Mass Spectrometry-Based Systems Approach for Identification of Inhibitors of Plasmodium falciparum Fatty Acid Synthase{triangledown}

The emergence of strains of Plasmodium falciparum resistant to the commonly used antimalarials warrants the development of new antimalarial agents. The discovery of type II fatty acid synthase (FAS) in Plasmodium distinct from the FAS in its human host (type I FAS) opened up new avenues for the development of novel antimalarials. The process of fatty acid synthesis takes place by iterative elongation of butyryl-acyl carrier protein (butyryl-ACP) by two carbon units, with the successive action of four enzymes constituting the elongation module of FAS until the desired acyl length is obtained. The study of the fatty acid synthesis machinery of the parasite inside the red blood cell culture has always been a challenging task. Here, we report the in vitro reconstitution of the elongation module of the FAS of malaria parasite involving all four enzymes, FabB/F (β-ketoacyl-ACP synthase), FabG (β-ketoacyl-ACP reductase), FabZ (β-ketoacyl-ACP dehydratase), and FabI (enoyl-ACP reductase), and its analysis by matrix-assisted laser desorption-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). That this in vitro systems approach completely mimics the in vivo machinery is confirmed by the distribution of acyl products. Using known inhibitors of the enzymes of the elongation module, cerulenin, triclosan, NAS-21/91, and (–)-catechin gallate, we demonstrate that accumulation of intermediates resulting from the inhibition of any of the enzymes can be unambiguously followed by MALDI-TOF MS. Thus, this work not only offers a powerful tool for easier and faster throughput screening of inhibitors but also allows for the study of the biochemical properties of the FAS pathway of the malaria parasite.

Differential modulation of intracellular survival of cytosolic and vacuolar pathogens by curcumin

Curcumin, a principal component of turmeric, acts as an immunomodulator regulating the host defenses in response to a diseased condition. The role of curcumin in controlling certain infectious diseases is highly controversial. It is known to alleviate symptoms of Helicobacter pylori infection and exacerbate that of Leishmania infection. We have evaluated the role of curcumin in modulating the fate of various intracellular bacterial pathogens. We show that pretreatment of macrophages with curcumin attenuates the infections caused by Shigella flexneri (clinical isolates) and Listeria monocytogenes and aggravates those caused by Salmonella enterica serovar Typhi CT18 (a clinical isolate), Salmonella enterica serovar Typhimurium, Staphylococcus aureus, and Yersinia enterocolitica. Thus, the antimicrobial nature of curcumin is not a general phenomenon. It modulated the intracellular survival of cytosolic (S. flexneri and L. monocytogenes) and vacuolar (Salmonella spp., Y. enterocolitica, and S. aureus) bacteria in distinct ways. Through colocalization experiments, we demonstrated that curcumin prevented the active phagosomal escape of cytosolic pathogens and enhanced the active inhibition of lysosomal fusion by vacuolar pathogens. A chloroquine resistance assay confirmed that curcumin retarded the escape of the cytosolic pathogens, thus reducing their inter- and intracellular spread. We have demonstrated that the membrane-stabilizing activity of curcumin is crucial for its differential effect on the virulence of the bacteria.

Interaction of Silver Nanoparticles with Serum Proteins Affects Their Antimicrobial Activity In Vivo

