Influ��ncia do suco de laranja na microbiota intestinal humana

Coordena����o de Aperfei��oamento de Pessoal de N��vel Superior (CAPES)

Desenvolvimento de um embutido c��rneo fermentado, com teores reduzidos de gordura e sais de cura, atrav��s da utiliza����o de culturas probi��ticas

Coordena����o de Aperfei��oamento de Pessoal de N��vel Superior (CAPES)

��ndice de resist��ncia m��ltipla aos antimicrobianos, concentra����o inibit��ria e beta-lactamases de espectro estendido em linhagens de Proteus mirabilis e Proteus vulgaris isoladas de diferentes afec����es em animais dom��sticos

P��s-gradua����o em Medicina Veterin��ria - FMVZ

Persist��ncia de plasm��deos que codificam carbapenemases do tipo New-Delhi-Metalo-β-Lactamase

As metalo-β-lactamases (MBL) s��o capazes de hidrolisar os carbapen��micos, a classe de antimicrobianos com maior pot��ncia para o tratamento de infec����es graves e de maior uso clinico. Dentre as MBL, o grupo mais recentemente descrito e que apresentou r��pida dissemina����o em todo o mundo �� o da New-Delhi-Metalo- β-lactamases (NDM). Nas enterobactérias, os genes que codificam essas enzimas est��o mais frequentemente localizados em plasm��deos. O estudo da estabilidade de plasm��deos que albergam o gene blaNDM-1 �� importante para entender a predomin��ncia de esp��cies que carregam esses plasm��deos, desvendar mecanismos moleculares envolvidos na sua persist��ncia e para desenvolver novas drogas que possam diminuir a sua persist��ncia. Estudos recentes sobre estabilidade plasmidial evidenciaram que a maprotilina �� capaz de induzir perda plasmidial de at�� 90% em E. coli K12. Neste trabalho, foi estudado o efeito da maprotilina na indu����o de cura de plasm��deos, que albergam o gene blaNDM-1, em diferentes esp��cies da fam��lia Enterobacteriaceae. Nove isolados pertencentes a diferentes esp��cies foram inclu��das no estudo. Os plasm��deos foram caracterizados quanto ao seu tamanho por eletroforese e por sequenciamento de DNA no sistema Illumina. A persist��ncia plasmidial foi determinada pelo m��todo de contagem em placa em LB ��gar com e sem tratamento com maprotilina em concentra����es sub-inibit��rias (50mg/L). O experimento foi conduzido por 10 dias, representando aproximadamente 100 gera����es. Neste estudo evidenciou-se que o grupo das enterobactérias est��o envolvidas na dissemina����o de plasm��deos com blaNDM-1, sendo que plasm��deos do grupo IncF est��o mais relacionados a essa dispers��o. A maprotilina teve efeito de cura plasmidial em todos os isolados exceto em E. hormaechei \"subsp. oharae\" e C. freundii. O isolado P. rettgeri apresentou maior taxa de perda plasmidial e a an��lise comparativa da sequ��ncia nucleot��dica do plasm��deo indicou que a presen��a da IS5 pode estar relacionada com a diminui����o da persist��ncia plasmidial. Diferen��as na persist��ncia plasmidial, quando tratados com maprotilina, entre E. hormaechei \"subsp. steigerwaltii\" e E. hormaechei \"subsp. oharae\" sugerem que E. hormaechei \"subsp. oharae\" pode ser um poss��vel disseminador de plasm��deos albergando blaNDM-1, devido a processos de adapta����o co-evolutivos.

Desempenho de bezerros leiteiros recebendo probi��tico contendo Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis

