórias, ocorrendo mais freqüentemente na artrite idiopática juvenil sistêmica e raramente no lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESJ). OBJETIVO: Relatar um caso de LESJ que evoluiu com SAM precipitada por infecção e infarto esplênico, com desfecho fatal. RELATO DE CASO: Uma menina de 7 anos, com diagnóstico de LESJ desde os 5 anos, evoluiu com artrite em atividade, alopecia intensa, citopenias, cefaléia, infecções respiratórias recorrentes e elevação intermitente de transaminases. Os anticorpos anti-DNA e anticardiolipina IgG e IgM foram identificados e a biópsia renal evidenciou glomerulonefrite lúpica de classe III. A paciente foi tratada com pulso de metilprednisolona, prednisona, azatioprina e hidroxicloroquina. Após dois anos, na vigência de pneumonia apresentou abdome agudo e convulsões, evoluindo para o choque hemorrágico fatal após esplenectomia, que evidenciou infarto esplênico e infiltração maciça por macrófagos hemofagocíticos CD163+. CONCLUSÃO: A revisão do desfecho sugere a SAM precipitada por infecção e sobreposta a atividade inflamatória do lúpus com febre persistente, citopenias, disfunção hepática, hepatomegalia e esplenomegalia, como efeitos do excesso de produção de citocinas. Os anticorpos anticardiolipina podem ter tido papel precipitante na coagulopatia, que resultou infarto esplênico e choque hemorrágico.

Hiperoxalúria primária com insuficiência renal crônica terminal em lactente

Objetivo: descrever caso clínico de um lactente com insuficiência renal crônica terminal, causada por hiperoxalúria primária.Método: após revisão da literatura, verifica-se a raridade da doença; na França, a prevalência é de 1,05/milhão, com taxa de incidência de 0,12/milhão/ano. Pesquisa abordando centros especializados mundiais detectou, em 1999, 78 casos em lactentes; destes, em 14% o quadro inicial foi de uremia. A gravidade e a raridade da doença sugerem o relato deste caso.Resultados: criança de sexo feminino, com quadro de vômitos e baixo ganho de peso desde os primeiros meses de vida, desenvolveu insuficiência renal terminal aos 6 meses de idade, sendo mantida em tratamento dialítico desde então. Aos 8 meses, foi encaminhada para esclarecimento diagnóstico, apresentando déficit pôndero-estatural grave e os seguintes exames laboratoriais: uréia= 69 mg/dl, creatinina=2,2 mg/dl e clearance de creatinina= 12,5 ml/min/1.73m²SC. O exame de urina foi normal, a ultra-sonografia renal revelou tamanho normal e hiperecogenicidade de ambos os rins. A dosagem de oxalato urinário foi de 9,2mg/kg/dia ou 0,55 mmol/1.73m²SC, e a relação oxalato:creatinina, de 0,42. A biópsia renal diagnosticou presença de grande quantidade de depósitos de cristais de oxalato de cálcio no parênquima renal. A radiografia de ossos longos evidenciou sinais sugestivos de osteopatia oxalótica, e a fundoscopia indireta, sinais de retinopatia por oxalato. A criança foi mantida em diálise peritoneal ambulatorial contínua, tendo sido iniciado tratamento com piridoxina.Conclusões: a hiperoxalúria primária deve ser considerada como um dos diagnósticos diferenciais de insuficiência renal crônica em lactentes, especialmente na ausência de história sugestiva de outras patologias.

Decreased Sperm Motility in Rats Orally Exposed to Single or Mixed Pesticides

The Brazilian Agency of Sanitary Vigilance (ANVISA) conducted a study that demonstrated the presence of residues of several pesticides in fresh fruits and vegetables that were available for purchase by the general populace. In order to evaluate potential adverse health effects of low-level exposure to agrochemicals, the reproductive toxicity of the pesticides dicofol, dichlorvos, permethrin, endosulfan, and dieldrin was evaluated in rats dosed with these chemicals individually or as mixtures. Sixty male Lewis rats (6 wk old, 200 x g) were randomly allocated to 8 groups: (1) control group, received basal diet; (2) 5 groups designated a to e received the diet containing each pesticide individually, at the respective effective doses: lowest-observed-adverse-effect level (LOAEL) for dieldrin and endosulfan, lowest-observed-effect level (LOEL) for dicofol, and lowest effect level (LEL) for dichlorvos and permethrin, respectively, depending on the published data; (3) effective dose group, which received a mixture of pesticides added to basal diet at the respective doses reported to produce adverse effects; and (4) low dose group, which received a pesticide mixture added to the basal diet, where each pesticide was at its no-observed-effect level (NOEL). After 8 wk of treatment, reproductive parameters were evaluated. Sperm morphology, daily sperm production (DSP), sperm transit time through the epididymis, hormonal levels, and histopathological evaluation of testis and epididymis did not differ significantly among the groups. However, sperm motility was significantly decreased in animals that received a mixture of dieldrin, endosulfan, dicofol, dichlorvos, and permethrin, as well as in the group receiving dicofol alone. Exposure to the individual pesticides endosulfan, dichlorvos, and permethrin did not markedly affect sperm motility. The impairment of sperm motility in the mixture of pesticides at the NOEL level indicates that reproductive effects not seen with individual pesticides may occur in presence of several pesticides due to an additive effect. However, the pesticide mixtures did not appear to affect DSP or spermatogenesis despite reduced sperm motility.