The emergence of multidrug-resistant bacteria is a global threat for human society. There exist recorded data that silver was used as an antimicrobial agent by the ancient Greeks and Romans during the 8th century. Silver nanoparticles (AgNPs) are of potential interest because of their effective antibacterial and antiviral activities, with minimal cytotoxic effects on the cells. However, very few reports have shown the usage of AgNPs for antibacterial therapy in vivo. In this study, we deciphered the importance of the chosen methods for synthesis and capping of AgNPs for their improved activity in vivo. The interaction of AgNPs with serum albumin has a significant effect on their antibacterial activity. It was observed that uncapped AgNPs exhibited no antibacterial activity in the presence of serum proteins, due to the interaction with bovine serum albumin (BSA), which was confirmed by UV-Vis spectroscopy. However, capped AgNPs with citrate or poly(vinylpyrrolidone)] exhibited antibacterial properties due to minimized interactions with serum proteins. The damage in the bacterial membrane was assessed by flow cytometry, which also showed that only capped AgNPs exhibited antibacterial properties, even in the presence of BSA. In order to understand the in vivo relevance of the antibacterial activities of different AgNPs, a murine salmonellosis model was used. It was conclusively proved that AgNPs capped with citrate or PVP exhibited significant antibacterial activities in vivo against Salmonella infection compared to uncapped AgNPs. These results clearly demonstrate the importance of capping agents and the synthesis method for AgNPs in their use as antimicrobial agents for therapeutic purposes.

Molecular Basis for the Differential Quinolone Susceptibility of Mycobacterial DNA Gyrase

DNA gyrase is a type II topoisomerase that catalyzes the introduction of negative supercoils in the genomes of eubacteria. Fluoroquinolones (FQs), successful as drugs clinically, target the enzyme to trap the gyrase-DNA complex, leading to the accumulation of double-strand breaks in the genome. Mycobacteria are less susceptible to commonly used FQs. However, an 8-methoxy-substituted FQ, moxifloxacin (MFX), is a potent antimycobacterial, and a higher susceptibility of mycobacterial gyrase to MFX has been demonstrated. Although several models explain the mechanism of FQ action and gyrase-DNA-FQ interaction, the basis for the differential susceptibility of mycobacterial gyrase to various FQs is not understood. We have addressed the basis of the differential susceptibility of the gyrase and revisited the mode of action of FQs. We demonstrate that FQs bind both Escherichia coli and Mycobacterium tuberculosis gyrases in the absence of DNA and that the addition of DNA enhances the drug binding. The FQs bind primarily to the GyrA subunit of mycobacterial gyrase, while in E. coli holoenzyme is the target. The binding of MFX to GyrA of M. tuberculosis correlates with its effectiveness as a better inhibitor of the enzyme and its efficacy in cell killing.

Targeting Mycobacterium tuberculosis Topoisomerase I by Small-Molecule Inhibitors

We describe inhibition of Mycobacterium tuberculosis topoisomerase I (MttopoI), an essential mycobacterial enzyme, by two related compounds, imipramine and norclomipramine, of which imipramine is clinically used as an antidepressant. These molecules showed growth inhibition of both Mycobacterium smegmatis and Mycobacterium tuberculosis cells. The mechanism of action of these two molecules was investigated by analyzing the individual steps of the topoisomerase I (topoI) reaction cycle. The compounds stimulated cleavage, thereby perturbing the cleavage-religation equilibrium. Consequently, these molecules inhibited the growth of the cells overexpressing topoI at a low MIC. Docking of the molecules on the MttopoI model suggested that they bind near the metal binding site of the enzyme. The DNA relaxation activity of the metal binding mutants harboring mutations in the DxDxE motif was differentially affected by the molecules, suggesting that the metal coordinating residues contribute to the interaction of the enzyme with the drug. Taken together, the results highlight the potential of these small molecules, which poison the Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium smegmatis topoisomerase I, as leads for the development of improved molecules to combat mycobacterial infections. Moreover, targeting metal coordination in topoisomerases might be a general strategy to develop new lead molecules.

