SYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF POLYACRYLATES CONTAINING CHARGE-TRANSFER GROUPS

Polyacrylates containing para-nitro azobenzene have been synthesized by free radical polymerization. The influence of the length of the spacer of the homopolyacrylates (HPn, n=3,4,6), content of methyl acrylate in the copolyacrylates (CP6) with para-nitro azobenzene groups on the thermal properties, such as liquid crystallinity, Tg and Tm, was studied by DSC, WAXD and polarized optical microscopy. Among the polymers studied, only the homopolyacrylate (HP6)with six carbon atoms in the spacer exhibited a nematic phase. The second-harmonic generation (SHG) signal of the poled HP6 film was detected qualitatively by Maker-fringer method.

72型分光光度计的改装

为满足多元素分析的需要,对一台72型分光光度计进行了改装,增加了数显、打印等功能.本文介绍改装后的光学系统、信号放大电路、数显和打印电路.改装后的仪器,测量速度比原来提高约10倍,可作批量样品的连续测定.

Study on the concentration and seasonal variation of inorganic elements in 35 species of marine algae

The concentrations of five major and 28 trace elements in 35 marine algae collected along the coast of China were determined by instrumental neutron activation analysis. The concentrations of halogens, rare earth elements and many transition metal elements in marine algae are remarkably higher than those in terrestrial plants. The concentration factors for 31 elements in all collected algae were calculated, those for tri- and tetra-valent elements were higher than those of the mono- and di-valent elements in marine algae. The biogeochemical characteristics of inorganic elements in marine algae were investigated. In addition, the seasonal variation of inorganic elements in Sargassum kjellmanianum was also studied. (C) 1998 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

单细胞多核管状绿藻原生质团聚及发育研究

在实验室条件下研究了三种单细胞多核管状绿藻（藓羽藻、刺松藻和齿形蕨藻）原生质的团聚和发育过程。结果表明： 藓羽藻原生质团聚过程中，Na+或Ca2+浓度分别为0.5M和0.2 M时形成的藓羽藻亚原生质体数量最多，在原生质体团聚过程中细胞核发生了形变；藓羽藻无成熟叶绿体原生质能够在海水中团聚，并形成无成熟叶绿体的亚原生质体，该亚原生质体有细胞膜形成，但是无细胞壁形成，72小时后会死亡，分离纯化的线粒体在海水中不能团聚，分离纯化的叶绿体在海水中的团聚不是很明显，只是有2-3个叶绿体形成团聚体，而且数量也很少；在藓羽藻团聚过程中外源壳孢子和藓羽藻原生质会很快分开，这样壳孢子就不会被包围到藓羽藻原生质团聚体中，即使有的壳孢子被团聚进藓羽藻亚原生质体中，最后也是以藓羽藻亚原生质体的破裂而壳孢子发育而告终，同时加入壳孢子后还导致藓羽藻亚原生质体的发育方式发生了一定的变化，从以前的单极萌发变成二极萌发；在实验室条件下继代培养了藓羽藻原生质体三代，而且在团聚数量、大小和发育能力方面能够稳定遗传；野生藓羽藻原生质在6-12月份能够团聚，但是只能在8-12月份间发育； 刺松藻原生质体在碱性人工海水中会团聚形成亚原生质体，但是亚原生质体在72h内全部破裂，酶学和染色实验显示刺松藻原生质团聚过程中的絮凝胶状物质含有蛋白质和多糖类物质，松藻是一种非常合适的研究亚原生质体形成的实验模式材料；刺松藻的营养芽、游动细胞、丝状体和果胞都能够再生，刺松藻片断生长的最佳碳和氮浓度分别为：HCO3—C 3mM和NO3—N 70μM，刺松藻对所研究的不同氮源吸收能力基本相同； 齿形蕨藻的光饱和点为200 μmol/m2 s，最佳生长温度为25-30℃；齿形蕨藻片断的再生与光照强度成反比，而且只能在20-35℃间再生。齿形蕨藻原生质在碱性海水中能够团聚，但是与藓羽藻相比较数量非常的少。