O objetivo deste estudo foi avaliar a suplementa����o de um probi��tico composto por cepas de Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis, fornecidos via suced��neo l��cteo, no que se refere ao escore e pH fecal, contagem de microrganismos intestinais, par��metros sangu��neos e desempenho geral dos animais. Foram utilizados 24 animais da ra��a Holand��s que receberam 4L/dia de suced��neo comercial (15PB:15EE), al��m de livre acesso a ��gua e concentrado inicial. O desaleitamento ocorreu na 8�� semana de vida. Os animais foram distribu��dos em delineamento de blocos casualizados, em dois tratamentos: 1) Controle - sem a suplementa����o de probi��tico; 2) Suplementa����o de 2g/d (1,6 x 109 UFC) de Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis via suced��neo l��cteo. Semanalmente foram realizadas pesagens e aferi����es de medidas corporais (altura de cernelha, per��metro tor��cico e largura de garupa); e colheitas de sangue para determina����o de glicose, prote��na total, ureia e albumina, al��m de determina����o de hemat��crito. Foram colhidas amostras semanalmente para contagem de bact��rias ��cido l��ticas e enterobactérias e determina����o de pH fecal. O monitoramento do consumo de concentrado e do escore fecal foi realizado diariamente. O peso corporal, o ganho de peso m��dio di��rio e as medidas corporais n��o foram alteradas (P>0,05) pela suplementa����o do probi��tico contendo Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis; muito embora tenham apresentado efeito significativo de idade dos animais (P<0,001). O escore fecal, pH fecal e consumo de concentrado di��rio tamb��m n��o foram afetados pela suplementa����o com probi��tico. No entanto, o consumo de concentrado e o pH fecal sofreram influ��ncia da idade em resposta ao crescimento natural dos bezerros. A contagem de bact��rias ��cido l��ticas foi maior que n��mero de enterobactérias durante todo o per��odo (P<0,05). Apenas as enterobactérias sofreram efeito da idade (P<0,05), enquanto as bact��rias ��cido l��ticas permaneceram variando, por��m dentro de um padr��o constante. Os par��metros sangu��neos tamb��m n��o foram afetados pela suplementa����o com probi��tico (P>0,05) mas todos, com a exce����o da albumina, tiveram influ��ncia da idade (P<0,001). A suplementa����o com o probi��tico contendo Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis via suced��neo n��o apresentou benef��cios no desempenho ou no metabolismo de bezerros leiteiros, bem como n��o reduziu a ocorr��ncia de casos de diarreia.

Estado sanit��rio do jacar��-de-papo-amarelo (Caiman latirostris) em paisagens antropizadas no Estado de S��o Paulo

O jacar��-de-papo (Caiman latirostris) �� considerado um crocodiliano de m��dio porte que apresenta uma ampla distribui����o latitudinal na Am��rica do Sul. Possivelmente a esp��cie possui a situa����o mais complexa entre os crocodilianos brasileiros quanto ao aspecto da conserva����o, basicamente porque suas popula����es encontram-se fragmentadas em grande parte de sua ��rea de distribui����o original e por utilizarem ��reas com fortes atividades antr��picas. Embora a esp��cie possua aparentemente um processo adaptativo frente a estas press��es, um aspecto fisiol��gico pode ainda sofrer r��pida altera����o quando submetido a elas: o estado sanit��rio. Desta maneira, este estudo objetivou determinar o estado sanit��rio do maior predador aqu��tico, utilizando duas ��reas distintas no Estado de S��o Paulo, atrav��s da determina����o dos perfis hematol��gicos e bioqu��micos do sangue, al��m da caracteriza����o da microbiota oral, servindo de modelo �� conserva����o da esp��cie em ambientes alterados. No primeiro cap��tulo foram determinados o perfil hematol��gico e bioqu��mico do sangue utilizando-se 29 indiv��duos (19 machos e 10 f��meas) capturados em Angatuba e 11 indiv��duos (2 machos, 4 f��meas e 5 filhotes) capturados em Cubat��o. Diferen��as estat��sticas significativas foram encontradas nos valores de creatinina na compara����o entre f��meas de ambas as ��reas de estudo (p = 0,033) e nos valores de alanina aminotransferase (p = 0,003), hem��cias (p = 0,034), hemoglobina (p = 0,049) e volume corpuscular m��dio (p = 0,027) quando da compara����o entre sexos. No segundo cap��tulo determinou-se a microbiota oral destes animais atrav��s do isolamento, identifica����o e caracteriza����o bacteriana, em conjunto com o teste de perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos. Foram determinados 14 diferentes tipos de bact��rias na ��rea de Angatuba, sendo uma classificada como baciliforme aer��bio Gram-positivo, uma como bacilo Gram-negativo e 12 classificadas como Enterobactérias Gram-negativas. Na ��rea de Cubat��o foram isolados cinco tipos de bact��rias, sendo quatro classificadas como Enterobactérias Gram-negativas e uma como baciliforme aer��bio Gram-positivo. Considerando que o uso de antimicrobianos �� um processo prim��rio no tratamento de animais e pessoas, principalmente nos casos que envolvam infec����es provocadas pela intera����o homem x animais, para ambas as ��reas de estudo, as quinolonas Enrofloxacina e Norfloxacina, al��m do aminoglicos��deo Gentamicina, foram os antimicrobianos que apresentaram os menores ��ndices de resist��ncia frente aos isolados testados.

