Contribuição à história dos batistas Sul-Mato-grossenses a partir da memória coletiva Um Recorte Biográfico da missionária Ann Mae Louise Wollerman

Esta pesquisa parte do interesse de análise da contribuição da missionária Ana Wollerman para o crescimento da denominação batista no sul de Mato Grosso e Mato Grosso do Sul, no período compreendido entre os anos de 1948 a 1978. A memória religiosa e autobiográfica da missionária apresenta experiências com o sagrado que marcam divisores de fases e temporalidades no seu recorte biográfico e que influenciam decisivamente na postura ministerial adotada. As entrevistas com algumas pessoas que participaram das comunidades afetivas existentes e os registros nas atas lidas constatam em grande parte os dados coletados pela memória. Ana Wollerman, filha de descendentes de alemães nos E.U.A., graduou-se em Artes e pósgraduou- se em Educação Religiosa. Veio para o Brasil inicialmente como missionária sem depender do sustento financeiro de uma Junta Missionária, fundou diversas escolas de ensino primário, trabalhou na implantação de diversas igrejas e dedicou grande parte de seus esforços no ensino ministerial. Foi responsável pela ajuda financeira no sustento de mais de uma dezena de jovens nos Seminários de Curitiba-PR, no IBER-RJ e no Seminário do Sul-RJ. Contribuiu também para que fossem destinadas grandes ofertas para a construção do Seminário Teológico Batista em Dourados. O trabalho procura seguir uma metodologia ainda em construção no que se refere à memória religiosa e utiliza o referencial teórico de Maurice Halbwachs para apresentar as memórias individuais e construção da memória coletiva, bem como tem apoio no próprio Halbwachs ao trabalhar a leitura da formação das comunidades afetivas. Aliado a estas questões se presta como um primeiro tratado sobre a historiografia da denominação batista em Mato Grosso e Mato Grosso do Sul, reunindo aspectos da sua gênese e do seu desenvolvimento. O resgate e a valorização da memória do sujeito-objeto em questão, ainda em vida constitui também no reconhecimento que a academia pode prestar às pessoas e às comunidades que se dedicam à construção de um mundo melhor.(AU)

A presença e participação das mulheres no movimento de resistência camponesa a partir de Oséias 11

Esta pesquisa busca uma aproximação ao capítulo 11 da profecia atribuída a Oséias. Dedica-se, em especial, ao resgate da memória histórica das mulheres. Por isso não se limita apenas à percepção da sua presença, mas também busca perceber sua participação ativa, criativa e decisiva na caminhada histórica e profética do povo de Israel, no final do século oitavo a.C. A proposição que reside na recuperação desta memória é de que se reconheça as mulheres como sujeito teológico, enquanto co-participantes da produção dos textos bíblicos e, como sujeito social, na resistência ativa às relações de dominação e subordinação das mulheres camponesas e demais minorias oprimidas. Em destaque no cap.11 está o projeto de reconstrução da casa. Esta não é concebida como espaço idealizado, mas como lugar propício para a retomada do projeto libertador do êxodo. Ela torna-se espaço social onde acontece a articulação da oposição ao projeto monárquico, e de construção de alternativas sociais que viabilizam a esperança firmada no valor da vida. É a partir deste espaço concreto viabilizado pela casa, de confronto e resistência, que a história do povo e, da própria monarquia é avaliada. A denúncia profética enfoca a religião colocada a serviço do projeto econômico da monarquia, através da prática do sacrifício, apontada pela profecia com responsável pela desestruturação da casa e por levar Israel à ruína. A profecia também enfoca a denúncia das violências praticadas pelas estruturas de poder monárquico, firmadas na religião. É também neste espaço social da casa que a perspectiva teológica é re-significada e que permite a reconstrução da imagem de Deus. De uma imagem patriarcal monárquica, ela se move em direção a uma imagem feminina maternal, que manifesta a dinâmica diária do cuidado da mãe pelo filho ou pela filha. Nesta representação de Deus está implícita a prática da misericórdia que se concretiza nas relações comunitárias, necessária para a efetivação do projeto de reconstrução que privilegia a casa como espaço concreto que viabiliza perspectivas de esperança.(AU)

A presença e participação das mulheres no movimento de resistência camponesa a partir de Oséias 11

