Quantification and stability of everolimus (SDZ RAD) in human blood by high-performance liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry

We report here a validated method for the quantification of a new immunosuppressant drug, everolimus (SDZ RAD), using HPLC-tandem mass spectrometry. Whole blood samples (500 mul) were prepared by protein precipitation, followed by C-18 solid-phase extraction. Mass spectrometric detection was by selected reaction monitoring with an electrospray interface operating in positive ionization mode. The assay was linear from 0.5 to 100 mug/l (r(2) > 0.996, n = 9). The analytical recovery and inter-day imprecision, determined using whole blood quality control samples (n = 5) at 0.5, 1.2, 20.0, and 75.0 mug/l, was 100.3-105.4% and less than or equal to7.6%, respectively. The assay had a mean relative recovery of 94.8 +/- 3.8%. Extracted samples were stable for up to 24 h. Fortified everolimus blood samples were stable at -80 degreesC for at least 8 months and everolimus was found to be stable in blood when taken through at least three freeze-thaw cycles. The reported method provides accurate, precise and specific measurement of everolimus in blood over a wide analytical range and is currently supporting phase 11 and III clinical trials. (C) 2002 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Prolonged retention after aggregation into secretory granules of human R183H-growth hormone (GH), a mutant that causes autosomal dominant GH deficiency type II

Human R183H-GH causes autosomal dominant GH deficiency type II. Because we show here that the mutant hormone is fully bioactive, we have sought to locate an impairment in its progress through the secretory pathway as assessed by pulse chase experiments. Newly synthesized wild-type and R183H-GH were stable when expressed transiently in AtT20 cells, and both formed equivalent amounts of Lubrol-insoluble aggregates within 40 min after synthesis. There was no evidence for intermolecular disulfide bond formation in aggregates of wild-type hormone or the R183H mutant. Both wildtype and R183H-GH were packaged into secretory granules, assessed by the ability of 1 mm BaCl2 to stimulate release and by immunocytochemistry. The mutant differed from wildtype hormone in its retention in the cells after packaging into secretory granules; 50% more R183H-GH than wild-type aggregates were retained in AtT20 cells 120 min after synthesis, and stimulated release of R183H-GH or a mixture of R183H-GH and wild-type that had been retained in the cell was reduced. The longer retention of R183H-GH aggregates indicates that a single point mutation in a protein contained in secretory granules affects the rate of secretory granule release.

Em busca de contribuições Schumpeterianas à Teoria da Regulação : as telecomunicações brasileiras numa perspectiva evolucionária

A partir da década de 1970, a literatura que trata daqueles setores de infraestrutura, cujo funcionamento requer um acompanhamento específico do Estado, vale dizer através da regulação, absorveu grande parte dos conceitos fundamentais desenvolvidos pelas escolas institucionalistas, notadamente pela Nova Economia Institucional (NEI). Entretanto, apesar dos avanços alcançados, esta literatura ainda carece de alguns desenvolvimentos teóricos e estudos empíricos que contribuam de forma decisiva. Tais questões estão ligadas, por exemplo, à evolução dos cenários e às condições econômicas que são alteradas a partir de mudanças significativas nas condições tecnológicas e que acabam por alterar significativamente aquela estrutura industrial para qual o modelo regulatório foi desenhado. Nesse sentido, as contribuições da Economia da Regulação e da NEI carecem de elementos evolucionários, notadamente schumpeterianos. O principal objetivo da dissertação é investigar como alguns elementos de inspiração schumpeteriana podem em algum grau ser aplicados à economia da regulação e neste sentido contribuir com proposições naqueles temas que essa escola fincou sua abordagem característica: o progresso tecnológico e o comportamento estratégico inovativo das empresas. Nesse sentido, o problema de pesquisa desse trabalho pode ser assim colocado: como pode ser entendido o papel do progresso tecnológico e da inovação nas teorias da regulação? A hipótese assumida neste trabalho é que não se pode desconsiderar a tecnologia e suas diversas implicações para a análise dos setores regulados, constatação essa cada vez mais clara, dadas as recentes transformações dessas indústrias: uma das principais características dos setores regulados, a partir da década de 1990, é o surgimento de novos marcos regulatórios e uma alteração progressiva dos modelos organizacionais que predominavam até então e um movimento de adaptação à margem da regulação vigente. Os resultados empíricos mostram que as transformações tecnológicas e institucionais ocorridas a partir de 1995 na indústria brasileira de telecomunicações alteraram significativamente a estrutura industrial e a dinâmica concorrencial do setor, colocando ao desenho regulatório – da Anatel – novos e complexos desafios, sobretudo, o de se adaptar à margem da dinamicidade característica das telecomunicações. Neste novo contexto, as funções regulatórias são mais complexas, o que exige um duplo processo de aprendizagem: quanto às estruturas de mercado e quanto ao comportamento estratégico das empresas.