Estudo comparativo da microflora bacteriana de doentes portadores de pr��teses totais acr��licas mucosuportadas e implantosuportadas

Disserta����o para obten����o do grau de Mestre no Instituto Superior de Ci��ncias da Sa��de Egas Moniz

Infec����es por enterobacteriaceae resistente aos carbapen��micos em hospital de ensino: epidemiologia e caracteriza����o molecular

Introduction: The production of KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase) has become an important mechanism of carbapenem-resistance among Enterobacteriaceae strains. In Brazil, KPC is already widespread and its incidence has increased significantly, reducing treatment options. The ���perfect storm��� combination of the absence of new drug developmentand the emergence of multidrug-resistant strains resulted in the need for the use of older drugs, with greater toxicity, such as polymyxins. Aims: To determine the occurrence of carbapenemase-producing strains in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae isolated from patients with nosocomial infection/colonization during September/2014 to August/2015, to determine the risk factors associated with 30-day- mortality and the impact of inappropriate therapy. Materials and Methods: We performed a case control study to assess the risk factors (comorbidities, invasive procedures and inappropriate antimicrobial therapy) associated with 30-day-mortality, considering the first episode of infection in 111 patients. The resistance genes blaKPC, blaIMP, blaVIM and blaNDM-1 were detected by polymerase chain reaction technique. Molecular typing of the strains involved in the outbreak was performed by pulsed field gel electrophoresis technique. The polymyxin resistance was confirmed by the microdilution broth method. Results: 188 episodes of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae infections/colonizations were detected; of these, 122 strains were recovered from the hospital laboratory. The presence of blaKPC gene were confirmed in the majority (74.59%) of these isolates. It was not found the presence of blaIMP , blaVIM and blaNDM-1 genes. K. pneumoniae was the most frequent microorganism (77,13%), primarily responsible for urinary tract infections (21,38%) and infections from patients of the Intensive Care Unit (ICU) (61,38%). Multivariate statistical analysis showed as predictors independently associated with mortality: dialysis and bloodstream infection. The Kaplan-Meier curve showed a lower probability of survival in the group of patients receiving antibiotic therapy inappropriately. Antimicrobial use in adult ICU varied during the study period, but positive correlation between increased incidence of strains and the consumption was not observed. In May and July 2015, the occurrence rates of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae KPC-producing per 1000 patient-days were higher than the control limit established, confirming two outbreaks, the first caused by colistin-susceptible KPC-producing K. pneumoniae isolates, with a polyclonal profile and the second by a dominant clone of colistin-resistant (��� 32 ��g/mL) KPC-producing K. pneumoniae. The cross transmission between patients became clear by the temporal and spatial relationships observed in the second outbreak, since some patients occupied the same bed, showing problems in hand hygiene adherence among healthcare workers and inadequate terminal disinfection of environment. The outbreak was contained when the ICU was closed to new admissions. Conclusions: The study showed an endemicity of K. pneumoniae KPC-producing in adult ICU, progressing to an epidemic monoclonal expansion, resulted by a very high antibiotic consumption of carbapenems and polymyxins and facilitated by failures in control measures the unit.

Avalia����o da Capacidade Antioxidante e da Estabilidade Ap��s Embalamento a V��cuo de Hamb��rgueres de Pata-roxa (Scyliorhinus canicula).

