Phenotypic and genotypic analysis of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus serially passaged in cell culture

Rapid accumulation of few polyhedra (FP) mutants was detected during serial passaging of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HaSNPV) in cell culture. 100% FP infected cells were observed by passage 6. The specific yield decreased from 178 polyhedra per cell at passage 2 to two polyhedra per cell at passage 6. The polyhedra at passage 6 were not biologically active, with a 28-fold reduction in potency compared to passage 3. Electron microscopy studies revealed that very few polyhedra were produced in an FP infected cell (< 10 polyhedra per section) and in most cases these polyhedra contained no virions. A specific failure in the intranuclear nucleocapsid envelopment process in the FP infected cells, leading to the accumulation of naked nucleocapsids, was observed. Genomic restriction endonuclease digestion profiles of budded virus DNA from all passages did not indicate any large DNA insertions or deletions that are often associated with such FP phenotypes for the extensively studied Autographa californica nucleopolyhedrovirus and Gaileria mellonella nucleopolyhedrovirus. Within an HaSNPV 25K FP gene homologue, a single base-pair insertion (an adenine residue) within a region of repetitive sequences (seven adenine residues) was identified in one plaque-purified HaSNPV FP mutant. Furthermore, the sequences obtained from individual clones of the 25KFP gene PCR products of a late passage revealed point mutations or single base-pair insertions occurring throughout the gene. The mechanism of FP mutation in HaSNPV is likely similar to that seen for Lymantria dispar nucleopolyhedrovirus, involving point mutations or small insertions/deletions of the 25K FP gene.

Testing the applicability of molecular genetic markers to population analyses of scleratinian corals

The abundance of coral reefs worldwide is in decline, and despite the ecological importance of reefs, only a limited number of DNA markers have been identified for scleractinian coral genetic studies. This paper addresses the search for new coral molecular markers and investigates the applicability of the cytochrome c oxidase subunit I (COI), the internal transcribed spacer region 1 (ITS1), and the pocilloporin gene to the question of intraspecific variation in the scleractinian coral Pocillopora verrucosa along the southeast African coastline. The COI fragment was 710 bp long and was identical for P. verrucosa (n = 10) and P. damicornis (n = 3). Only two different ITS1 sequences were found (differing by 13 bp insertion), but more importantly, 24% of the sequences were heterogenous indicating that different multiple copies of the sequence exist. Pocilloporin is an intronless gene that was absolutely conserved throughout all P. verrucosa populations (n = 50). Thus, the three DNA regions studied appear unsuitable for the population genetic analyses of P. verrucosa.

The 2000 Ogura Lecture: Olfactory neural cells: An untapped diagnostic and therapeutic resource

Objective. This is an over-view of the cellular biology of upper nasal mucosal cells that have special characteristics that enable them to be used to diagnose and study congenital neurological diseases and to aid neural repair. Study Design: After mapping the distribution of neural cells in the upper nose, the authors' investigations moved to the use of olfactory neurones to diagnose neurological diseases of development, especially schizophrenia. Olfactory-ensheating glial cells (OEGs) from the cranial cavity promote axonal penetration of the central nervous system and aid spinal cord repair in rodents. The authors sought to isolate these cells from the more accessible upper nasal cavity in rats and in humans and prove they could likewise promote neural regeneration, making these cells suitable for human spinal repair investigations. Methods: The schizophrenia-diagnosis aspect of the study entailed the biopsy of the olfactory areas of 10 schizophrenic patients and 10 control subjects. The tissue samples were sliced and grown in culture medium. The ease of cell attachment to fibronectin (artificial epithelial basement membrane), as well as the mitotic and apoptotic indices, was studied in the presence and absence of dopamine in those cell cultures. The neural repair part of the study entailed a harvesting and insertion of first rat olfactory lamina propria rich in OEGs between cut ends of the spinal cords and then later the microinjection of an OEG-rich suspension into rat spinal cords previously transected by open laminectomy. Further studies were done in which OEG insertion was performed up to 1 month after rat cord transection and also in monkeys. Results: Schizophrenic patients' olfactory tissues do not easily attach to basement membrane compared with control subjects, adding evidence to the theory that cell wall anomalies are part of the schizophrenic lesion of neurones. Schizophrenic patient cell cultures had higher mitotic and apoptotic indices compared with control subjects. The addition of dopamine altered these indices enough to allow accurate differentiation of schizophrenics from control patients, leading to, possibly for the first time, an early objective diagnosis of schizophrenia and possible assessment of preventive strategies. OEGs from the nose were shown to be as effective as those from the olfactory bulb in promoting axonal growth across transected spinal cords even when added I month after injury in the rat. These otherwise paraplegic rats grew motor and proprioceptive and fine touch fibers with corresponding behavioral improvement. Conclusions. The tissues of the olfactory mucosa are readily available to the otolaryngologist. Being surface cells, they must regenerate (called neurogenesis). Biopsy of this area and amplification of cells in culture gives the scientist a window to the developing brain, including early diagnosis of schizophrenia. The Holy Grail of neurological disease is the cure of traumatic paraplegia and OEGs from the nose promote that repair. The otolaryngologist may become the necessary partner of the neurophysiologist and spinal surgeon to take the laboratory potential of paraplegic cure into the day-to-day realm of clinical reality.

