Estudo soroepidemiológico de Brucella abortus, Toxoplasma gondii e vírus da artrite encefalite caprina em rebanhos caprinos nas unidades produtoras dos estados do Pará e Maranhão

Pesquisou-se a frequência da ocorrência de anticorpos anti-Brucella abortus, Toxoplasma gondii e vírus da artrite encefalite caprina (CAEV) em caprinos de 14 unidades produtoras localizadas dos Estados do Pará e Maranhão. No Estado do Pará foram analisados animais dos municípios de Benevides, Castanhal, Santa Izabel do Pará e Moju e no Estado do Maranhão, o município de Chapadinha. Os testes sorológicos realizados para o diagnóstico da brucelose foi o teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), como teste de triagem, e o 2- Mercaptoetanol (2-Me), como teste confirmatório. Para as análises de toxoplasmose foi utilizado a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e para CAEV Imunodifusão de Gel de Agarose (IDGA). O resultado das análises de brucelose mostrou-se negativo para 100,0% das amostras analisadas. Para toxoplasmose e CAEV a frequência obtida foi 23,5% (97/412) e 21,6% (85/393), respectivamente. Foi observada diferença estatística na relação entre a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e a faixa etária dos caprinos, mostrando que animais com idade superior a 24 meses tiveram mais risco de estarem infectados quando comparados com animais mais novos OR= 2,15 (IC 95% 1,19 – 3,88). Já os fatores de risco encontrados para CAEV foram: falta de conhecimento da doença OR=6,45 (IC 95% 2,88-14,47); a não utilização de material descartável, OR=10,85 (IC 95% 4,85-24,28); sistema de criação extensivo OR=10,85 (IC 95% 4,85-24,28); sistema de criação semi-extensivo OR=3,71(IC 95% 1,64-8,39) e manejo OR=11,4 (IC 95% 5,51-23,60). Conclui-se que as unidades produtoras de caprinos dos Estados do Pará e Maranhão apresentam positividade em seus rebanhos para toxoplasmose e CAEV.

Infecção transplacentária e intrauterina por Brucella abortus em búfalos (Bubalus bubalis)

O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de Brucella abortus e as lesões causadas por esse agente nos anexos fetais e nos fetos de búfalas. Para isso, 20 búfalas em diversos meses de gestação, sorologicamente positivas para brucelose, foram submetidas ao abate sanitário. A idade fetal foi determinada através de exames ultrassonográficos associados à mensuração dos fetos durante a necropsia. Do útero fechado desses animais foram coletadas amostras para histopatologia e qPCR. A partir do segundo mês de gestação foi possível detectar a presença de DNA de B. abortus em líquido amniótico, líquido alantoide e em útero e, a partir do quinto mês, na placenta, coração, baço, rim, pulmão, intestino, fígado e linfonodos dos fetos. Os principais achados anatomopatológicos foram placentite fibrinopurulenta necrótica e endometrite supurativa crônica.

Perfil sorológico anti-Brucella abortus em bezerras bubalinas vacinadas com a B19, pelas provas do antígeno acidificado tamponado(corado com rosa bengala), 2-mercaptoetanol e fixação de complemento

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Comparison of Brucella agar, CITA and Farrel media for selective isolation of Brucella abortus from semen of bovine bulls

Brucellosis remains as a public health concern worldwide. In domestic animals, the disease is characterized by reproductive disorders in male and female. Besides extensive use of serological tests and recent development of molecular biology techniques, microbiological culture of Brucella species is yet considered a “gold standard” method for diagnosis. Here, semen of 335 bovine bulls was subjected simultaneously to microbiological culture in Brucella agar, Farrell media, and CITA media to evaluate comparatively the best selective media for isolation of Brucella sp. Among all 335 samples, B. abortus B19 strain was isolated from semen of five (1.49%) bulls using the three selective media. However, Farrell media was considered the best selective media for microbiological diagnosis, because of allowed isolation of B. abortus B19 strain from bull semen without bacterial commensal or fungal contamination of plates.

Estudo epidemiológico sobre as perdas reprodutivas em bovinos leiteiros: ocorrência de neospora caninum, brucella abortus, herpesvírus bovino tipo-1 e leptospira spp. em uma propriedade do município de São Carlos-SP

The aim of this work was draw an endemic level of reproductive losses and determine positivity for four infectious agents related to reproductive problems in dairy cattle on a property in São Carlos city. Blood serum samples were collected of 142 breeding animals more than two years old, from which 21.1% showed history of abortions or stillbirths in at least one pregnancy. Immunofluorescent antibody technique, tamponated acidified antigen test, serum neutralization technique and microscopic agglutination test, were used for detection of antibody anti-Neospora caninum, anti- Brucella abortus, anti-Bovine Herpesvirus Type-1 (BoHV-1) and anti-Leptospira spp , respectively. The serological tests carried out showed that 28.9% of the animals had titers greater than or equal to 100 of anti-Neospora caninum. Viral neutralization tests demonstrated that 26.8% of the animals had titers greater or equal to 256 for antibody anti-BoHV-1.Only 7.7% of the animals studied had titers equal to or greater than 100 in the microscopic agglutination test for Leptospira spp. There weren’t observed positive reactions to the tamponated acidified antigen test for diagnosis of bovine brucellosis. The study suggests the presence of BoHV-1, N. caninum and Leptospira spp in contact with dairy cattle property and could be involved in the occurrence of abortions and stillbirths in cattle. Reproductive losses are endemic and implies a possible behavior of chronic infections caused by these microorganisms.

