Revisiting the Mechanism of the Triosephosphate Isomerase Reaction: The Role of the Fully Conserved Glutamic Acid 97 Residue

An analysis of 503 available triosephosphate isomerase sequences revealed nine fully conserved residues. Of these, four residues-K12, H95, E97 and E165-are capable of proton transfer and are all arrayed around the dihydroxyacetone phosphate substrate in the three-dimensional structure. Specific roles have been assigned to the residues K12, H95 and E165, but the nature of the involvement of E97 has not been established. Kinetic and structural characterization is reported for the E97Q and E97D mutants of Plasmodium falciparum triosephosphate isomerase (Pf TIM). A 4000-fold reduction in k(cat) is observed for E97Q, whereas the E97D mutant shows a 100-fold reduction. The control mutant, E165A, which lacks the key catalytic base, shows an approximately 9000-fold drop in activity. The integrity of the overall fold and stability of the dimeric structure have been demonstrated by biophysical studies. Crystal structures of E97Q and E97D mutants have been determined at 2.0 angstrom resolution. In the case of the isosteric replacement of glutamic acid by glutamine in the E97Q mutant a large conformational change for the critical K12 side chain is observed, corresponding to a trans-to-gauche transition about the C gamma-C delta (chi(3)) bond. In the E97D mutant, the K12 side chain maintains the wild-type orientation, but the hydrogen bond between K12 and D97 is lost. The results are interpreted as a direct role for E97 in the catalytic proton transfer cycle. The proposed mechanism eliminates the need to invoke the formation of the energetically unfavourable imidazolate anion at H95, a key feature of the classical mechanism.

Sapientia, 1970, Vol. XXV, nº 97 (número completo)

Contenido: El hecho y la norma / Octavio N. Derisi – El Nuevo Mundo en la filosofía de la historia de Vico / Alberto Caturelli – Los comentarios de Santo Tomás y de Roberto Grosseteste a la “Física” de Aristóteles / Celina A. Lértora Mendoza – Descartes : cuestiones gnoseológicas / Augusto Furlán – Notas y comentarios -- Bibliografía

Teología, 2008, Tomo XLV nº 97 (número completo)

Nota del Director -- Breve exposición de la hermenéutica analógica / Mauricio Beuchot -- ¿Fin de la antropología alma-cuerpo? / Lucio Florio -- Michel de Certeau : recorridos por el "creer" y sus constelaciones contemporáneas / Marcelo González -- Justicia, caridad y solidaridad en la DSI / Gustavo Irrazábal -- "Las palabras del Grito" / Hugo Rodolfo Safa -- Grupo de estudio bíblico judío cristiano / Víctor M. Fernández -- Una aproximación al acompañamiento espiritual en San Juan de la Cruz -- El lenguaje de la vida en la estética hildegardiana / Cecilia Inés Avenatti de Palumbo -- Reflexiones sobre la experiencia religiosa durante la crisis de identidad de la adolescencia / Julio V. Maffei -- Catalina de Siena : su teología hecha biografía / Gabriela María Di Renzo -- Espiritualidad sanante : salud y espiritualidad en Anselm Grün / Mónica Cristina Ukaski -- El legado póstumo de José Carlos Barcellos / Alberto Toutin -- Notas bibliográficas

Viabilidade técnica e econômica da criação do serviço de tv comunitária, incluindo análise do projeto de lei em tramitação 2701/97

Consultoria Legislativa - Área XIV - Comunicação Social, Informática, Telecomunicações, Sistema Postal, Ciência e Tecnologia.