Toneladas de pescado s��o desperdi��adas diariamente aquando do processamento do peixe e o hamb��rguer de pata-roxa foi desenvolvido para reaproveitar esse pescado subvalorizado e para ser uma fonte nutricional rica em antioxidantes. No presente trabalho, pretendeu-se comprovar o potencial antioxidante antes e ap��s o tratamento t��rmico do hamb��rguer de pata-roxa, e o potencial citot��xico e antiproliferativo sobre um modelo celular do cancro da mama (MCF-7). Foi tamb��m observada a estabilidade do hamb��rguer de pata-roxa embalado a v��cuo e refrigerado. A extra����o dos compostos fitoqu��micos foi realizada com solventes de polaridade distinta (��gua, metanol e diclorometano) e com diferentes dura����es do processo (12h e 24h). O tratamento t��rmico aplicado foi vinte minutos a 180��C. O potencial antioxidante foi avaliado pela capacidade de redu����o do radical livre 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH) e pela capacidade de redu����o de radicais de oxig��nio (ORAC), e atrav��s da quantifica����o total de polifen��is (QTP) pelo m��todo de Folin-Ciocalteu (FC). O potencial citot��xico e antiproliferativo foi avaliado na linha celular MCF-7, cujos resultados foram revelados por ensaios espectrofotom��tricos (m��todo do brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetraz��lio (MTT)) e fluorim��tricos (m��todo de acetoxi-metil ��ster de calce��na (calce��na-AM)). A estabilidade do hamb��rguer de pataroxa em v��cuo e refrigerado foi avaliada atrav��s do estudo microbiol��gico com metodologias de refer��ncia (contagens de ���totais��� e produtores de sulfureto de hidrog��nio (H2S) aer��bios e anaer��bios, esporos de Clostridium sulfitos-redutores, enterobactérias, Escherichia coli e pesquisa de Salmonella spp.), da determina����o do ��ndice de ��cido tiobarbit��rico (TBA) e da avalia����o da cor do hamb��rguer pelo sistema CIE-L*a*b*. Os ensaios de DPPH e ORAC comprovaram a atividade antioxidante do extrato de hamb��rguer de pata-roxa (metanol, 12h) com 79,5% de redu����o do DPPH e 8603,01��mol ET/100g para amostras sem tratamento t��rmico, e 87,4% de redu����o do DPPH e 2567,27��mol ET/100g para amostras com tratamento t��rmico. Quanto ao conte��do fen��lico, os extratos (metanol, 12h) revelaram 17,13mg EAG/100g do hamb��rguer cru e 31,81mg EAG/100g do hamb��rguer cozinhado. A extra����o de 24 horas n��o aumentou a quantidade de compostos fitoqu��micos presentes no extrato. O hamb��rguer apenas revelou ainda um potencial citot��xico in vitro relevante na linha celular MCF-7 (1mg/mL, 24h).Apesar do abuso observado na temperatura de armazenamento em refrigera����o (temperatura m��dia de 10,3��C), o hamb��rguer de pata-roxa cru, quando submetido ao embalamento a v��cuo, apresentou um aumento no per��odo de vida ��til de prateleira de 4 dias relativamente �� pata-roxa. Foi detetada a presen��a de esporos de Clostridium sulfito-redutores e 1,0x101ufc E. coli por 1g de hamb��rguer de pata-roxa. N��o foi detetada a presen��a de Salmonella spp. O ��ndice de TBA manteve-se est��vel, mas o hamb��rguer de pata-roxa sofreu uma perda na vivacidade (Cab) e na tonalidade (hab) da cor ao fim de 6 dias em refrigera����o. �� necess��rio continuar o estudo para melhorar o novo produto alimentar funcional, mas o presente trabalho permitiu concluir que o hamb��rguer de pata-roxa re��ne as condi����es para ter um elevado potencial antioxidante, apresentar maior estabilidade em armazenamento e, em simult��neo, constituir uma solu����o para o desperd��cio de pescado.

Atividade antimicrobiana de ��cidos org��nicos e compostos clorados sobre micro-organismos patog��nicos em carne de frango

