南方主要易腐易褐变特色水果贮藏加工关键技术

本成果研究开发我国产量均居世界第一的杨梅、荔枝、龙眼、草莓等四种易腐易褐变南方特色水果的贮运保鲜加工技术，为这些水果的时空市场拓展和增值提供关键技术支撑。取得的主要成果包括：鉴别了杨梅等易腐水果的主要腐败微生物，建立了动态生长模型，开发的抑霉剂可延长五倍保鲜期，好果率90%以上；筛选了水果采后病害的拮抗微生物，从生态、生理和基因水平阐明了水果采后病害的生防机理，开发的高效低成本生防制剂对杨梅、草莓真菌病害性腐烂的抑制率达60%~70%；研究了衰老、褐变、腐烂、冷害等影响荔枝、龙眼采后品质的关键问题，阐明了酶促褐变和品质劣变机理；开发的荔枝龙眼抗褐变综合保鲜贮运技术使保鲜期达2个月，好果率90%以上；建立了系统的果蔬运输生理学研究体系，开发的易腐水果控温长途运输保鲜集成技术可将杨梅、草莓的运销半径由产地周边数百公里拓展到全国和国际市场；阐明了杨梅花色苷降解特性，开发了杨梅汁、酒护色和澄清关键技术。以上成果获得5项发明专利，发表相关论文102篇，其中SCI收录42篇。成果在主产区企业应用后，近三年直接创产值7.5743亿元,创利税1.8634亿元，创汇1375万美元；向果农收购四种水果10万多吨，使果农增收4亿多元。

美味猕猴桃和软枣猕猴桃种间杂交花粉管行为和早期胚胎发生的观察

美味猕猴桃(Actinidia deliciosa(A．Chev．)C．F．Liang and A．R．Ferguson)和软枣猕猴桃（Actinidia arguta）种间传粉后，花粉管在花柱内行为的荧光观察，以及早期胚胎发生的显微观察，结果如下： 1．花粉粒在柱头的乳头细胞表面萌发，在开放型的V形花柱道内生长。 2．花粉管生长速率比对照缓慢，到达胚珠珠孔的时间平均延迟50到60小时。 3．花粉管在花柱中下部出现形态变化：部分花粉管呈波纹状弯曲;花粉管顶端膨大，尖细或破裂;花粉管直径变化;花粉管解体。 4．花粉管胼胝质沉积的变化：胼胝质沿花粉管壁不规则沉积;有的膨大的花粉管顶端出现胼胝质;有的不出现胼胝质塞，而整个花粉管壁有胼胝质分布，荧光强烈。 5．基于显微结构和种子分析，种间杂交大约有30%的胚珠能够受精，并发育成为种子，种子的胚的大小和胚乳的量与对照有差别，有约70%或更多的表现不育或败育。胚发育为茄型，受精后台子保持休眠十几天后开始横分裂。传粉后七周形成子叶胚。胚发育较对照迟缓。胚乳细胞型。 6．种间杂交能够结实，正常种子占20% -30％，败育干瘪种子占10%左右，未受精胚珠占60%- 70％。种内传粉正常种子占95%，空瘪败育种子占0.7％，未受精胚珠占3.8％。 7．种间杂交果实大小、重量，种子大小及数目，胚的大小都比对照小。