Experimental Infection of Richardson’s Ground Squirrels (Spermophilus Richardsonii ) With Attenuated and Virulent Strains pf Brucella abortus

A previous investigation of the safety of Brucella abortus strain RB51 (sRB51) in various nontarget species suggested that Richardson’s ground squirrels (Spermophilus richardsonii) may develop persistent infections when orally inoculated with the vaccine. In the present study, sRB51, B. abortus strain 19 (s19), and virulent B. abortus strain 9941 (s9941) were administered orally to Richardson’s ground squirrels to further characterize B. abortus infection in this species. Six groups of nongravid ground squirrels were orally inoculated with 6x108 colony forming units (cfu) sRB51 (n=10), 2.5x104 cfu s19 (n=10), 2.5x107 cfu s19 (n=6), 1.3x106 cfu s9941 (n=5), 2.1x108 cfu s9941 (n=5), or vaccine diluent (control; n=4). One of five animals in the lower-dose s19 group and two of three animals in the higher-dose s19 group showed persistence of bacteria in various tissues at 14 wk post-inoculation (PI). At 18 wk PI, one of five animals in the sRB51 group and one of five animals in the high-dose s9941 group were culture positive. Although we did detect some persistence of B. abortus strains at 18 wk, we found no evidence of pathology caused by B. abortus strains in nonpregnant Richardson’s ground squirrels based on clinical signs, gross lesions, and microscopic lesions.

Determinación de la prevalencia serológica de brucella abortus, toxoplasma gondii, sarcocystis spp y los factores de riesgo asociados en estudiantes de medicina veterinaria de la Universidad de la Salle

Tesis (Médico Veterinario). -- Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Programa de Medicina Veterinaria, 2013

Proteômica aplicada a Brucella abortus visando busca de alvos para imunoproteção e diagnóstico

2015

Estudo da susceptibilidade aos antimicrobianos de estirpes de brucella suis

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial e representa um importante problema de saúde pública em muitos países em desenvolvimento. Preocupante é, também, a emergência da resistência bacteriana aos antimicrobianos, a nível mundial. Do nosso conhecimento, em Portugal, não existem estudos publicados sobre a susceptibilidade in vitro de Brucella spp a antimicrobianos. O presente estudo teve como objectivo a avaliação da susceptibilidade aos antimicrobianos de Brucella suis e sua comparação com estirpes de Brucella melitensis e Brucella abortus. Para tal, foi determinada em 89 estirpes bacterianas (75 de B. suis, 11 de B. melitensis e 3 de B. abortus) a Concentração Mínima Inibitória para a tetraciclina, doxiciclina, estreptomicina, gentamicina, trimetoprim, sulfametoxazol, rifampicina e polimixina-B. A maioria das estirpes em estudo mostrou ser suscetível à tetraciclina, doxiciclina, gentamicina, estreptomicina e rifampicina. Detectaram-se diferenças significativas na susceptibilidade entre as várias espécies e biovares à polimixina-B. Uma estirpe de campo de B. suis biovar 2 revelou um comportamento atípico em relação à estreptomicina, gentamicina e rifampicina. Sugere-se, como trabalho futuro, o estudo mais aprofundado desta estirpe, a nível molecular, para detecção de genes responsáveis pelo seu comportamento face aos antimicrobianos em questão. Os resultados obtidos poderão servir como base de dados e de comparação por parte de outros autores, em estudos futuros.

Type III secretion homologs are present in Brucella melitensis, B-ovis, and B-suis biovars 1, 2, and 3

Protein sequences from characterized type III secretion (TTS) systems were used as probes in silico to identify several TTS gene homologs in the genome sequence of Brucella suis biovar 1 strain 1330. Four of the genes, named flhB, fliP, fliR, and fliF on the basis of greatest homologies to known flagellar apparatus proteins, were targeted in PCR and hybridization assays to determine their distribution among other Brucella nomen species and biovars. The results indicated that flhB, fliP, fliR and fliF are present in Brucella melitensis, Brucella ovis, and Brucella suis biovars 1, 2 and 3. Similar homologos have been reported previously in Brucella abortus. Using RT-PCR assays, we were unable to detect any expression of these genes. It is not yet known whether the genes are the cryptic remnants of a flagellar system or are actively involved in a process contributing to pathogenicity or previously undetected motility, but they are distributed widely in Brucella and merit further study to determine their role.

