Caracterização por espectrometria de massas e investigação das atividades anti-inflamatória e gastroprotetora do extrato etanólico e diterpenos clerodânicos de folhas de Casearia sylvestris Swartz

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Documentação química de espécies do gênero Casearia (Salicaceae) de importância ecológica, econômica e medicinal

The Casearia genus (Salicaceae) is well known because of the medicinal use of its species. Among them, a noteworthy one is the C. sylvestris specie because it already has studies concerning its antiproliferative and/or cytotoxic activity in tumor cells. Furthermore, this specie is popularly used against snake bites, in gastric ulcers treatment and as anti-inflammatory. As well as this, there are other species from this same genus which have been poorly studied, such as the following species: C. decandra, C. grandiflora, C. javitensis, C. arborea, C. lasiophylla and C. ulmifolia. However, several biological activities have been reported for them. In this context, the aim of this project, besides of contributing to the Casearia genus studies, is to study those six species through the analysis and documentation of their leaves' chemical composition (aqueous, ethanolic and hexanic extracts), using analytical separation techniques coupled with spectroscopic techniques, such as UHPLC-DAD, GC-MS and NMR 1H, which will assist the identification of new secondary metabolites in this genus. Moreover, another goal of this present work is aiming the bioprospection of substances with medicinal and economical potential and finally promote the systematic study of some biological activities, such as antimicrobial and cytotoxicity bioassays. A wide variety of metabolites was identified in those three types of extracts, being most of them detected for the first time in Casearia genus, highlighting C. lasiophylla and C. decandra for featuring antimicrobial activity against Staphylococcus aureus.

Incidenza della qualità del latte nella produzione lattiero-casearia di Squacquerone di Romagna DOP

San Patrignano non rappresenta solo una comunità di recupero, ma anche un'azienda agricola che, al suo interno, vede realizzata l'intera filiera di produzione e lavorazione del latte vaccino. Uno dei prodotti di spicco, di grande importanza per l'economia locale, è certamente lo Squacquerone di Romagna Dop, un formaggio fresco, caratterizzato da particolari parametri chimico-fisici ed organolettici strettamente correlati al territorio d'origine. La ricerca, svoltasi in un periodo di dodici mesi, ha permesso di raccogliere un cospicuo quantitativo di dati, con l'obiettivo di valutare la qualità igienica, la sicurezza e la relazione con la materia prima utilizzata per la caseificazione. Le analisi sono state svolte secondo uno specifico piano di campionamento mensile, che prevedeva sia la determinazione della qualità microbiologica del latte utilizzato, prima e dopo la fase preliminare di pastorizzazione, sia la determinazione dei principali agenti degradativi e patogeni nel prodotto finito. Si sono volute evidenziare eventuali differenze in rapporto al periodo di raccolta del latte ed eventuali ripercussioni sulla qualità finale dello Squacquerone DOP. I risultati testimoniano l'ottima qualità del latte ottenuto dalle bovine presso la stalla San Patrignano, anche in relazione alla stagionalità. A conferma di ciò, la sporadica presenza di batteri degradativi, non in grado di influenzare in modo significativo la shelf life del prodotto Squacquerone, e l'assenza continuativa di batteri patogeni. Inoltre, i dati raccolti, in un'ottica di controllo qualità dell’azienda agricola, supportano l'identificazione dei punti critici del processo di produzione.

Teste de viabilidade de armazenamento para sementes de guaçatunga (Casearia decandra Jacq.).

O objetivo deste trabalho foi determinar o tempo que as sementes podem ser armazenadas sem que ocorra prejuízo à manutenção da sua germinabilidade.

Evaluación de la capacidad de rebrotes de dos especies arbóreas en el bosque tropical seco en Nandarola, Pacifico Sur