水稻AP2/EREBP转录因子基因OsDRE和OsRAF的功能分析

AP2是一个大的转录因子家族，因其成员含有一个60-70 个氨基酸残基的保守结构域即AP2结构域而得名，它们的功能涉及植物花的发育以及植物对生物或非生物逆境的应答反应。根据它们所含的AP2 结构域的数目，这个家族可分为AP2亚家族和EREBP 亚家族。 AP2亚家族成员含两个AP2结构域，EREBP 亚家族成员含一个AP2结构域。一般来说，AP2 亚家族的成员主要参与植物发育过程的调控;EREBP 亚家族成员则主要参与对逆境的应答反应。按照它们响应外界刺激的类型和AP2结构域中结合顺式作用元件的核心氨基酸的不同，EREBP亚家族又可分为ERF和CBF/DREB两大类群，ERF 类主要响应生物类逆境的诱导，CBF/DREB类则响应干旱、低温等非生物胁迫的刺激。 根据AP2保守结构域搜索，水稻基因组中一共有147个AP2/EREBP成员，但其中功能得到证实的还非常有限。为了解更多AP2基因在植物生长发育过程中的功能，我们先从水稻基因组数据库中搜索到含有AP2/EREBP 结构域的推测基因序列，选择其中40个扩增并成功扩增出31个，将这些DNA片段点在尼龙膜上，然后用水稻叶片cDNA 作模板标记探针，与固定在膜上的推测基因杂交。杂交结果作为选择基因进行功能分析的重要依据。 OsDRE就是我们选择进行研究的一个表达较强的基因。首先，通过RACE 克隆得到OsDRE 的cDNA全长 1589bp，它编码318个氨基酸。Blast 搜索和保守结构域序列比对分析以及进化树分析显示它是一个新的ERF 基因。RT-PCR分析表明该基因在水稻各种组织中表达量比较一致，而且，OsDRE 既不对植物生长物质如乙烯，水杨酸（SA），茉莉酸甲酯（MJ），脱落酸（ABA），赤霉素（GA3），油菜素内酯（BR）的诱导起反应，同样也不响应环境因子如低温、干旱条件的处理。这些结果说明OsDRE是一个不响应胁迫相关因素的诱导的、组成型表达的水稻基因。用OsDRE的非保守区域构建的RNAi 载体转入水稻后未能使转基因水稻产生异常表型，然而，OsDRE在水稻和拟南芥中的过量表达都导致转基因植物出现植株矮小、开花延迟、生长周期延长以及育性降低等表型，说明OsDRE对生长和发育的影响在水稻和拟南芥中是一致的。 基于以上原因，我们选择在遗传分析方面有明显优势的拟南芥作为材料，对OsDRE基因功能进行研究并得出以下结论：（1）瞬时表达和随后的过量表达证明OsDRE定位于细胞核中，过量表达OsDRE引起转基因植株的生长周期变长、抽苔时间延迟和抽苔时莲座叶的数量增多;（2）过量表达OsDRE通过一种不影响细胞数量的方式抑制了细胞的膨胀从而导致植物器官以致整个植株变小，而且，在此过程中部分器官的形态也受到了影响;（3）OsDRE过量表达能激活已知位于乙烯信号途径下游的基因表达并且转基因植株幼苗在黑暗中出现下胚轴及根缩短变粗的现象，提示OsDRE 可能部分参与了乙烯信号途径下游的反应。 除此之外，我们还初步分析了另一个EREBP基因，并将其命名为OsRAF。氨基酸序列分析表明该基因与大麦的RAF 基因在蛋白水平上相似性最高。Northern 杂交结果进一步显示，与RAF 一样，OsRAF 也是根中优势表达的基因，并且它的表达量在乙烯或低温的诱导下增加。对转基因植株的观察和瞬时表达表明OsRAF 定位于细胞核中。 综上所述，对水稻基因OsDRE 和OsRAF的分析表明， OsDRE是一个新的ERF基因，它不受乙烯等因素的诱导并且过量表达该基因导致转基因植株出现细胞膨胀受到抑制等一系列的表型。另外，OsRAF在水稻根中优势表达并受乙烯和低温的诱导，目前，与之相关的功能研究正在进行。