Esta pesquisa busca uma aproximação ao capítulo 11 da profecia atribuída a Oséias. Dedica-se, em especial, ao resgate da memória histórica das mulheres. Por isso não se limita apenas à percepção da sua presença, mas também busca perceber sua participação ativa, criativa e decisiva na caminhada histórica e profética do povo de Israel, no final do século oitavo a.C. A proposição que reside na recuperação desta memória é de que se reconheça as mulheres como sujeito teológico, enquanto co-participantes da produção dos textos bíblicos e, como sujeito social, na resistência ativa às relações de dominação e subordinação das mulheres camponesas e demais minorias oprimidas. Em destaque no cap.11 está o projeto de reconstrução da casa. Esta não é concebida como espaço idealizado, mas como lugar propício para a retomada do projeto libertador do êxodo. Ela torna-se espaço social onde acontece a articulação da oposição ao projeto monárquico, e de construção de alternativas sociais que viabilizam a esperança firmada no valor da vida. É a partir deste espaço concreto viabilizado pela casa, de confronto e resistência, que a história do povo e, da própria monarquia é avaliada. A denúncia profética enfoca a religião colocada a serviço do projeto econômico da monarquia, através da prática do sacrifício, apontada pela profecia com responsável pela desestruturação da casa e por levar Israel à ruína. A profecia também enfoca a denúncia das violências praticadas pelas estruturas de poder monárquico, firmadas na religião. É também neste espaço social da casa que a perspectiva teológica é re-significada e que permite a reconstrução da imagem de Deus. De uma imagem patriarcal monárquica, ela se move em direção a uma imagem feminina maternal, que manifesta a dinâmica diária do cuidado da mãe pelo filho ou pela filha. Nesta representação de Deus está implícita a prática da misericórdia que se concretiza nas relações comunitárias, necessária para a efetivação do projeto de reconstrução que privilegia a casa como espaço concreto que viabiliza perspectivas de esperança.(AU)

Qualidade da Construção dos Vínculos entre Filhas Cuidadoras e Mães Idosas Dependentes

Este estudo teve por objetivos: - descrever as dificuldades nas relações entre as filhas-cuidadoras e suas mães idosas dependentes de cuidados, a partir de relatos das filhas; - investigar, a partir dos relatos da história familiar dessas filhas, a existência de conflitos prévios a necessidade de cuidar, relacionados à construção dos vínculos; identificar os principais desafios associados assistência ao cuidador familiar de idosos no que tange a resolução de conflitos com o idoso dependente. Método – tratou-se de um estudo qualitativo em que foram apresentados três casos clínicos de cuidadoras que haviam sido encaminhados para atendimento psicológico pela equipe multiprofissional de um Instituto de Geriatria e Gerontologia, unidade de atenção secundária da Secretaria de Estado da Saúde de S.P. Os resultados indicaram dificuldades relacionais entre ambas: cuidadoras filhas e mães idosas. As cuidadoras revelaram sobrecarga física e emocional e grande sofrimento. Todavia, a existência desses conflitos remontava às relações anteriores à atual situação de dependência; ficando bastante evidenciado, tanto pelas histórias de vida das cuidadoras, quanto pelo conteúdo trazido durante o processo terapêutico, a repetição das relações primeiras estabelecidas entre mãe-filha. O processo psicoterapêutico pôde permitir a essas cuidadoras a compreensão da necessidade em ter suas falhas ambientais supridas, na medida em que foi propiciado um ambiente favorável ao relacionamento humano. Assim, ao observarmos que ao longo do processo as pacientes apresentavam mudanças significativas, entendemos que a psicoterapia pode figurar como meio preventivo e preservação de equilíbrio psíquico.