El estudio tuvo como objetivo evaluar el comportamiento de la sobrevivencia en los árboles con los cuales se estableció el estudio, conocer la capacidad de rebrotes y el incremento en diámetro y altura de los mismos en las especies: Lonchocarpus minimiflorus y Casearia corymbosa después de la aplicación de tres tratamientos silviculturales. La metodología utilizada consistió en seleccionar 25 árboles por especie de forma aleatoria dentro del bosque, los cuales se podaron a una altura de 1.30 mts, dividiéndose posteriormente estos en tres grupos de 8, 9 y 8 individuos por grupo. Después de que los tocones rebrotaron se procedió a la aplicación de los tratamientos: al primer grupo se les dejó un eje/árbol, al segundo grupo 2 eje/ árbol y al tercer grupo 3 eje/árbol. Los resultados demuestran que la especie Lonchocarpus minimiflorus obtuvo el mayor porcentaje de sobrevivencia al final del estudio (84%), en comparación con la especie Casearia corymbosa (44%), así como también en la producción de rebrotes con 18.09 ejes por árbol en el primer registro y 9.90 en el segundo registro mientras que Casearia corymbosa obtuvo 8.13 y 8.82 ejes respectivamente. En cuanto a las variables diámetro y altura, los mayores resultados los alcanzó la especie Casearia corymbosa en el primer tratamiento, mientras que Lonchocarpus minimiflorus alcanzó los mayores diámetros en el tratamiento 3 y las mayores alturas en el tratamiento 2. Es importante señalar que en esta última especie, la relación de estas dos variables no es directa; esto quiere decir que en el tratamiento donde se presentó el mayor incremento diamétrico, también se presentó el menor incremento longitudinal.

Vegetação e arquitetura das espécies de restinga associadas à ocorrência de Formicivora littoralis (Aves,Thamnophilidae)

O presente estudo teve como objetivo central conhecer a composição florística, a estrutura e a arquitetura das espécies da formação arbustiva fechada pós-praia e investigar possíveis associações com Formicivora littoralis, considerando tática de forrageamento, construção de ninhos e abundância da ave. F. littoralis é endêmica de restingas, e está ameaçada de extinção devido a perda acelerada de habitat. Entretanto, pouco se sabe sobre a vegetação em que ela ocorre, principalmente sobre as áreas de maior abundância da ave localizadas na formação Arbustiva Fechada Pós-praia (AFP) da Restinga da Massambaba, as quais estão inseridas em um Centro de Diversidade Vegetal (CDV) na Região de Cabo Frio. Diante disto, este estudo foi realizado em dois trechos desta formação na Restinga da Massambaba, nos municípios de Araruama e Arraial do Cabo, RJ, Brasil. Foram efetuadas 60 excursões a campo, com coletas aleatórias realizadas ao longo de toda a formação, geração de 20 parcelas de 2x50 m (0,2ha) perpendiculares ao mar, incluindo na amostragem indivíduos com DAP e DAS ≥2,5, estes, foram ainda categorizados em modelos de arquitetura de ramificação considerando número de ramos em dois patamares de altura (DAP e DAS). O levantamento florístico resultou em 327 coletas de 160 espécies, sendo pelo menos 12 espécies vegetais sob algum estado de ameaça, inclusive redescoberta uma Salicaceae (Casearia sessiliflora). Orchidaceae, Leguminosae e Myrtaceae foram as famílias mais ricas. Foram acrescentados 75% mais espécies na lista preliminar da AFP na Massambaba, além de 14 novos registros para o CDV de Cabo Frio. Na estrutura e arquitetura foram analisados 906 indivíduos de 58 espécies. Sendo os maiores valores de importância de Pilosocereus arrabidae (42,30) e Chrysophyllum lucentifolium (23,45). A diversidade de Shannon foi de 3,46 e equabilidade de 0,85. A arquitetura da maior parte dos indivíduos foi complexa, 58% de indivíduos com múltiplas ramificações, e as espécies apresentando variados padrões de ramificação. A densidade populacional de F. littoralis na AFP foi elevada, sendo estimada em 172 ind/km2. A arquitetura da AFP tem influência na ecologia da ave, pois ela foi generalista quanto à espécie utilizada como suporte na construção de ninhos e também para as táticas de forrageamento, mas houve seleção de ramos finos que formavam na horizontal ângulos de até 90 de abertura para construir ninhos. Ramos finos e mais horizontais também foram utilizados com frequência para as táticas de forrageamento. A abundância de F. littoralis esteve correlacionada positivamente à diversidade vegetal e negativamente à altura da vegetação, características marcantes nesta formação. Além disso, elevada taxa de vegetais com síndrome de dispersão zoocórica indica a importância desta formação na oferta de recursos alimentícios para a fauna e atração de pequenos artrópodes, os quais fazem parte da dieta de F. littoralis.

MONITORAMENTO da fenologia vegetativa e reprodutiva de espécies nativas dos biomas brasileiros: guaçatunga.

