Non-enzymatic assay for glucose by using immobilized whole-cells of E. coli containing glucose binding protein fused to fluorescent proteins

Glucose monitoring in vivo is a crucial issue for gaining new understanding of diabetes. Glucose binding protein (GBP) fused to two fluorescent indicator proteins (FLIP) was used in the present study such as FLIP-glu- 3.2 mM. Recombinant Escherichia coli whole-cells containing genetically encoded nanosensors as well as cell-free extracts were immobilized either on inner epidermis of onion bulb scale or on 96-well microtiter plates in the presence of glutaraldehyde. Glucose monitoring was carried out by F��rster Resonance Energy Transfer (FRET) analysis due the cyano and yellow fluorescent proteins (ECFP and EYFP) immobilized in both these supports. The recovery of these immobilized FLIP nanosensors compared with the free whole-cells and cell-free extract was in the range of 50���90%. Moreover, the data revealed that these FLIP nanosensors can be immobilized in such solid supports with retention of their biological activity. Glucose assay was devised by FRET analysis by using these nanosensors in real samples which detected glucose in the linear range of 0���24 mM with a limit of detection of 0.11 mM glucose. On the other hand, storage and operational stability studies revealed that they are very stable and can be re-used several times (i.e. at least 20 times) without any significant loss of FRET signal. To author's knowledge, this is the first report on the use of such immobilization supports for whole-cells and cell-free extract containing FLIP nanosensor for glucose assay. On the other hand, this is a novel and cheap high throughput method for glucose assay.

The role of the efflux mechanisms in multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis

Abstract The emergence of multi and extensively drug resistant tuberculosis (MDRTB and XDRTB) has increased the concern of public health authorities around the world. The World Health Organization has defined MDRTB as tuberculosis (TB) caused by organisms resistant to at least isoniazid and rifampicin, the main first-line drugs used in TB therapy, whereas XDRTB refers to TB resistant not only to isoniazid and rifampicin, but also to a fluoroquinolone and to at least one of the three injectable second-line drugs, kanamycin, amikacin and capreomycin. Resistance in Mycobacterium tuberculosis is mainly due to the occurrence of spontaneous mutations and followed by selection of mutants by subsequent treatment. However, some resistant clinical isolates do not present mutations in any genes associated with resistance to a given antibiotic, which suggests that other mechanism(s) are involved in the development of drug resistance, namely the presence of efflux pump systems that extrude the drug to the exterior of the cell, preventing access to its target. Increased efflux activity can occur in response to prolonged exposure to subinhibitory concentrations of anti-TB drugs, a situation that may result from inadequate TB therapy. The inhibition of efflux activity with a non-antibiotic inhibitor may restore activity of an antibiotic subject to efflux and thus provide a way to enhance the activity of current anti-TB drugs. The work described in this thesis foccus on the study of efflux mechanisms in the development of multidrug resistance in M. tuberculosis and how phenotypic resistance, mediated by efflux pumps, correlates with genetic resistance. In order to accomplish this goal, several experimental protocols were developed using biological models such as Escherichia coli, the fast growing mycobacteria Mycobacterium smegmatis, and Mycobacterium avium, before their application to M. tuberculosis. This approach allowed the study of the mechanisms that result in the physiological adaptation of E. coli to subinhibitory concentrations of tetracycline (Chapter II), the development of a fluorometric method that allows the detection and quantification of efflux of ethidium bromide (Chapter III), the characterization of the ethidium bromide transport in M. smegmatis (Chapter IV) and the contribution of efflux activity to macrolide resistance in Mycobacterium avium complex (Chapter V). Finally, the methods developed allowed the study of the role of efflux pumps in M. tuberculosis strains induced to isoniazid resistance (Chapter VI). By this manner, in Chapter II it was possible to observe that the physiological adaptation of E. coli to tetracycline results from an interplay between events at the genetic level and protein folding that decrease permeability of the cell envelope and increase efflux pump activity. Furthermore, Chapter III describes the development of a semi-automated fluorometric method that allowed the correlation of this efflux activity with the transport kinetics of ethidium bromide (a known efflux pump substrate) in E. coli and the identification of efflux inhibitors. Concerning M. smegmatis, we have compared the wild-type M. smegmatis mc2155 with knockout mutants for LfrA and MspA for their ability to transport ethidium bromide. The results presented in Chapter IV showed that MspA, the major porin in M. smegmatis, plays an important role in the entrance of ethidium bromide and antibiotics into the cell and that efflux via the LfrA pump is involved in low-level resistance to these compounds in M. smegmatis. Chapter V describes the study of the contribution of efflux pumps to macrolide resistance in clinical M. avium complex isolates. It was demonstrated that resistance to clarithromycin was significantly reduced in the presence of efflux inhibitors such as thioridazine, chlorpromazine and verapamil. These same inhibitors decreased efflux of ethidium bromide and increased the retention of [14C]-erythromycin in these isolates. Finaly, the methods developed with the experimental models mentioned above allowed the study of the role of efflux pumps on M. tuberculosis strains induced to isoniazid resistance. This is described in Chapter VI of this Thesis, where it is demonstrated that induced resistance to isoniazid does not involve mutations in any of the genes known to be associated with isoniazid resistance, but an efflux system that is sensitive to efflux inhibitors. These inhibitors decreased the efflux of ethidium bromide and also reduced the minimum inhibitory concentration of isoniazid in these strains. Moreover, expression analysis showed overexpression of genes that code for efflux pumps in the induced strains relatively to the non-induced parental strains. In conclusion, the work described in this thesis demonstrates that efflux pumps play an important role in the development of drug resistance, namely in mycobacteria. A strategy to overcome efflux-mediated resistance may consist on the use of compounds that inhibit efflux activity, restoring the activity of antimicrobials that are efflux pump substrates, a useful approach particularly in TB where the most effective treatment regimens are becoming uneffective due to the increase of MDRTB/XDRTB.