Creche Odetinha: um estudo de caso

Esta Pesquisa, de natureza qualitativa, teve por objetivo, descrever e analisar o processo de formação (2009) de um grupo de educadores os Agentes Auxiliares de Creche1 (AAC)-, recém concursados, através de um Estudo de Caso. Para tanto, fez parte das análises as recentes mudanças nas políticas de educação infantil do município do Rio de Janeiro (1997-2010) e o percurso de constituição da unidade de educação infantil -Creche Municipal Odetinha Vidal de Oliveira, através do relato de alguns de seus líderes comunitários. No município do Rio de Janeiro, as creches públicas resultaram da transferência das instituições que pertenciam à antiga Secretaria de Desenvolvimento Social (SMDS), atual Secretaria Municipal de Assistência Social (SMAS), para a Secretaria Municipal de Educação (SME). Atualmente, a rede municipal de ensino totaliza 255 creches municipais, com 33.348 alunos, em horário integral (7h -17h). No ano de 2005, o poder executivo do município do Rio de Janeiro, através da Lei 3985 de 08 de abril, criou a categoria funcional de Agente Auxiliar de Creche, que passou a integrar o Quadro de Pessoal de Apoio à Educação. O ingresso ao cargo deu-se através de concurso público, realizado em 2007, constituído de provas e provas de títulos, sendo exigida, a formação mínima em nível fundamental (o que fere a LDBEN 9394/96) e carga horária de 40 horas semanais. A seleção ocorreu regionalmente, isto é, por CRE. Em junho de 2008, o quadro de pessoal das creches públicas do município do Rio de Janeiro passou a contar em sua estrutura, com os novos profissionais egressos do concurso, marcando uma nova trajetória na história dessas instituições. A partir da análise do perfil destes educadores, meu objetivo foi refletir sobre a formação em serviço necessária para atender às especificidades de trabalho com criança de zero a três anos. Estaremos assim, co-participando na implementação de políticas públicas de Educação Infantil da prefeitura quanto à formação em serviço dos agentes auxiliares de creche. Para tanto, propomos três temas comuns e complementares de pesquisa: Inserção das crianças e famílias à creche; Brincar/Brincadeira; Arranjo espacial. Os instrumentos utilizados na pesquisa foram: observação participativa, questionários, e entrevistas. Foram também desenvolvidas, com os educadores, atividades de formação e sessões reflexivas que proporcionem o pleno desenvolvimento profissional desses sujeitos.

Metodologia Problematizadora na formação de graduandos de Pedagogia em Comunicação Alternativa

A formação inicial de professores se constitui como objeto desta tese. Na presente pesquisa pretendi planejar, implementar e avaliar a eficácia de um programa de formação inicial de professores para atuar com Tecnologia Assistiva, principalmente com a Comunicação Alternativa e Ampliada, por meio de metodologia problematizadora. Para responder à pergunta principal do estudo A formação inicial de professores para atuar com TA, principalmente com a CAA, através de metodologia problematizadora favorece a modificação das preconcepções sobre deficiência e práticas desses futuros professores? foi necessário conhecer as concepções dos alunos de Pedagogia, assim como envolvê-los no planejamento do curso. Outro elemento fundamental na proposta de formação foi a Metodologia da Problematização aplicada a questões educacionais , que estimula o trabalho reflexivo, criativo e colaborativo. A pesquisa foi desenvolvida em dois estudos, durante o período de agosto de 2008 a dezembro de 2010. Uma pesquisa ação foi desenvolvida com 37 alunos da graduação do curso de Pedagogia, duas professoras responsáveis pela disciplina, 26 alunos com deficiência sem fala articulada, com idades entre 8 e 32 anos, cinco professoras de uma escola especial da rede pública de ensino. Os estudos foram desenvolvidos na Faculdade de Educação da UERJ em salas de aula e no Laboratório de Tecnologia Assistiva/Comunicação Alternativa (Lateca) e numa escola especial. Foram utilizados questionários, filmagens, vídeos e vários recursos de tecnologia assistiva. Os procedimentos metodológicos foram os seguintes: 1. Aplicação de questionário com objetivo duplo caracterizar os graduandos de Pedagogia e apreender suas concepções a respeito de Educação Inclusiva, deficiência, TA e CAA. 2. Com base na análise dos questionários, levantei o perfil dos alunos, suas expectativas em relação a essa formação e as sugestões que direcionaram o planejamento e a implementação da oferta das aulas expositivas e das atividades práticas. 3. Oferta de aulas expositivas, acompanhadas de farto material audiovisual e do desenvolvimento de atividades práticas, que versaram sobre os seguintes temas: linguagem, comunicação e interação, deficiência, TA e CAA. 4. Os graduandos observaram, planejaram e desenvolveram uma proposta de intervenção direta para alunos com deficiência. Os estudos apontaram que houve modificação das concepções dos graduandos em relação aos conceitos de deficiência, TA e CAA. Os dados revelaram ainda que esse trabalho proporcionou aos graduandos uma oportunidade real de exercício da prática, com as seguintes características: partindo da observação da realidade de uma sala de aula ou sala de atendimento especializado, identificar problemas pedagógicos e escolher um deles como foco de uma investigação; refletir sobre os possíveis fatores e determinantes principais do problema selecionado e definir os pontos-chave do estudo; investigar esses pontos-chave; buscar informações em diversas fontes e analisá-las para responder ao problema, compondo, assim, a teorização; elaborar hipóteses de solução para o problema; e, por fim, aplicar uma ou mais das hipóteses de solução, como um retorno do estudo à realidade investigada. Verifiquei também, ao final do estudo, a imensa gama de recursos e estratégias de CAA, a adequação de material pedagógico e os recursos de acesso ao computador que foram criados pelos graduandos nesse atendimento aos alunos com deficiência. O estudo beneficiou, ainda, os professores e alunos da escola especial que, além de conhecer os recursos de TA e CAA, puderam vivenciar essa abordagem educacional diferenciada, proposta na formação inicial. Além disso, observei que os alunos com deficiência ampliaram as oportunidades de comunicação e interação social.