Sistema para formação e avaliação dos operadores das máquinas de inspeção ótica automática

A montagem de circuitos eletrónicos é um processo extremamente complexo, e como tal muito difícil de controlar. Ao longo do processo produtivo, é colocada solda no PCB (printed circuit board), seguidamente são colocados os componentes eletrónicos que serão depois soldados através de um sistema de convecção, sendo por fim inspecionados todos os componentes, com o intuito de detetar eventuais falhas no circuito. Esta inspeção é efetuada por uma máquina designada por AOI (automatic optical inspection), que através da captura de várias imagens do PCB, analisa cada uma, utilizando algoritmos de processamento de imagem como forma de verificar a presença, colocação e soldadura de todos os componentes. Um dos grandes problemas na classificação dos defeitos relaciona-se com a quantidade de defeitos mal classificados que passam para os processos seguintes, por análise errada por parte dos operadores. Assim, apenas com uma formação adequada, realizada continuamente, é possível garantir uma menor taxa de falhas por parte dos operadores e consequentemente um aumento na qualidade dos produtos. Através da implementação da metodologia Gage R&R para atributos, que é parte integrante da estratégia “six sigma” foi possível analisar a aptidão dos operadores, com base na repetição aleatória de várias imagens. Foi desenvolvido um software que implementa esta metodologia na formação dos operadores das máquinas AOI, de forma a verificar a sua aptidão, tendo como objetivo a melhoria do seu desempenho futuro, através da medição e quantificação das dificuldades de cada pessoa. Com esta nova sistemática foi mais fácil entender a necessidade de formação de cada operador, pois com a constante evolução dos componentes eletrónicos e com o surgimento de novos componentes, estão implícitas novas dificuldades para os operadores neste tipo de tarefa. Foi também possível reduzir o número de defeitos mal classificados de forma significativa, através da aposta na formação com o auxílio do software desenvolvido.

Indoor school environment: easy and low cost to assess inorganic pollutants

Total particulate matter (TPM) was passively collected inside two classrooms of each of five elementary schools in Lisbon, Portugal. TPM was collected in polycarbonate filters with a 47 mm diameter, placed inside of uncovered plastic petri dishes. The sampling period was from 19 May to 22 June 2009 (35 days exposure) and the collected TPM masses varied between 0.2 mg and 0.8 mg. The major elements were Ca, Fe, Na, K, and Zn at μg level, while others were at ng level. Pearson′s correlation coefficients above 0.75 (a high degree of correlation) were found between several elements. Soil-related, traffic soil re-suspension and anthropogenic emission sources could be identified. Blackboard chalk was also identified through Ca large presence. Some of the determined chemical elements are potential carcinogenic. Quality control of the results showed good agreement as confirmed by the application of u-score test.

Avaliação da qualidade dos dados populacionais e cobertura dos registros de óbitos para as regiões brasileiras

OBJETIVO: Avaliar a qualidade dos dados populacionais e a cobertura dos registros de óbitos para as Unidades da Federação Brasileira (UF), por sexo, no ano de 1990. MÉTODOS: Os dados populacionais extraídos dos Censos Demográficos foram avaliados através de métodos demográficos clássicos. Os registros de óbitos, extraídos da Fundação Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística e do Ministério da Saúde, foram avaliados através de três técnicas de mensuração do sub-registro de óbitos. RESULTADOS: A precisão das declarações das idades das UF, em sua maioria, passou do status de "pouco preciso" ou "moderado" para "preciso" na década de 80. A cobertura dos óbitos, em 1990, foi classificada como "boa" ou "satisfatória" para todos os Estados do Sul, Sudeste, Centro-Oeste e para os do Nordeste, abaixo do Rio Grande do Norte. O restante dos estados foram classificados como "regular" ou "insatisfatório". CONCLUSÕES: Houve uma melhora importante na qualidade das declarações da população recenseada e aumento da cobertura de óbitos e que, para muitas UF, é possível gerar confiáveis indicadores de mortalidade.