Utiliza����o de coberturas ajardinadas de vegeta����o intensiva, extensiva e horta urbana em edifica����es

Trabalho Final de Mestrado para obten����o do grau de Mestre em Engenharia Civil

Auditoria �� gest��o de res��duos industriais

A presente disserta����o foi realizada em colabora����o com o grupo empresarial Monteiro, Ribas, tendo como principal objectivo a realiza����o de uma auditoria �� gest��o dos res��duos industriais produzidos pelas suas f��bricas localizadas na Estrada da Circunvala����o, no Porto. Para cumprir este objectivo, inicialmente foi efectuado um levantamento das obriga����es legais relativas aos res��duos e foram procuradas pr��ticas aconselhadas para a gest��o interna. Para cada uma das f��bricas, verificaram-se, quais os res��duos produzidos e analisaram-se os seus percursos, considerando as suas origens, os locais e modos de acondicionamento na origem, os modos de transporte interno, os locais e modos de armazenagem preliminar, e ainda, as quantidades produzidas, os transportadores, os operadores finais e as opera����es finais de gest��o, sendo que estas quatro ��ltimas informa����es s��o relativas ao ano 2013. De seguida procedeu-se �� realiza����o da auditoria nas diferentes unidades, verificando o cumprimento dos requisitos legais e das boas pr��ticas em mat��ria de gest��o de res��duos. As principais n��o conformidades detectadas, comuns ��s v��rias unidades fabris foram a inexist��ncia de local/recipiente definido para acondicionamento de alguns res��duos, a falta ou insuficiente identifica����o de recipientes/zonas de acondicionamento, a inexist��ncia de bacias de reten����o para res��duos l��quidos perigosos, o facto de no transporte interno apenas os res��duos perigosos serem cobertos e, os res��duos l��quidos perigosos n��o serem transportados sobre bacias de reten����o m��veis nem com o material necess��rio para absorver derrames. Para cada res��duo e para cada unidade industrial foram propostas medidas correctivas e/ou de melhoria, quando aplic��vel. Relativamente �� armazenagem preliminar, a principal inconformidade detectada foi o facto de todos os parques (quatro) possu��rem res��duos perigosos no momento das auditorias, o que n��o �� adequado. Foram propostas medidas correctivas e/ou de melhoria para cada parque. Como proposta global, tendo em conta factores econ��micos e de seguran��a, sugeriu-se que apenas o parque de res��duos perigosos possa armazenar este tipo de res��duos, pelo que os procedimentos de transporte interno devem ser melhorados, fazendo com que estes res��duos sejam transportados directamente para o parque de res��duos perigosos. Desta forma dois dos parques devem sofrer algumas remodela����es, nomeadamente serem cobertos e fechados, ainda que n��o totalmente, e o parque de res��duos perigosos deve ser fechado, mantendo aberturas para ventila����o, deve ser equipado com kit��s de conten����o de derrames, fichas de seguran��a, procedimentos a realizar em caso de emerg��ncia, e ainda, devido ao facto do sistema de conten����o de derrames ser pequeno face ao total de armazenamento, aconselha-se o uso de bacias de reten����o para alguns dos recipientes de res��duos l��quidos perigosos. Ao longo deste processo e em consequ��ncia da realiza����o da auditoria, algumas situa����es consideradas n��o conformes foram sendo corrigidas. Tamb��m foram preparadas instru����es de trabalho adequadas que ser��o posteriormente disponibilizadas. Foi ainda elaborada uma metodologia de avalia����o de processos como base de trabalho para redu����o dos res��duos gerados. A etapa escolhida para a aplica����o da mesma foi uma etapa auxiliar do processo produtivo da Monteiro, Ribas - Revestimentos, S.A - a limpeza de cubas com solventes, por forma a tentar minimizar os res��duos de solventes produzidos nesta opera����o. Uma vez que a f��brica j�� realiza a opera����o tendo em considera����o medidas de preven����o e reutiliza����o, a reciclagem �� neste momento a ��nica forma de tentar minimizar os res��duos de solventes. Foram ent��o estudadas duas op����es, nomeadamente a aquisi����o de um equipamento de regenera����o de solventes e a contrata����o de uma operadora que proceda �� regenera����o dos res��duos de solventes e fa��a o retorno do solvente regenerado. A primeira op����o poder�� permitir uma redu����o de cerca de 95% na produ����o de res��duos de solventes e na aquisi����o de solvente puro, estimando-se uma poupan��a anual de cerca de **** ���, com um per��odo de recupera����o do capital de cerca de 16 meses e a segunda pode conduzir a uma redu����o significativa na aquisi����o de solvente puro, cerca de 65%, e a uma poupan��a anual de cerca de **** ���.

A satisfa����o dos trabalhadores com as pr��ticas de gest��o de recursos humanos: o caso de uma Institui����o do Ensino Superior P��blico em Portugal