环境因子对有毒赤潮生物微型原甲藻（Prorocentrum minimum）生长增殖的影响

本文研究了温度、盐度、PH、营养盐（N、P）；维生素（B_(12)、B_1）、微量元素（Fe、Mn）、底泥抽提液和赤潮生物骨条藻与微型原甲藻生长的关系。结果表明，微型原甲藻增殖生长的适温范围为20－30 ℃，28 ℃时有最大生长率；最适盐度为10－35‰，25‰盐度生长率最高；PH 7.18-8.72范围内生长良好，影响不明显。N、P营养盐能促进微型原甲藻增殖生长，N盐以硝态氮效果最好，容易被吸收利用；氨盐为唯一N源时效果较差，浓度超过100uM时则有抑制作用；亚硝酸盐作用不明显。微型原甲藻主要是利用无机磷；有机磷作唯一P源时不能有效地被吸收利用，对微型原甲藻生长不利；维生素B_(12)促进微型原甲藻增殖生长效果明显，B_(12)与B_1综合效果更好；底泥抽提液、微量元素Fe、Mn都能有效地促进微型原甲藻增殖生长；研究证实底泥中腐植酸（HFA）虽有促进生长的作用，但效果尚不及抽提液，推测可能还有其他有效成分。研究发现中肋骨条藻有刺激微型原甲藻生长的作用，但其具体作用成分还有待研究。所得这些结果对进一步研究阐明微型原甲藻赤潮成因和机理有重要科学意义。

中国近海浮游细菌生物量与生产力的生态分布特点

本论文研究了胶洲湾、东海和渤海的蓝细菌（Synechococcus）、生物量、异养细菌生物量和生产力的生态学特点。并在汇泉湾、渤海和东海用分极增减法对海洋蓝细菌在微型食物环（the microbial loop）中的作用进行了初步研究。在以上海区调查研究的时间如下：胶州湾：1993年2月、5月、9月11月，1996年5月、1999年3月、5月和12月。汇泉湾：1996年4月至1998年4月。东海：1997年2-3月，1998年7月。渤海1998年9-10月，1999年4-5月。研究结果如下：胶州湾：蓝细菌生物量的变化范围是11.4-0.03 mgC/m~3，季节变化是夏季>秋季和春季>冬季。其水平分布是除夏季蓝细菌生物量是沿岸浅水区向湾外递减外，其它三季（春、秋和冬季）是由湾外向湾内至沿岸浅水区递减。蓝细菌生物量与海水温度周年变化正相关，与季节海水温度的关系是秋、冬季分布变化一致，春、夏季分布变化相反。海水温度是影响胶州湾蓝细菌生物量分布变化的主要原因。异养细菌生物量和生产力的变化范围分别是29.8-1.62 mgC/m~3; 129.12-1.92 mgC/m~3.d。季节变化都是夏季>秋季、春季>冬季。夏季的异养细菌生物量和生产力水平分布趋势与蓝细菌生物量的分布变化相同。海水温度对异养细菌生产力的影响较对异养细菌生物量的影响大。异养细菌生产力相比（BP:PP）的变化在0.58-0.02之间，季节分布变化是夏季>秋季、春季>冬季。夏季表层的BP:PP由沿岸浅水区向湾心、湾口和湾外递减。东海：蓝细菌生物量的变化范围是46.72-0.011 mgC/m~3，夏季高平均是23.59 mgC/m~3，冬季低平均是3.61 mgC/m~3。冬季蓝细菌生物量的水平分布明显受黑潮的影响，在表面和20米层是由东南向西北方向递减。其垂直分布是冬季表层和20米层>底层，夏季是20米层>表层>底层；在连续站冬111站和410站变化都是中层>底层>表层。异养细菌生物量和生产力的变化范围分别是17.2-4.4 mgC/m~3（1997.2）；376.8-7.2 mgC/m~3.d。异养细菌生产力夏季高平均是35.1 mgC/m~3.d。异养细菌生物量的水平分布是由沿岸向外海递增（1997.2），异养细菌生产力的水平分布是冬季异养细菌生产力在32度断面有由沿岸向外递减趋势，PN断面的变化与冬季相似。垂直分布，冬季和夏季的异养细菌生产力的垂直变化在2断面是底层大于表面，PN断面则是表层大于底层，32度断面大多断站是底层大于表层。在连续站冬季111站异养细菌生产力的变化是底层>中层>表层，409站的变化是中层>底层>表层，夏季111站和410站都是中>底层>表层。异养细菌生物量（1997.2）表层分布变化与海水温度分布变化相似，底层变化相反。异养细菌生产力与初级生产力相比（BP:PP），冬季在0.04-0.30之间，平均为0.17；夏季在0.20-0.43之间平均0.32。冬季在长江口附近BP：PP有一个高值区是0.30，夏季在111站附近有一个高值区是0.43。从连续站111站和409’站观测发现底层的BP：PP明显高于表层。渤海：蓝细菌生物量秋季（16.6-0.37 mgC/m~3）比春季（0.44-0.015 mgC/m~3）高。其秋季的水平分布与海水盐度水平分布相同，与海水温度水平分布相反。异养细菌生产力秋季（189-62.2 mgC/m~3.d）与春季（193.2-49.8 mgC/m~3.d）相当。但秋季捕层BP普遍小于底层，而春季是表层普遍大于底层。根据颗粒分级培养实验结果，海洋蓝图细菌在微型食物环中的作用如下：在汇泉湾的春季和秋季蓝细菌可能主要被小型浮游动物（microzooplankton 20-200 μm）捕食。在渤海的春季和秋季也是同样结果。但在东海夏季的111站和410站附近（东海大陆架中部）微型浮游动物（nanozooplankton 2-20 μm）对蓝细菌的捕食压力明显。

