An in vitro investigation on the cytotoxic and nuclear receptor transcriptional activity of the mycotoxins fumonisin B1 and beauvericin

Fumonisin B1 (FB1) and beauvericin (BEA) are secondary metabolites of filamentous fungi, which under appropriate temperature and humidity conditions may develop on various foods and feeds. To date few studies have been performed to evaluate the toxicological and endocrine disrupting effects of FB1 and BEA. The present study makes use of various in vitro bioassays including; oestrogen, androgen, progestagen and glucocorticoid reporter gene assays (RGAs) for the study of nuclear receptor transcriptional activity, the thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT) assay to monitor cytotoxicity and high content analysis (HCA) for the detection of pre-lethal toxicity in the RGA and Caco-2 human colon adenocarcinoma cells. At the receptor level, 0.001-10μM BEA or FB1 did not induce any agonist responses in the RGAs. However at non-cytotoxic concentrations, an antagonistic effect was exhibited by FB1 on the androgen nuclear receptor transcriptional activity at 10μM and BEA on the progestagen and glucocorticoid receptors at 1μM. MTT analysis showed no decrease in cell viability at any concentration of FB1, whereas BEA showed a significant decrease in viability at 10μM. HCA analysis confirmed that the reduction in the progestagen receptor transcriptional activity at 1μM BEA was not due to pre-lethal toxicity. In addition, BEA (10μM) induced significant toxicity in both the TM-Luc (progestagen responsive) and Caco-2 cells.

Assessment of genotoxicity of aflatoxin M1 and B1 contaminated milks after in vitro human digestion

Introduction - Milk is considered a complete food from the nutritional point of view. Milk can be exposed to various types of contamination, such as mycotoxins. These metabolites are naturally occurring toxic compounds produced by fungi. Several studies on milk samples have reported the presence of aflatoxin B1 (AFB1) and M1 (AFM1), due to the high incidence in samples intended for human consumption, carcinogenicity proven AFB1 and resistance of the contaminants to the process of digestion, making those available for intestinal absorption. Considering these aspects, the objective of this study was to evaluate the genotoxicity of milk samples contaminated by AFB1 and AFM1 before and after the action of lactic acid bacteria using Caco-2 intestinal human cells.

Occupational exposure to Aflatoxin B1 in a Portuguese poultry slaughterhouse

Aflatoxin B1 (AFB1) is a secondary metabolite produced by the fungi Aspergillus flavus and is the most potent hepatocarcinogen known in mammals and has been classified by the International Agency of Research on Cancer as Group 1 carcinogen. Although dietary exposure to AFB1 has been extensively documented, there are still few studies dedicated to the problem of occupational exposure. Considering recent findings regarding AFB1 occupational exposure in poultry production, it was considered relevant to clarify if there is also exposure in poultry slaughterhouses. Occupational exposure assessment to AFB1 was done with a biomarker of internal dose that measures AFB1 in the serum by enzyme-linked immunosorbent assay. Thirty workers from a slaughterhouse were enrolled in this study. A control group (n = 30) was also considered in order to know AFB1 background levels for Portuguese population. Fourteen workers (47.0%) showed detectable levels of AFB1 with values from 1.06 to 4.03ng ml(-1), with a mean value of 1.73ng ml(-1). No AFB1 was detected in serum of individuals used as controls. Despite uncertainties regarding the exposure route that is contributing more to exposure (inhalation or dermal) is possible to state that exposure to AFB1 is occurring in the slaughterhouse studied. It seems that reducing AFB1 contamination in poultry production can have a positive result in this occupational setting.

Avaliação da interação entre aflatoxina M1 e B1 com a fração proteica do leite

Dissertação composta por 02 artigos.