Este estudo tem como objetivos: (1) conhecer as pr��ticas desenvolvidas numa organiza����o do Ensino Superior P��blico Portugu��s; (2) conhecer a tipologia das pr��ticas de GRH de cariz tradicional e de cariz estrat��gico; (3) perceber em que medida as pr��ticas de GRH est��o relacionadas com a ��rea de qualifica����o dos respons��veis do departamento de RH; (4) averiguar o grau de satisfa����o que os trabalhadores sentem com as Pr��ticas de Gest��o de Recursos Humanos desenvolvidas e a sua rela����o com a ��rea de qualifica����o dos respons��veis do departamento de RH. Foi utilizada uma metodologia mista, que possibilita ampliar a obten����o de resultados em abordagens investigativas, proporcionando ganhos relevantes para a pesquisa. �� realizado um primeiro estudo explorat��rio, que utiliza uma metodologia mista quantitativa e qualitativa, com recurso a uma entrevista semiestruturada e inqu��rito realizados aos respons��veis de RH, e que tem como objetivos identificar e caracterizar as Pr��ticas de GRH vigentes na Organiza����o e, consequentemente, averiguar se se aproximam das designadas na literatura, assim como averiguar o grau de interven����o do DRH no desenvolvimento das PGRH e caraterizar o perfil do respons��vel de RH na Organiza����o, averiguando se a ��rea de forma����o de RH influencia as Pr��ticas de GRH desenvolvidas. No segundo estudo, recorremos a uma metodologia quantitativa com recurso ao inqu��rito por question��rio, aplicado aos trabalhadores que exercem fun����es a tempo integral, para averiguar o grau de satisfa����o dos trabalhadores em rela����o ��s Pr��ticas de Gest��o de Recursos Humanos. Na compila����o dos dois estudos foi nosso objetivo obter respostas ��s quest��es que orientaram a nossa investiga����o. Na parte final da disserta����o s��o discutidos os principais resultados obtidos e apresentadas as conclus��es do estudo aqui levado a cabo. Os resultados sugerem que: 1) as PGRH existentes s��o essencialmente de cariz tradicional, em especial a gest��o administrativa; 2) as PGRH predominantes s��o: o Planeamento de Recursos Humanos, a An��lise e Descri����o de Fun����es, o Recrutamento e Sele����o, a Forma����o e Desenvolvimento, a Gest��o Administrativa, a Comunica����o e a Partilha de Informa����o, ��tica e Deontologia e o Estatuto Disciplinar; 3) existe pouco recurso ao outsourcing para as PGRH; 4) o grau de interven����o DRH baseia-se em atividades de cariz mais administrativo; 5) as pr��ticas tradicionais de RH s��o aquelas que requerem mais tempo ao DRH; 6) n��o existe rela����o entre o tipo de PGRH e a ��rea de qualifica����o do respons��vel do DRH; 7) as PGRH s��o realizadas seguindo essencialmente as normas legais e regras r��gidas da GRH na AP; 8) algumas PGRH n��o s��o entendidas em contexto da AP, como importantes pelos gestores, embora j�� sejam desenvolvidos alguns procedimentos dessas pr��ticas; 9) a PGRH da forma����o e desenvolvimento n��o �� corretamente desenvolvida e n��o d�� cumprimento ao estipulado na lei; 10) a gest��o de carreiras e o sistema de compensa����o e recompensas s��o entendidas como inexistentes, porque n��o existem promo����es e progress��es desde 2005; 11) a avalia����o do desempenho �� um sistema burocr��tico e ritualista com fins de promo����o e compensa����o, sem efeitos pr��ticos no momento atual, e que causa insatisfa����o e o sentimento de injusti��a; 12) existem problemas de comunica����o quanto a partilha e uniformiza����o de procedimentos entre UO; 13) a satisfa����o dos trabalhadores �� maior com as PGRH de tipo tradicional, nomeadamente na gest��o administrativa, recrutamento e sele����o, an��lise e descri����o de fun����es, acolhimento, integra����o e socializa����o 14) a satisfa����o �� menor na gest��o de carreiras, no sistema de compensa����o e recompensas e na avalia����o do desempenho; 15) quanto a rela����o entre o grau de satisfa����o e as caracter��sticas s��cio demogr��ficas e profissionais dos inquiridos, os casos com signific��ncia mostram que os trabalhadores com 10 ou mais anos de antiguidade tendem a sentir mais satisfa����o com as pr��ticas em GRH; 16) existe mais satisfa����o dos trabalhadores das UO onde o respons��vel de DRH possui forma����o na ��rea de RH.

Optimiza����o e Valida����o da Produ����o de [13n]-Nh3 para Estudos Cl��nicos de Tomografia por Emiss��o de Positr��es na Avalia����o da Perfus��o Mioc��rdica

A par das patologias oncol��gicas, as doen��as do foro card��aco, em particular a doen��a arterial coron��ria, s��o uma das principais causas de morte nos pa��ses industrializados, devido sobretudo, �� grande incid��ncia de enfartes do mioc��rdio. Uma das formas de diagn��stico e avalia����o desta condi����o passa pela obten����o de imagens de perfus��o mioc��rdica com radionucl��deos, realizada por Tomografia por Emiss��o de Positr��es (PET). As solu����es inject��veis de [15O]-H2O, [82Rb] e [13N]-NH3 s��o as mais utilizadas neste tipo de exame cl��nico. No Instituto de Ci��ncias Nucleares Aplicadas �� Sa��de (ICNAS), a exist��ncia de um ciclotr��o tem permitido a produ����o de uma variedade de radiof��rmacos, com aplica����es em neurologia, oncologia e cardiologia. Recentemente, surgiu a oportunidade de iniciar exames cl��nicos com [13N]-NH3 para avalia����o da perfus��o mioc��rdica. �� neste ��mbito que surge a oportunidade do presente trabalho, pois antes da sua utiliza����o cl��nica �� necess��rio realizar a optimiza����o da produ����o e a valida����o de todo o processo segundo as normas de Boas Pr��ticas Radiofarmac��uticas. Ap��s uma fase de optimiza����o do processo, procedeu-se �� avalia����o dos par��metros f��sico-qu��micos e biol��gicos da prepara����o de [13N]-NH3, de acordo com as indica����es da Farmacopeia Europeia (Ph. Eur.) 8.2. De acordo com as normas farmac��uticas, foram realizados 3 lotes de produ����o consecutivos para valida����o da produ����o de [13N]-NH3. Os resultados mostraram um produto final l��mpido e ausente de cor, com valores de pH dentro do limite especificado, isto ��, entre 4,5 e 8,5. A pureza qu��mica das amostras foi verificada, uma vez que relativamente ao teste colorim��trico, a tonalidade da cor da solu����o de [13N]-NH3 n��o era mais intensa que a solu����o de refer��ncia. As prepara����es foram identificadas como sendo [13N]-NH3, atrav��s dos resultados obtidos por cromatografia i��nica, espectrometria de radia����o gama e tempo de semi-vida. Por examina����o do cromatograma obtido com a solu����o a ser testada, observou-se que o pico principal possuia um tempo de reten����o aproximadamente igual ao pico do cromatograma obtido para a solu����o de refer��ncia. Al��m disso, o espectro de radia����o gama mostrou um pico de energia 0,511 MeV e um outro adicional de 1,022 MeV para os fot��es gama, caracter��stico de radionucl��deos emissores de positr��es. O tempo de semi-vida manteve-se dentro do intervalo indicado, entre 9 e 11 minutos. Verificou-se, igualmente, a pureza radioqu��mica das amostras, correspondendo um m��nimo de 99% da radioactividade total ao [13N], bem como a pureza radionucl��dica, observando-se uma percentagem de impurezas inferiores a 1%, 2h ap��s o fim da s��ntese. Os testes realizados para verifica����o da esterilidade e determina����o da presen��a de endotoxinas bacterianas nas prepara����es de [13N]-NH3 apresentaram-se negativos.Os resultados obtidos contribuem, assim, para a valida����o do m��todo para a produ����o de [13N]-NH3, uma vez que cumprem os requisitos especificados nas normas europeias, indicando a obten����o de um produto seguro e com a qualidade necess��ria para ser administrado em pacientes para avalia����o da perfus��o card��aca por PET.