黄海太平洋磷虾种群生态学研究

太平洋磷虾（Euphausia pacifica Hansen）作为目前已开发利用的6种主要磷虾资源之一，广泛分布于北太平洋北部及其临近近岸海域。在黄海，太平洋磷虾是黄海海洋生态系统中大型浮游动物的优势种和重要功能群的组成种类，它还是黄海生态系统中鱼类等上层营养级生物的重要饵料。太平洋磷虾的种群组成以及数量变化会直接影响到黄海经济鱼类的资源动态，从而影响到整个黄海海洋生态系统的变化。 本论文依托国家重点基础研究发展计划项目（973-II）——“我国近海生态系统食物产出的关键过程及其可持续机理”和国家自然科学基金40306021号——“黄、东海太平洋磷虾种群补充机制研究”，在2006年4月到2007年8月的八个黄海调查航次中，通过网采固定样品和现场培养实验相结合的方法，对黄海海域太平洋磷虾的种群生态分布和补充、繁殖和发育策略、以及成体的摄食、代谢进行了较为全面、细致的研究。 种群生态分布：本文根据2006年4月（春季）和10月（秋季）两次黄海大面调查和2006年9月－2007年8月六次黄海断面调查所获得的样品，研究了太平洋磷虾在南黄海的种群生态分布和补充机制，并探讨了其生态分布与环境因子的关系。 春季，南黄海太平洋磷虾种群主要分布在33 °N－36 °N、50 m-75 m等深线之间的海域，种群总丰度（不包括卵）为152.90 ind. m-3，卵丰度非常高，成体丰度较低，仅占种群总数量的8.72%。调查海域的平均成体丰度为0.35 ind. m-3。种群组成以幼体为主，占到种群的90.85%。春季是太平洋磷虾种群补充的高峰期。秋季，种群主要分布在黄海冷水团海域，种群总丰度（不包括卵）为335.38 ind. m-3，成体丰度显著高于春季，调查海区成体的平均丰度为7.73 ind. m-3。成体和未成体以99.5%的总比例在种群中占绝对数量优势，卵和幼体都非常少。秋季太平洋磷虾种群处于稳定期。春季成体的体长显著大于秋季，春季成体全长以13-18 mm为主，而秋季成体的全长主要是9-13 mm。 春季，太平洋磷虾成体具有昼夜垂直迁移行为，白天主要停留在底层水域，夜间少部分成体会上升到中上层水域，但是大部分成体仍然停留在深层。幼体从C3期开始就具有一定昼夜垂直迁移行为，F2—F5期幼体的昼夜垂直迁移行为已经非常明显。由于从表层到底层叶绿素a浓度逐渐降低，因此，太平洋磷虾的昼夜垂直迁移行为可能与摄食有关。 太平洋磷虾成体的分布是与海水温度紧密相关，南黄海太平洋磷虾成体比较适宜生活的水温是8-16 °C。春、冬季水温较低，成体分布范围较广。夏、秋季表层水温急剧升高到20 °C以上，太平洋磷虾成体主要分布在黄海冷水团海域，丰度也达到一年中的最高值。另外，秋季在近长江口的北部海域有大量成体分布。 繁殖和发育：自2006年9月到2007年8月的一年内，在黄海进行了七个航次的太平洋磷虾现场培养产卵实验，结果表明：在南黄海，太平洋磷虾在3月—6月份都具有产卵行为，4月份达到产卵高峰期。单个雌体的最大产卵量为617 egg female-1，出现在4月份。8月、9月和12月在南黄海均未发现太平洋磷虾的产卵行为。太平洋磷虾具有二次产卵行为，并且第一次产卵量要高于第二次。太平洋磷虾的产卵行为与其干湿重紧密相关。成体干重低于5.0 mg，湿重低于26.0 mg，均不具有产卵能力。在产卵高峰期，太平洋磷虾的干湿重达到一年中的最高值。 在南黄海，太平洋磷虾的幼体发育主要遵循下面的发育途径：卵 → 无节幼体 → 后期无节幼体 → 原溞状幼体 → 溞状幼体F1（0' 7, 1' 7） → 溞状幼体F2（1' 4'' 7, 3' 1'' 7） → 溞状幼体F3（5'' 7） → 溞状幼体F4（5'' 5） → 溞状幼体F5（5'' 3） → 溞状幼体F6（5'' 1）。太平洋磷虾在15 °C下的幼体发育速度明显快于4 °C。15 °C下幼体发育到C1期只需5.6 d，而4 °C下则需要16.1 d。 摄食和代谢：2006年9、10、12月和2007年3、8月，在南黄海的五个断面调查航次中，在S1-4站进行了太平洋磷虾成体摄食实验，结果表明：太平洋磷虾在8月和9月份对水体中浮游植物的摄食率比较低，主要摄食水体中的微型浮游动物，从而由于营养级级联作用，致使水体中叶绿素a浓度升高。12月和3月，太平洋磷虾对水体中浮游植物有着很强的摄食活动，使得水体的叶绿素a浓度大量降低，当然太平洋磷虾也可能会同时摄食水体中微型浮游动物。 2006年9、12月和2007年3月，在南黄海的三个断面调查航次中，在S1-4站进行了太平洋磷虾现场耗氧率和排氨率实验，结果表明：太平洋磷虾在3月份的耗氧率是172.92 μg ind.-1 d-1，是9月份和12月份的6倍还要多。太平洋磷虾在9月和12月的耗碳率和体碳日损耗量相近，且都较低。3月份太平洋磷虾的代谢非常旺盛，体碳日损耗量达到2.70 % d-1，每日的耗碳率为62.9 µg C ind-1 d-1。9月和12月份太平洋磷虾代谢的氧氮比都较低，分别是11.3和7.0，太平洋磷虾成体的主要代谢基质是蛋白质。3月份的氧氮比为35.1，太平洋磷虾成体代谢主要以脂肪及碳水化合物为主。