内蒙古羊草草原碳通量观测及其驱动机制分析

植被与大气间CO2通量的长期观测能够使人们加深对陆地生态系统在全球碳循环中科学地位的理解。在生态系统水平上，涡度相关技术是评价植被/大气间净生态系统CO2交换量的主要手段。本研究以内蒙古羊草草原通量站为试验平台，以涡度相关技术为主要技术手段，以内蒙古草原生态系统定位研究站羊草草原围封样地2003～2005年开路涡度相关系统观测的CO2通量数据为基础，深入探讨了内蒙古羊草草原生态系统CO2通量不同时间尺度上的变化特征及其驱动机制。 在建立生态系统尺度CO2通量观测基本方法论的前提下，集中探讨了不同时间尺度内蒙古羊草草原生态系统净生态系统碳交换、呼吸作用以及碳吸收的季节变异特征及其控制机制，初步建立了内蒙古羊草草原净生态系统CO2交换量估算的基本方法，可为生态系统过程模拟与模型预测提供科学依据和技术支撑。主要结果包括以下几个方面： 1. 功率谱和协谱分析表明，开路涡度相关系统对高频湍流信号的响应能力可以满足内蒙古草原生态系统实际观测要求。与闭路涡度相关系统和常规气象系统对比分析表明，开路涡度相关系统在CO2通量长期观测中仪器性能稳定，可以满足CO2通量长期观测的客观需要。坐标旋转校正是复杂地形条件下CO2通量测定理想的倾斜校正途径。能量平衡闭合的测试仅可以作为数据质量评价的参考标准之一，而不能作为CO2通量数据质量评价的绝对标准并用于数据校正。 2. 按照CO2通量吸收的高峰特征划分，正常降水年，内蒙古羊草草原CO2通量同时具有一个吸收高峰和两个吸收高峰的特征。而极端干旱年蒙古羊草草原的CO2通量具有两个吸收高峰的特征。在严重干旱胁迫条件下，2005年内蒙古羊草草原生态系统净生态系统交换出现显著下降的趋势。净生态系统交换下降主要是降雨量减少的影响。 3. 通过分析不同时间尺度上CO2通量和环境因子的关系，发现小时尺度上，内蒙古羊草草原生态系统的净生态系统交换主要由光合有效辐射控制，而饱和水汽压差和土壤含水量是影响生态系统光合作用的另外两个关键因素。在更大的时间尺度上降雨量和物候相的变化是调节生态系统碳通量大小的主要因素。最大的生物量和LAI出现的时间和最大的NEE出现的时间相吻合，但是降雨量的变化可以改变这种关系。 4. 在内蒙古羊草草原区>3mm的降雨被认为是对生态系统有效的。土壤含水量(0~20cm)在一次有效降雨事件发生后，约1~2天后才会发生响应， 2003年和2004年，NEE在 >3mm的降雨事件发生后，NEE开始增加，4~6天后达到高峰。随着降雨的结束，NEE在达到高峰后开始降低，10天后达到初始值的60~70%。 5. 在生态系统水平上，温度和土壤水分条件的季节动态是控制生态系统呼吸季节变化模式的重要环境要素，在干旱胁迫的条件下，水分条件也可能成为生态系统呼吸的主导因素，生态系统呼吸在干旱条件降低。

基于生态系统服务理论的草地可持续利用评价

草地退化不仅仅是今天中国才发生的事情。历史上曾经发生“黑尘暴”的美国North Dakota州，现在仍然有62.7％土地被用作耕作，林地所占面积仅仅占1％。私有制和种植业较畜牧业的高的利润率，是该州种植业比重高于畜牧业的重要原因。草原保护项目（CRP）得到了美国政府财政的大力支持， 在North Dakota州采用了以草地恢复为主的措施。美国发达的教育体系带来的高流动率，使得North Dakota州自30年代后居住人口稳定在60－70万成为可能，从而避免了我国出现的草原地区不断增加的人口压力。由此可见：草地作为重要的自然资源，不可能完全保护起来;没有其他配套措施，私有制可能会带来新一轮垦殖;草地畜牧业仍然是畜牧业的重要组成部分，畜牧业发展需要结合种植业尤其需要与饲料生产相结合。 依据生态系统服务的理念，首次发展了生态系统服务指数（ESI），试图通过对生态系统服务功能的综合考虑，提出科学的适宜放牧率的评价方法。本文利用美国北达科他州立大学中部草原研究站17年长期放牧试验数据，选取植物多样性Shannon-Wiener指数、地上净初级生产力、土壤表层含水量和单位面积家畜增重等四个指标，通过对不同指标分别赋予不同的权重，计算不同管理目标下ESI及其稳定性，并对单目标管理与多目标管理进行了比较研究。结果表明，对于北美混合普列里(Prairie)草地，围封不利用或建立自然保护区，虽然生态系统比较稳定，但既不能有效的提高植物多样性、初级生产力和土壤水分含量等生态功能，又没有畜产品产出;而在重牧或极重牧处理下虽然获得了较大的畜产品生产，但导致了草地生态系统的退化和较大的系统不稳定性。因此，这两种管理方式在实践中都是不可取的。应用生态系统服务指数综合考虑，认为应该权衡各项生态功能和生产功能，此时轻牧或中牧是最适宜的。因此，ESI的建立避免了单项指标的评价偏差，使得适宜放牧率的确定更加合理。 利用前面构建的多目标权重评价体系，结合内蒙古草原生态系统定位站放牧试验样地的数据，探讨了锡林郭勒盟定位站附近的适宜放牧率为2.67羊/ha，低于单目标条件下的每公顷绵羊4羊/ha。同时在经济学和生态系统系统服务理论的基础上，依据谢高地等人（2001年）的研究，并提出了环境税和生态补偿的标准，分别是每公顷15元和90元。