Are Ichthyosporea animals or fungi? Bayesian phylogenetic analysis of elongation factor 1α of Ichthyophonus irregularis

Ichthyosporea is a recently recognized group of morphologically simple eukaryotes, many of which cause disease in aquatic organisms. Ribosomal RNA sequence analyses place Ichthyosporea near the divergence of the animal and fungal lineages, but do not allow resolution of its exact phylogenetic position. Some of the best evidence for a specific grouping of animals and fungi (Opisthokonta) has come from elongation factor 1alpha, not only phylogenetic analysis of sequences but also the presence or absence of short insertions and deletions. We sequenced the EF-1alpha gene from the ichthyosporean parasite Ichthyophonus irregularis and determined its phylogenetic position using neighbor-joining, parsimony and Bayesian methods. We also sequenced EF-1alpha genes from four chytrids to provide broader representation within fungi. Sequence analyses and the presence of a characteristic 12 amino acid insertion strongly indicate that I. irregularis is a member of Opisthokonta, but do not resolve whether I. irregularis is a specific relative of animals or of fungi. However, the EF-1alpha of I. irregularis exhibits a two amino acid deletion heretofore reported only among fungi. (C) 2003 Elsevier Science (USA). All rights reserved.

alpha-conotoxins PnIA and [A10L] PnIA stabilize different states of the alpha 7-L247T nicotinic acetylcholine receptor

The effects of the native alpha-conotoxin PnIA, its synthetic derivative [ A10L] PnIA and alanine scan derivatives of [ A10L] PnIA were investigated on chick wild type alpha7 and alpha7-L247T mutant nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs) expressed in Xenopus oocytes. PnIA and [A10L] PnIA inhibited acetylcholine (ACh)-activated currents at wtalpha7 receptors with IC50 values of 349 and 168 nM, respectively. Rates of onset of inhibition were similar for PnIA and [ A10L] PnIA; however, the rate of recovery was slower for [ A10L] PnIA, indicating that the increased potency of [ A10L] PnIA at alpha7 receptors is conveyed by its slower rate of dissociation from the receptors. All the alanine mutants of [ A10L] PnIA inhibited ACh-activated currents at wtalpha7 receptors. Insertion of an alanine residue between position 5 and 13 and at position 15 significantly reduced the ability of [ A10L] PnIA to inhibit ACh-evoked currents. PnIA inhibited the non-desensitizing ACh-activated currents at alpha7-L247T receptors with an IC50 194 nM. In contrast, [ A10L] PnIA and the alanine mutants potentiated the ACh-activated current alpha7-L247T receptors and in addition [ A10L] PnIA acted as an agonist. PnIA stabilized the receptor in a state that is non-conducting in both the wild type and mutant receptors, whereas [ A10L] PnIA stabilized a state that is non-conducting in the wild type receptor and conducting in the alpha7-L247T mutant. These data indicate that the change of a single amino acid side-chain, at position 10, is sufficient to change the toxin specificity for receptor states in the alpha7-L247T mutant.