南黄海浮游细菌的分布特点与水文现象的影响研究

本文采用表面荧光显微镜计数法和分级稀释培养技术对我国南黄海聚球蓝细菌和异养细菌在各个季节的分布特点、摄食压力的来源以及物理水文现象对其分布影响进行了研究，同时还对浮游细菌的年际变化进行了探讨。 1． 春季三个航次中聚球蓝细菌平均丰度为3.71×10E+4 cells/ml， 生物量为10.91µg C l-1；异养细菌平均丰度为3.86×10E+5 cells/ml，生物量为17.72 µg C l-1。在垂直方向上，聚球蓝细菌一直表现为中层>表层>底层，而异养细菌在每个航次中的表现都不尽相同，但总体来说仍是中上层丰度较大。 春末夏初，海区多种水团的存在导致水域水文现象复杂，其中潮汐锋、层化现象等对浮游细菌的分布产生很明显的影响。聚球藻(Synechococcus)蓝细菌生物量最大值主要分布于潮汐锋区及层化区表层和水体中层，异养细菌生物量最大值则多出现在混合区的表、底层和层化区的表层。 2． 夏季对黄海冷水团鼎盛时期的浮游细菌的生态学研究表明：(1)垂直方向上聚球蓝细菌生物量和异养细菌的表现特点不同，聚球蓝细菌生物量的分布情况是中层>表层>底层；异养细菌丰度在垂直方向上的分布状况是表层＞中层＞底层。(2)聚球蓝细菌对浮游植物总生物量的贡献为2~99%(平均为42.5%)，异养细菌生物量与浮游植物总生物量的比值为0.05~6.37(平均为0.85)。(3)浮游细菌的分布于水体温度和盐度变化有一定关系，冷水团中的浮游细菌生物量最低。(4)小型浮游动物对聚球藻蓝细菌的捕食率为0.20~0.42/d。 3． 秋冬季节，11月份黄海沿岸流比暖水流对聚球蓝细菌分布的影响要大，聚球蓝细菌主要分布在黄海沿岸流经过的南黄海北部水域；而异养细菌的分布在此时与聚球蓝细菌的分布恰恰相反。1月份，异养细菌的分布与暖流水的入侵有很好的相关性，主要分布在暖流水的舌锋位置34°N附近；聚球蓝细菌主要分布在暖流水经过的区域33~34.5°N。 秋、冬季，海区突出的水文特征为沿岸流及黄海暖流，它们的强弱、流向及分布直接影响了浮游细菌的分布状况。 4． 南黄海聚球蓝细菌的季节变化是春季(6月)>秋季(10月)>夏季(8月)>冬季(1月)，丰度在7.8×103~5.8×104 cells ml-1间；异养细菌的季节变化是夏季(8月)> 春季(6月)>秋季(10月)>冬季(1月)，丰度在1.5×10E+5~7.8×10E+5 cells ml-1间。 聚球蓝细菌对浮游植物总生物量的贡献(CB/PB)在南黄海的季节变化情况是春季>秋季>夏季>冬季，平均为35.76%。异养细菌生物量对浮游植物总生物量的比值(BB/PB)的季节变化是夏季>秋季>春季>冬季，平均为61%。 浮游细菌的主要摄食者是微型浮游动物(<20 µm)和小型浮游动物(<200 µm)，在不同季节摄食者表现不同。原生动物对浮游细菌的摄食率冬季高于春季。综上所述，浮游细菌在南黄海的分布主要受温度影响，随季节变化较明显；同时也受到原生动物的下行控制。同时物理场对浮游细菌的分布也有影响。

