Lipid microspheres loaded with antigenic membrane proteins of the Leishmania amazonensis as a potential biotechnology application

Lipid microspheres (LM) are excellent drug delivery or vaccines adjuvant systems and are relatively stable. The aim of this work is to develop and characterize a system that is able to encapsulate and present antigenic membrane proteins from Leishmania amazonensis. Membrane proteins are important for vaccine`s formulation because these proteins come in contact with the host cell first, triggering the cell mediated immune response. This is a useful tool to avoid or inactivate the parasite invasion. The LM are constituted by soybean oil (SO), dipalmitoylphosphatidilcholine (DPPC), cholesterol and solubilized protein extract (SPE). The particles formed presented an average diameter of 200 run, low polydispersion and good stability for a period of 30 days, according to dynamic light scattering assays. Isopycnic density gradient centrifugation of LM-protein showed that proteins and lipids floated in the sucrose gradient (5-50%w/v) suggesting that the LM-protein preparation was homogeneous and that the proteins are interacting with the system. The results show that 85% of SPE proteins were encapsulated in the LM. Studies of cellular viability of murine peritoneal macrophages show that our system does not present cytotoxic effect for the macrophages and still stimulates their NO production (which makes its application as a vaccine adjuvant possible). LM-protein loaded with antigenic membrane proteins from L. amazonensis seems to be a promising vaccine system for immunization against leishmaniasis. (C) 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

Local delivery of EGF-liposome mediated bone modeling in orthodontic tooth movement by increasing RANKL expression

Aims: It has long been demonstrated that epidermal growth factor (EGF) has catabolic effects oil bone. Thus. we examined the role of EGF in regulating mechanically induced bone modeling in a rat model of orthodontic tooth movement. Main methods: The maxillary first molars of rats were moved mesially using an orthodontic appliance attached to the maxillary incisor teeth. Rats were randomly divided into 4 groups: (G1) administration of PBS (Phosphate buffer saline Solution (n = 24); (G2) administration of empty liposomes (it = 24): (Q) administration 20 rig of EGF Solution (n = 24): and (G4) 20 ng of EGF-liposomes Solution (it = 24). Each Solution was injected in the mucosa of the left first molar adjacent to the appliance. At days 5, 10, 14 and 2 1 after drug administration. 6 animals of each group were sacrificed. Histomorphometric analysis was used to quantify osteoclasts (Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) + cells) and tooth movement. Using immunohistochemistry assay we evaluated the RANKL (receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) and epidermal growth factor receptor (EGFR) expression. Key findings: The EGF-liposome administration showed an increased tooth movement and osteoclast numbers compared to controls (p<0.05). This was correlated with intense RANKL expression. Both osteoblasts and osteoclasts expressed EGFR. Significance: Local delivery of EGF-liposome stimulates, osteoclastogenesis and tooth movement. (C) 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

Antibody Response from Whole-Cell Pertussis Vaccine Immunized Brazilian Children against Different Strains of Bordetella pertussis

Bordetella pertussis is a gram-negative bacillus that causes the highly contagious disease known as pertussis or whooping cough. Antibody response in children may vary depending on the vaccination schedule and the product used. In this study, we have analyzed the antibody response of cellular pertussis vaccinated children against B. pertussis strains and their virulence factors, such as pertussis toxin, pertactin, and filamentous hemagglutinin. After the completion of the immunization process, according to the Brazilian vaccination program, children serum samples were collected at different periods of time, and tested for the presence of specific antibodies and antigenic cross-reactivity. Results obtained show that children immunized with three doses of the Brazilian whole-cell pertussis vaccine present high levels of serum antibodies capable of recognizing the majority of the components present in vaccinal and non-vaccinal B. pertussis strains and their virulence factors for at least 2 years after the completion of the immunization procedure.

A Comparison of the Home Range Sizes of Mainland and Island Populations of Black-Faced Lion Tamarins (Leontopithecus caissara) Using Different Spatial Analysis