Abrang??ncia, inser????o e impacto transformador dos sistemas de compras eletr??nicas na administra????o p??blica: an??lise do Siasg/Comprasnet

Quais as funcionalidades necess??rias aos sistemas de compras eletr??nicas no ambiente da administra????o p??blica? Que par??metros s??o relevantes para a an??lise e a avalia????o desses sistemas? O trabalho aborda a aplica????o da tecnologia da informa????o ??s compras governamentais, focalizando o caso do Sistema Integrado de Administra????o de Servi??os Gerais (Siasg) e seu portal na Internet, o Comprasnet, desenvolvido pela Administra????o P??blica Federal brasileira. Contextualiza a emerg??ncia do com??rcio eletr??nico e sua aplica????o ?? administra????o p??blica. Sistematiza as fases e os procedimentos do processo de compras e contrata????es na administra????o p??blica brasileira, indicando os componentes e as funcionalidades que devem compor os sistemas de compras eletr??nicas governamentais. Prop??e par??metros de an??lise para a avalia????o desses sistemas: abrang??ncia, inser????o e impacto na transforma????o da gest??o. A aplica????o desses par??metros ao estudo de caso evidencia que o Siasg/Comprasnet apresenta abrang??ncia ainda incompleta, inser????o consolidada e impacto transformador mais acentuado sobre as compras realizadas por meio de modalidades de licita????o eletr??nicas.

Aprender a governar: a aprendizagem de funcion??rios p??blicos para as carreiras de estado

Esta tese investiga como dois grupos de funcion??rios p??blicos seleciona dos para as carreiras de Estado no Brasil aprendem a desempenhar as suas fun????es. Deste m odo, busca compreender os processos de aprendizagem, formais e informais, da e ntrada desses servidores p??blicos como alunos nos espa??os destinados ?? sua forma????o, at?? sua inser ????o nos espa??os de trabalho, como aprendizes. A pesquisa justifica-se porque, sendo as am ostras estudadas consideradas boas refer??ncias no servi??o p??blico, faz-se necess??ri o compreender como se d?? a aprendizagem para o exerc??cio dessas carreiras de Estado. Quatro dimens??es s??o consideradas para investigar a aprendizagem dos funcion??rios p??blicos: primeira, o surgimento e evolu????o da forma????o em administra????o p??bli ca no Pa??s. Segunda, as escolas de governo, lugares prop??cios ?? aprendizagem, influente s para a administra????o p??blica do Pa??s, inclinados ?? discuss??o de novas solu????es e cr??ticos na identifica????o, an??lise e apropria????o das experi??ncias verificadas em outras realidades. Te rceira, os cursos de forma????o inicial, espa??os para o primeiro contato com a fun????o escol hida e os seus desafios, saberes necess??rios e ferramentas dispon??veis. Quarta, a inse r????o no ambiente de trabalho, decisiva para o processo de aprendizagem social dos funcion??rios novatos por interm??dio das comunidades de pr??tica.

Reactivity of the isolated perfused rat tail vascular bed

Isolated segments of the perfused rat tail artery display a high basal tone when compared to other isolated arteries such as the mesenteric and are suitable for the assay of vasopressor agents. However, the perfusion of this artery in the entire tail has not yet been used for functional studies. The main purpose of the present study was to identify some aspects of the vascular reactivity of the rat tail vascular bed and validate this method to measure vascular reactivity. The tail severed from the body was perfused with Krebs solution containing different Ca2+ concentrations at different flow rates. Rats were anesthetized with sodium pentobarbital (65 mg/kg) and heparinized (500 U). The tail artery was dissected near the tail insertion, cannulated and perfused with Krebs solution plus 30 µM EDTA at 36oC and 2.5 ml/min and the procedures were started after equilibration of the perfusion pressure. In the first group a dose-response curve to phenylephrine (PE) (0.5, 1, 2 and 5 µg, bolus injection) was obtained at different flow rates (1.5, 2.5 and 3.5 ml/min). The mean perfusion pressure increased with flow as well as PE vasopressor responses. In a second group the flow was changed (1.5, 2, 2.5, 3 and 3.5 ml/min) at different Ca2+ concentrations (0.62, 1.25, 2.5 and 3.75 mM) in the Krebs solution. Increasing Ca2+ concentrations did not alter the flow-pressure relationship. In the third group a similar protocol was performed but the rat tail vascular bed was perfused with Krebs solution containing PE (0.1 µg/ml). There was an enhancement of the effect of PE with increasing external Ca2+ and flow. PE vasopressor responses increased after endothelial damage with air and CHAPS, suggesting an endothelial modulation of the tone of the rat tail vascular bed. These experiments validate the perfusion of the rat tail vascular bed as a method to investigate vascular reactivity.