Diário da Constituinte [gravação de vídeo] : [programa n. 323]

O Substitutivo da Constituição começa a circular esta noite, e traz todas as emendas aprovadas na Sistematização. Segundo Deputado João Cunha (PMDB-SP) com o restabelecimento da soberania do Plenário da Assembleia Nacional Constituinte (ANC), o povo brasileiro poderá dizer o que pensa. Em relação ao sistema de governo, o Deputado Costa Ferreira (PFL-MA) optou pelo presidencialismo porque já está identificado com o povo e os costumes do país. O Deputado Edson Lobão (PFL-MA) afirma que nos países desenvolvidos o parlamentarismo é excelente, mas não considera a melhor solução para a atividade política e institucional no Brasil. O Deputado Miraldo Gomes (PMDB-BA) afirma que deve prevalecer o presidencialismo. Para o Deputado Aluízio Bezerra (PMDB-AC), o sistema parlamentarista é o que mais possibilita uma condução mais democrática e assimila as constantes mutações na estrutura econômica e social do país. Surge uma nova proposta que convoca eleições gerais para 90 ou 120 dias após a promulgação da Constituição. O Deputado Heraldo Trindade (PFL-AP) que também defende as eleições em todos os níveis, tem uma outra proposta de eleições diretas para governador nos Estados do Amapá e Roraima a partir do dia 15 de novembro de 1988. O Deputado José Serra (PMDB-SP) assegura que os aposentados terão mecanismos reais de proteção.

O fundo social e o PL nº 323, de 2007

Analisa o impacto da aprovação pelo Congresso Nacional do PL nº 323, de 2007, que destina recursos dos royalties e participações especiais provenientes da exploração e comercialização de petróleo e gás para educação e saúde, sobre o Fundo Social (FS) criado pela Lei nº 12.351, de 22 de dezembro de 2010.

Recent investigations on zooplankton in the Limnological Institute of the University of Freiburg, in Falkau (Germany). [Translation from: Acta cient.Venezolana 18, 94-97, 1967. ]

Histochemical experiments are conducted in order to study the interrenal cells of European brook lamprey (Lampetra planeri).

Determination of dissolved oxygen in water with leukoberbelin-blue I. A quick Winkler method. [Translation from: Z.analyt.Chem. 262 97-99, 1972.]

The reaction of Mn(II) with water-dissolved oxygen, to a higher manganese hydroxide in an alkaline medium, as with the longstanding classic Winkler method, is the first step in the method described here. The assumption for faultless results by the conventional and modified Winkler method is clean water, which contains no organic substances by Mn(III) or Mn(IV). In many cases, however, eg. in river and lake-water tests, it can be seen with the naked eye that after some time the originally brown-coloured precipitate of manganese hydroxide becomes more and more colourless. Oxygen content was analysed in the water samples and evaluated by raising the amount of the leuko-base and giving the corresponding dilution of the colouring matter solution formed still higher oxygen contents can be measured.

The periodicity in the consumption of oxygen in Asellus aquaticus [Translation from: Vestnik ceskoslovenske zoologicke Spolecnosti, 15, 1, 89-97, 1951]

The consumption of oxygen in Asellus aquaticus was measured to find if there existed a periodicity in the consumption of oxygen and how this showed itself during the course of the day, year and in various experimental conditions. From the figures obtained comparative values were calculated and from these curves were plotted of the changes in the consumption of oxygen during the day and year.

Apneia obstrutiva do sono e função endotelial em pacientes com hipertensão arterial resistente