Braquiterapia prost��tica: morbilidade urin��ria e sexual

RESUMO: Objectivos 1. Avaliar a morbilidade urin��ria e sexual secund��ria �� braquiterapia prost��tica com implante de I125. 2. Avaliar a influ��ncia da hormonoterapia neoadjuvante e adjuvante na morbilidade urin��ria e sexual secund��ria �� braquiterapia(I125). 3. Avaliar a influ��ncia da associa����o da radioterapia externa na morbilidade urin��ria e sexual secund��ria �� braquiterapia(I125). 4. Avaliar a morbilidade urin��ria dos doentes com contra-indica����o relativa (pr��statas volumosas, IPSS elevado).Material e m��todos De Setembro de 2000 a Dezembro de 2004 foram recrutados 204 doentes com o diagn��stico de carcinoma da pr��stata localizado (T1 e T2) ou localmente avan��ado (T3) e expectativa de vida superior a 10 anos. Foram submetidos a braquiterapia, com implante transperineal de Iodo 125 (I125) em monoterapia ou combinada com hormonoterapia e/ou radioterapia externa (tratamento trimodal). Definiram-se diversos sub-grupos de pacientes, consoante algumas caracter��sticas habitualmente referidas como factores de risco para a morbilidade do tratamento de braquiterapia prost��tica, com o objectivo de analisar a sua influ��ncia sobre a morbilidade urin��ria e sexual: Grupo 1: Braquiterapia em monoterapia (MONO) versus braquiterapia associada a radioterapia externa (BCOMB) Grupo 2: Pr��statas volumosas (>50ml) versus pr��statas n��o volumosas (<50ml)Grupo 3: Braquiterapia associada a hormonoterapia (HORM) versus braquiterapia sem hormonoterapia (NHORM)Grupo 4: IPSS elevado versus IPSS baixo Avaliou-se a evolu����o do IPSS, QoL, taxa de RTU-P e reten����o urin��ria p��s implante, e evolu����o do BSFI durante todo o per��odo de seguimento. Resultados Grupo 1: Para o grupo MONO o IPSS iniciou-se com 7.1, sofreu agravamento para 16.1 e 15.9 ao primeiro e terceiro meses. Aos 12 meses, o IPSS desceu para 10.1 enquanto que, aos 18 e 24 meses, o IPSS foi de 7.3 e 5.8. O grupo BCOMB iniciou com IPSS de 9.4. Sofreu agravamento ligeiro e pouco acentuado at�� aos 6 meses (IPSS de 14). A evolu����o do IPSS foi, ent��o, flutuante com IPSS de 5.9 aos 12 meses e 9.5 aos 18 meses. Aos 24 meses apresentava IPSS de 6.7. A taxa de reten����o urin��ria (6.4% e 0%) e de RTU-P (2.0% e 0%) foram semelhantes nos grupos MONO e BCOMB, respectivamente (p=0.375 e p=1). A evolu����o da qualidade das erec����es foi semelhante nos dois grupos excepto aos 6 meses em que MONO apresentou o valor 6 e BCOMB 3.7 (p=0.029). A percentagem de doentes potentes foi significativamente inferior nos primeiros 6 meses ap��s a braquiterapia para o grupo BCOMB relativamente ao grupo MONO: 36%���74%; 33%���73%; 33%���75%. Ap��s os 6 meses os grupos foram homog��neos. Grupo 2: O IPSS evoluiu nas pr��statas <50ml e >50ml de 7���9 para 15-19 ao primeiro m��s e 15-18 ao 3.�� m��s. Apenas ao primeiro m��s �� que as diferen��as no IPSS foram significativas (p=0.061). Ap��s o 3.�� m��s os dois grupos foram semelhantes: IPSS de 8 e 12 ao 12.�� m��s e 5.7 e 6 ao 24.�� m��s. As taxas de reten����o urin��ria e de RTU-P foram semelhantes (p=0.054 e p=0.286) Grupo 3: A evolu����o do IPSS, taxas de reten����o urin��ria e de RTU-P foram sobrepon��veis em ambos os grupos. A evolu����o da l��bido, erec����es, percentagem de doentes potentes, ejacula����o, inc��modo e satisfa����o foi significativamente inferior no grupo HORM relativamente ao grupo N HORM apenas ao primeiro m��s (valores de p<0.0001; <0.0001; < 0.0001; 0.009 e 0.002 respectivamente) Grupo 4: A evolu����o do IPSS nos doentes com IPSS elevado foi a seguinte: 22.17(0M); 19.5(1M); 20.5(3M); 15.3(6M); 15.7(12M); 11(18M); 8(24M) A evolu����o do IPSS nos doentes com IPSS baixo foi a seguinte: 5.9(0M); 15.3(1M); 14.9(3M); 12.2(6M); 8.9(12M); 7.2(18M), 5.5(24M) As taxas de RTU-P (2.8% e 0%) e reten����o urin��ria (5.1% e 5.9%) foram semelhantes em ambos os grupos de doentes (p=1). Conclus��es 1. A radioterapia intersticial da pr��stata com implante transperineal e ecoguiado de Iodo 125 �� frequentemente acompanhada de morbilidade urin��ria transit��ria e de intensidade moderada. A Morbilidade consiste em sintomatologia do aparelho urin��rio baixo (���LUTS ��� lower urinary tract symptoms���) que, na maioria dos doentes, sofre um agravamento m��ximo do primeiro ao 3.�� m��s. Segue-se uma melhoria ligeira at�� ao 6.�� m��s que �� mais acentuada da�� em diante. Por volta do 12.�� e 18.�� m��s, a maior parte dos doentes apresenta sintomatologia urin��ria muito semelhante �� que apresentava antes do tratamento. Ap��s o 18.�� m��s, os doentes mant��m uma melhoria da sintomatologia urin��ria para al��m da que apresentavam previamente ao implante. As taxas de reten����o urin��ria e de ressec����o transuretral prost��tica ap��s o implante de braquiterapia s��o muito baixas, inferiores a 10%. 2. A associa����o da braquiterapia prost��tica com radioterapia externa adjuvante influencia a evolu����o da sintomatologia urin��ria: o aparecimento da sintomatologia urin��ria �� mais lento, demorando 6 meses a atingir o seu valor m��ximo que, por sua vez, �� de intensidade menos acentuada do que quando a braquiterapia �� utilizada em monoterapia. 