Orientation-dependent and sequence-specific expansions of CTG/CAG trinucleotide repeats in Saccharomyces cerevisiae

A quantitative and selective genetic assay was developed to monitor expansions of trinucleotide repeats (TNRs) in yeast. A promoter containing 25 repeats allows expression of a URA3 reporter gene and yields sensitivity to the drug 5-fluoroorotic acid. Expansion of the TNR to 30 or more repeats turns off URA3 and provides drug resistance. When integrated at either of two chromosomal loci, expansion rates were 1 × 10−5 to 4 × 10−5 per generation if CTG repeats were replicated on the lagging daughter strand. PCR analysis indicated that 5–28 additional repeats were present in 95% of the expanded alleles. No significant changes in CTG expansion rates occurred in strains deficient in the mismatch repair gene MSH2 or the recombination gene RAD52. The frequent nature of CTG expansions suggests that the threshold number for this repeat is below 25 in this system. In contrast, expansions of the complementary repeat CAG occurred at 500- to 1,000-fold lower rates, similar to a randomized (C,A,G) control sequence. When the reporter plasmid was inverted within the chromosome, switching the leading and lagging strands of replication, frequent expansions were observed only when CTG repeats resided on the lagging daughter strand. Among the rare CAG expansions, the largest gain in tract size was 38 repeats. The control repeats CTA and TAG showed no detectable rate of expansions. The orientation-dependence and sequence-specificity data support the model that expansions of CTG and CAG tracts result from aberrant DNA replication via hairpin-containing Okazaki fragments.

Changes of telomere length cause reciprocal changes in the lifespan of mother cells in Saccharomyces cerevisiae

Budding yeast cells divide asymmetrically, giving rise to a mother and its daughter. Mother cells have a limited division potential, called their lifespan, which ends in proliferation-arrest and lysis. In this report we mutate telomerase in Saccharomyces cerevisiae to shorten telomeres and show that, rather than shortening lifespan, this leads to a significant extension in lifespan. This extension requires the product of the SIR3 gene, an essential component of the silencing machinery which binds to telomeres. In contrast, longer telomeres in a genotypically wild-type strain lead to a decrease in lifespan. These findings suggest that the length of telomeres dictates the lifespan by regulating the amount of the silencing machinery available to nontelomeric locations in the yeast genome.

The N terminus of the Drosophila Numb protein directs membrane association and actin-dependent asymmetric localization

Drosophila Numb is a membrane associated protein of 557 amino acids (aa) that localizes asymmetrically into a cortical crescent in mitotic neural precursor cells and segregates into one of the daughter cells, where it is required for correct cell fate specification. We demonstrate here that asymmetric localization but not membrane localization of Numb in Drosophila embryos is inhibited by latrunculin A, an inhibitor of actin assembly. We also show that deletion of either the first 41 aa or aa 41–118 of Numb eliminates both localization to the cell membrane and asymmetric localization during mitosis, whereas C-terminal deletions or deletions of central portions of Numb do not affect its subcellular localization. Fusion of the first 76 or the first 119 aa of Numb to β-galactosidase results in a fusion protein that localizes to the cell membrane, but fails to localize asymmetrically during mitosis. In contrast, a fusion protein containing the first 227 aa of Numb and β-galactosidase localizes asymmetrically during mitosis and segregates into the same daughter cell as the endogenous Numb protein, demonstrating that the first 227 aa of the Numb protein are sufficient for asymmetric localization.

Rapid decline of fitness in panmictic populations of Drosophila melanogaster maintained under relaxed natural selection

The parameters of the spontaneous deleterious mutation process remain poorly known, despite their importance. Here, we report the results of a mutation accumulation experiment performed on panmictic populations of Drosophila melanogaster without any genetic manipulations. Two experimental populations were kept for 30 generations under relaxed natural selection. Each generation, 100 pairs were formed randomly, and every fecund pair contributed a son and a daughter to the next generation. Comparison with two controls, one cryopreserved and the other kept as the experimental populations but with long generation time, showed that the number of surviving offspring per female declined by 0.2% and 2.0% per generation under benign and harsh, competitive conditions, respectively. Thus, the mutational pressure on fitness may be strong and depends critically on the conditions under which fitness is assayed.

In vitro-generated neural precursors participate in mammalian brain development

During embryogenesis, pluripotent stem cells segregate into daughter lineages of progressively restricted developmental potential. In vitro, this process has been mimicked by the controlled differentiation of embryonic stem cells into neural precursors. To explore the developmental potential of these cell-culture-derived precursors in vivo, we have implanted them into the ventricles of embryonic rats. The transplanted cells formed intraventricular neuroepithelial structures and migrated in large numbers into the brain tissue. Embryonic-stem-cell-derived neurons, astrocytes, and oligodendrocytes incorporated into telencephalic, diencephalic, and mesencephalic regions and assumed phenotypes indistinguishable from neighboring host cells. These observations indicate that entirely in vitro-generated neural precursors are able to respond to environmental signals guiding cell migration and differentiation and have the potential to reconstitute neuronal and glial lineages in the central nervous system.

