Estudio de genes de la familia MYB relacionados con la tolerancia al estrés salino en Lotus spp

Resumen: El género Lotus comprende alrededor de 100 especies anuales y perennes distribuidas en todo el mundo. Algunas de las especies de Lotus muestran un gran potencial para la adaptación a estreses abióticos. Entre estas especies se encuentra Lotus tenuis, especie herbácea, que se encuentra naturalizada en los bajos salinos alcalinos de la Pampa Deprimida hace más de 50 años y es muy valorada como forrajera en los sistemas ganaderos. Como características principales se encuentra la variabilidad genética de sus poblaciones, la plasticidad genotípica de las plantas, su tolerancia al anegamiento y a la salinidad. Teniendo en cuenta la importancia de los daños causados por el estrés en las plantas, sería de gran utilidad comprender cuales son los mecanismos moleculares a través de los cuales las plantas detectan el estrés y transducen la señal dentro de las células para generar respuestas adaptativas y de esta manera poder diseñar estrategias que permitan mejorar la tolerancia al estrés de los cultivos. Uno de los mecanismos de la regulación de la expresión génica es a través de los factores de transcripción (FT). Estos, entre otras funciones, regulan las respuestas adaptativas, por eso sería importante conocer cuáles son los genes involucrados en estas respuestas. Varias familias de FT se encuentran involucradas en la respuesta al estrés abiótico en plantas, una de ellas es la familia de proteínas MYB, siendo esta una de las más numerosas en las plantas. El objetivo de este trabajo es identificar FT tipo MYB en L. tenuis y evaluar su relación con la respuesta adaptativa al estrés salino. Para este experimento se extrajo ADN de hojas de plantas que crecieron en condiciones normales y ARN de raíces de plántulas que permanecieron bajo condiciones de salinidad por 8 y 24 horas, de dos familias de medio hermano (FMH) de L. tenuis, una susceptible y otra tolerante a la salinidad. Se realizaron varias reacciones de PCR y RT-PCR, que arrojaron como resultado amplificación del fragmento genómico y del transcrito con el tamaño esperado. Una vez secuenciados estos fragmentos se determinó la presencia de FT tipo MYB en L. tenuis. Analizando los resultados preliminares de la expresión relativa de los genes MYB estudiados bajo condiciones de estrés salino, se observó expresión bajo condiciones de salinidad como en condiciones normales de crecimiento, lo que sugiere que estos genes no solo responden al estrés salino sino también a otros estreses o factores. Para el gen MYB 102_1420 se observó mayor expresión del tratamiento con solución salina a las 24 horas que a las 8 horas. Al comparar ambas FMH vemos que el comportamiento es similar. Para el gen MYB 102_950 se observó que la FMH susceptible bajo condiciones de salinidad a las 8 horas presenta mayor expresión que a las 24 horas, con la FMH tolerante sucede todo lo contrario. El estudio de la capacidad de adaptación y tolerancia a los distintos estreses y el control de las respuestas adaptativas por medio de los FT en L. tenuis permitirá contribuir a mejorar su adaptación en la Pampa Deprimida, y de esta manera poder identificar poblaciones aptas para ser cultivadas en suelos salinos.

Respuesta a la fertilización fosforada en campo natural con presencia de Lotus tenuis en el partido de Olavarría, Cuenca del Salado, provincia de Buenos Aires

Resumen: La pampa deprimida bonaerense (región denominada Cuenca del Salado) es considerada la zona de cría más importante del país y su principal recurso forrajero son los pastizales naturales. Allí se encuentra Lotus tenuis como especie herbácea naturalizada y muy valorada por su aporte a la oferta forrajera de los sistemas ganaderos de la región. En condiciones de campos naturales en bajos dulces (con horizonte superficial de pH cercano a la neutralidad) el agregado de fósforo mediante la fertilización incrementaría la presencia de leguminosas, mejorando la receptividad y calidad de los forrajes y por ende, la producción de carne. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la respuesta del pastizal natural, medida como producción de materia seca, utilizando distintas dosis de fertilización fosforada (NPK 5-40-0). Se realizó un ensayo en un establecimiento ubicado en las cercanías de la ciudad de Olavarría, en el paraje rural Pourtalé, Provincia de Buenos Aires, utilizando un diseño de bloques al azar con tres repeticiones. Los tratamientos fueron 0, 50 y 120 kg.ha-1 realizándose cinco muestreos luego de la fertilización en el transcurso de un año, en los cuales se determinó la producción de materia seca como estimación de la disponibilidad forrajera. La producción acumulada promedio para el tratamiento con 0kg.ha-1 fue de 2793kgMS.ha-1, con 50kg.ha-1 fue de 5159 kgMS.ha-1 y con 120kg.ha-1 fue de 7206 kgMS.ha-1. Para analizar estadísticamente los resultados, se realizó un análisis de varianza mediante un software estadístico (Infostat), donde se pudo observar diferencias significativas entre el testigo y el tratamiento con 120kg ha-1 (p-valor<0,05).