桑沟湾贝藻养殖区附着生物生态效应研究

附着生物又称污损生物，是附生在海洋设施和生物体表面的动物、植物和微生物等生物的总称（Azis et al., 2001）。附生在养殖器材和生物体表面的数量巨大的附着生物，对贝类养殖和海湾生态系统内的物质和营养盐循环等多个方面产生影响。本研究以北方重要的养殖海湾----桑沟湾为研究对象，对贝藻养殖区附着生物的群落演替及其生态效应进行了研究。主要研究结果如下： ① 2007年5月至2008年5月，采用挂网的方法对桑沟湾栉孔扇贝和海带混养区的附着生物的季节变化进行了研究。结果显示挂网上的附着生物具有显著的季节变化特征，网片上的附着生物湿重与水温的变化相一致，生物量为3~1210 g•m-2。2月份附着生物的生物量最低，8月份最高。2007年9月至11月，对栉孔扇贝养殖笼上和贝壳上的附着生物种类和数量进行了研究。结果显示9月份养殖笼上附着生物的湿重约为1.94 kg，10月份降至0.99 kg，11月份又稍有增加，为1.03 kg。扇贝壳上的附着生物变化趋势与养殖笼上的相同，9~11月份壳上附着生物的数量约0.49~2.09 g。扇贝养殖笼上可鉴定的大型附着生物约23种，包括藻类、海鞘类、苔藓虫类、环节动物、腔肠动物、软体动物、甲壳动物和海绵动物等。玻璃海鞘、柄海鞘、紫贻贝和苔藓虫等是附着生物群落中的优势种。 ② 通过在栉孔扇贝和虾夷扇贝上壳上添加不同重量的“模拟附着生物”（速凝水泥）的方法，研究了贝壳上附着生物的重量对这两种扇贝生长和存活的影响。结果显示水泥重量是上壳重0.5-3倍的各组实验组扇贝的生长和存活与对照组（未添加水泥的扇贝）之间没有显著差异。说明贝壳上附着生物重量为上壳的3倍重时，也不会显著影响扇贝生长存活。9-11月份贝壳上的自然附着生物的重量约为1.47-2.09 g，为上壳重的28.16 (±38.6)%—31.29 ± (31.63)%。因此，贝壳上附着的生物重量不太可能对扇贝的生长存活造成显著的负面影响。 ③ 在桑沟湾现场测定了玻璃海鞘和柄海鞘的生物沉积速率。9月份（水温约24℃）玻璃海鞘和柄海鞘的生物沉积速率分别为32.14和90.06 mg•ind-1•d-1或（858.99 和467.76 mg•gdw-1•d-1），据此计算，养殖笼上的两种海鞘的生物沉积速率约为84.29 mg•m-2•d-1。海区的自然沉积速率为41.49 mg•m-2•d-1；玻璃海鞘和柄海鞘沉积物中有机质含量分别为14.34%和13.77%，对照组海区自然的有机质含量为14.36%；以上三者有机碳的含量分别为24.72%，23.74%和24.76%；氮的含量分别为0.27%和0.25%，自然沉积物中的氮含量为0.30%。9月份扇贝养殖笼上附着的海鞘将产生2588.16吨的沉积物，即向底部沉积363.77吨的有机物、6.99吨的氮和1.79吨的磷。 ④ 通过测定扇贝养殖笼上优势种附着生物--玻璃海鞘、柄海鞘和贻贝的摄食、呼吸和排泄，研究了这些优势种类对贝类养殖和海湾环境的影响。9月份（水温约24.5℃）玻璃海鞘和柄海鞘对颗粒有机物（POM）的摄食率分别为14.30 和17.01 mg• h-1•ind-1。根据实验结果计算这两种海鞘摄取的颗粒有机物相当于312个扇贝的摄取量，大于笼内养殖的扇贝的摄取量；玻璃海鞘和柄海鞘的耗氧率分别约为0.32和0.18 mg•h-1•ind-1，养殖笼上的这两种海鞘消耗的溶解氧约等于75个扇贝消耗的溶解氧。栉孔扇贝、玻璃海鞘、柄海鞘和贻贝的排氨率分别为33.66 ±11.34，117.90±23.46，35.91±6.22，28.08±3.41 ug NH4-N•gdw-1•h-1。以此估算，9月份玻璃海鞘、柄海鞘和贻贝每天排泄的氨氮约为654.08 kg，相当于16467吨栉孔扇贝（鲜重）排泄的氨氮。海鞘和贻贝排泄的氨氮可提供浮游植物等所需的2.75%的氮，可以提供1204吨海带的生长所需的氮。 ⑤ 一个养殖笼内的栉孔扇贝和全部附着生物（Scallop Culture Unit, SCU）在夏季（6-9月）对颗粒有机物的摄食速率约为43.13-98.94 mg/h，平均74.05 mg/h，期间桑沟湾养殖的栉孔扇贝及附着生物摄取的POM约为1279.58吨；同期，SCU对氨氮和磷（PO4-P）的排泄速率分别为125.59-1432.23 μmol•h-1和76.2-252.89μmol•h-1，期间桑沟湾养殖扇贝及附着生物排泄的氮磷分别为211.09 吨和83.79 吨。一串牡蛎及吊绳和牡蛎壳上的附着生物（Oyster Culture Unit, OCU），夏季摄食率为5-41.43μmol•h-1，耗氧率为16.54-41.76μmol•h-1，对氨氮和磷（PO4-P）的排泄速率分别为35.56-489.34μmol•h-1 和9.92-16.68μmol•h-1。以此估算，夏季OCU可摄取POM535.68吨，消耗溶解氧955.58吨，排泄氮磷分别为62.37 吨和15.50 吨。