3. O volume prost��tico superior a 50 ml n��o influencia a morbilidade urin��ria. 4. A terap��utica hormonal, neoadjuvante e adjuvante, n��o influencia a sintomatologia urin��ria. 5. Os doentes com sintomatologia urin��ria pr��via muito acentuada n��o sofrem agravamento da referida sintomatologia. Pelo contr��rio, apresentam uma melhoria de sintomas urin��rios desde o primeiro m��s, e que se mant��m ao longo dos 24 meses de seguimento, apresentando, no final deste per��odo, sintomatologia urin��ria ligeira e muito inferior �� que apresentavam antes do implante. As taxas de reten����o urin��ria e RTU-P ap��s a braquiterapia s��o semelhantes ��s que ocorrem nos doentes assintom��ticos previamente ao implante. 6. A vida sexual est�� preservada, em mais de 70% dos casos, ao fim dos 24 meses de seguimento. No entanto, imediatamente ap��s o primeiro m��s de seguimento, ocorre uma diminui����o ligeira da qualidade das erec����es que se mant��m, sem melhoria ou agravamento, durante todo o per��odo de seguimento. A hormonoterapia afecta todos os par��metros da vida sexual, embora de forma apenas tempor��ria. Ap��s a suspens��o da terap��utica hormonal este grupo de doentes recupera a actividade sexual e apresenta-se id��ntico ao grupo de doentes que n��o foram sujeitos a essa terap��utica.----------------ABSTRACT: Objectives 1. To assess urinary and sexual morbility after prostatic brachytherapy with the implant of I125 seeds. 2. To assess the influence of neoadjuvant and adjuvant hormone therapy in urinary and sexual morbility after prostatic brachytherapy with the implant of I125 seeds. 3. To assess the effects, on urinary and sexual morbility, of associating external radiotherapy after prostatic brachytherapy with the implant of I125 seeds. 4. To assess the urinary morbility in patients with relative contraindications (voluminous prostates, high IPSS). Material and Methods From September, 2000 to December, 2004 a total of 204 patients were recruited with a diagnosis of localized (T1 and T2) or locally advanced (T3) carcinoma of the prostate and a life expectancy in excess of 10 years. The patients underwent brachytherapy with transperineal seed implant of iodine (I125) as a monotherapy or in combination with hormone therapy and/or external radiotherapy (trimodal treatment). With the aim of evaluating the treatment���s influence on urinary and sexual morbility, a number of patient sub-groups were defined in accordance with certain characteristics normally mentioned as morbility risk factors for prostatic brachytherapy treatment: Group 1: Brachytherapy as monotherapy (MONO) versus brachytherapy in combination with external radiotherapy (BCOMB) Group 2: Voluminous prostates (>50ml) versus non- voluminous prostates (<50ml) Group 3: Brachytherapy in combination with hormone therapy (HORM) versus brachytherapy without hormone therapy (NHORM)Group 4: High IPSS versus a low IPSS. The evolution of the IPSS, QoL, TURP rate and post-implant urinary retention as well as the BSFI were assessed throughout the entire follow-up period. Results Group 1: For the MONO group the IPSS began at 7.1, and then rose to 16.1 and 15.9 in the first and third months, respectively. At month 12, the IPSS had dropped to 10.1 and at month 18 and 24 the IPSS was registered at 7.3 and 5.8, respectively. The BCOMB group started out with an IPSS of 9.4. It underwent a slight and little-significant rise until month 6 (IPSS at 14). The evolution of the IPSS then began to fluctuate from an IPSS of 5.9 at month 12 and 9.5 at month 18. At month 24 we registered an IPSS of 6.7. The urinary retention rate (6.4% and 0%) and TURP rate (2.0% e 0%) were similar to those of the MONO and BCOMB groups, respectively (p=0.375 and p=1). The evolution regarding the quality of erections was similar for the two groups except at 6 months when the MONO group displayed a value of 6 and the BCOMB group 3.7 (p=0.029). The percentage of sexually potent patients was significantly lower in the first six months after brachytherapy for the BCOMB group when compared with the MONO group: 36%���74%; 33%���73%; 33%���75%. After six months, the results became more consistent. Group 2: IPSS results evolved in <50ml and >50ml prostates from 7���9 to 15-19 in the first month and from 15-18 after the third month. It was only in the first month that the differences in the IPSS were significant (p=0.061). After the third month, the two groups displayed similar outcomes: IPSS 8 and 12 at month 12 and 5.7 and 6 at month 24. Urinary retention and TURP rates were similar (p=0.054 e p=0.286). Group 3: IPSS evolution and rates of urinary retention and TURP were identical in both groups. Figures regarding libido, erections, percentage of sexually potent patients, ejaculation, discomfort and sexual satisfaction were always significantly lower for the HORM group, when compared to the NHORM group in the first month only (values of p<0.0001; <0.0001; <0.0001; 0.009 e 0.002, respectively). Group 4: IPSS evolution in patients with a high