The critically endangered black-faced lion tamarin, Leontopithecus caissara, has a restricted geographical distribution consisting of small mainland and island populations, each with distinct habitats in coastal southeastern Brazil. Necessary conservation management actions require an assessment of whether differences in habitats are reflected in use of space by the species. We studied two tamarin groups on the mainland at Sao Paulo state between August 2005 and March 2007, and compared the results with data from Superagui Island. Three home range estimators were used: minimum convex polygon (MCP), Kernel, and the new technique presented dissolved monthly polygons (DMP). These resulted, respectively, in home ranges of 345, 297, and 282 ha for the 12-month duration of the study. Spatial overlap of mainland groups was extensive, whereas temporal overlap was not, a pattern that indicates resource partitioning is an important strategy to avoid intraspecific competition. L. caissara large home ranges seem to be dynamic, with constant incorporation of new areas and abandonment of others through time. The main difference between mainland and island groups is the amount and variety of sleeping sites. A better understanding of the home range sizes, day range lengths, and territorial behavior of this species will aid in developing better management strategies for its protection. Additionally, the presented DMP protocol is a useful improvement over the MCP method as it results in more realistic home range sizes for wildlife species. Am. J. Primatol. 73: 1114-1126, 2011. (C) 2011 Wiley Periodicals, Inc.

Bovine embryo transfer recipient synchronisation and management in tropical environments

Numerous studies have shown that it is possible to manipulate follicular and luteal dynamics, thereby eliminating the need for oestrus detection in embryo transfer (ET) programmes. Fixed-time ET (FTET) protocols are based on the use of gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) and prostaglandin (PG) F or progesterone/progestogen (P4)-releasing devices and oestradiol. The FTET protocols increases the proportion of recipients transferred, and therefore pregnancy rates, compared with the use of PGF followed by ET 7 days after oestrus. Furthermore, the addition of equine chorionic gonadotrophin (eCG) to the P4 and oestradiol-based FTET protocols results in an even higher proportion of recipients transferred, and thus higher pregnancy rates. The beneficial effect of eCG treatment may be related to increased growth of the dominant follicle and increased plasma P4 concentrations during the subsequent luteal phase. In Bos taurus x Bos indicus recipients, pregnancy rates were positively correlated with the diameter of the corpus luteum (CL) and the number of CL at ET. When repeat-breeder Holstein cows were used as recipients, FTET protocols increased number of recipients transferred and pregnancy rates compared with the traditional PGF-based synchronisation protocols. In conclusion, the use of FTET protocols eliminates the need for the detection of oestrus and results in a greater proportion of recipients transferred and satisfactory pregnancy rates. Thus, FTET optimises the use of recipients, reducing labour and animal handling and facilitating the use of ET.

Xenooplasmic Transfer between Buffalo and Bovine Enables Development of Homoplasmic Offspring

Nuclear-mitochondrial incompatibilities may be responsible for the development failure reported in embryos and fetuses produced by interspecies somatic cell nuclear transfer (iSCNT). Herein we performed xenooplasmic transfer (XOT) by introducing 10 to 15% of buffalo ooplasm into bovine zygotes to assess its effect on the persistence of buffalo mitochondrial DNA (mtDNA). Blastocyst rates were not compromised by XOT in comparison to both in vitro fertilized embryos and embryos produced by transfer of bovine ooplasm into bovine zygotes. Moreover, offspring were born after transfer of XOT embryos to recipient cows. Buffalo mtDNA introduced in zygotes was still present at the blastocyst stage (8.3 vs. 9.3%, p = 0.11), indicating unaltered heteroplasmy during early development. Nonetheless, no vestige of buffalo mtDNA was found in offspring, indicating a drift to homoplasmy during later stages of development. In conclusion, we show that the buffalo mtDNA introduced by XOT into a bovine zygote do not compromise embryo development. On the other hand, buffalo mtDNA was not inherited by offspring indicating a possible failure in the process of interspecies mtDNA replication.

Validation of body condition score as a predictor of subcutaneous fat in Nelore (Bos indicus) cows

The aim of the present study was to determine the relationship among body weight (BW), body condition score (BCS) and rump fat thickness (RFAT) measured by ultrasonography, and validate the relationship between BCS and RFAT over the time. Two hundred sixty and six Nelore cows had their BW, BCS and RFAT evaluated at five different moments during the production cycle: M1) weaning: M2) parturition, M3) 42 days post-partum; M4) 82 days postpartum and M5) 112 days post-partum. A BCS value was attributed for each cow following a I to 5 points scale. Ultrasonographic images for RFAT measurement were obtained using a 3.5 MHz linear transducer. Images were immediately analyzed as soon as they were formed and frozen. Body condition scores and ultrasound measurements were collected on the same day by a single trained technician. The relationship between BCS and RFAT values was investigated by regression models. The analysis of similarity among the five obtained models was performed using the proc MIXED from SAS and the correlations among variables were analyzed with proc CORR from SAS. The BCS was able to predict RFAT in Nelore cows in all different moments evaluated. Also, it was shown that BCS presented high correlation (r=0.82 to 0.93) and relationship (R(2) = 0.73 to 0.92) with RFAT. However, both BCS and RFAT showed low correlation (r=0.37 to 0.50) and relationship (R(2) = 0.13 to 0.25) with BW. The BCS classification by visual method using a 1 to 5 point scale, was able to predict the RFAT in Nelore cows over the time. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