Phosphorothioate Antisense Oligonucleotides Induce the Formation of Nuclear Bodies

Antisense oligonucleotides are powerful tools for the in vivo regulation of gene expression. We have characterized the intracellular distribution of fluorescently tagged phosphorothioate oligodeoxynucleotides (PS-ONs) at high resolution under conditions in which PS-ONs have the potential to display antisense activity. Under these conditions PS-ONs predominantly localized to the cell nucleus where they accumulated in 20–30 bright spherical foci designated phosphorothioate bodies (PS bodies), which were set against a diffuse nucleoplasmic population excluding nucleoli. PS bodies are nuclear structures that formed in cells after PS-ON delivery by transfection agents or microinjection but were observed irrespectively of antisense activity or sequence. Ultrastructurally, PS bodies corresponded to electron-dense structures of 150–300 nm diameter and resembled nuclear bodies that were found with lower frequency in cells lacking PS-ONs. The environment of a living cell was required for the de novo formation of PS bodies, which occurred within minutes after the introduction of PS-ONs. PS bodies were stable entities that underwent noticeable reorganization only during mitosis. Upon exit from mitosis, PS bodies were assembled de novo from diffuse PS-ON pools in the daughter nuclei. In situ fractionation demonstrated an association of PS-ONs with the nuclear matrix. Taken together, our data provide evidence for the formation of a nuclear body in cells after introduction of phosphorothioate oligodeoxynucleotides.

Dominant Negative Alleles of SEC10 Reveal Distinct Domains Involved in Secretion and Morphogenesis in Yeast

The accurate targeting of secretory vesicles to distinct sites on the plasma membrane is necessary to achieve polarized growth and to establish specialized domains at the surface of eukaryotic cells. Members of a protein complex required for exocytosis, the exocyst, have been localized to regions of active secretion in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae where they may function to specify sites on the plasma membrane for vesicle docking and fusion. In this study we have addressed the function of one member of the exocyst complex, Sec10p. We have identified two functional domains of Sec10p that act in a dominant-negative manner to inhibit cell growth upon overexpression. Phenotypic and biochemical analysis of the dominant-negative mutants points to a bifunctional role for Sec10p. One domain, consisting of the amino-terminal two-thirds of Sec10p directly interacts with Sec15p, another exocyst component. Overexpression of this domain displaces the full-length Sec10 from the exocyst complex, resulting in a block in exocytosis and an accumulation of secretory vesicles. The carboxy-terminal domain of Sec10p does not interact with other members of the exocyst complex and expression of this domain does not cause a secretory defect. Rather, this mutant results in the formation of elongated cells, suggesting that the second domain of Sec10p is required for morphogenesis, perhaps regulating the reorientation of the secretory pathway from the tip of the emerging daughter cell toward the mother–daughter connection during cell cycle progression.

Inhibition of Chromosomal Separation Provides Insights into Cleavage Furrow Stimulation in Cultured Epithelial Cells

While astral microtubules are believed to be primarily responsible for the stimulation of cytokinesis in Echinoderm embryos, it has been suggested that a signal emanating from the chromosomal region and mediated by the interzonal microtubules stimulates cytokinesis in cultured mammalian cells. To test this hypothesis, we examined cytokinesis in normal rat kidney cells treated with an inhibitor of topoisomerase II, (+)-1,2-bis(3,5-dioxopiperaz-inyl-1-yl)propane, which prevents the separation of sister chromatids and the formation of a spindle interzone. The majority of treated cells showed various degrees of abnormality in cytokinesis. Furrows frequently deviated from the equatorial plane, twisting daughter cells into irregular shapes. Some cells developed furrows in regions outside the equator or far away from the spindle. In addition, F-actin and myosin II accumulated at the lateral ingressing margins but did not form a continuous band along the equator as in control cells. Imaging of microinjected 5- (and 6-) carboxymtetramethylrhodamine-tubulin revealed that a unique set of microtubules projected out from the chromosomal vicinity upon anaphase onset. These microtubules emanated toward the lateral cortex, where they delineated sites of microtubule bundle formation, cortical ingression, and F-actin and myosin II accumulation. As centrosome integrity and astral microtubules appeared unperturbed by (+)-1,2-bis(3,5-dioxopiperaz-inyl-1-yl)propane treatment, the present observations cannot be easily explained by the conventional model involving astral microtubules. We suggest that in cultured epithelial cells the organization of the chromosomes dictates the organization of midzone microtubules, which in turn determines and maintains the cleavage activity.