IPSS was as follows: 22.17(0M); 19.5(1M); 20.5(3M); 15.3(6M); 15.7(12M); 11(18M); 8(24M) IPSS evolution in patients with a low IPSS was as follows: 5.9(0M); 15.3(1M); 14.9(3M); 12.2(6M); 8.9(12M); 7.2(18M), 5.5(24M)TURP rates (2.8% e 0%) and those for urinary retention (5.1% e 5.9%) were similar in both patient groups (p=1). Conclusions 1. Interstitial radiotherapy of the prostate with transperineal, ultrasound-guided implant of Iodine-125 seeds is often followed by transitory urinary morbility of moderate intensity. The morbility involves symptoms of the lower urinary tract which, in most cases are at their worst from the first to the third months. There is a slight improvement up to the sixth month, at which point improvement becomes more accentuated. Around months 12 or 18, most patients display urinary symptoms that are very similar to those noted before treatment. After month 18, patients��� urinary symptoms continue to improve past the point they displayed prior to the implant. Urinary retention rates and those for transurethral resection of the prostate are very low (below 10%), after brachytherapy seed implant. 2. The combination of prostatic brachytherapy and adjuvant external radiotherapy affects the evolution of urinary symptoms: the appearance of urinary symptoms is much slower, taking six months to peak, and is less intense than when brachytherapy is employed as the only means of treatment. 3. The fact that the prostate displays a volume greater than 50 ml does not influence urinary morbility. 4. Neoadjuvant and adjuvant hormone therapy do not influence urinary symptomology. 5. Patients with severe, preexisting symptoms of the urinary tract do not experience a worsening of those symptoms. On the contrary, they exhibit an improvement in urinary symptoms as of the first month. This improvement continues for the 24 months, after which patients display symptoms of the urinary tract that are slight and a noticeable improvement over the urinary complaints registered before the implant. Urinary retention and TURP rates subsequent to brachytherapy are similar to those registered for asymptomatic patients. 6. The patient���s sexual performance is maintained in more than 70% of the cases, as noted after 24 months of follow-up. However, immediately after the first follow-up month there is a lessening in the quality of erections that continues, without improving or worsening, for the whole follow-up period. Hormone therapy affects all the parameters of sexual performance, albeit temporarily. After suspending hormone therapy, this group recovered with regard to sexual performance, and showed itself to be identical to the group of patients that had not undergone hormone therapy.-------------------RESUM��:Objectives 1. ��valuer la morbilit�� urinaire et sexuelle apr��s la realisation la curieth��rapie de la prostate avec implant de I125. 2. ��valuer l��� influence de la th��rapie hormonale n��oadjuvante et adjuvante en ce qui concerne la morbilit�� urinaire et sexuelle apr��s la r��alisation de la curieth��rapie (I125). 3. ��valuer l���influence de l���association de la radioth��rapie externe dans la morbilit�� urinaire et sexuelle apr��s la r��alisation de la curieth��rapie (I125). 4. ��valuer la morbilit�� urinaire des malades avec des contre indications relatives (prostates volumineuses, IPSS ��lev��). Mat��riel et m��thodologie De Septembre 2000 �� D��cembre 2004, on a recrut�� 204 patients ayant pour diagnostique un carcinome de la prostate localis�� (T1 et T2) ou localement avanc�� (T3) et dont l���expectative de vie ��tait de plus de 10 ans. Ils ont ��t�� soumis au traitement de la curieth��rapie avec l���implantation transp��rin��al de l���iode 125 (I125) en monoth��rapie ou en traitement combin�� avec une th��rapie hormonale et/ou radioth��rapie externe (traitement trimodale). Il y a eu plusieurs sous-cat��gories de patients, et cela d��pend de quelques caract��ristiques normalement consid��r��es comme des facteurs �� risque en ce qui concerne la morbilit�� du traitement de la curieth��rapie de la prostate, et l���objective ��tant d���analyser son influence sur la morbilit�� urinaire et sexuelle. Groupe 1: Curieth��rapie en traitement unique (MONO) par rapport �� la curieth��rapie associ��e au traitement externe (BCOMB). Groupe 2: Prostates volumineuses (>50ml) par rapport au prostates qui ne sont pas volumineuses (<50ml). Groupe 3: Curieth��rapie associ��e au traitement hormonale (HORM) par rapport �� la curieth��rapie sans traitement hormonale (NHORM). Groupe 4: IPSS ��lev�� par rapport au IPSS diminu��. Nous avons ��valu�� l���evolution du IPSS, Qualit�� de vie, le taux de RTU-P et la retention de l���urine apr��s l���implant, BSFI pendant toute la p��riode du traitement. R��sultats Groupe 1: Pour le groupe MONO l���IPSS a commen���� avec un taux de 7.1, et les patients ont souffert d���un empirement allant jusqu����� 16.1 et 15.9 pendant le premier et le troisi��me mois. 12 mois apr��s l���IPSS diminua jusqu����� 10.1 �� 18 mois le taux f��t de 7.3 et �� 24 mois il diminua encore jusqu����� atteindre 