Uso de Comunicação Alternativa e Ampliada e as possibilidades de interação com seus pares: brincar, comunicar, interagir

Para muitas crianças a impossibilidade de se comunicar através da linguagem oral torna-se um impedimento para sua efetiva interação no grupo social a qual pertencem, deixando-as à margem de experiências propulsoras para o seu desenvolvimento. Segundo Gumpezz (1986), Heat (1989), Luckmann (1990) apud (Capovilla, 1993), converter-se em membro da comunidade lingüística implica que a pessoa domine as regras gramaticais e pragmáticas da linguagem de sua comunidade. O presente estudo teve como objetivos utilizar o brinquedo como propulsor do desenvolvimento da linguagem, através da implementação de um sistema de Comunicação Alternativa e Ampliada (CAA), em uma criança com paralisia cerebral. O procedimento envolveu o uso de um sistema pictório de comunicação e a avaliação das intenções comunicativas da criança, utilizando o sistema de CAA; avaliação das produções lingüísticas e descrição das diferentes formas de interação propiciadas pelo uso do sistema de CAA, em ambiente escolar. O estudo foi dividido em duas etapas: o primeiro estudo foi desenvolvido numa abordagem do ensino naturalístico (Warren and Rogers-Warren, 1985), que demonstrou sua eficácia na implantação do sistema, mudança nas formas de comunicação, construção de sentenças de uma ou mais palavras com as funções de solicitação, pergunta e relato. No segundo estudo foram realizadas observações no contexto escolar, onde a criança encontra-se integrada em classe de alfabetização, sendo possível verificar os tipos de interação realizados pelo sujeito com e sem o uso do sistema de CAA. O estudo indica que o uso de CAA e a possibilidade de interação com outras crianças e adultos falantes auxiliam a construção de uma estrutura lingüística quando assumida no seu papel de uma outra linguagem

A Comunicação Alternativa e Ampliada e suas contribuições para o processo de inclusão de um aluno com Transtorno do Espectro do Autismo com distúrbios na comunicação.