四种海藻热休克蛋白70（HSP70）基因的克隆与表达分析

热休克蛋白70是热休克蛋白家族中重要的成员，参与新生蛋白的折叠、转运、重折叠变性蛋白、协助降解变性蛋白和抗逆环境胁迫等功能。海带和裙带菜是浅海潮下带典型的褐藻，孔石莼和浒苔是潮间带典型的绿藻，四种大型海藻均有重要的经济价值和生态价值。随着潮汐变化固着藻类生境理化因素变化剧烈，藻类面临着严重的环境胁迫，因此研究藻类抗逆机理有着重要的意义。 本研究采用同源克隆法配合RACE-PCR，克隆了海带、孔石莼、裙带菜和浒苔HSP70基因的全序列（分别命名为LJHSP70、UPHSP70、QDHSP70和EPHSP70）。利用生物信息学方法分析了四种藻类HSP70结构特征、同源性关系和进化地位。获得的海带HSP70基因全序列长为2918 bp，5’非翻译区为248 bp，3’非翻译区为696 bp，开放阅读框为1974 bp，编码657个氨基酸，预测的分子量为72.03 kDa，等电点为4.97。获得的裙带菜HSP70基因全序列长为3243 bp，5’非翻译区为248 bp，3’非翻译区为1021 bp，开放阅读框为1974 bp，编码657个氨基酸，预测的分子量为72.03 kDa，等电点为4.96。获得的孔石莼HSP70基因全序列长为2283 bp，5’非翻译区为65 bp，3’非翻译区为247 bp，开放阅读框为1971 bp，编码656个氨基酸，预测的分子量为71.13 kDa，等电点为5.04。获得的浒苔HSP70基因全序列长为2265 bp，5’非翻译区为65 bp，3’非翻译区为217 bp，开放阅读框为1983 bp，编码660个氨基酸，预测的分子量为71.39 kDa，等电点为5.03。四种海藻HSP70氨基酸序列均含有四肽重复序列GGMP，具有三个典型的HSP70签名基序。细胞质定位的HSP70 C-末端特征基序为EEID或EEVD，并且N-端氨基酸序列保守性高于C-端。海带和裙带菜HSP70蛋白同源性为98%，孔石莼和浒苔HSP70蛋白同源性为96%，四种海藻HSP70蛋白序列与陆地植物和其他藻类HSP70蛋白序列同源性为70-80%。 利用荧光定量RT-PCR技术对不同胁迫条件处理的海带和孔石莼HSP70 mRNA的表达水平进行定量分析。不同热激温度（5-40 ℃）处理组中，30 ℃处理组的海带HSP70 mRNA表达量最高是10 ℃处理组的海带HSP70 mRNA表达量的3倍，而35 ℃或40 ℃处理组的海带HSP70表达量却低于25 ℃或30 ℃处理组的海带HSP70 mRNA表达量。25 ℃不同热激时间（0-12 h）处理组中，海带HSP70 mRNA表达量呈先上升后下降趋势。热激1 h后海带HSP70 mRNA表达量迅速上升，热激7 h后mRNA表达量达到最大，是对照组表达量的4倍。不同盐度（0‰-45‰）胁迫处理组中，0‰或5‰盐度处理组的海带HSP70 mRNA表达量是30‰盐度处理组海带HSP70 mRNA表达量的3倍。35‰、40‰和45‰盐度处理组之间HSP70 mRNA表达量较低且无显著差异。 不同热激温度（5-40℃）处理组中，20 ℃或25 ℃处理的孔石莼HSP70 mRNA表达量较低，而5 ℃、35 ℃、或40 ℃处理组的孔石莼HSP70 mRNA的表达量是25 ℃处理组孔石莼HSP70 mRNA表达量的2倍以上。30 ℃不同热激时间（0-12 h）处理组中，孔石莼HSP70 mRNA表达量也呈先上升后下降趋势。热激5 h后孔石莼HSP70 mRNA表达量达到最大，是对照组的3.5倍。不同盐度（0‰-45‰）胁迫处理组中，0‰或5‰盐度处理组的孔石莼HSP70 mRNA表达量是30‰盐度处理组孔石莼HSP70表达量的3倍。30‰、40‰和45‰盐度处理组孔石莼HSP70 mRNA表达量较低，且无显著差异。不同紫外线照射时间（0-4.0 h）和不同干燥时间（0-4.0 h）处理组中，孔石莼HSP70 mRNA表达量都在3 h后达到最高值，之后表达量维持在较高水平。 为进一步研究藻类HSP70的生物学功能，将海带HSP70基因的开放阅读框区域克隆到表达载体pEASY-E2中，并转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS。将阳性重组子培养于含有AMP（100 U/mL）的LB培养基，IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳鉴定。经5 h诱导，其表达量达到平台期，继续培养HSP70表达量并不显著增高。5 mM IPTG诱导海带HSP70蛋白表达量高于1 mM IPTG诱导蛋白表达量。