Treatment With a Growth Factor-Protein Mixture Inhibits Formation of Mineralized Nodules in Osteogenic Cell Cultures Grown on Titanium

Despite wide clinical application, the efficacy of platelet-rich plasma (PRP) for repairing bone defects and enhancing osseointegration of metal implants is still subject of debate. This study aimed to evaluate the effects of a well-defined PRP-like mixture containing platelet-derived growth factor-BB, transforming growth factor (TGF)-beta 1, TGF-beta 2, albumin, fibronectin, and thrombospondin [growth factors (GFs) + proteins] on the development of the osteogenic phenotype on titanium (Ti) in vitro. Human alveolar bone-derived osteoblastic cells were subcultured on Ti discs and exposed during the first 7 days to osteogenic medium supplemented with GFs + proteins and to osteogenic medium alone thereafter up to 14 days. Control cultures were exposed to only osteogenic medium. Dose-response experiments were carried out using rat primary calvarial cells exposed to GFs + proteins and 1:10 or 1:100 dilutions of the mixture. Treated human-derived cell cultures exhibited a significantly higher number of cycling cells at days 1 and 4 and of total cells at days 4 and 7, significantly reduced alkaline phosphatase (ALP) activity at days 4, 7, and 10, and no Alizarin red-stained areas (calcium deposits) at day 14, indicating an impairment in osteoblast differentiation. Although the 1:10 and 1:100 dilutions of the mixture restored the proliferative activity of rat-derived osteogenic cells to control levels and promoted a significant increase in ALP activity at day 10 compared with GFs + proteins, mineralized nodule formation was only observed with the 1:100 dilution (similar to 50% of the control). These results showed that a PRP-like protein mixture inhibits development of the osteogenic phenotype in both human and rat osteoblastic cell cultures grown on Ti. (J Histochem Cytochem 57:265-276, 2009)

Effects of a mixture of growth factors and proteins on the development of the osteogenic phenotype in human alveolar bone cell cultures

Strategies to promote bone repair have included exposure of cells to growth factor (GF) preparations from blood that generally include proteins as part of a complex mixture. This study aimed to evaluate the effects of such a mixture on different parameters of the development of the osteogenic phenotype in vitro. Osteoblastic cells were obtained by enzymatic digestion of human alveolar bone and cultured under standard osteogenic conditions until subconfluence. They were subcultured on Thermanox coverslips up to 14 days. Treated cultures were exposed during the first 7 days to osteogenic medium supplemented with a GFs + proteins mixture containing the major components found in platelet extracts [plate I et-derived growth factor-BB, transforming growth factor (TGF)-beta 1, TGF-beta 2, albumin, fibronectin, and thrombospondin] and to osteogenic medium alone thereafter. Control cultures were exposed only to the osteogenic medium. Treated cultures exhibited a significantly higher number of adherent cells from day 4 onward and of cycling cells at days 1 and 4, weak alkaline phosphatase (ALP) labeling, and significantly decreased levels of ALP activity and mRNA expression. At day 14, no Alizarin red-stained nodular areas were detected in cultures treated with GFs + proteins. Results were confirmed in the rat calvaria-derived osteogenic cell culture model. The addition of bone morphogenetic protein 7 or growth and differentiation factor 5 to treated cultures upregulated Runx2 and ALP mRNA expression, but surprisingly, ALP activity was not restored. These results showed that a mixture of GFs + proteins affects the development of the osteogenic phenotype both in human and rat cultures, leading to an increase in the number of cells, but expressed a less differentiated state.