Fumonisina B1 em arroz: validação de método e efeito de tratamento térmico nos níveis da micotoxina

O arroz (Oryza sativa, L.), como todos os cereais, pode ser contaminado por fungos responsáveis por danos tecnológicos, nutricionais e toxicológicos, dentre eles a produção de micotoxinas. Diversas toxinas fúngicas produzidas pelo gênero Fusarium tem sido relatadas em arroz, no entanto a fumonisina B1 (FB1) é pouco estudada neste grão. As principais características da FB1 é a alta solubilidade em solventes polares, estabilidade a altas temperaturas além de efeitos neurotóxicos e carcinogênicos. Assim o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do tratamento térmico e hidrotérmico nos teores de fumonisina B1 e nas características químicas de arroz comercial. Na primeira etapa do trabalho foi adaptado um método para detecção e quantificação de FB1 em arroz cru e após cocção, por HPLC-FL. O método foi avaliado quanto aos indicativos de eficiência destacando-se o LOD (30 µg.kg-1) e a recuperação ( 90% para arroz cru e 86% pra arroz cozido). Na segunda etapa realizou-se o levantamento de ocorrência de FB1 em 05 diferentes amostras comerciais de arroz integral, branco e parboilizado da cidade de Rio Grande, RS, totalizando 9 amostras. Foi detectada a presença de FB1 em 7 das 9 amostras, sendo que os maiores índices foram encontrados em amostras de arroz parboilizado e integral apresentando níveis de contaminação entre 30 e 170 µg.kg-1. A terceira etapa do trabalho consistiu no estudo do efeito de tratamentos térmicos sobre os níveis de FB1 em amostras após aplicação de calor. Foram testados tratamento hidrotérmico com evaporação, tratamento hidrotérmico com autoclavagem e tratamento térmico seco. O maior nível de redução dos teores iniciais de FB1 foi 82,8% quando se empregou tratamento térmico seco a 125 °C/3 min. Ainda foram avaliados os efeitos do t ratamento hidrotérmico com evaporação de água na composição química e na digestibilidade protéica. Esta característica proporcionou aumento de até 100% na digestibilidade in vitro das proteínas e reduziu em média 73% do teor de contaminação com FB1.

Dise?o y aplicaci?n de un plan de preparaci?n f?sica para f?tbol sala en personas con deficiencia visual (B1)

El trabajo presentado es de tipo investigaci?n experimental en el que se hace una intervenci?n a una poblaci?n de deportistas que conforman la selecci?n Valle masculina de f?tbol sala en situaci?n de discapacidad visual. Se dise?? una propuesta de actividades adaptadas orientadas a la preparaci?n f?sica, en las que se tiene en cu?ntalas caracter?sticas y necesidades espec?ficas de los deportistas, los medios y los recursos que permiten el acceso a la informaci?n, la complejidad y dificultad de las actividades de acuerdo a su situaci?n de discapacidad visual. Finalmente, valora e identifica el nivel de variaci?n de las capacidades f?sicas trabajadas, mediante la realizaci?n de unos test de evaluaci?n al inicio y el final del proceso, lo que permite determinar el nivel de ?xito logrado en la aplicaci?n de la propuesta. Esta investigaci?n comprende tres cap?tulos en los cuales; en el primer cap?tulo se trataron temas como concepto de discapacidad, actividad f?sica adaptada, deporte adaptado, capacidades condicionales y coordinativas en los deportistas de f?tbol sala con deficiencia visual. En el segundo cap?tulo se encuentra el tema del trabajo, el problema, la justificaci?n del tema y los objetivos de la tesis; finalmente en el tercer cap?tulo se habla de la caracterizaci?n del grupo del seleccionado del Valle de f?tbol sala, los protocolos de los test que se llevaron a cabo, los resultados, an?lisis de las pruebas, y la conclusi?n general del trabajo de investigaci?n.