5.8. Le groupe BCOMB commen��a avec un taux d���IPSS de 9.4. Ils souffrirent un empirement l��g��r et peu accentu�� jusqu���aux 6 premiers mois (IPSS de 14). L�����volution de l���IPSS ��tait fluctuante allant de 5.9 �� 12 mois et 9.5 �� 18 mois. �� 24 mois, l���IPSS ��tait de 6.7. Le taux de retention de l���urine (6.4% et 0%) et de la RTU-P (2.0% et 0%) ��taient simmilaires dans les groupes MONO et BCOMB respectivement (p=0.375 et p=1). L��� ��volution de la qualit�� des ��rections f��t semblable dans les 2 groupes except�� le groupe MONO qui pr��senta une valeure de 6 �� 6 mois et le groupe BCOMB qui pr��senta une valeure de 3.7 (p=0.029). Le pourcentage des malades sexuellement puissants a ��t�� significativement inf��rieur pendant les 6 premiers mois depuis la curieth��rapie pour le groupe BCOMB si on le compare au groupe MONO: 36%���74%; 33%���73%; 33%���75%. Apr��s cette p��riode, les groupes e��rent des r��sultats homog��nes. Groupe 2: L��� IPSS a ��volu�� dans les prostates <50ml et >50ml de 7���9 jusqu����� 15-19 pendant le premier mois et jusqu����� 15-18 au 3��me mois. C���est seulement pendant le premier mois que les diff��rences de l���IPSS ont ��t�� significatives (p=0.061). Apr��s le 3��me mois les deux groupes ont eu des r��sultats semblables: IPSS 8 et 12 �� 12.�� mois et 5.7 et 6 �� 24.�� mois. Le taux de retention de l���urine et de la RTU-P ont ��t�� simmilaires (p=0.054 e p=0.286). Groupe 3: L���evolution de l��� IPSS, les taux de retention de l���urine et de la RTU-P pourraient se surposer pour les deux groupes. L�����volution de la libido, des ��rections, le pourcentage des malades sexuellements puissants, l���incommodit�� et la satisfaction ont ��t�� toujours significativement inf��riures dans le groupe HORM par rapport au groupe NHORM d��s le premier mois (valeurs de p <0.0001; <0.0001; < 0.0001; 0.009 et 0.002 respectivement) Groupe 4: L�����volution de l��� IPSS pour les malades ayant un IPSS ��lev�� f��t ainsi: 22.17(0M); 19.5(1M); 20.5(3M); 15.3(6M); 15.7(12M); 11(18M); 8(24M)L�����volution de l��� IPSS pour les malades ayant un IPSS diminu�� f��t ainsi:5.9(0M); 15.3(1M); 14.9(3M); 12.2(6M); 8.9(12M); 7.2(18M), 5.5(24M) Le taux de RTU-P (2.8% e 0%) et de retention de l���urine (5.1% et 5.9%) ont ��t�� semblables dans les 2 groupes de malades (p=1). Conclusions 1. La radioth��rapie interstitielle de la prostate avec implant transp��rin��al de l���iode 125 est fr��quamment acompagn��e d���une morbilit�� urinaire transitoire et d���intensit�� mod��r��e. La morbilit�� consiste d���une symptomatologie de l���appar��il urinaire inf��rieure qui, dans la plupart des malades, empire gravement du premier au troisi��me mois. La situation s���am��liore l��g��rement jusqu���au 6��me mois, l���am��lioration ��tant plus accentu��e �� partir de l��. Autour du 12��me jusqu���au 18��me mois, la majorit�� des malades pr��sente une symptomatologie urinaire qui se ressemble beaucoup �� celle qu���ils avaient avant le traitement. Apr��s le 18��me mois l���am��lioration de la symptomatologie urinaire est constante par rapport �� celle qu���ils pr��sentaient avant l���implant. Le taux de retention de l���urine et de RTU-P apr��s l���implant de la curieth��rapie sont tr��s basses, au dessus de 10%. 2. L���association de la curieth��rapie de la prostate avec la radioth��rapie externe adjuvante a une influence sur l�����volution de la symptomatologie urinaire: l���apparition des sympt��mes est plus lente, prenant jusqu����� 6 mois pour atteindre son niveau maximum, qui �� son tour, a une intensit�� moins accentu��e que lorsque la curieth��rapie est utilis��e en monoth��rapie. 3. Le volume de la prostate sup��rieure �� 50 ml n���a pas d���influence sur la morbilit�� urinaire. 4. La th��rapie hormonale, n��oadjuvante et adjuvante, n���a pas d���influence sur la symptomatologie urinaire. 5. Les malades ayant une symptomatologie urinaire pr��alable et tr��s accentu��e ne souffrent pas d���empirement de leur situation. Au contraire, ils pr��sentent une am��lioration des sympt��mes urinaires �� partir du premier mois et ceci se maintient tout au long des 24 mois que dure le traitement, ayant �� la fin de cette p��riode une symptomatologie urinaire l��g��re et beaucoup plus basse que celle qu���ils pr��sentaient avant l���implant. Le taux de retention de l���urine et de la RTU-P apr��s la curieth��rapie est simmilaire �� celui que les malades qui n���ont pas de sympt��mes pr��sentent avant l���implant. 6. La vie sexuelle est pr��serv��e dans plus du 70% des cas �� la fin de la p��riode de traitement (24 mois). Entretemps, imm��diatement apr��s le premier mois d�����tude, on note une l��g��re diminution de la qualit�� des ��rections qui se maintient sans am��lioration ou empirement tout au long du traitement. Le traitement �� base d���hormones affecte tous les param��tres de la vie sexuelle, mais de fa��on temporaire. Apr��s la suspension de la th��rapie hormonale ce groupe de malades r��cup��re l���activit�� sexuelle et se pr��sente de fa��on ��gale au groupe de malades qui n���ont pas ��t�� soumis �� ce traitement.