菠菜甜菜碱醛脱氢酶的研究

本实验以菠菜叶片为材料，分离并纯化了甜菜碱醛脱氢酶（BADH，EC 1.2.1.8），并对其某些性质进行了研究。此外，还提取并纯化了poly (A)+RNA，并对其完整性进行了分析，主要结果如下： 1.菠菜甜菜碱醛脱氢酶存在于60％硫酸铵沉淀部分，70％硫酸铵沉淀部分未检出其活性。用层析法纯化该酶，使纯化倍数达到405.3倍。菠菜甜菜碱醛脱氢酶有两个同工酶。 2.菠菜甜菜碱醛脱氢酶主要定位于胞液中。其中，在过氧化物酶体及微粒体中有一定量活性存在，但在叶绿体中未检出其活性。 3.菠菜甜菜碱醛脱氢酶活性有较广的pH值范围，其最适pH范围为9.5左右。该酶以NAD作为特异性辅酶，其Km值为8.0×10-6M, Vmax为0.143nmol/min。该酶以甜菜碱醛作为特异性底物，其Km值为1.82×10-4M，Vmax为0.182nmol/min。该酶活性为0.125～1M的NaCl、KCl和脯氨酸所抑制，但0.125～1M的蔗糖及甜菜碱对其活性没有影响。 4.PCMB和Mersalyl抑制该酶的活性，DTT可逐步恢复被抑制的活性。稀土元素LaCl3对该酶活性没有影响，但CeCl则使其完全失活。另外，Mn2+和Mo6+离子对其活性没有影响，Mg2+离子可增加其活性。 5.菠菜叶片中有菠菜甜菜碱醛脱氢酶的抑制因子存在，该因子可能是一种小分子化合物。 6.应用酚-氯仿方法分离了菠菜叶片的poly (A)+RNA，并在-80℃低温下长期贮存。

Characterization of a fibrinogen-clotting enzyme from Trimeresurus stejnegeri venom, and comparative study with other venom proteases

Trimeresurus stejnegeri venom, which contains TSV-PA (a specific plasminogen activator sharing 60-70% sequence homology with venom fibrinogen-clotting enzymes), also possesses fibrinogen-clotting activity in vitro. A fibrinogen-clotting enzyme (stejnobin) has been purified to homogeneity by gel filtration and ion-exchange chromatography on a Mono-Q column. It is a single-chain glycoprotein with a mol. wt of 44,000. The NH2-terminal amino acid sequence of stejnobin shows great homology with venom fibrinogen-clotting enzymes and TSV-PA. Like TSV-PA, stejnobin was able to hydrolyse several chromogenic substrates. Comparative study of substrate specificities of stejnobin and other venom proteases purified in our laboratory was carried out on five chromogenic substrates. Stejnobin clotted human fibrinogen with a specific activity of 122 NIH thrombin-equivalent units/mg protein. However, stejnobin did not act on other blood coagulation factors, such as factor X, prothrombin and plasminogen. Diisopropyl fluorophosphate and phenylmethanesulfonyl fluoride inhibited its activity, whereas ethylenediamine tetracetic acid had no effect on it, indicating that it is a serine protease. Although stejnobin showed strong immunological cross-reaction with polyclonal antibodies raised against TSV-PA, it was interesting to observe that, unlike the case of TSV-PA, these antibodies did not inhibit the amidolytic and fibrinogen-clotting activities of stejnobin. (C) 1998 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