O presente estudo foi fruto de uma pesquisa maior ocorrida no período entre os anos de 2011 e 2012. Tal pesquisa teve como objetivo planejar, implementar e a avaliar um programa de capacitação oferecido para professores da rede municipal do Rio de Janeiro que atuavam em salas de Atendimento Educacional Especializado para introduzir o uso do sistema PECS-Adaptado junto aos alunos com Transtorno do Espectro do Autismo sem fala funcional. Ao final da pesquisa maior, alguns questionamentos surgiram, dando origem ao presente trabalho, a fim de dar seguimento à pesquisa desenvolvida e finalizada. Para tanto, o estudo foi dividido em dois: Estudo I e Estudo II. O primeiro foi o Follow-up da pesquisa maior e teve como objetivo verificar a continuidade do uso do sistema PECS-Adapatado por um aluno com TEA tendo a professora de AEE em sala de recursos como a sua principal interlocutora após o término da pesquisa maior e analisar o avanço na evolução das fases do referido sistema de CAA. Foi realizado em uma sala de recursos do município do Rio de Janeiro e participaram da pesquisa uma professora da sala de recursos e aluno com TEA. Ocorreram 7 sessões de Follow-up, que foram analisadas a partir de um protocolo de registro, de acordo com as tentativas ocorridas e a pontuação de acordo com os níveis de apoio recebidos para usar o sistema de CAA. Os resultados apontaram para uma continuidade do uso do PECS-Adaptado pela professora de sala de recursos e um avanço no desempenho do aluno até a fase 4. O Estudo II teve como objetivo analisar as interações comunicativas de um aluno com TEA em ambiente de sala de aula regular, verificando os efeitos da utilização de um sistema de Comunicação Alternativa e Ampliada no contexto escolar. Tiveram como participantes o aluno do Estudo I, a professora da turma regular que ele frequentava e a estagiária. O estudo ocorreu em uma sala de aula de uma escola regular municipal do Rio de Janeiro e foram realizadas 10 sessões ao todo, das quais 4 sessões de linha de base e 6 de intervenção, além de 3 encontros de capacitação com a professora e estagiária. Para transcrever os dados, foram realizados quadros de categorias dos atos comunicativos dos três participantes, onde foram verificadas as ocorrências em intervalos de 3 minutos. Os resultados sinalizaram uma maior interação comunicativa do aluno com a estagiária na fase de intervenção, uma vez que a professora passou a diminuir significativamente a atenção ao aluno, dirigindo-se pouco a ele. O aluno começou a fazer uso da CAA em sala de aula, ampliando a sua possibilidade de comunicar-se com seus pares em contexto escolar. Concluiu-se que a preocupação com a comunicação é um dos fatores fundamentais para que a inclusão de um aluno com TEA ocorra de forma mais eficaz, assim como outros fatores que ainda precisam ser revistos pela prática pedagógica para garantir o acesso pleno de pessoas com necessidades especiais ao contexto escolar. Além disso, o PECS-Adaptado mostrou-se um eficaz sistema de CAA para ser utilizado por alunos com TEA, mesmo que tenha sido mais efetivo em sala de recursos.

Caracterização fenotípica e molecular de amostras de Enterococcus isoladas em um hospital universitário da cidade do Rio de Janeiro

Os enterococos estão amplamente distribuídos no ambiente. Nos seres humanos, compõem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinário. Nas últimas décadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiológicos de infecções hospitalares. Uma característica marcante desses microrganismos é a resistência intrínseca a vários antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infecções, além de alguns fatores que tem sido relacionado à virulência de enterococos. Este estudo investigou a presença de enterococos em amostras de infecção e colonização de pacientes hospitalizados, profissionais de saúde, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonização, de quadros de infecção, dietas orais e manipuladores de alimento. Não foram recuperadas amostras dos profissionais de saúde. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterização do gênero e espécies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo método de disco difusão, além da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produção de biofilme e a expressão da gelatinase também foram avaliadas. Os genes de resistência a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulência cylA, esp e fsr foram pesquisados pela técnica de PCR. O polimorfismo genético foi determinado por PFGE. A espécie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonização e infecção (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqüente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonização as maiores taxas de resistência foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infecção, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistência a níveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonização (52,6%) e infecção (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistência a níveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relação a formação de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqüência dentre as de infecção. A expressão de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonização e infecção, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificação referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A análise do polimorfismo genético revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium, não acarretando um perfil eletroforético prevalente. Entretanto, foi observado um perfil único dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, não só de quadros infecciosos, podem representar um risco para a população, apontando para uma maior reflexão quanto ao papel desses microrganismos nas infecções humanas, particularmente no ambiente hospitalar.