A apneia obstrutiva do sono (AOS) é considerada um fator de risco independente para as doenças cardiovasculares. Existem evidências de que indivíduos com apneia obstrutiva do sono podem apresentar elevação nos mediadores inflamatórios, alterações no perfil metabólico, aumento na atividade do sistema nervoso simpático, com consequente elevação da pressão arterial e disfunção endotelial. Nos últimos anos, inúmeros estudos tem apontado a AOS como um dos fatores responsáveis pela hipertensão resistente. O objetivo do estudo foi avaliar a presença da apneia obstrutiva do sono e o comportamento da função endotelial em pacientes com hipertensão resistente, comparando com hipertensos apresentando pressão arterial controlada com até 3 classes diferentes de fármacos anti-hipertensivos. Trata-se de um estudo transversal com 40 pacientes hipertensos: 20 com hipertensão arterial resistente (HAR) e 20 com pressão arterial controlada por medicação (hipertensão arterial controlada; HAC), sem distinção de raça ou gênero, com idade entre 18 e 75 anos. A pressão arterial casual e a monitorização ambulatorial da pressão arterial foram aferidas por método oscilométrico em aparelhos automáticos. A função endotelial e a presença da apneia obstrutiva do sono foram avaliadas através da tonometria arterial periférica pelos equipamentos Endo-PAT2000 e o aparelho portátil Watch-PAT200, respectivamente. A avaliação antropométrica foi realizada através das aferições das circunferências da cintura e do pescoço, índice de massa corporal (IMC), e relação cintura-estatura. A composição corporal foi avaliada por bioimpedância elétrica BIODYNAMICS 450. As análises estatísticas foram realizadas pelo software GraphPad PRISM, versão 6.01. A prevalência de AOS no grupo com HAR foi de 85% (Índice de apneia-hipopneia [AHI]= 12,391,89) e de 80% no grupo com HAC (AHI =20,744,69), sendo mais frequente em homens (p=0,04; OR=3,86; 95% IC 0,99 a 14,52). Os dois grupos apresentaram valores semelhantes das variáveis antropométricas avaliadas. A função endotelial avaliada pelo índice de hiperemia reativa foi similar nos dois grupos (grupo HAR: 1,880,09 vs. grupo HAC: 2,030,09; p=0,28). Apesar do número de dessaturações de oxigênio >4% ter apresentado diferença significativa entre os grupos (grupo HAR: 28,755,08 vs. grupo HAC: 64,1516,97; p=0,04), o tempo total de sono (grupo HAR: 309,515,27 vs. grupo HAC: 323,318,74 min) e a saturação mínima da oxi-hemoglobina (grupo HAR: 87,80,85 vs. grupo HAC: 83,32,37%) não mostraram essa diferença. Considerando todos os pacientes hipertensos, o AHI apresentou correlação significativa com o peso corporal (r=0,51; p=0,0007), o IMC (r=0,41; p=0,007), a circunferência da cintura (r=0,44; p=0,005), a circunferência do pescoço (r=0,38; p=0,01) e a relação cintura-estatura (r=0,39; p=0,01). Os pacientes sem AOS em comparação com os pacientes com AOS, apresentaram risco significativamente menor de apresentar comprometimento da função endotelial (OR=0,17; 95% IC 0,04-0,72; p=0,03). Os achados do presente estudo sugerem que a prevalência de AOS em pacientes com hipertensão resistente é elevada, porém semelhante a de indivíduos com hipertensão controlada. Pacientes com hipertensão resistente e controlada não apresentaram diferenças significativas em relação à função endotelial. A gravidade de AOS no grupo total de hipertensos se associou com maior risco de comprometimento da função endotelial.

Avaliação de aspectos hematológicos, bioquímicos e de hemoparasitas em população de Didelphis aurita Wied-Neuwied, 1826 (Didelphimorphia: Didelphidae) da Serra dos Órgãos, RJ