Determinant factors of turnover versus permanence of portuguese repatriates: an exploratory study

The study seeks to identify the determinant factors of the repatriate���s decision to remain or leave the company after repatriation, in a convenience sample of 40 Portuguese returnees working in companies based in Portugal. The main results were as follows: (1) there are seven factor categories: (a) salaries and benefits; (b) possibility of promotion, development, professional development; (c) organizational support (during and after the international mission) recognition of work; (d) economic and social atmosphere of the company, (e) good relationship with leadership; (f) convenience and/or personal / family well-being and; (g) external alternatives; (2) the main factors leading to permanence are (a) possibility of promotion, development and professional development and; (b) the existence of personal and family well-being / convenience; (3) the main factors leading to abandonment are (a) lack of organizational support and recognition of work performed; (b) lack of possibility of promotion, development and professional development and; (c) lack of personal / family well-being / convenience. Globally, the study suggests that the factors leading to permanence are very similar to those that lead to abandonment, although in reverse.

Factors of repatriates��� turnover: literature review

One of the important challenges for multinational organisations is to increase the ability to retain their repatriates. The literature review shows high turnover rates amongst repatriates in the first two years following return from the international assignment. This paper discusses organisation���s (in)ability to retain its repatriates. A diversity of predictable factors of repatriates��� turnover is identified, including factors related to the job, the organisation, qualification, career development, personality, social context and the market. The paper analysis organisational support practices designed to increase the power of retention and decrease the turnover. We concluded that research about retention versus turnover of repatriates is scarce, mainly regarding the role a formal repatriation and retention programme in facilitating the retention of these employees with acquired international knowledge and skills, that is, the role that organisational factors play in voluntary turnover decisions. Further research is suggested at the end of the article.

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Generic competencies and practices of managing by competencies: an exploratory study in different organizational contexts

Given the increasingly demanding labor market, today���s professional should act according to certain generic competencies, which allows him to perform as required by the contemporary world. In parallel, human resource management (HRM) current trends, highlight the importance that managing by competencies has in the organizational context, in the sense that it impels a more strategic and integrated HRM. The evidence of the theoretical and practical pertinence of this theme resulted in an exploratory study of a qualitative nature, which findings lead us to conclude that the most valued generic competencies by firms are flexibility, interpersonal relationship, adjustment to change and teamwork. Another finding is that HRM managing by competencies practices is characterized by informality. Managing by competencies is more frequent presence in processes as: recruitment, retention and in the employees��� development plans.

A coopera����o informal para a internacionaliza����o

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While CMV myeloradiculitis is a known complication in AIDS patients with severe immunosuppression, HSV-2 necrotizing myeloradiculitis is rare and often associated with disabling a fatal outcome. We hereby describe a 46 year-old HIV infected patient with profound and sustained immunosuppression who presented with an acute ascending paraparesis and urinary retention. Lumbar spine MRI showed contrast enhancement at the conus medullaris and cauda equine, and both CMV and HSV-2 CSF PCR were positive. Despite treatment, the patient died 20 days later. We review the main diagnostic and therapeutic aspects of herpes virus associated myeloradiculitis and discuss the approach in similar cases.

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Esta disserta����o tem como objetivo central conhecer os sistemas de recompensas em empresas portuguesas. Primeiramente �� realizada uma abordagem aos conceitos subjacentes ao sistema de recompensas e, simultaneamente �� exposta teoria sobre o tipo de recompensas mais utilizadas e como estas diferem consoante o cargo/fun����o. Foi aplicado um inqu��rito por question��rio a uma amostra de 144 empresas localizadas por todo o pa��s. Foram testadas hip��teses de estudo capazes de permitir caraterizar o sistema de recompensas desenvolvido nas empresas em estudo. Os resultados do estudo permitem concluir que: 1) os sistemas de recompensas baseados na antiguidade est��o atualmente em desuso, ao contr��rio dos sistemas de recompensas baseados na fun����o/cargo, no desempenho e nas compet��ncias; 2) o principal objetivo do sistema de recompensas das empresas do estudo �� a motiva����o dos colaboradores; 3) a conjuga����o das recompensas monet��rias e n��o monet��rias s��o as mais valorizadas pelas empresas; 4) predomina a compensa����o vari��vel nos sistemas de recompensas das empresas bem como os incentivos mistos (individuais e de grupo); 5) predominam os incentivos de curto-prazo no sistema de recompensas; 6) o b��nus anual �� o incentivo mais utilizado; 7) os benef��cios e alguns dos incentivos tendem a ser maiores �� medida que se sobe na hierarquia funcional da empresa; 8) o benef��cio predominante �� a atribui����o de telem��vel e o seguro de sa��de; 9) as formas de reconhecimento mais comuns s��o os pr��mios de desempenho, o feedback cont��nuo, as promo����es e as placas comemorativas; 10) a maioria dos inquiridos acredita que as oportunidades de desenvolvimento de carreira �� uma importante medida para a reten����o dos colaboradores; 11) as oportunidades de desenvolvimento s��o mais utilizadas pelas empresas de maior dimens��o e; 12) os benef��cios sociais s��o considerados a componente mais importante para garantir a reten����o dos colaboradores. Com base nestes resultados, na parte final da disserta����o s��o apresentadas algumas implica����es te��ricas e pr��ticas, algumas limita����es do estudo, bem como pistas para investiga����es futuras.