Marcadores fenotípicos e genotípicos de resistência aos antimicrobianos em enterobactérias e Staphylococcus spp. e detecção de genes para a produção de enterotoxina estafilocócica em cepas isoladas de equipamentos da cozinha de um hospital universitário no município do Rio de Janeiro

A resistência aos antimicrobianos pela produção de β-lactamases em enterobactérias é um problema adicional neste cenário. Staphylococcus spp é considerado um patógeno humano freqüentemente associado a infecções adquiridas no ambiente hospitalar. O objetivo desse trabalho foi estudar a resistência aos antimicrobianos em cepas de Enterobactérias e Staphylococcus spp. isoladas de equipamentos utilizados no preparo de dietas destinadas à pacientes internados em um hospital universitário no município do Rio de Janeiro, além de verificar a presença de genes codificadores de enterotoxinas nas cepas de Staphylococcus spp. As enterobactérias e os Staphylococcus spp. foram isolados e identificados por metodologia convencional. Para o teste de susceptibilidade aos antimicrobianos foram utilizados discos contendo antimicrobianos clinicamente relevantes. Foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição em caldo para os antimicrobianos clinicamente relevantes. A pesquisa de genes que codificam β-lactamases em enterobactérias foi realizada pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento para os genes blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaOXA-1 e blaCMY-2. Para Staphylococcus spp. foram pesquisados, através da PCR e sequenciamento, os genes de resistência a meticilina, gentamicina e eritromicina e os genes codificadores de enterotoxinas (sea-see, seg-sej, sen-ser e seu). Foram isoladas 97 cepas de enterobactérias, 40 de liquidificador e 57 de batedeira e 40 cepas de Staphylococcus spp., 20 de cada equipamento. Dentre as enterobactérias, o gênero Enterobacter foi isolado com maior frequencia (n=37, 38%). Foram ainda isoladas seis cepas de Salmonella spp. Das enterobactérias, 80% (n=79) foram resistentes a pelo menos um antimicrobiano e 38% (n=37) a três ou mais. A expressão fenotípica presuntiva de b-lactamases do tipo AmpC foi detectada em 32 cepas. O gene blaCMY-2 não foi encontrado. Doze cepas apresentaram halos de inibição com screaning positivo para a pesquisa de ESBL. Foi detectada a presença do gene blaSHV em K. pneumoniae subsp. pneumoniae. O sequenciamento desse gene permitiu identificá-lo como sendo blaSHV-36. Dentre os Staphylococcus spp., oito foram identificados como coagulase-positivas (SCP) e 32 como coagulase-negativas (SCN). As oito cepas de SCP foram identificadas como S. aureus subsp. aureus. Dentre os SCN, as espécies identificadas com maior frequência foram: S. caprae (n=7, 17,5%), S. simulans (n=5, 12,5%) e S. epidermidis (n=4, 10%). Destas, 83% (n=33) foram resistentes a pelo menos um antimicrobiano e 30% (n=12) foram resistentes a mais do que três. Duas cepas (5%) de S. epidermidis apresentaram perfil de resistência a até seis antimicrobianos e genes de resistência a meticilina, a eritromicina e a gentamicina. Todas as sete cepas que foram resistentes no TSA e na CIM a gentamicina, apresentaram o gene aac(2)/aph(6). O gene ermB foi observado ainda em uma S hominis subsp hominis que apresentou resistência na CIM e no TSA. Foi detectada a presença de pelo menos um gene codificador de enteroxotxina em 83% (n=33) das cepas. O gene seg foi detectado em 11 cepas, o gene sei em 17 cepas e o gene sen em 31 cepas. Os resultados encontrados implicam as dietas preparadas com esses equipamentos como veículo de disseminação de enteropatógenos e Staphylococcus spp. com marcadores de resistência e genes codificadores de enterotoxinas relevantes no ambiente hospitalar.

