Detecção, transmissão e efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris na qualidade fisiológica de sementes de brócolis

A detecção, a transmissão e o efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) na qualidade fisiológica de sementes de brócolis (Brassica oleracea var. italica) foram avaliadas, a partir de sementes obtidas de plantas ("Baron, Flórida, Hana Midori Sakata, Precoce Piracicaba de Verão, Ramoso Santana e Sabre") inoculadas com a bactéria, em condições de campo. Para a detecção do patógeno nas sementes foram utilizados os meios de cultura semi-seletivos: SX ágar, NSCAA e BSCAA; a taxa de transmissão da bactéria pelas sementes às plântulas foi avaliada usando semeadura em areia e meio de cultura contido em tubo de ensaio. Para a avaliação da qualidade fisiológica das sementes foram realizados o teste padrão de germinação e os testes de vigor: envelhecimento acelerado, índice de velocidade de emergência, crescimento das plântulas e massa seca. De acordo com os resultados, o meio de cultura semi-seletivo NSCAA foi mais eficaz para detectar Xcc em sementes de brócolis; não houve diferença significativa entre os genótipos na taxa de transmissão da bactéria pelas sementes e Xcc não afetou a germinação e o vigor das sementes.

Detecção, transmissão e efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris na qualidade fisiológica de sementes de brócolis

A detecção, a transmissão e o efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) na qualidade fisiológica de sementes de brócolis (Brassica oleracea var. italica) foram avaliados, a partir de sementes obtidas de plantas ("Baron, Flórida, Hana Midori Sakata, Precoce Piracicaba de Verão, Ramoso Santana e Sabre") inoculadas com a bactéria, em condições de campo. Para a detecção do patógeno nas sementes foram utilizados os meios de cultura semi-seletivos: SX ágar, NSCAA e BSCAA; a taxa de transmissão da bactéria pelas sementes às plântulas foi avaliada usando semeadura em areia e meio de cultura contido em tubo de ensaio. Para a avaliação da qualidade fisiológica de sementes foram realizados o teste padrão de germinação e os testes de vigor: envelhecimento acelerado, índice de velocidade de emergência, crescimento de plântulas e massa seca. De acordo com os resultados, o meio de cultura semi-seletivo NSCAA foi mais eficaz para detectar Xcc em sementes de brócolis; não houve diferença significativa entre os genótipos na taxa de transmissão da bactéria pelas sementes e Xcc não afetou a germinação e o vigor das sementes.

Especificidade de hospedeiro nas interações Xanthomonas campestris pv. campestris - brássicas

Face às escassas informações acerca da variabilidade patogênica de isolados brasileiros de Xanthomonas campestris pv. campestris, realizou-se um estudo para avaliar a especificidade patogênica de trinta e três isolados do patógeno, provenientes de várias regiões do Brasil e do exterior, a oito espécies de brássicas, através de inoculação por meio de injeção da suspensão bacteriana nas folhas. Desse total, 12 isolados foram obtidos de couve-comum (Brassica oleracea var. acephala), nove de repolho (B. oleracea var. capitata), cinco de couve-flor (B. oleracea var. botrytis), dois de canola (B. napus), um de brócolos (B. oleracea var. italica), um de couve-chinesa (B. chinensis), um de couve-rábano (B. oleracea var. gongylodes) e dois de rabanete (Raphanus sativus). A avaliação da patogenicidade dos isolados da bactéria, frente aos hospedeiros em estudo, demonstrou que 14 deles não apresentaram especificidade, originando sintomas em todas as diferentes plantas inoculadas. Os 19 isolados restantes, entretanto, apresentaram relativo grau de especificidade, não causando doença em uma ou mais das plantas inoculadas.