A Floresta Tropical Atlântica apresenta uma enorme biodiversidade, e está atualmente sujeita a inúmeras pressões como a perda de área pela intensa ocupação humana, agricultura, pecuária, urbanização e industrialização. Esses impactos têm provocado desmatamento e fragmentação florestal, processos que interferem na manutenção das populações animais, inclusive afetando os ciclos silvestres de parasitas e microorganismos. Didelphis aurita é um marsupial da Mata Atlântica com alta capacidade adaptativa a ambientes perturbados. Esta espécie onívora é tolerante à fragmentação florestal, podendo sobreviver em ambientes silvestres, rurais, suburbanos e urbanos, tendo importância na conexão dos ciclos silvestres e urbanos de diversos agentes. Este trabalho teve por objetivo descrever aspectos hematológicos, bioquímicos e de hemoparasitas em Didelphis aurita de duas áreas da Serra dos Órgãos/ RJ, uma área fragmentada e outra de mata contínua. Entre julho de 2011 e fevereiro de 2012 foram capturados 61 animais que tiveram amostras de sangue avaliadas. Os resultados expressos como média desvio padrão foram: Volume Globular 38,66 % ( 4,97); Hemácias 5,40 ( 0,75) x106/mm3; Hemoglobina 12,78 ( 1,68) g/dL; VGM 71,69 ( 3,56) fl; CHGM 33,01 ( 0,63) %; Plaquetas 514,70 ( 323,10) x 103/mm3; Leucócitos 19.678,52 ( 10.152,26)/mm3; Basófilos 0,59 ( 0,72) %; Eosinófilos 13,79 ( 6,94)%; Bastonetes 0,77 ( 2,04) %; Segmentados 41,12 ( 13,95) %; Linfócitos 41,97 ( 12,97) %; Monócitos 1,75 ( 1,51)%. Para parâmetros bioquímicos encontramos os seguintes resultados: Proteínas totais 8,50 ( 1,68); albumina 3,03 ( 0,69); globulina 5,44 ( 1,66); uréia 83,57 ( 20,11); creatinina 0,44 ( 0,13); ALT 85,01 ( 65,65); AST 314,55 ( 130,58); FA 420,38 ( 371,89); GGT 19,40 ( 8,51). Os parâmetros hematócrito, hemoglobina, hematimetria, ALT, AST e FA foram maiores nos machos do que nas fêmeas. Adultos apresentaram valores de proteína plasmática total, leucócitos, hematócrito, hemoglobina, hematimetria, albumina, proteínas totais, creatinina e GGT maiores do que jovens, e o inverso ocorreu para plaquetas, globulina e FA. Animais do Fragmento apresentaram valores de massa corporal e albumina menores do que os do Garrafão, e o inverso ocorreu para GGT e globulina. Babesiasp. ocorreu em 26,6% da população, sendo mais freqüente em adultos. Estes resultados são os primeiros parâmetros de referência para Didelphis aurita na Serra dos Órgãos, contribuindo para o estudo desta espécie.

Status of the beach seine fishery in the Hambantota District during 1995-97

Beach seine fishery is one of the oldest fishing methods practiced in Sri Lanka. In the recent past several modifications were observed in the structure of the net and the material used in the construction of nets. beach seine nets made of nylon material were also reported at 4 operating sites out of 17-beach seine landing centers in the Hambantota District. However, traditional beach seine nets made of coir and kuralon were the common nets used in the area. Fishing season extends from September to April of the following year. However, beach seining at Mawella was carried out throughout the year. The estimated average annual effort for the entire study area was about 4250 operations. The mean annual catch rate at Mawella, Kalametiya and Welipatanwila were estimated as 81.8, 290.7, and 167.3 kg/operation respectively. The mean annual catch rate for the entire study area was estimated as 157.3 kg/operation. The beach seines recorded an estimated annual production of 662mt in the Hambantota district. Stoleophorous sp. has made the major contribution to the beach seine catches and it was about 31.7% of the total beach seine production. Leiognathus sp. Carangids and Trichuras sp. have produced 11.5%, 9.5% and 8.5% respectively while Amblygaster sirm and other Sardinella sp. have produced 5.5% and 4.9% respectively. A sirm was found during the months of November, February, March and July. The size range of A. sirm caught by beach seine during February –March period was in the range of 5-12cm (total length). Contribution by Rastrelliger sp. and Sphyreana sp. were 2.9% and 2.6% by each category. Average income of a beach seine operation at Mawella, Kalametiya and Welipatanwila were Rs. 3330/=, 10250/= and 6222/= per operation respectively.