Isolation of brucella spp from milk of brucellosis positive cows in São Paulo and Minas Gerais states

A brucelose é uma zoonose crônica de importância para a Saúde Pública. Considerando o pequeno número de dados brasileiros sobre a sua presença em leite cru e derivados não-pasteurizados, estudamos a presença de brucelas em leite de animais sorologicamente positivos. A soroaglutinação rápida (SAR), a soroaglutinação lenta (SAL) e a soroaglutinação lenta com tratamento do soro com 2-mercaptoetanol foram utilizados para identificar os animais positivos nas propriedades estudadas. Amostras diárias de 300 ml de leite foram colhidas por três dias de todos os quartos mamários produtivos (75 ml/teto). As amostras eram misturadas e centrifugadas. Parte do sedimento e do sobrenadante foi inoculada em meios de Farrel e Brodie-Sinton (BS) suplementados com agentes antimicrobianos. As placas e tubos foram cultivados por sete dias a 37ºC, em microaerofilia. As colônias suspeitas no meio BS foram imediatamente repicadas para ágar-Brucella, e cultivadas sob a mesma condição. Os microrganismos isolados foram submetidos a procedimentos de identificação, incluindo a coloração de Gram, requerimento de CO2, produção de H2S, atividade da urease e crescimento na presença de tionina e fucsina. Das 49 amostras examinadas, isolou-se Brucella abortus de 15 (30,61%). Os biótipos isolados foram: biótipo 1 em uma amostra (2,04%), biótipo 2 em oito (16,32%) e biótipo 3 em seis amostras (12,25%)

Detecção de Brucella spp. em leite bovino não pasteurizado através da Reação de Cadeia pela Polimerase (PCR)

Brucellosis is a zoonosis caused by bacteria of the genus Brucella. Man infection occurs through contact with reproductive secretions as placenta and its lochia, semen and penile secretion of infected animals or by consuming unpasteurized milk and dairy products. With the objective of investigating the presence of bacteria in milk, 30 samples of raw milk sold illegally in the region of Botucatu, São Paulo, Brazil, as well as 50 samples of milk delivered to a dairy industry previously to its pasteurization were evaluated by the polymerase chain reaction (PCR) technique. Of the 80 samples analyzed, 10 samples (12.5%) were positive and 70 (87.5%) were negative. Among the  positive samples,  5 (16.6%)  were from  illegal traders  and other  5  (10%) were obtained  from the dairy industry. Brucella spp. positivity shows that the pathogen is representatively present in Botucatu, São Paulo, Brazil, and the risk associated to public health due to the commercialization of illegal products without pasteurization is real.

Molecular epidemiology and antibiotic susceptibility of livestock Brucella melitensis isolates from Naryn Oblast, Kyrgyzstan.

The incidence of human brucellosis in Kyrgyzstan has been increasing in the last years and was identified as a priority disease needing most urgent control measures in the livestock population. The latest species identification of Brucella isolates in Kyrgyzstan was carried out in the 1960s and investigated the circulation of Brucella abortus, B. melitensis, B. ovis, and B. suis. However, supporting data and documentation of that experience are lacking. Therefore, typing of Brucella spp. and identification of the most important host species are necessary for the understanding of the main transmission routes and to adopt an effective brucellosis control policy in Kyrgyzstan. Overall, 17 B. melitensis strains from aborted fetuses of sheep and cattle isolated in the province of Naryn were studied. All strains were susceptible to trimethoprim-sulfamethoxazole, gentamicin, rifampin, ofloxacin, streptomycin, doxycycline, and ciprofloxacin. Multilocus variable number tandem repeat analysis showed low genetic diversity. Kyrgyz strains seem to be genetically associated with the Eastern Mediterranean group of the Brucella global phylogeny. We identified and confirmed transmission of B. melitensis to cattle and a close genetic relationship between B. melitensis strains isolated from sheep sharing the same pasture.

Studies in vaccinal immunity towards disease of the bovine placenta due to bacillus abortus (infectious abortion) /

"November 15, 1923"--Cover.

Etiologic diagnosis of bovine infectious abortion by PCR

Infectious abortion is a significant cause of reproductive failure and economic losses in cattle. The goal of this study was to detect nucleic acids of several infectious agents known to cause abortion including Arcanobacterium pyogenes, Bovine Herpesvirus 1, Brucella abortus, Campylobacter fetus subsp. venerealis, Chlamydophila abortus, Leptospira sp., Listeria monocytogenes, Salmonella sp., Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Neospora caninum, and Tritrichomonas foetus. Tissue homogenates from 42 fetuses and paraffin-embedded tissues from 28 fetuses and 14 placentas/endometrium were included in this study. Brucella abortus was detected in 14.2% (12/84) of the samples. Salmonella sp. DNA was amplified from 2 fetuses, and there was one positive for Neospora caninum, and another for Listeria monocytogenes. This PCR-based approach resulted in identification of the etiology in 19% of samples, or 20% if considered fetal tissues only.