The current scenario of the Brazilian poultry production is defined by high productivity motivated by exports to markets with elevated levels of sanitary requirement. The work aimed to evaluate the efficacy of chlorinated compounds (chlorine dioxide, dichloro and trichloro) and organic acids (citric, lactic and peracetic acids) in reducing the contamination of poultry by Salmonella spp., mesophiles and enterobacteriaceae. Were isolated 102 strains Salmonella spp. poultry carcass from June to September 2014. Strains were identified by PCR. Was determined the minimum inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial compounds for the standard strains of S. Typhimurium, S. Enteritidis and S. Heidelberg. MIC of lactic acid and peracetic acid (20 to 10 g/L) was applied in strains of Salmonella spp. isolated from the slaughter. The MIC of the compounds lactic acid and sodium dichloro was applied in contaminated chiller water with Salmonella (109 CFU/mL) and this was determined Salmonella count in water. Thighs and drumsticks poultry were contaminated with S. Heidelberg (109 UFC/mL) and were applied dichloro (60 mg/L), lactic acid (20 g/L) and sodium hypochlorite (5,0 and 0,5 mg/L) compounds. In the identification by PCR, 93,1% of the strains were identified as Salmonella. For sodium dichloro the MIC was 60 mg/L for 15 minutes to S. Heidelberg and 60 mg/L for 20 minutes for S. Enteritidis. Lactic acid presented MIC of the 5 g/L for 10 minutes to S. Enteritidis 10 g/L for 15 minutes to S. Typhimurium and 20 g/L for 20 minutes to S. Heidelberg. For peracetic acid, MICs were 10 g/L for 10 minutes to S. Typhimurium and S. Heidelberg and 10 g/L for 20 minutes to S. Enteritidis. To citric acid, MICs were 10 g/L for 10 minutes to S. Typhimurium and S. Enteritidis and 25 g/L for 20 minutes to S. Heidelberg. In the isolated Salmonella strains, lactic acid inhibited 97,89% of the strains and peracetic inhibited 100% of the strains. In contaminated chiller water, the compounds reduced the growth of standards strains. When applied to contaminated poultry meat, there was a reduction of Salmonella spp. 1,06 log10 CFU/g relative to the positive control with the use of sodium hypochlorite at 5,0 mg/L, 0,97 log10 CFU/g with dichloro and 0,56 log10 CFU/g with sodium hypochlorite 0,5 mg/L. For mesophiles reduction observed was 0,90 log10 CFU/g relative to the positive control with the use of sodium hypochlorite at 5,0 mg/L, 0,83 log10 CFU/g with dichloro and there isn��t reduction with hypochlorite with sodium 0,5 mg/L. For enterobacteriaceae reduction was 1,0 log10 CFU/g relative to the positive control with the use of sodium hypochlorite at 5,0 mg/L, 0,79 log10 CFU/g with dichloro and 0,22 log10 CFU/g with sodium hypochlorite at 0,5 mg/L. Lactic acid inhibit growth of the microorganisms tested. The data supports the discussions to regulate the use of the technology coadjuvants in the slaughter of poultry.

Influ��ncia das etapas do processo de abate de su��nos na preval��ncia de pat��genos e n��veis de microrganismos indicadores de qualidade e higiene

The pig slaughter process involve different steps that can influence the microbiological quality of carcasses. At this, the understanding of the slaughter process on the microbiological aspects is necessary for the implementation and evaluation of critical control points. The microbiological control of the slaughter process should involve the evaluation of pathogens prevalence and levels of quality and hygiene indicator microorganisms. This study aimed at investigating the influence of steps slaughter process on the microbiological levels of pig carcasses, and evaluate if there is correlation between pathogens (Salmonella spp. and Listeria monocytogenes) and indicators (aerobic mesophilic counts, total coliforms, Escherichia coli and Enterobacteriaceae) microorganisms. A high Salmonella soroprevalence in pigs were founded before the slaughter (57.49 %). While the Salmonella prevalence in carcasses at the initial stage of the slaughter was 26.67 % and in the final stage 1.11 %, L. monocytogenes was detected only in the final washing and cooling steps, with a prevalence of 21.11 and 8.89 %, respectively. The aerobic mesophilic counts, Enterobacteriaceae, total coliforms and E. coli levels in initial steps of slaughter process were 4.25 �� 0.37; 1.25 �� 0.38; 1.10 �� 0.35 and 0.86 �� 0.36, respectively. At the end of slaughter process the results were lower (ranging from 0.16 at 2.70 log CFU/cm2). The step that most reduced microbiological levels was the scalding. The dehairing was a critical step that led to a significant increase of microorganisms levels in the process (p < 0.05). The evisceration not proved to be a critical step on the increase of microbial levels, differently of the final washing, which showed significant increases (p < 0.05) over the levels of aerobic counts, total coliforms, E. coli and enterobacterias (0.30; 0.36; 0.27 and 0.42 log respectively) and Salmonella spp. and L. monocytogenes. The chilling contributes significantly to the reduction of microbiological levels of carcasses, bringing them to levels below the all process stages, with the exception of scalding. No correlation between the hygiene indicator microorganisms used and presence of Salmonella spp. and L. monocytogenes were obtained (p < 0.05). The results show that steps in the process are critical to the sanitary profile, which implies the need to implement actions in the process to reducing the microbiological levels.

Sistemas de vigil��ncia das resist��ncias aos antibi��ticos

Disserta����o de Mestrado, Ci��ncias Farmac��uticas, Faculdade de Ci��ncias e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2015