Production of freshwater giant prawn using over-wintered juveniles for enhancement of farm income and reduction of rural poverty in Bangladesh

Freshwater giant prawn, Macrobrachium rosenbergii fry produced during late season can not withstand low temperature thus the prawn culture programme during winter is hampered. To overcome this problem, late season (August-September) prawn juveniles (0.9-6.8 g) were stocked at a density of 1.43 to 3.57/square meter in 350-476 square-meter ponds in Pabna and Mymensingh districts during October 2000 and cultured till May 2001. Monthly average water temperature during the winter months (December-February) varied from 16 to 22 °C and gradually increased to 32 °C in May. The prawn fry showed fast growth rate and attained an average weight of 60-70 g within eight months including three winter months. Growth compensation was observed during summer months. Survival rate was 60-79%. After extrapolation of the present growth rate more than 1,600 kg/ha production can be achieved in better-managed ponds. Extrapolated cost of production was Tk. 268,000 and 200,000 Tk./ha in two best ponds, sale value was Tk. 644,9146 [sic] and 528,466 and gross profit was Tk. 376,000-410,000, suggesting a higher economic feasibility of farming freshwater prawn with over-wintered juveniles.

芒果柑桔花蕾蛆(Contarinia citri Barnes)的生物学及其防治研究

柑桔花蕾蛆幼虫对芒果花蕊的危害率为60％-70％, 最高达100％, 严重影响芒果开花、 座果。该虫在云南景谷湿热气候区, 1年发生5-6代, 完成1代需16-32日, 世代重叠。采取综合防治措施, 危害率可控制在0.29％左右。

Impact of sedimentalogical processes on mangrove ecosystem of the Indus Delta

A detailed sedimentalogical study concerning the depletion of mangrove in the Indus Delta due to the marked decrease in the supply of silt was undertaken. Thirty one stations were established for sampling in a selected area of 12000 hectares between Korangi creek and Wad do Khuddi creek. Seventy one samples of soil were collected from 6cm and 1m depth, out of which fifty one samples were selected for sedimentalogical studies. It was inferred from this study that the marine depositional processes are distinctly dominating over the fluvial processes, which is major cause in decreasing the growth of mangrove. It was also inferred that among the sampled stations the sites having clayey silt (with silt 60%-70% and clay 25%-30%) are most favourable for mangrove plantation.

黑长臂猿的分布、现状与保护

黑长臂猿(H y lobates concolor) 是现生11 种长臂猿中其系统地位最低的灵长类。历史时期 长臂猿曾广泛分布在我国南部的大部省区。自公元4 世纪以来, 它们的分布发生了很大变化。分 布区从北到南, 从东到西急剧缩小, 现黑长臂猿缩小到只在海南岛、云南南部和越南北部, 已 分化为6 个亚种。分布于我国的5 亚种中, 海南亚种(H. c. hainanus) 现今仅20 余只, 是最 濒危的一个亚种; . 北部湾亚种(H. c. nasu tus) 50 年代曾在广西西南部发现, 60- 70 年代已绝 迹; 指名亚种(H. c. concolor) 主要分布于越南北部、滇南和滇中哀牢山。滇南约有100 余只, 滇中哀牢山可能有40- 60 群, 180- 240 只; 景东亚种(H. c. j ing d ong ensis) 为滇中无量山的 特有亚种, 现有100- 116 群, 430- 500 只; 滇西亚种(H. c. f u rvog aster) , 只分布在滇西南的 沧源、镇康、云县和耿马等地, 约有26- 42 群, 100- 150 只。现今, 黑长臂猿的分布区已不足 1 000Km 2, 总数量约1 000 只, 为高度濒危的灵长类动物。造成黑长臂猿濒危的主要原因是: 热 带和南亚热带原始森林的被破坏和缩小、人类活动的干扰使生境破碎和恶化、过度猎捕和长臂 猿自身的生物学弱点。目前, 中国的黑长臂猿已在9 个自然保护区中得到保护。