Mitochondrial Alterations in Nonalcoholic Fatty Liver Disease. Pediatric Case Description of Three Submitted Sequential Biopsies

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a clinical-pathological syndrome that encompasses a wide spectrum of morphologic alterations, ranging from simple hepatic steatosis to a more severe stage, known as nonalcoholic steatohepatitis (NASH). The purpose of this clinical report was to contribute to the understanding of mitochondrial alterations in NAFLD. The child (13-month-old) underwent initial biopsy in the year 2000 and was diagnosed with diffuse macro and microvesicular steatosis. Two additional biopsies were performed in 2001 and 2004. A high percentage of microvesicular steatosis was observed in the biopsies performed in 2000 and 2001. Mitochondrial size was slightly increased in the biopsy performed in the year 2000, significantly increased in 2001 and decreased in 2004. The presence of "mitochondrial hypertrophy" in the hepatocytes of an asymptomatic pediatric patient whose disease presentation was typical of NAFLD, excluding other pathological processes, allowed us to suspect that such a defect was considered the primary mitochondrial disorder.

Role of Peritubular Capillaries and Vascular Endothelial Growth Factor in Chronic Allograft Nephropathy

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Experimental poisoning by Senecio brasiliensis in calves: quantitative and semi-quantitative study on changes in the hepatic extracellular matrix and sinusoidal cells

A matriz extracelular (MEC) desempenha um papel importante em lesões hepáticas crônicas e tem sido estudada em modelos de intoxicação experimental. em bovinos, no entanto, não há estudos específicos sobre a MEC hepática normal ou com lesões crônicas. Por isso, foi desenvolvido um modelo de intoxicação experimental hepático usando Senecio brasilliensis, uma planta que contém alcalóides pirrolizidínicos e causa lesão hepática dependente da dose. Cinco bezerros receberam por via oral, 0.38g/kg de folhas secas por 24 dias. Biópsias hepáticas foram obtidas a cada 15 dias durante 60 dias. Sinais clínicos de complicações digestivas surgiram da terceira semana do experimento. Um bezerro morreu aos 45 dias e os outros quatro foram avaliados até os 60 dias. As biópsias hepáticas foram processadas para microscopia óptica, imuno-histoquímica e microscopia eletrônica de transmissão. No trigésimo dia, as lesões hepáticas eram progessivas caracterizadas por vacuolização hepatocelular, necrose, apoptose, megalocitose, e fibrose centrolobular, pericelular e portal. Foram realizadas avaliações quantitativas e semi-quantitativas de componentes da MEC hepática antes e após o aparecimento das lesões. Foi realizada morfometria do colágeno total e do sistema de fibras elásticas. Colágeno total e colágenos tipos I e III aumentaram progressivamente em todos os locais do fígado. Mudanças na localização, quantidade e disposição do sistema de fibras elásticas foram também observadas. Houve um aumento significativo de células de Kupffer aos 30 dias e de células sinusoidais totais aos 45 e 60 dias. As lesões hepáticas neste experimento foram progressivas mesmo após a remoção da planta. Lesões de fibrose severa foram localizadas principalmente nos espaços porta, seguido por fibrose veno-oclusiva e pericelular. Os colágenos tipo I e tipo III foram observados no fígado normal e no fígado dos bezerros afetados, com predomínio do tipo I. Nos bezerros afetados o aumento do colágeno total e do sistema de fibras elásticas foi paralelo ao aumento no número das células sinusoidais.

Padrões morfológicos de lesão glomerular e correlação com achados clinicolaboratoriais de 43 crianças com síndrome nefrótica

OBJETIVOS: Avaliar a associação entre os parâmetros clinicolaboratoriais e alteração morfológica de biópsias renais em crianças com síndrome nefrótica. MÉTODOS: Os dados foram obtidos dos prontuários médicos de 43 crianças com síndrome nefrótica submetidas a biópsia renal. RESULTADOS: Vinte e oito pacientes eram do sexo masculino (65,1%), idades entre 1,4 a 12 anos (média de 4,7±3,2). Quarenta e dois pacientes (97,7%) apresentaram edema; 83,7%, oligúria e 32,5%, hipertensão arterial. A média de proteinúria foi 15,3g/1,73m²SC/dia e 55,8% apresentaram hematúria microscópica. As biópsias renais mostraram: glomerulonefrite proliferativa mesangial (GNPM) em 37,2%, glomeruloesclerose segmentar e focal (GESF) em 27,9%, alterações glomerulares mínimas (LM) em 25,6%, glomerulonefrite membranoproliferativa (GNMP) em 7% e glomerulonefrite membranosa (GNM) em 2,3%. Vinte e seis pacientes (60,5%) apresentaram resistência ao corticosteróide. Idade, sexo, hipertensão arterial, oligúria, uréia e creatinina séricas não mostraram diferenças estatísticas significativas entre os pacientes com GNPM, GESF e LM. Os pacientes com GNPM e GESF apresentaram maior freqüência de hematúria microscópica (p < 0,003 e p < 0,03; respectivamente). Os pacientes com GESF apresentaram maiores níveis de proteinúria (p < 0,01 versus LM e p < 0,05 versus GNPM). Os pacientes com LM apresentaram sensibilidade ao corticosteróide (p < 0,001 versus GESF e p = 0,047 versus GNPM). CONCLUSÕES: Sexo, idade, presença de hipertensão arterial ou oligúria e níveis séricos de uréia e creatinina não auxiliaram na diferenciação entre pacientes com GNPM, GESF e LM. Os pacientes com LM apresentaram sensibilidade a corticosteróides e menos probabilidade de apresentar hematúria microscópica. Pacientes com GESF apresentaram maiores níveis de proteinúria.