Variabilidad molecular en una población de lotus tenuis tolerante a la salinidad

Resumen: Lotus tenuis Waldst et Kit (ex Lotus glaber Mill) (2n=2x=12), es una leguminosa perenne, utilizada como forrajera, que se introdujo en suelos salinoalcalinos de la Pampa Deprimida de la Provincia de Buenos Aires. L. tenuis presenta variabilidad genética para caracteres asociados a la tolerancia a salinidad que esta siendo explorada y explotada en programas de mejoramiento. El estudio de la variabilidad molecular en esta especie permitirá ayudar a los programas de mejoramiento a incrementar la adaptación de la especie en la Pampa Deprimida, permitiendo identificar poblaciones aptas para lograr alta productividad en los suelos salinos de la región. Mediante este trabajo se buscó cuantificar la variabilidad molecular de una población de L. tenuis tolerante a alta salinidad, para lo cual se extrajo ADN de 23 plantas y se utilizaron 8 marcadores ISSRs (Inter Secuencias Simples Repetidas) con la técnica de PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa). Con el uso de los programas de análisis molecular Structure (Pritchard et al., 2000), PowerMarker (Liu et al., 2005) y Arlequín (Excoffier et al., 2010), se estimó la estructura genética, varianza, medidas de diversidad y de distancia genética. A su vez se realizó a modo de complemento una comparación entre la población tolerante y otra población de L. tenuis susceptible a salinidad, para estimar la variabilidad genética entre poblaciones e identificar bandas especificas asociadas a la tolerancia a salinidad. El número obtenido de bandas presentes en la población tolerante fue de 73, que permitió realizar un estudio de la variabilidad molecular. La estructura genética representada por Structurama y Structure arrojó un K=1, observándose a las 23 plantas tolerantes agrupadas en una misma población. El uso de los 8 marcadores seleccionados permitieron estudiar la variabilidad molecular y la estructura genética de las poblaciones de L. tenuis, identificándose un total de 117 bandas totales. El análisis de la estructura poblacional reveló la existencia de una mayor homogeneidad en los individuos de la población tolerante que en la población susceptible. Los marcadores ISSRs desarrollados en este trabajo podrán ser utilizados en otros programas de mejoramiento genético de L. tenuis, para evaluar la variabilidad molecular presente en otras poblaciones de la especie

Electrowetting On A Lotus Leaf

Electrowetting on dielectrics has been widely used to manipulate and control microliter or nanoliter liquids in micro-total-analysis systems and laboratory on a chip. We carried out experiments on electrowetting on a lotus leaf, which is quite different from the equipotential plate used in conventional electrowetting. This has not been reported in the past. The lotus leaf is superhydrophobic and a weak conductor, so the droplet can be easily actuated on it through electrical potential gradient. The capillary motion of the droplet was recorded by a high-speed camera. The droplet moved toward the counterelectrode to fulfill the actuation. The actuation speed could be of the order of 10 mm/s. The actuation time is of the order of 10 ms.

Electrowetting on a lotus leaf

Electrowetting on dielectrics has been widely used to manipulate and control microliter or nanoliter liquids in micro-total-analysis systems and laboratory on a chip. We carried out experiments on electrowetting on a lotus leaf which is quite different from the equipotential plate used in conventional electrowetting. This has not been reported in the past. The lotus leaf is superhydrophobic and a weak conductor so the droplet can be easily actuated on it through electrical potential gradient. The capillary motion of the droplet was recorded by a high-speed camera. The droplet moved toward the counterelectrode to fulfill the actuation. The actuation speed could be of the order of 10 mm/s. The actuation time is of the order of 10 ms.

Diferencias en la aplicación del programa Hocus y Lotus y sus repercusiones en el aprendizaje de una nueva lengua en educación primaria

389 p.