O ter e o ser : representações sociais da adolescência entre adolescentes de inserção urbana e rural

Fundamentando-se na Teoria das Representações Sociais este trabalho analisa como adolescentes de diferentes inserções sociais representam a adolescência e dão sentido ao período em que vivem. Participaram desse estudo 360 adolescentes entre as idades de 14 e 23 anos: 180 (90 do sexo feminino e 90 do sexo masculino) residentes em região urbana, estudantes de escola particular, localizada em bairro considerado de classe média alta e alta, e 180 (90 do sexo feminino e 90 do sexo masculino) residentes em uma região rural e que estudam em escola agrotécnica pública. Os resultados indicaram que a adolescência para os dois grupos está ancorada na percepção tradicional da adolescência como fase universal e transitória. Ocorre, entretanto, uma diferenciação de acordo com os elementos culturais presentes nos grupos. Dessa forma, verificamos formas diferentes de vivenciar a adolescência, corroborando assim, a tendência mais recente que propõe a adolescência como uma condição construída historicamente.

Pais adolescentes : vivência e significação

Foram investigadas mudanças ocorridas na vida de pais adolescentes e identificados os significados da paternidade e da maternidade para esses jovens. Oito participantes com idades de 16 a 21 anos foram entrevistados com base em roteiro focalizando: mudanças decorrentes da paternidade; significados da paternidade e da maternidade; práticas parentais. Entre as mudanças referidas destacaram-se a perda de liberdade e a inserção no mercado de trabalho. Para eles ser pai significa, principalmente, trabalhar para prover as necessidades da criança e também educar, dar carinho e atenção. A mãe é aquela que cuida e dá carinho, sacrifica-se e é a figura mais importante na vida da criança. As práticas parentais mais mencionadas estavam relacionadas com lazer e brincadeiras. Os dados indicaram a permanência de forte vínculo com os modelos tradicionais de parentalidade, embora tenham mostrado também a emergência de relações afetivas significativas entre pais e filhos.

Paneleiras de Goiabeiras & paneleiros de Guarapari : limites e influências entre patrimônio cultural, artesanato e mercado

Esta pesquisa visa compreender as relações entre o artesanato, o patrimônio cultural imaterial e o mercado, analisando as influências que um exerce sobre o outro. Para tanto, realizamos um estudo de caso comparativo entre as paneleiras de Goiabeiras, cujo ofício é registrado como patrimônio cultural imaterial, e os paneleiros de Guarapari, que possuem um modo de fazer panela diferenciado das paneleiras de Goiabeiras. Sendo assim, analisamos os modos de fazer dos dois grupos, as semelhanças e diferenças nas duas produções, as relações mercadológicas, sociais, políticas e ambientais envolvidas entre ambos e as políticas públicas que apoiam ou não os grupos pesquisados. Inicialmente apresentamos os grupos e seus modos de fazer panela de barro preta, utilizando os conceitos de patrimônio cultural e artesanato para contextualizar essas produções. Em seguida, observamos as principais diferenças e semelhanças nesses modos de produção, analisamos como acontece a inserção e o desenvolvimento do artesanato e do patrimônio no mercado, assim como as relações sociais entre os grupos de artesãos; identificamos as políticas de salvaguarda e os principais programas de incentivo ao artesanato; e apontamos as influências e relações entre artesanato, patrimônio cultural imaterial e mercado.