Estudos dos constituintes químicos e atividade antibacteriana do óleo essencial de Lippia gracilis a Xanthomonas campestris pv. viticola "in vitro"

Este trabalho foi realizado com o objetivo de estudar a eficácia de óleos essenciais de Lippia gracilis, no crescimento in vitro de Xcv. Foram utilizados oito óleos extraídos de L. gracilis, obtidos de diferentes manejos de cultivo, em três dosagens diferentes (200; 250 e 300 µL.L-1), testemunha com o oxicloreto de cobre (controle padrão) e a testemunha absoluta. A suscetibilidade do isolado Xcv3 aos óleos testados foi avaliada na primeira etapa pela presença e ausência do crescimento bacteriano e, na segunda etapa, pela porcentagem de inibição do crescimento bacteriano. A análise da composição química dos óleos essenciais extraídos de L. gracilis, mostrou, o carvacrol (73,9 a 77%) como composto majoritário e o timol (4,9 a 10,3%). Os óleos referentes aos tratamentos 01, 06 e 07 foram os que proporcionaram maiores porcentagens de inibição no crescimento bacteriano de Xcv: 94,75%, 96,50% e 94,02%, respectivamente, sendo superiores ao oxicloreto de cobre (49,6%).

Palinotaxonomia de espécies brasileiras de Salacia L. (Hippocrateaceae)

O estudo palinotaxonômico de Salacia L. teve como objetivo contribuir para a melhor caracterização, circunscrição e delimitação deste gênero. Os grãos de pólen de 21 espécies de Salacia foram acetolisados, medidos, descritos e ilustrados sob microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura (MEV). A análise sob MEV foi utilizada visando a elucidação de dúvidas sobre a ornamentação da exina. Constatou-se que os grãos de pólen são predominantemente de tamanho médio, reticulados a microrreticulados, 3-colporados, geralmente com uma característica área apertural proeminente. Salacia é um gênero estenopolínico. Entretanto, o pólen permitiu a confecção da chave polínica e a separação de diferentes espécies ou grupo de espécies de Salacia com base nos resultados obtidos sob microscopia de luz. O presente trabalho confirmou, por meio dos grãos de pólen, a circunscrição e a delimitação genérica da Hippocrateaceae da América do Sul.

Copper accumulation in Xanthomonas campestris pv. vesicatoria

A strain of Xanthomonas campestris pv. vesicatoria showing resistance to 1.2 mM cupric sulfate was analyzed by atomic absorption spectroscopy and ESI (electron spectrophotometry imaging). Accumulation of copper was detected in the periphery of the cell membrane region, suggesting that the mechanism of copper resistance is similar to that previously described for Pseudomonas species. The ESI technique was used to detect copper in the membrane region. Copper-resistance in X. campestris pv. vesicatoria 484 is inducible and occurs by accumulation of the metal and not by efflux mechanism as has been suggested. The growth curve also showed that this system is inducible.

Adverse pregnancy outcome in rats following exposure to a Salacia reticulata (Celastraceae) root extract

The root extract of Salacia reticulata Wight (family: Celastraceae) is used in Sri Lanka by traditional practitioners as a herbal therapy for glycemic control even during pregnancy. It is recognized that some clinically used antidiabetic drugs have harmful effects on pregnancy but the effects of the S. reticulata root extract on reproductive outcome is unknown and deserves examination. We determined the effects of the S. reticulata root extract on the reproductive outcome of Wistar rats (250-260 g) when administered orally (10 g/kg) during early (days 1-7) and mid- (days 7-14) pregnancy. The root extract significantly (P<0.05) enhanced post-implantation losses (control vs treatment: early pregnancy, 4.7 ± 2.4 vs 49.3 ± 13%; mid-pregnancy, 4.7 ± 2.4 vs 41.7 ± 16.1%). Gestational length was unaltered but the pups born had a low birth weight (P<0.05) (early pregnancy, 6.8 ± 0.1 vs 5.3 ± 0.1 g; mid-pregnancy, 6.8 ± 0.1 vs 5.0 ± 0.1 g) and low birth index (P<0.05) (early pregnancy, 95.2 ± 2.4 vs 50.7 ± 12.9%; mid-pregnancy, 95.2 ± 2.4 vs 58.3 ± 16.1%), fetal survival ratio (P<0.05) (early pregnancy, 95.2 ± 2.4 vs 50.7 ± 12.9; mid-pregnancy, 95.2 ± 2.4 vs 58.3 ± 16.1), and viability index (P<0.05) (early pregnancy, 94.9 ± 2.6 vs 49.5 ± 12.5%; mid-pregnancy, 94.9 ± 2.6 vs 57.1 ± 16.1%). However, the root extract was non-teratogenic. We conclude that the S. reticulata root extract can be hazardous to successful pregnancy in women and should not be used in pregnancy complicated by diabetes.

