Removal of the N-linked glycan structure from the peanut peroxidase prxPNC2: Influence on protein stability and activity

Lines of transgenic tobacco have been generated that are transformed with either the wild-type peanut peroxidase prxPNC2 cDNA, driven by the CaMV3 5S promoter (designated 35S::prxPNC2-WT) or a mutated PNC2 cDNA in which the asparagine residue (Asn(189)) associated with the point of glycan attachment (Asn(189)) has been replaced with alanine (designated 35S::prxPNC2-M). PCR, using genomic DNA as template, has confirmed the integration of the 35S::prxPNC2-WT and 35::prxPNC2-M constructs into the tobacco genome, and western analysis using anti-PNC2 antibodies has revealed that the prxPNC2-WT protein product (PNC2-WT) accumulates with a molecular mass of 34,670 Da, while the prxPNC2-M protein product (PNC2-M) accumulates with a molecular mass of 32,600 Da. Activity assays have shown that both PNC2-WT and PNC2-M proteins accumulate preferentially in the ionically-bound cell wall fraction, with a significantly higher relative accumulation of the PNC2-WT isoenzyme in the ionically-bound fraction when compared with the PNC2-M isoform. Kinetic analysis of the partially purified PNC2-WT isozyme revealed an affinity constant (apparent K-m) of 11.2 mM for the reductor substrate guaiacol and 1.29 mM for H2O2, while values of 11.9 mM and 1.12 mM were determined for the PNC2-M isozyme. A higher Arrenhius activation energy (E,,) was determined for the PNC2-M isozyme (22.9 kJ mol(-1)), when compared with the PNC2-WT isozyme (17.6 kJ mol(-1)), and enzyme assays have determined that the absence of the glycan influences the thermostability of the PNC2-M isozyme. These results are discussed with respect to the proposed roles of N-linked glycans attached to plant peroxidases. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Rhizodeposits of Trifolium pratense and Lolium perenne: Their comparative effects on 2,4-D mineralization in two contrasting soils

Rhizosphere enhanced biodegradation of organic pollutants has been reported frequently and a stimulatory role for specific components of rhizodeposits postulated. As rhizodeposit composition is a function of plant species and soil type, we compared the effect of Lolium perenne and Trifolium pratense grown in two different soils (a sandy silt loam: pH 4, 2.8% OC, no previous 2,4-D exposure and a silt loam: pH 6.5, 4.3% OC, previous 2,4-D exposure) on the mineralization of the herbicide 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid). We investigated the relationship of mineralization kinetics to dehydrogenase activity, most probable number of 2,4-D degraders (MPN2,4-D) and 2,4-D degrader composition (using sequence analysis of the gene encoding alpha-ketoglutarate/2,4-D dioxygenase (tfdA)). There were significant (P < 0.01) plant-soil interaction effects on MPN2,4-D and 2,4-D mineralization kinetics (e.g. T pratense rhizodeposits enhanced the maximum mineralization rate by 30% in the acid sandy silt loam soil, but not in the neutral silt loam soil). Differences in mineralization kinetics could not be ascribed to 2,4-D degrader composition as both soils had tfdA sequences which clustered with tfdAs representative of two distinct classes of 2,4-D degrader: canonical R. eutropha JMP134-like and oligotrophic alpha-proteobacterial-like. Other explanations for the differential rhizodeposit effect between soils and plants (e.g. nutrient competition effects) are discussed. Our findings stress that complexity of soil-plant-microbe interactions in the rhizosphere make the occurrence and extent of rhizosphere-enhanced xenobiotic degradation difficult to predict.

Parasite-host interaction of the protoplast isolates of Entomophthora egressa with the eastern hemlock looper and the eastern spruce budworm

Hemocytes of the insects Lambdina fiscellaria fiscellaria and Choristoneura fumiferana did not adhere to the protoplasts of ~he fungus EntomoEhthora egressa. Hemocyte reaction for both insect species to test-particles was not suppressed by the protoplasts. The spherule cells of _-L. fiscellaria fiscellaria adhered to the spherical hyphal bodies and hyphae of ~· ~gressa. The granular cells of -c. fumiferana adhered to the hyphae of ~· egress~. Protoplasts exposed to papain were attacked by the granular ·cells of -c. fumiferana. Spent growth medium of both protoplast isolates produced paralysis when injected into -c. fumiferana larvae. Evidence suggests that heat-stable proteins may be involved. Protoplast isolates showed differences in the growth rates and regeneration sequences using coagulated egg yolk medium, a highly modified version of Grace's insect tissue . culture medium (MGM) and modifications of MGM and in the presence of C0₂. The isolates also differed in the changes that they induced in MGM composition during protoplast growth and in the rates of glucose utilization and protein secretion. The serum of c. fumiferana larvae contained protein(s) which we believe adhere to the cell membranes of the protoplasts of E. egressa. Evidence is presented for hemocyteplasn~ interaction in the presence of protoplasts. Components in the larval serum were found to influence protoplast growth patterns. The possibility of antiprotoplast serum activity is presented. Melanin, toxic levels of ninhydrinpositive compounds and antiprotoplast proteins may have been involved in this activity. The granular cells of -L. fiscellaria fiscellaria and Q• fumiferana adhered to the hyphae of ,Rhizopus ~i$rican~. Spores of Absidia repens and the bacteria Escherichia coli and Bacillus cereus adhered to the granular cells of both species of· insects. The granular cells and plasmatocytes of -c. fumiferana were capable of phagocytosing -B. cereus. Adhesion of .A... . repens spores to c. fumiferana granular cells ~ . - was stimulated by N-acetylglucosamine and glucosamine, moderately reduced by D-fucose, D-arabinose, D-mannose, D-galatose and sucrose and mildly reduced by D-glucose, D-fructose and trehalose. There was no evidence of humoral opsonins in larval hemolymph favoring test-particle-hemocyte interaction. Granular cells of c. fumiferana exposed to papain had reduced affinities for A. repens spores.