Effects of acute temperature or salinity stress on the immune response in sea cucumber, Apostichopus japonicus

Invertebrates are increasingly raised in mariculture, where it is important to monitor immune function and to minimize stresses that could suppress immunity. The activities of phagocytosis, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), myeloperoxiclase (MPO), and lysozyme (LSZ) were measured to evaluate the immune capacities of the sea cucumber, Apostichopus japonicus, to acute temperature changes (from 12 degrees C to 0 degrees C, 8 degrees C, 16 degrees C, 24 degrees C, and 32 degrees C for 72 h) and salinity changes (from 30 parts per thousand to 20 parts per thousand, 25 parts per thousand, and 35 parts per thousand for 72 h) in the laboratory. Phagocytosis was significantly affected by temperature increases in 3 h, and by salinity (25 parts per thousand and 35 parts per thousand) changes in 1 h. SOD activities decreased significantly in 0.5 h to 6 h samples at 24 degrees C. At 32 degrees C, SOD activities decreased significantly in 0.5 h and 1 h exposures, and obviously increased for 12 h exposure. CAT activities decreased significantly at 24 degrees C for 0.5 h exposure, and increased significantly at 32 degrees C in 3 h to 12 h exposures. Activities of MPO increased significantly at 0 degrees C in 0.5 h to 6 In exposures and at 8 degrees C for 1 h. By contrast, activities of MPO decreased significantly in 24 degrees C and 32 degrees C treatments. In elevated-temperature treatments, activities of LSZ increased significantly except at 32 degrees C for 6 h to 12 h exposures. SOD activity was significantly affected by salinity change. CAT activity decreased significantly after only 1 h exposure to salinity of 20 parts per thousand.. Activities of MPO and LSZ showed that A. japonicus tolerates limited salinity stress. High-temperature stress had a much greater effect on the immune capacities of A. japonicus than did low-temperature and salinity stresses. Crown Copyright (C) 2008 Published by Elsevier Inc. All rights reserved.

藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷的RP-HPLC分析

建立了藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷含量的高效液相色谱分析法.采用Waters XTerra RP18色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-1%冰醋酸溶液(28:72,V:V)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长330 nm,柱温30℃,在20 min内分离检测了该两种化合物.松果菊苷和麦角甾苷进样量分别在0.077～4.950μg(r=0.999 9)和0.085～5.450μg(r=0.999 9)内呈良好线性,平均加样回收率分别为98.35%和92.50%,RSD分别为2.35%和2.86%.所建立的方法简便、快捷、结果准确可靠,重现性好,可用于藏药短管兔耳草的质量控制,并为兔耳草属植物中苯丙素苷类化合物的分离分析提供一定的参考.

高寒草原3种蓼科植物酚类物质含量及存在状态分析

对高寒草原3种蓼科植物全株不同部位的酚类物质含量进行了测定和比较.结果表明：植物不同的部位的酚类物质含量不同.珠芽蓼、西伯利亚蓼和圆穗蓼酚类物质含量最高的部位分别为根、茎叶和花穗,总酚含量分别为67.18、72.41、98.12 g/kg;简单酚含量分别为31.32、34.90、30.16 g/kg;单宁含量分别为35.86、37.51、67.96g/kg;缩合单宁含量依次为26.09、36.90、31.69 g/kg.珠芽蓼与西伯利亚蓼茎叶与根中酚类物质含量高于圆穗蓼,花穗中含量反之.3种植物酚类物质的蛋白质结合能力为珠芽蓼〉西伯利亚蓼〉圆穗蓼.

The effect of land management on carbon and nitrogen status in plants and soils of alpine meadows on the Tibetan plateau

Large-scale grassland rehabilitation has been carried out on the severely degraded lands of the Tibetan plateau. The grasslands created provide a useful model for evaluating the recovery of ecosystem properties. The purposes of this research were: (1) to examine the relative influence of various rehabilitation practices on carbon and nitrogen in plants and soils in early secondary succession; and (2) to evaluate the degree to which severely degraded grassland altered plant and soil properties relative to the non-disturbed native community. The results showed: (1) The aboveground tissue C and N content in the control were 105-97 g m(-2) and 3.356gm(-2), respectively. The aboveground tissue C content in the mixed seed treatment, the single seed treatment, the natural recovery treatment and the severely degraded treatment was 137 per cent, 98 per cent, 49 per cent and 38 per cent, respectively, of that in the control. The corresponding aboveground tissue N content was 109 per cent, 84 per cent, 60 per cent and 47 per cent, respectively, of that in the control. (2) Root C and N content in 0-20 cm depths of the control had an 2 2 average 1606 gm(-2) and 30-36 gm(-2) respectively. Root C and N content in the rehabilitation treatments were in the range of 26-36 per cent and 35-53 per cent, while those in the severely degraded treatment were only 17 per cent and 26 per cent of that in the control. (3) In the control the average soil C and N content at 0-20 cm was 11307 gm(-2) and 846 gm(-2), respectively. Soil C content in the uppermost 20 cm in the seeded treatments, the natural recovery treatment and the severely degraded treatment was 67 per cent, 73 per cent and 57 per cent, respectively, while soil N content in the uppermost 20cm was 72 per cent, 82 per cent and 79 per cent, respectively, of that in the control. The severely degraded land was a major C source. Restoring the severely degraded lands to perennial vegetation was an alternative approach to sequestering C in former degraded systems. N was a limiting factor in seeding grassland. It is necessary for sustainable utilization of seeding grassland to supply extra N fertilizer to the soil or to add legume species into the seed mix. Copyright (c) 2005 John Wiley & Sons, Ltd.

贵州乌江水系河水硫同位素组成研究

对乌江丰水期河水硫酸盐的硫同位素组成特征进行了研究。SO^2- 4平均浓度为0．48mmol／L，δ^34S值为-11．5‰～8．3‰，干流河水834S值为-6．7％。～-3．9‰。河水的硫同位素组成主要受岩石风化及大气降水的影响，具有明显的区域性分异特征：上游碳酸盐岩地区河水的SO^2- 4浓度高而834s值低，SO^2- 4主要来源于煤中黄铁矿的氧化、矿床硫化物的氧化和大气降水；下游碳酸盐岩夹碎屑岩地区河水中的SO^2- 4浓度低而δ^34 S值高，SO^2- 4主要来源于大气降水和石膏溶解，煤中黄铁矿氧化生成的硫酸盐所占比重较低。乌江河水向贵州省外输出的SO^2- 4。通量为172×10^10g／a，丰水期占全年SO^2- 4输出总量的72％。来自煤、硫化物、雨水和蒸发岩的硫对丰水期河水中SO^2- 4的平均贡献分别为：50％、25％、20％和5％。H2s04对碳酸盐岩的侵蚀速率为35．1t／km^2／a（17．5mm／ka），由此降低大气CO2消耗速率3．66×10^5moL／km^2／a.