Formulação de meios de cultivo à base de soro de leite para a produção de goma xantana por X. Campestris C7L

A goma xantana é um polissacarídeo microbiano de grande significado comercial especialmente para a indústria de alimentos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de xantana em diferentes meios de cultura à base de soro de leite utilizando o isolado Xanthomonas campestris C7L. Dentre as formulações testadas o meio de soro de leite integral produziu maior viscosidade e concentração final de xantana. Um sistema combinando soro integral (0,35% de proteína) e soro filtrado (0,18%de proteína) foi proposto. Na primeira fase em soro integral a produção de xantana foi de 13g/L e 45% de rendimento,enquanto que na segunda fase utilizando-se soro filtrado obteve-se um total de 28g/L de xantana e 75% de rendimento. O rendimento geral do processo foi de 55% e a viscosidade final do meio atingiu 18000cP. As soluções de xantana produzidas em soro de leite apresentaram comportamento pseudoplástico e tixotrópico característicos deste tipo de polímero. O isolado C7L demonstrou capacidade de produzir gomas de alta viscosidade e qualidade em soro de leite, constituindo uma alternativa promissora para a produção industrial de goma xantana a partir deste subproduto.

Extracción y caracterización química,nutricional y funcional de proteinas de la semilla de Brassica campestris L.

Tesis (Doctorado en ciencias con Especialidad en alimentos) UANL

Stability of plasmid profile of highly virulent races of Xanthomonas campestris pv. malvacearum during storage and subculturing

Four races of Xanthomonas campestris pv. mal-vacearum (Xcm) viz. races 23, 27 and 32 (isolated from Gossypium hirsutum) and race 23b (from Gossypium barbadense) were studied. The plasmid profile of the natural isolates showed four plasmids in races 23 and 23b (ca. 60, 40, 23, 8.2 kb), five in race 27 (ca. 60, 40, 23, 8.2 and 3.7 kb) and six in race 32 (ca. 60, 40, 23, 8.2, 3.7 and 1.6 kb). Continuously sub-cultured laboratory isolates of the Xcm races resulted in the loss of all but two plasmids, ca. 60 and 40 kb in size. When the laboratory isolates were passed through cotton (Gossypium hirsutum), they regained certain plasmids so that four plasmids were found in race 23 and 23b (ca. 60, 40, 23 and 8.2 kb), five in race 27 (ca. 60, 40, 23, 8.2 and 3.7 kb) and six in race 32 (ca. 60, 40, 23, 8.2, 3.7 and 1.6 kb), which was more or less similar to the original isolates. The isolates recovered from cotton maintained their plasmid profile (except for minor changes in the miniplasmids) after storage for six months at -70degreesC in 50% glycerol. It is suggested that plasmid profiles among highly virulent races of Xcm are unstable during repeated sub-culturing at room temperature, resulting in rapid loss of some plasmids. However, when the cultures were sub-cultured and stored at -70degreesC the plasmid profile was fairly stable except for the miniplasmids (ca. 3.7 and 1.6 kb).