O significado da maternidade para mães de 10 a 14 anos

A maternidade em meninas de 10 a 14 anos é um fenômeno que desafia as políticas públicas de saúde e a academia científica, visto que, sua ocorrência aumenta a cada ano, mesmo com a taxa de fecundidade decrescendo cada vez mais no Brasil. Procurando se aproximar dessa temática para contribuir com o aprofundamento do assunto nessa faixa etária, o presente estudo teve como objetivo compreender o significado da maternidade para mães de 10 a 14 anos de idade a partir de seus relatos de experiência. Parte-se de uma investigação epidemiológica realizada em uma região interiorana do Espírito Santo, no período de Julho de 2012 a Fevereiro de 2013, em que se avaliou a assistência pré-natal de 742 puérperas, através de informações registradas em formulário e contidas no Cartão da Gestante e no prontuário do recém-nascido. Aprofunda-se o estudo dos dez casos relativos às mães que possuíam entre 10 e 14 anos no momento do parto, mediante uma abordagem qualitativa que utilizou entrevistas individuais com roteiro semiestruturado. As falas foram gravadas, transcritas e analisadas através da técnica de análise de conteúdo, com enfoque na análise temática. Os resultados evidenciaram dois temas e cada um deles definiu quatro categorias de análise: 1) A experiência da maternidade: a) A vida familiar e conjugal; b) O que é ser mãe?; c) O apoio recebido após a maternidade e d) Reflexões sobre ser mãe adolescente e 2) A perspectiva após a maternidade: a) A escolaridade; b) A inserção no mercado de trabalho; c) Conselhos para jovens da mesma faixa etária e d) Os planos para o futuro. O estudo considera que o comportamento da maternidade poderá ter características e significados distintos de acordo com o contexto social em que vivem essas meninas. O arcabouço sexual, reprodutivo e familiar possui faces e formas estruturais que diferem dentro de cada grupo e a raiz desse assunto pode estar sendo baseada em uma relação que não depende da idade cronológica das mães.

A atuação do professor de Educacao fisica nos centros de atencao álcool e drogas

Esta dissertação teve como objetivo conhecer e analisar a atuação do professor de Educação Física no tratamento de pessoas que fazem uso prejudicial de álcool e outras drogas, especificamente em dois Centros de Atenção Psicossocial Álcool e Drogas (CAPSad) da região da Grande Vitória, ES, buscando elementos para subsidiar a questão a partir dos professores e demais integrantes da equipe multidisciplinar. Antes de adentrar no tema da pesquisa, considerei necessário expor os caminhos que fizeram com que se encontrassem, ao longo da história, os personagens protagonistas deste trabalho – professor de Educação Física e CAPSad. Para isso, retomei a Reforma Psiquiátrica Brasileira, a instituição dos CAPS, as intervenções políticas em álcool e outras drogas e a inserção do professor de Educação Física na saúde mental/saúde pública. A metodologia empregada foi a observação e a condução de entrevistas semiestruturadas com os professores e trabalhadores da equipe de saúde. Na descrição e análise dos dados, foi possível constatar que há certa semelhança nas atividades desenvolvidas pelos professores em ambos os CAPSad, os quais demonstraram a participação na equipe de modo multidisciplinar e intersetorial. A pesquisa demonstrou a relevância dos professores de Educação Física não somente como mais um membro da equipe, portador de uma série de intervenções, mas como um trabalhador que pode vir a somar significativamente com o campo da saúde mental. Mesmo não possuindo formação específica para atuarem, os professores se mostraram comprometidos com o trabalho dos CAPSad a partir de práticas corporais e outras atuações que evidenciam as relações humanas.

Brazil's strategic partnerships: an assessment of the Lula era (2003-2010)

This article examines the priority bilateral relations of Brazil, named "strategic partnerships", both because of their tradition and historical relevance and due to the existence of political and economic cooperation projects. An assessment of these relationships, especially under Lula's administration, is made in this work, bearing in mind the concept of "strategic partnerships" and its development in Brazilian foreign policy. There will be considered partnerships with the US; Argentina; Japan; China; India; South Africa and the European Union. In the article, the meaning of the increase in these relationships is interpreted on the grounds of its significance to the international insertion strategy of Brazil