中国澜沧江(鱼芒)科鱼类种群现状及洄游原因分析

我国曾经记录有(鱼芒)科鱼类4种.国际上近年来对(鱼芒)科鱼类的分类进行了许多重要的修订,物种数量已达3属22种.我国的(鱼芒)科鱼类也因长时间没有进行及时的分类修订而存在许多疑问.基于国内自1960年以来所收集的珍贵标本和记录,确认我国记录有(鱼芒)科鱼类1属3种.它们是:长丝(鱼芒)(Pangasius sanitwongsei Smith)、贾巴(鱼芒)(Pangasius djambal Bleeker)、短须(鱼芒)(Pangasius micronemus Bleeker).在此基础上,根据掌握的资料对我国(鱼芒)科鱼类的种群现状和濒危原因、洄游的性质及洄游群体数量下降原因以及水电站建设对大型洄游鱼类的影响进行了分析.以往记录显示,捕获时间都集中于4-5月份,无冬季捕获记录.捕获季节与(鱼芒)科鱼类产卵繁殖季节高度吻合,提示其上溯到我国澜沧江下游应属生殖洄游,而不是索饵洄游.被捕获记录主要出现于20世纪60-70年代,之后则数量锐减.导致这种情况发生的主要原因可能有三方面:1)下游湄公河对(鱼芒)科鱼类的捕捞压力过大;2)湄公河-澜沧江航运船只对(鱼芒)科鱼类有损害作用;3)由于西南季风变化的影响,澜沧江径流量发生变化,可能间接导致(鱼芒)科鱼类洄游行为发生改变.分析显示,(鱼芒)科鱼类的洄游与3-4月份澜沧江流量呈密切相关规律,提示适合鱼类产卵的雨季及西南夏季风比往年较早到达该地区,从而激发它们较往年提前启动生殖洄游,并且溯河的高度较高.以往的捕获记录还表明,(鱼芒)科鱼类主要洄游至景洪下方的澜沧江河段及支流补远江,上述水域是其喜好的产卵场之一.景洪大桥以下的干支流不适合建设水电站,因为电站大坝必然会阻断(鱼芒)科鱼类的繁殖洄游,影响其繁殖活动.而景洪大桥上方的干流电站不在(鱼芒)科鱼类正常繁殖洄游通道中,大坝阻隔作用对(鱼芒)科鱼类的影响相对较小.建议把补远江建设成为鱼类和水生生物保护区.

The potential of community fish refuges (CFRs) in rice field agro-ecosystems for improving food and nutrition security in the Tonle Sap region

The fisheries sector in Cambodia contributes 8%–12% to national GDP and 25% - 30% to agricultural GDP, with an estimated 4.5 million people involved in fishing and associated trades. Fish and other aquatic animals are important food sources, contributing an estimated national average of 60% - 70% of total animal protein intake. Of the 2013 total fish production, 550,000 metric tons were harvested from freshwater habitats, of which rice field fisheries and small-scale family fisheries contributed approximately 20%. The productivity and value of rice field fisheries to households in rural Cambodia has been highlighted in a number of previous studies. The Fisheries Administration of the Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries plans to increase productivity from rice field fisheries and aquaculture at an annual rate of 15% to maintain supply for a growing population. This report draws mainly on the baseline and monitoring data from the Rice Field Fisheries Enhancement Project (RFFEP) during its implementation between 2012 and 2014. Reference is also made to the Fish on Farms project to highlight the relative contribution of fish from small-scale aquaculture compared to wild-caught fish.