Acompanhamento dos trabalhos de reabilitação de edifícios da Baixa-Chiado

O trabalho em apreço aborda o acompanhamento das intervenções de reabiblitação de vários edifícios na zona histórica da Baixa-Chiado. O interesse por este tipo de trabalho ocorreu devido à necessidade de complementar a diversificada experiência profissional adquirida na Amoníaco de Portugal, com responsabilidade na Inspecção e Diagnóstico, bem como na reabilitação e reforço de estrutura e, ainda, em conservação e restauro em edifícios recentes. A realização deste estágio na Unidade de Projecto Baixa-Chiado visou adquirir competências no processo de reabilitação de edifícios antigos, tendo em vista a observação e caracterização construtiva, diagnóstico, propostas de intervenção, com elaboração dos respectivos projectos, sua aprovação, licenciamento, implementação e acompanhamento de obra. A actividade desenvolvida no âmbito deste estágio recaiu também na visita regular a edifícios antigos e às obras em curso nos mesmos, acompanhando a sua evolução e analisando as soluções construtivas utilizadas. Destas visitas regulares foram colhidos elementos preponderantes para a caracterização do estado de conservação dos respectivos edifícios, com vista a encontrar a melhor solução para a sua reabilitação. Estes elementos foram recolhidos através da realização de vistorias e de outros tipos de levantamentos, designadamente, de arquitectura, topográficos, entre outros, e aompanhamento de alguns ensaios. Com estes tipos de levantamentos descobriram-se várias patologias nos diferentes edifícios, quer nas zonas exteriores, quer nas interiores dos mesmos. Essas anomalias foram, na generalidade, detectadas e posteriormente eliminadas. Noutras situações, em que se optou por demolir o interior dos edifícios mantendo as fachadas (zonas classificadas), constatou-se que houve necessidade de erguer estruturas de contenção e travamento provisórias para garantir a segurança da respectiva edificação e dos edifícios adjacentes. Também se efectuou uma abálise de custos de construção por unidade de área, quer para edifícos a reabilitar, quer para obras de intervenção mais profunda.

Palácio de Monserrate: reabilitação estrutural dos torreões e criação da telha cerâmica romana monserrate

Esta dissertação baseia-se na compreensão de que se está perante um Monumento, património de Sintra e do País, indissociável da magia e do romantismo de uma região que se tornou símbolo de um país singular, de acordo com as cartas e convenções internacionais. O objectivo deste trabalho é elaborar um documento que possa ser utilizado no futuro como base de estudo para a resolução de casos práticos de reabilitação semelhantes ao que se apresenta e também promover uma aprendizagem sobre as técnicas de restauro e reforço de estruturas de madeira. Pretende-se contribuir também com conjunto de experiências profissionais sobre uma matéria que para o nosso País deverá ser cada vez mais tomada em consideração e conhecida. Tentou-se com este trabalho, e a partir da experiência profissional vivida como técnico responsável e colaborador da LNRibeiro Construções Lda. desenvolver a temática do reforço das estruturas de madeira em construções antigas, por se tratar de um material nobre e com propriedades comprovadas, ainda que pouco explorado e actualmente sujeito a preconceitos de utilização. No desenvolvimento da minha actividade regi-me sempre pelo profundo respeito ao Monumento, sua autenticidade e humildade na aprendizagem que este me ia transmitido.

Gestão integrada de resíduos de construção e demolição: análise de estudo

A actividade de construção civil é responsável por grande parte dos resíduos produzidos, nomeadamente em obras de construção, demolições de edifícios ou derrocadas, operações de manutenção, restauro, remodelação e reabilitação de construções. A gestão dos resíduos deste sector, abreviadamente designada por resíduos de construção e demolição (RCD), passou a estar regulada, através de regime de operações de gestão de RCD. Este diploma, define entre outras, a responsabilidade dos vários intervenientes no processo de gestão de resíduos, fase de projecto, execução, transporte e recepção. Com a evolução das preocupações ambientais da população e maior envolvência das empresas na contribuição para uma gestão integrada de resíduos, existe um crescente desenvolvimento de estudos no âmbito de caracterização de quantidades e tipos de resíduos produzidos pelo sector. Neste contexto, e por ser importante uma economia integrada com a gestão de resíduos, os principais desafios passam pelo planeamento e preparação de Obra desde da fase de projecto à fase de execução, com vista à prevenção, redução, reutilização e valorização dos RCD. O presente trabalho pretende contribuir para este desenvolvimento do sector, mais concretamente na obtenção de indicadores de resíduos de construção (RC), resíduos de demolição (RD) e caracterização da tipologia destes. Para tanto, foi feita uma avaliação dos estudos desenvolvidos no âmbito de caracterização dos tipos de resíduos e indicadores de RC e RD, como método comparativo. Os indicadores deste estudo foram obtidos com base na análise de dados de casos de estudo, no caso concreto RC, de obras de estruturas, e RD de edifícios com execução de demolição selectiva. Na parte final deste estudo apresentam-se algumas conclusões e recomendações.