On the Role of Myosin-II in Cytokinesis: Division of Dictyostelium Cells under Adhesive and Nonadhesive Conditions

We have investigated the role of myosin in cytokinesis in Dictyostelium cells by examining cells under both adhesive and nonadhesive conditions. On an adhesive surface, both wild-type and myosin-null cells undergo the normal processes of mitotic rounding, cell elongation, polar ruffling, furrow ingression, and separation of daughter cells. When cells are denied adhesion through culturing in suspension or on a hydrophobic surface, wild-type cells undergo these same processes. However, cells lacking myosin round up and polar ruffle, but fail to elongate, furrow, or divide. These differences show that cell division can be driven by two mechanisms that we term Cytokinesis A, which requires myosin, and Cytokinesis B, which is cell adhesion dependent. We have used these approaches to examine cells expressing a myosin whose two light chain-binding sites were deleted (ΔBLCBS-myosin). Although this myosin is a slower motor than wild-type myosin and has constitutively high activity due to the abolition of regulation by light-chain phosphorylation, cells expressing ΔBLCBS-myosin were previously shown to divide in suspension (Uyeda et al., 1996). However, we suspected their behavior during cytokinesis to be different from wild-type cells given the large alteration in their myosin. Surprisingly, ΔBLCBS-myosin undergoes relatively normal spatial and temporal changes in localization during mitosis. Furthermore, the rate of furrow progression in cells expressing a ΔBLCBS-myosin is similar to that in wild-type cells.

The myosin motor, Myo4p, binds Ash1 mRNA via the adapter protein, She3p

In Saccharomyces cerevisiae, mRNA encoding the cell-fate determinant Ash1p is localized to the distal tip of daughter cells. Five SHE genes are required for proper Ash1 mRNA localization, one of which encodes the myosin Myo4p. We show that three of the five She proteins, She2p, She3p, and Myo4p, colocalize with Ash1 mRNA in vivo and coimmunoprecipitate with Ash1 mRNA from cell extracts. We also find that She3p binds to Myo4p in the absence of RNA and She2p is required for binding She3p-Myo4p to Ash1 mRNA. These results suggest that She3p acts as an adapter protein that docks the myosin motor onto an Ash1–She2p ribonucleoprotein complex.

Spermatogonial stem cell enrichment by multiparameter selection of mouse testis cells

The spermatogonial stem cell initiates and maintains spermatogenesis in the testis. To perform this role, the stem cell must self replicate as well as produce daughter cells that can expand and differentiate to form spermatozoa. Despite the central importance of the spermatogonial stem cell to male reproduction, little is known about its morphological or biochemical characteristics. This results, in part, from the fact that spermatogonial stem cells are an extremely rare cell population in the testis, and techniques for their enrichment are just beginning to be established. In this investigation, we used a multiparameter selection strategy, combining the in vivo cryptorchid testis model with in vitro fluorescence-activated cell sorting analysis. Cryptorchid testis cells were fractionated by fluorescence-activated cell sorting analysis based on light-scattering properties and expression of the cell surface molecules α6-integrin, αv-integrin, and the c-kit receptor. Two important observations emerged from these analyses. First, spermatogonial stem cells from the adult cryptorchid testis express little or no c-kit. Second, the most effective enrichment strategy, in this study, selected cells with low side scatter light-scattering properties, positive staining for α6-integrin, and negative or low αv-integrin expression, and resulted in a 166-fold enrichment of spermatogonial stem cells. Identification of these characteristics will allow further purification of these valuable cells and facilitate the investigation of molecular mechanisms governing spermatogonial stem cell self renewal and hierarchical differentiation.