2010

Caracterização de unidades de manejo (biótopos) na futura unidade de conservação ambiental da UFRGS, Porto Alegre, RS : uma contribuição com bases na ecologia de paisagem

Para a caracterização dos biótopos naturais da futura Unidade de Conservação (UC) do Morro Santana (Porto Alegre, RS) foi realizado o macrozoneamento da área de estudo utilizando-se a cobertura com fitofisionomias campestres e florestais nativas e as variáveis do meio físico: declividade, altitude e exposição solar. Em quatro macrozonas campestres e em nove florestais, foram realizados estudos fitossociológicos e estatísticos para definir as unidades e sub-unidades vegetais presentes e a relação destas com a variável distância aos cursos d’água, caracterizando assim os onze biótopos naturais da área de estudo. Os tipos naturais de uso e cobertura do solo ocupam 51,6% da área do morro e as categorias de uso antrópico cobrem 48,4%. As formações de campo nativo do Morro Santana foram caracterizadas a partir da estrutura da vegetação dominante fisionomicamente, por duas unidades e quatro sub-unidades de vegetação, sendo que a unidade Aristida filifolia - Axonopus sp1 obteve a maior freqüência e densidade, não ocorrendo em apenas uma macrozona. A unidade de vegetação Guapira opposita - Casearia sylvestris ocorreu em todas as macrozonas arbóreas amostradas e caracteriza a estrutura da vegetação dominante fisionomicamente, nestas formações O método seguiu o cruzamento de informações espacializadas utilizando o sistema de informação geográfica (SIG) Idrisi, versão 14.02 (Kilimanjaro). Uma nova análise conferiu valores ecológicos às áreas com cobertura campestre e florestal nativas do morro a partir dos parâmetros relativos à: climacidade das espécies presentes nas unidades e sub-unidades de vegetação, naturalidade das comunidades vegetais presentes e índices da configuração estrutural da paisagem (tamanho e forma das manchas e distância de áreas urbanas). Foram então somados os valores ecológicos de cada parâmetro e estabelecidas as quatro zonas de caracterização ecológica, que são: núcleo, extensão do núcleo, tamponamento e ligação, em ordem decrescente de valor ecológico. Os biótopos de formações campestres encontram-se com melhor grau de conservação em relação aos florestais, por comporem a maior parte da zona núcleo. As zonas de caracterização ecológica servem como importante ferramenta para a realização do plano de manejo da unidade de conservação.

Evaluation of pH and Calcium Ion Release of Calcium Hydroxide Pastes Containing Different Substances

Introduction: The objective of this study was to evaluate the pH and calcium ion release of calcium hydroxide pastes associated with different substances. Methods: Forty acrylic teeth with simulated root canals were divided into 4 groups according to the substance associated to the calcium hydroxide paste: chlorhexidine (CHX) in 2 formulations (1% solution and 2% gel), Casearia sylvestris Sw extract, and propylene glycol (control). The teeth with pastes and sealed coronal accesses were immersed in 10 mL deionized water. After 10 minutes, 24 hours, 48 hours, and 7, 15, and 30 days, the teeth were removed to another container, and the liquid was analyzed. Calcium ion release was measured by atomic absorption spectrophotometry, and pH readings were made with a pH meter. Data were analyzed statistically by analysis of variance and Tukey test (alpha = 0.05). Results: Calcium analysis revealed significant differences (P < .05) for 1% CHX solution and 2% CHX gel at 10 minutes. After 24 hours, 2% CHX gel x Control and 2% CHX gel x 1% CHX solution differed significantly (P < .05). After 48 hours, there were significant differences (P < .05) for 2% CHX gel x Control and Extract x Control. No differences (P > .05) were observed among groups in the other periods. Regarding the pH, there were significant differences (P < .05) for 2% CHX gel x Control and 2% CHX gel x 1% CHX solution after 48 hours and for 2% CHX gel x Control after 15 days. In the other periods, no differences (P > .05) were observed among groups. Conclusions: All pastes behaved similarly in terms of pH and calcium ion release in the studied periods. (J Endod 2009;35:1274-1277)

Isolation and characterization of microsatellite markers for Cascaria sylvestris Sw. (Salicaceae), a neotropical medicinal tree

Casearia sylvestris Sw. is a widespread neotropical tree utilized in popular medicine. Recent research ranked Casearia as one of the most promising genus in the search of drugs against cancer. Despite its wide distribution and pharmacological importance, no microsatellite markers have yet been developed for this genus. In this study, we provide 10 polymorphic microsatellite loci specifically designed for C. sylvestris, used to analyse 90 individuals distributed in two populations from São Paulo state, Brazil. on average, 12.3 alleles per locus were identified, showing the ability of the markers to detect microsatellite polymorphism in this species.