Stability in miniplasmids of Xanthomonas campestris pv. malvacearum during subculturing and storage - Abstract 7

Abstract 7

Cell-cell signal-dependent dynamic interactions between HD-GYP and GGDEF domain proteins mediate virulence in Xanthomonas campestris

RpfG is a paradigm for a class of widespread bacterial two-component regulators with a CheY-like receiver domain attached to a histidine-aspartic acid-glycine-tyrosine-proline (HD-GYP) cyclic di-GMP phosphodiesterase domain. In the plant pathogen Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc), a two-component system comprising RpfG and the complex sensor kinase RpfC is implicated in sensing and responding to the diffusible signaling factor (DSF), which is essential for cell-cell signaling. RpfF is involved in synthesizing DSF, and mutations of rpfF, rpfG, or rpfC lead to a coordinate reduction in the synthesis of virulence factors such as extracellular enzymes, biofilm structure, and motility. Using yeast two-hybrid analysis and fluorescence resonance energy transfer experiments in Xcc, we show that the physical interaction of RpfG with two proteins with diguanylate cyclase (GGDEF) domains controls a subset of RpfG-regulated virulence functions. RpfG interactions were abolished by alanine substitutions of the three residues of the conserved GYP motif in the HD-GYP domain. Changing the GYP motif or deletion of the two GGDEF-domain proteins reduced Xcc motility but not the synthesis of extracellular enzymes or biofilm formation. RpfG-GGDEF interactions are dynamic and depend on DSF signaling, being reduced in the rpfF mutant but restored by DSF addition. The results are consistent with a model in which DSF signal transduction controlling motility depends on a highly regulated, dynamic interaction of proteins that influence the localized expression of cyclic di-GMP.

Detecção, transmissão e efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris na qualidade fisiológica de sementes de brócolis

A detecção, a transmissão e o efeito de Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) na qualidade fisiológica de sementes de brócolis (Brassica oleracea var. italica) foram avaliados, a partir de sementes obtidas de plantas (Baron, Flórida, Hana Midori Sakata, Precoce Piracicaba de Verão, Ramoso Santana e Sabre) inoculadas com a bactéria, em condições de campo. Para a detecção do patógeno nas sementes foram utilizados os meios de cultura semi-seletivos: SX ágar, NSCAA e BSCAA; a taxa de transmissão da bactéria pelas sementes às plântulas foi avaliada usando semeadura em areia e meio de cultura contido em tubo de ensaio. Para a avaliação da qualidade fisiológica de sementes foram realizados o teste padrão de germinação e os testes de vigor: envelhecimento acelerado, índice de velocidade de emergência, crescimento de plântulas e massa seca. de acordo com os resultados, o meio de cultura semi-seletivo NSCAA foi mais eficaz para detectar Xcc em sementes de brócolis; não houve diferença significativa entre os genótipos na taxa de transmissão da bactéria pelas sementes e Xcc não afetou a germinação e o vigor das sementes.

New Culture Medium to Xanthan Production by Xanthomonas campestris pv. campestris

Xanthan is a important biopolymer for commercial purpose and it is produced in two stages by Xanthomonas campestris. In the first one, the bacterium is cultivated in the complex medium enriched in nitrogen and the biomass produced is used as inoculum for the next stage in which the gum is produced in another medium. In this work a new medium for the first stage is proposed in place of currently used YM medium. Different formulated growth media were studied and the correspondent biomass produced was analysed as inoculum for the second stage. The inoculum and gum were produced by batch process in shaker at 27A degrees C in pH 6.0 and at 30A degrees C in pH 7.0, respectively. The gum was precipitated with ethanol (3:1 v/v). The dryed biomass and xathan gum produced were determined by drying in oven at 105 and 40A degrees C, respectively. The viscosity of the fermentation broth and 1% gum solution in water were determined in Brookfield viscometer. The formulated medium presented the increase in gum production (30%), broth (136%) and 1% gum solution viscosity (60%) compared to YM, besides the inferior cost. The results showed the importance of the quality of the inoculum from the first stage of the culture which influenced on the gum viscosity in the second stage.