Chagas disease in an area of recent occupation in Cochabamba, Bolivia

INTRODUCTION: A descriptive, entomological and seroepidemiological study on Chagas disease was conducted in a place of recent occupation on the outskirts of Cochabamba, Bolivia: Avaroa/Primer de Mayo (population:3,000), where the socio-economic level is low and no control measures have been made available. METHODS: The immunofluorescent antibody test (IFAT) was used for IgG and IgM anti-Trypanosoma cruzi antibodies in filter paper bloodspot eluates from 128 subjects (73 females, 55 males) selected by systematic sampling. Concerning each subject age, gender, birthplace, occupation, duration of residence and building materials used in their houses were recorded. Vectors were captured both in domestic and peridomestic environments. RESULTS: Seropositive, 12.5% (16/128): females, 15.1% (11/73); males, 9.1% (5/55). Average time of residence: 6.1 years for the whole population sample and 7.4 years for the seropositive subjects. Most houses had adobe walls (76.7% , n= 30), galvanized iron rooves (86.7%) and earthen floors (53.4%) 80% of the walls had crevices. One hundred forty seven specimens of Triatoma infestans were captured, of which 104 (70.7%) were domestic, and 1 peridomestic Triatoma sordida. Precipitin host identification: birds, 67.5%; humans, 27.8%; rodents, 11.9%; dogs, 8.7%; cats, 1.6%. House infestation and density indices were 53.3 and 493.0 respectively. We found 21 (14.3%) specimens of T. infestans infected with trypanosomes, 18 (85.7%) of which in domestic environments. DISCUSSION: The elements for the vector transmission of Chagas disease are present in Avaroa/Primer de Mayo and the ancient custom of keeping guinea pigs indoors adds to the risk of human infection. In neighboring Cochabamba, due to substandard quality control, contaminated blood transfusions are not infrequent, which further aggravates the spread of Chagas disease. Prompt action to check the transmission of this infection, involving additionally the congenital and transfusional modes of acquisition, is required.

The role of discriminant analysis in the refinement of customer satisfaction assessment

OBJECTIVE: To test discriminant analysis as a method of turning the information of a routine customer satisfaction survey (CSS) into a more accurate decision-making tool. METHODS: A 7-question, 10-multiple choice, self-applied questionnaire was used to study a sample of patients seen in two outpatient care units in Valparaíso, Chile, one of primary care (n=100) and the other of secondary care (n=249). Two cutting points were considered in the dependent variable (final satisfaction score): satisfied versus unsatisfied, and very satisfied versus all others. Results were compared with empirical measures (proportion of satisfied individuals, proportion of unsatisfied individuals and size of the median). RESULTS: The response rate was very high, over 97.0% in both units. A new variable, medical attention, was revealed, as explaining satisfaction at the primary care unit. The proportion of the total variability explained by the model was very high (over 99.4%) in both units, when comparing satisfied with unsatisfied customers. In the analysis of very satisfied versus all other customers, significant relationship was identified only in the case of the primary care unit, which explained a small proportion of the variability (41.9%). CONCLUSIONS: Discriminant analysis identified relationships not revealed by the previous analysis. It provided information about the proportion of the variability explained by the model. It identified non-significant relationships suggested by empirical analysis (e.g. the case of the relation very satisfied versus others in the secondary care unit). It measured the contribution of each independent variable to the explanation of the variation of the dependent one.