Arte y política : Un estudio comparativo de Jacques Rancière y Nelly Richard para el arte latinoamericano

En este artículo se indagan y comparan las teorías de Jacques Rancière y Nelly Richard sobre la relación entre arte y política desde el pensamiento posfundacional, y se producen reflexiones y análisis de manifestaciones artísticas latinoamericanas vanguardistas o críticas en diálogo con ambas. Para ello, se parte de una presentación de las teorías de Rancière y Richard en términos generales, se focaliza en las ideas que dichos autores ;tienen de la política y, específicamente, en la conceptualización que hacen del arte y su relación con la política. Al mismo tiempo, se desarrolla una interpretación de producciones artísticas desde una mirada centrada en sus diversas conexiones con lo político, más allá del contenido temático de estas. Se utiliza la perspectiva metodológica cualitativa transdisciplinaria, que articula distintas áreas de conocimiento (filosofía política, sociología, historia del arte). En el caso de los desarrollos de Jacques Rancière, se recurre a herramientas teóricas metropolitanas para resituarlas y repensarlas en función del arte de Latinoamérica. En este sentido, se trata de potenciar sus ideas en el análisis de casos ;locales. En cuanto a la teoría de Nelly Richard, sus conceptos de arte crítico y vanguardista se ponen en relación con el arte latinoamericano. Finalmente, se propone una comparación en la cual se destacan similitudes y diferencias conceptuales entre ambos en combinación con análisis de casos para abrir el panorama analítico e interpretativo que vincule teorías actuales con estudios de manifestaciones artísticas locales

Arte y política : Un estudio comparativo de Jacques Rancière y Nelly Richard para el arte latinoamericano

En este artículo se indagan y comparan las teorías de Jacques Rancière y Nelly Richard sobre la relación entre arte y política desde el pensamiento posfundacional, y se producen reflexiones y análisis de manifestaciones artísticas latinoamericanas vanguardistas o críticas en diálogo con ambas. Para ello, se parte de una presentación de las teorías de Rancière y Richard en términos generales, se focaliza en las ideas que dichos autores ;tienen de la política y, específicamente, en la conceptualización que hacen del arte y su relación con la política. Al mismo tiempo, se desarrolla una interpretación de producciones artísticas desde una mirada centrada en sus diversas conexiones con lo político, más allá del contenido temático de estas. Se utiliza la perspectiva metodológica cualitativa transdisciplinaria, que articula distintas áreas de conocimiento (filosofía política, sociología, historia del arte). En el caso de los desarrollos de Jacques Rancière, se recurre a herramientas teóricas metropolitanas para resituarlas y repensarlas en función del arte de Latinoamérica. En este sentido, se trata de potenciar sus ideas en el análisis de casos ;locales. En cuanto a la teoría de Nelly Richard, sus conceptos de arte crítico y vanguardista se ponen en relación con el arte latinoamericano. Finalmente, se propone una comparación en la cual se destacan similitudes y diferencias conceptuales entre ambos en combinación con análisis de casos para abrir el panorama analítico e interpretativo que vincule teorías actuales con estudios de manifestaciones artísticas locales

Arte y política : Un estudio comparativo de Jacques Rancière y Nelly Richard para el arte latinoamericano

En este artículo se indagan y comparan las teorías de Jacques Rancière y Nelly Richard sobre la relación entre arte y política desde el pensamiento posfundacional, y se producen reflexiones y análisis de manifestaciones artísticas latinoamericanas vanguardistas o críticas en diálogo con ambas. Para ello, se parte de una presentación de las teorías de Rancière y Richard en términos generales, se focaliza en las ideas que dichos autores ;tienen de la política y, específicamente, en la conceptualización que hacen del arte y su relación con la política. Al mismo tiempo, se desarrolla una interpretación de producciones artísticas desde una mirada centrada en sus diversas conexiones con lo político, más allá del contenido temático de estas. Se utiliza la perspectiva metodológica cualitativa transdisciplinaria, que articula distintas áreas de conocimiento (filosofía política, sociología, historia del arte). En el caso de los desarrollos de Jacques Rancière, se recurre a herramientas teóricas metropolitanas para resituarlas y repensarlas en función del arte de Latinoamérica. En este sentido, se trata de potenciar sus ideas en el análisis de casos ;locales. En cuanto a la teoría de Nelly Richard, sus conceptos de arte crítico y vanguardista se ponen en relación con el arte latinoamericano. Finalmente, se propone una comparación en la cual se destacan similitudes y diferencias conceptuales entre ambos en combinación con análisis de casos para abrir el panorama analítico e interpretativo que vincule teorías actuales con estudios de manifestaciones artísticas locales