A gestão do currículo nos cursos de educação e formação que integram alunos com necessidades educativas especiais

A inclusão dos alunos com Necessidades Educativas Especiais (NEE) nas escolas do ensino regular implica mudança nas atitudes e prá ticas dos professores, nomeadamente ao nível da gestão curricular. O presente trabalho, desenvolvido através de um estudo de caso desenvolvido numa turma do Curso de Educação e Formação (CEF), numa Escola Bá sica do 2º e 3º ciclos de uma cidade alentejana, visa conhecer o tipo de prá ticas que são desenvolvidas em sala de aula nos CEF e em que medida correspondem à s necessidades dos alunos que frequentam estes cursos e o tipo de diferenciação que se realiza nestes percursos para incluir alunos com NEE. Para tal, seleccioná mos uma turma que frequenta o 2º ano de CEF (equivalente ao 9 º ano do percurso regular), constituída por 11 alunos, dos quais um tem NEE. As duas técnicas utilizadas para a recolha de dados foram a entrevista e a observação naturalista, em contexto de sala de aula. Realizaram-se 7 entrevistas semi-directivas, a professores que leccionam diferentes disciplinas nesta turma, e 4 observaçõ es naturalistas, uma em cada aula, nas disciplinas de Educação Física, L íngua P ortuguesa, Ciências Naturais e Cidadania e Mundo Actual. Os resultados permitiram concluir que, apesar de os professores reconhecerem que este percurso escolar é mais adequado e benéfico para os alunos com NEE e de afirmarem ter em consideração as NEE dos alunos, o tipo de gestão curricular realizado pela equipa pedagó gica revela-se insuficiente e pouco consistente perante as NEE do aluno. A expectativa dos participantes sobre a eficá cia dos CEF é baixa, o trabalho desenvolvido na sala de aula, por vezes, não se traduziu nos pressupostos pré- estabelecidos, uma vez que as metodologias e estratégias de trabalho apresentadas, ao longo das aulas observadas, não parecem contribuir para que o aluno com NEE alcance os objectivos previamente estabelecidos. Estas situaçõ es parecem decorrer quer da falta de adequação de estratégias e recursos pedagó gicos, quer do parco trabalho em equipa. P ensamos que a partilha efectiva de experiências, materiais e prá ticas pedag ó gicas, aliada a uma maior consciencialização da importância do que é adequar, diversificar e diferenciar todo o processo ensino/aprendizagem dos alunos conduziria a um percurso escolar mais autó nomo, eficaz e ajustado à s verdadeiras necessidades dos alunos, quer actuais, quer no processo de transição para a vida activa.

Optimal insurance with counterparty default risk

We study the design of optimal insurance contracts when the insurer can default on its obligations. In our model default arises endogenously from the interaction of the insurance premium, the indemnity schedule and the insurer’s assets. This allows us to understand the joint effect of insolvency risk and background risk on efficient contracts. The results may shed light on the aggregate risk retention sched- ules observed in catastrophe reinsurance markets, and can assist in the design of (re)insurance programs and guarantee funds.

Intervenções em estruturas antigas

O presente relatório de estágio, definido como Trabalho Final de Mestrado, surge como resultado de um estágio profissional realizado no âmbito do Mestrado em Engenharia Civil do Instituto Superior de Engenharia de Lisboa, e tem como objectivos primordiais, expor as actividades realizadas e reflectir os conhecimentos adquiridos durante o período de estágio. Após uma formação académica maioritariamente vocacionada para os aspectos teóricos e de natureza científica, tornou-se fundamental ao estagiário garantir um contacto real com a profissão de Engenheiro Civil antes do ingresso no mercado de trabalho. Foi com base nesse pressuposto que a opção do Trabalho Final de Mestrado incidiu sobre a realização de um estágio curricular em detrimento das restantes possibilidades. O período de estágio iniciou-se a 14 de Março de 2011 e incidiu sobre a área de Conservação, Restauro e Reabilitação de edifícios com valor patrimonial, sendo feito referência no capítulo 2 aos princípios importantes da intervenção neste tipo de edifícios. O capítulo 3 faz uma abordagem geral do que são as coberturas servindo de complemento ao capítulo 4, onde são abordados e analisados os processos e métodos construtivos envolvidos, contemplando a evolução construtiva da cobertura do Cruzeiro, no Convento de Cristo em Tomar. Nos restantes capítulos, 5 e 6, é feita a caracterização e constituição da estrutura de um edifício da segunda metade do século XVIII, e a análise estrutural feita ao edifício no Antigo Convento do Santíssimo Sacramento, em Lisboa, respectivamente. O capítulo 4 é complementado pelo Anexo A, sendo utilizado como referência ao esquema da estrutura artesanal encontrada na cobertura do Cruzeiro.