Controlo de qualidade microbiológica na indústria farmacêutica

O presente Relatório de Estágio teve como objectivo analisar e discutir as competências adquiridas e desenvolvidas, durante o estágio, no controlo da qualidade microbiológica na indústria farmacêutica O estágio, foi realizado no Laboratório de Microbiologia dos Laboratórios Atral, Grupo AtralCipan, localizado na Vala do Carregado, Castanheira do Ribatejo. Este teve a duração de aproximadamente dez meses e meio, com data de início a 21 de Setembro de 2011 e final de 10 de Agosto de 2012. Numa fase inicial, foram adquiridas as aptidões necessárias para a aplicação das metodologias realizadas no laboratório de microbiologia com o estudo das normas, procedimento e legislação aplicada, com foco na importância das farmacopeias na indústria farmacêutica e formação para a realização de ensaios em Áreas de Processamento Asséptico, conhecendo e compreendendo os procedimentos a ter nestas. Uma das principais metodologias realizadas, e desenvolvida neste relatório, compreendeu a análise de produtos farmacêuticos estéreis, com a aplicação de Testes de Esterilidade, pelo método de STERITEST e método Directo, com resultados que demonstraram a importância destas técnicas, da avaliação do ambiente em que são realizadas e do operador que as executa. Os Testes de Promoção de Crescimento, foram também explorados neste trabalho, realizados não só para avaliação dos meios de cultura, onde foi possível analisar os requisitos e resultados obtidos, como também para validação de metodologias, nomeadamente, na validação de meios e fluidos de marcas diferentes para utilização no método STERITEST e na validação do método de filtração de membrana para Enumeração Microbiana de um produto não estéril. Estas validações possibilitaram a redução de custos e melhoria das condições da análise e metodologias aplicadas. Com a realização do estágio foi possível adquirir aptidões práticas, que aliadas ao conhecimento teórico obtido no mestrado, proporcionaram um crescimento a nível pessoal, científico e profissional.

Otimização da imagem em tomografia computorizada no exame de tórax

Mestrado em Radiações Aplicadas às Tecnologias da Saúde. Área de especialização: Imagem Digital.

Otimização de dose em mamografia

Mestrado em Radiações Aplicadas às Tecnologias da Saúde. Área de especialização: Imagem Digital com Radiação X.

Oportunidades para o desenvolvimento da aquacultura de macroalgas nos Açores

Jornadas "Ciência nos Açores – que futuro? Tema Ciências Naturais e Ambiente", Ponta Delgada, 7-8 de Junho de 2013.

Iron oxide/gold core/shell nanomagnetic probes and CdS biolabels for amplified electrochemical immunosensing of Salmonella typhimurium

There is an imminent need for rapid methods to detect and determine pathogenic bacteria in food products as alternatives to the laborious and time-consuming culture procedures. In this work, an electrochemical immunoassay using iron/gold core/shell nanoparticles (Fe@Au) conjugated with anti-Salmonella antibodies was developed. The chemical synthesis and functionalization of magnetic and gold-coated magnetic nanoparticles is reported. Fe@Au nanoparticles were functionalized with different self-assembled monolayers and characterized using ultraviolet-visible spectrometry, transmission electron microscopy, and voltammetric techniques. The determination of Salmonella typhimurium, on screen-printed carbon electrodes, was performed by square-wave anodic stripping voltammetry through the use of CdS nanocrystals. The calibration curve was established between 1×101 and 1×106 cells/mL and the limit of detection was 13 cells/mL. The developed method showed that it is possible to determine the bacteria in milk at low concentrations and is suitable for the rapid (less than 1 h) and sensitive detection of S. typhimurium in real samples. Therefore, the developed methodology could contribute to the improvement of the quality control of food samples.

Auditoria da qualidade e as suas implicações nos resultados

Dissertação de Mestrado apresentado ao Instituto de Contabilidade e Administração do Porto para a obtenção do grau de Mestre em Auditoria, sob orientação da Doutora Alcina Portugal Dias

Cultivo de macroalgas nos Açores… Oportunidades e desafios

As macroalgas marinhas têm uma grande diversidade de aplicações. Nos Açores, várias espécies têm sido usadas tradicionalmente para alimentação humana e para extração de agar, um ficocolóide aplicado na indústria alimentar e farmacêutica. As exigências no controlo da qualidade das matérias-primas e as práticas atuais de colheita de macroalgas marinhas selvagens na Europa exigem uma gestão eficaz deste recurso natural e, simultaneamente, tornam premente a necessidade de se implementarem métodos de produção de biomassa controlados, nomeadamente, práticas de cultivo. Apesar da importância reconhecida da exploração sustentável dos recursos marinhos existentes nos Açores, não existe qualquer informação sobre a viabilidade do cultivo de macroalgas marinhas no Arquipélago. O objetivo principal do presente projeto é avaliar o potencial de cultivo de espécies de macroalgas marinhas selecionadas, bem como identificar as melhores práticas de recolha desse recurso natural.