Effect of environmental conditions on the distribution of Pacific mackerel (Scomber japonicus) larvae in the California Current system

We modeled the probability of capturing Pacif ic mackerel (Scomber japonicus) larvae as a function of environmental variables for the Southern California Bight (SCB) most years from 1951 through 2008 and Mexican waters offshore of Baja California from 1951 through 1984. The model exhibited acceptable fit, as indicated by the area under a receiver-operating-characteristic curve of 0.80 but was inconsistent with the zero catches that occurred frequently in the 2000s. Two types of spawners overlapped spatially within the survey area: those that exhibited peak spawning during April in the SCB at about 15.5°C and a smaller group that exhibited peak spawning in August near Punta Eugenia, Mexico, at 20°C or greater. The SCB generally had greater zooplankton than Mexican waters but less appropriate (lower) geostrophic f lows. Mexican waters generally exhibited greater predicted habitat quality than the SCB in cold years. Predicted quality of the habitat in the SCB was greater from the 1980s to 2008 than in the earlier years of the survey primarily because temperatures and geostrophic flows were more appropriate for larvae. However, stock size the previous year had a larger effect on predictions than any environmental variable, indicating that larval Pacific mackerel did not fully occupy the suitable habitat during most years.

Length-based estimates of vital statistics in threadfin bream (Nemipterus japonicus) from Bay of Bengal, Bangladesh

ELEFAN 0, ELEFAN I and ELEFAN II were used to estimate vital statistics of Nemipterus japonicus from length-frequency data sampled along the coast of Bangladesh. The parameters L and K were estimated at 24.5 cm and 0.94 year super(-1). The values of M and F were found to be 1.81 and 1.58 year super(-1), respectively. The fish recruit to the fishery during May-June and September-October.

Growth and length-weight parameters of Pacific mackerel (Scomber japonicus) in the Gulf of Guayaquil, Ecuador

The seasonally oscillating growth parameters and length-weight relationships for Scomber japonicus caught in the Gulf of Guayaquil, Ecuador, were determined based on length-frequency data from 1989 to 1996, using the FiSAT software package of Gayanilo et al. (1996). Estimates of growth parameters are in general agreement with previous studies on the same species. Results also imply that the growth of Scomber japonicus slows down during the cold season by approximately 50% with respect to the average growth. The mean value of the power b is significantly larger than 3, indicating that the model of allometric growth should be used for the length-weight relationship and calculation of the condition factor.

麦冬（Ophiopogon japonicus (L.f)Ker Gawl）花粉的发育、精子结构及绒毡层的变化

麦冬的花粉发育自小孢子母细胞开始，经连续型减数分裂，产生游离的单细胞小孢子;小孢子进一步发育，经两次有丝分裂，最终发育为包含有二个精细胞和一个营养核的成熟花粉。在此发育过程中，内质网、线粒体、高尔基体和脂体含量丰富。 麦冬的精子细胞为伸长的细胞，具有椭圆形的头部和长长的尾部细胞质突起，细胞器较少，是线粒体，但缺乏质体，没有明显的二型性;其精细胞伸长的尾部细胞质突起是在生殖细胞有丝分裂时产生，而不是以后由精子细胞本身发育;两个精子细胞之间除了头部的联结外，还有尾部的联接，但没有任何结构上的联结;一个精子细胞的头部常与营养核十分靠近;另外，在精子与精子之间或精子与营养核之间的贴近点上，常可见到多层膜的结构，根据精细胞之间的联结和精细胞与营养核之间的靠近，推测麦冬的成熟花粉中存在雄性生殖单位。 麦冬的花粉壁发育在四分体后期开始，首先产生纤维状的原外壁，由原外壁上依次发育出原基柱层、原覆盖层和原基足层，当四分体分离时，花粉外壁外层已发育完全;在单细胞小孢子时期，外壁内层发育，为极薄的一层，同时内壁－1开始发育;到了二细胞花粉时期，内壁－1开始发育;到了二细胞花粉时期，内壁－1发育完全，并在萌发孔处发育特殊的蜂窝状结构;紧接内壁－1层，发育出内壁－2层。在其壁发育过程中，花粉中大量沿周围平行于花粉壁排列的内质网可能与花粉壁的形成有关。 麦冬的绒毡层发育属分泌型。在小孢子母细胞时期，绒毡层细胞达到了发育的顶峰，此时，细胞器非常丰富，大量的线粒体、高尔基体和质体，尤为内质网含量最为丰富;原乌氏体出现较早，小孢子母细胞时期绒毡层细胞中就已出现;四分体时期，大量乌氏体被排入内切向面的质膜和纤维素壁之间;到了小孢子早期，绒毡层细胞失去细胞壁，原乌氏体分布在质膜的凹陷处，孢粉素物质开始在其上沉积，发育为乌氏体，乌氏体有单个和复合两种类型;到花粉成熟时，绒毡层细胞彻底解体。