Breathers and thermal relaxation as a temporal process: A possible way to detect breathers in experimental situations

Breather stability and longevity in thermally relaxing nonlinear arrays is investigated under the scrutiny of the analysis and tools employed for time series and state reconstruction of a dynamical system. We briefly review the methods used in the analysis and characterize a breather in terms of the results obtained with such methods. Our present work focuses on spontaneously appearing breathers in thermal Fermi-Pasta-Ulam arrays but we believe that the conclusions are general enough to describe many other related situations; the particular case described in detail is presented as another example of systems where three incommensurable frequencies dominate their chaotic dynamics (reminiscent of the Ruelle-Takens scenario for the appearance of chaotic behavior in nonlinear systems). This characterization may also be of great help for the discovery of breathers in experimental situations where the temporal evolution of a local variable (like the site energy) is the only available/measured data. © 2005 American Institute of Physics.

An ambient proof and wide tuning range LC VCO with automatic amplitude control for tuner applications

This paper represents a LC VCO with AAC (Auto Amplitude Control), in which PMOS FETs are used as active components, and the varactors are directly connected to ground to widen Kvco linear range. The AAC circuitry adds little noise to the VCO and provides it with robust performance over a wide temperature and carrier frequency range. The VCO is fabricated in 50-GHz 0.35-mu m SiGe BiCMOS process. The measurement results show that it has -127.27-dBc/Hz phase noise at 1-MHz offset and a linear gain of 32.4-MHz/V between 990-MHz and 1.14-GHz. The whole circuit draws 6.6-mA current from 5.0-V supply.

阿片类药物成瘾者瞳孔光反射的检测和特征提取

建立了一种基于图像处理的快速瞳孔直径检测算法,运用此算法提取了反映阿片类药物成瘾人员与正常人对瞳孔光反射变化差异的3个特征值:绝对收缩幅度(absolute amplitude of contraction,AAC)、相对收缩幅度(relative amplitude of contraction,RAC)和收缩斜率(SCV,slope of contraction velocity);分别研究了成瘾、性别、近视、年龄、睡眠剥夺等因素对于这3个特征值的影响。不同性别、近视人员、睡眠剥夺人员与正常人之间的3个特征值均无显著差异,成瘾人员与之对比均显著减小。老年人相对于正常青年人,3个特征值都明显减小;与成瘾人员相比,仅在RAC值上有显著差异。结果表明,阿片类药物成瘾人员除了与正常人外,也与其他具有潜在影响瞳孔变化因素的非阿片成瘾人员在瞳孔对光反射的特征值上具有显著差异。该研究的实验数据为进一步建立基于检测瞳孔对光反射其直径发生变化的方法来快速、非接触地鉴别出阿片类药物成瘾人员提供了可靠的依据。

A 1.1GHz LC VCO with Automatic Amplitude Control for Tuner Applications

This paper presents an LC VCO with auto-amplitude control （AAC）, in which pMOS FETs are used,and the varactors are directly connected to ground to widen the linear range of Kvco. The AAC circuitry adds little noise to the VCO but provides it with robust performance over a wide temperature and carrier frequency range.The VCO is fabricated in a chartered 50GHz 0.35μm SiGe BiCMOS process. The measurements show that it has - 127. 27dBc/Hz phase noise at 1MHz offset and a linear gain of 32.4MHz/V between 990MHz and 1.14GHz.The whole circuit draws 6. 6mA current from 5V supply.