Casearin X exhibits cytotoxic effects in leukemia cells triggered by apoptosis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Protease inhibition activity of extracts from Salicaceae species from Brazilian Cerrado and Atlantic Rain Forest and of an enriched fraction of clerodane diterpenes (casearins)

Considerando o uso popular de Casearia sylvestris Sw., Salicaceae, para o tratamento de problemas gástricos e resultados pré-clínicos que mostraram potencial atividade anti-ulcerogênica, foi realizado um screening farmacológico para avaliar a atividade biológica de outras espécies de Salicaceae. Para isso, foi utilizado um ensaio de inibição de proteases como um modelo farmacológico molecular para screening de extratos com atividade anti-ulcerogênica. Os extratos etanólico e aquoso dos galhos e folhas de C. gossypiosperma, C. decandra e C. rupestris mostraram inibição da atividade da pepsina em aproximadamente 50% com a concentração de 1 μg/mL. Curiosamente, C. obliquoa e Flacourtia ramontchi não apresentaram atividade sobre a pepsina, mas seus extratos mais apolares mostraram atividade inibitória sobre a subtilisina. A fração enriquecida de diterpenos clerodânicos mostrou atividade inibitória (42,75%) sobre a pepsina com a concentração de 1 μg/mL, mas não sobre a subtilisina (23,76%). Os resultados obtidos com os extratos e folhas das espécies testadas mostraram um padrão de atividade diferente sobre os dois tipos de proteases, a pepsina e a subtilisina, as quais estão relacionadas com diferentes tipos de atividades biológicas. Ainda mais, os resultados com a fração enriquecida de diterpenos clerodânicos sugerem que estas substâncias podem estar relacionadas com a atividade do extrato bruto de C. sylvestris.

Antimicrobial activity of essential oils from plants used in Brazilian popular medicine

Essential oils from, Salvia officinalis L. (SO), Mentha sylvestris L. (MS), Casearia sylvestris Sw. (CS), Mentha piperita L. (MP), Ocimum micrantum Willd. (OM) and Mentha arvensis L. (MA), plants used in Brazilian popular medicine were extracted using method I, as described in the Brazilian Pharmacopoeia, in order to obtain the phytochemical profile and to evaluate their antimicrobial activity against the following microorganisms: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Escherichia coli, Serratia marcescens, Candida albicans and Aspergilus oryzae. Test was made by means of the disk-plaque diffusion test in liquid medium using 1% essential oil. In the disk-plaque diffusion test, all the essential oils exhibited activity against B. subtilis, but OM showed the greatest inhibition zone and was the only one to show activity against S. aureus. Samples of SO, MS, MP, OM and MA were active against M. luteus, E. coli and S. marcescens, while A. oryzae was sensitive to MS, MP, OM and MA. No sample, however, was active against C. albicans. In the liquid medium test, significant results were observed for OM and MA, which inhibited the growth of all microorganisms for 24 hours, and OM continued active against E. coli and A. oryzae until the last reading.

Search for Antifungal and Anticancer Compounds from Native Plant Species of Cerrado and Atlantic Forest

Bioactivity-guided fractionation of several bioactive extracts obtained from Cerrado and Atlantic Forest plant species led to the isolation of potent DNA-damaging piperidine 1-5 and guanidine alkaloids 6-9 from Cassia leptophylla and Pterogyne nitens respectively, two common Leguminosae from Atlantic Forest. By means of biotechnological approach on Maytenus aquifolium, a species from Cerrado, moderate DNA-damaging sesquiterpene pyridine alkaloid 10-11 was isolated. Bioassay-guided fractionation on Casearia sylvestris, a medicinal plant species found in Cerrado and Atlantic Forest, led to the isolation of clerodane diterpenes 12-13 which showed effect on DNA. In addition, we have reported several interesting potent antifungal iridoids: 1β-hydroxy-dihydrocornin (14), 1α-hydroxy-dihydrocornin (15), α-gardiol (16), β-gardiol (17), plumericin (18), isoplumericin (19), 11-O-trans-caffeoylteucrein (20); ester derivative: 2-methyl-4-hydroxy-butyl-caffeoate (21), amide N-[7-(3'.4'-methylenedioxyphenyl)-2Z, 4Z-heptadienoyl] pyrrolidine (22) and triterpene viburgenin (23).