Konnektorer i inlärarsvenska på CEFR-nivåerna A1, A2 och B1 – en longitudinell analys ur ett funktionellt perspektiv

Syftet med avhandlingen har varit att granska finska inlärares konnektorbruk på CEFR-nivåerna A1, A2 och B1 longitudinellt ur ett funktionellt perspektiv. Jag har studerat vad som är kännetecknande för konnektorbruket på dessa CEFR-nivåer och i vilken funktion konnektorerna har använts på dessa nivåer. Vidare har jämförts konnektorbruket i materialet med det som sägs i CEFR-kriterierna. Slutligen har jag också granskat hur konnektorbruket utvecklas. Som material har jag använt berättande texter (n=303) skrivna av 101 finskspråkiga grundskolelever och gymnasister. Materialet ingår i projektet Topling – Inlärningsgångar i andraspråket vid Jyväskylä universitet. I avhandlingen har använts såväl kvantitativa som kvalitativa metoder. Jag har räknat konnektorernas och konnektorkategoriernas frekvenser samt analyserat i vilka funktioner konnektorerna har använts. I den funktionella analysen har använts systemisk-funktionell lingvistik (Halliday & Matthiessen 2004) samt Labovs (1972) modell om berättelsestrukturen. Analysen har visat att konnektorbruket skiljer sig mellan CEFR-nivåerna A1, A2 och B1. Antalet konnektorer ökar såväl från nivå A1 till A2 som från nivå A2 till nivå B1 och andelen additiva och målspråksavvikande konnektorer minskar medan andelen temporala, kausala och komparativa konnektorer samt att ökar. Konnektorerna har använts först och främst i deras prototypiska funktioner på alla dessa CEFR-nivåer. Vissa konnektorer (när, eftersom, att) verkar även ha en funktion i berättelsestrukturen. Om man jämför konnektorbruket med CEFR-kriterierna kan man konstatera att inlärare på nivå A1 använder pronomenet den i stället för sedan även om denna konnektor nämns i CEFR-kriterierna på nivå A1. Konnektorbruket verkar utvecklas på det sättet att antalet konnektorer samt andelen additiva, temporala och komparativa konnektorer samt att ökar. Andelen additiva konnektorer och målspråksavvikande konnektorer minskar. Vidare börjar inlärare använda mera olika konnektorer och på nivå B1 även mindre frekventa konnektorer som om och fast. I fortsättningen borde man granska konnektorbruket i olika texttyper samt studera om explicit undervisning påverkar inlärares konnektorbruk.

LAP1 interactome and its functional features throughout spermatogenesis

The lamina-associated polypeptide 1 (LAP1) is a type II transmembrane protein of the inner nuclear membrane encoded by the human gene TOR1AIP1. LAP1 is involved in maintaining the nuclear envelope structure and appears be involved in the positioning of lamins and chromatin. In the nuclear envelope, LAP1 is suggested to exist as a complex with A-type and B-type lamins, torsins and emerin. The presence of such complexes suggests that LAP1 may cooperate functionally with these proteins in tissues where they play a critical role. Therefore, the identification of LAP1 binding partners and the signalling pathways where LAP1 participates, is crucial for a better understanding of LAP1 functions. The work described in this thesis addresses novel human LAP1 associated proteins found through bioinformatic tools. Public databases allowed for the discovery of the LAP1 interactome, which was manually curated, identifying several functionally relevant proteins. Subsequently, the integration of multiple bioinformatic tools established novel functions to LAP1 such as DNA damage response and telomere association. In conjunction, bioinformatic results also reinforced the association of LAP1 with mitosis, and the already identified role of LAP1 in nuclear morphology. Interestingly, this association of LAP1 with the regulation of the nuclear envelope structure and mitosis progression, shares functional elements with spermatogenesis. Therefore, this work additionally described the localization of LAP1 and some of its interactors throughout the spermatogenic cycle, in mouse and human testis. The results established that the activity of LAP1 during the mouse spermatogenic cycle is most evident from stage VIII until the end of spermiogenesis, which is characteristic of manchette development. Concomitantly, some LAP1 interactors studied in this work share a similar localization, namely, PP1γ2, Lamin B1 and Lamin A/C. The results obtained from the study of LAP1 throughout different periods of the male reproductive system attributed potential new biological functions to LAP1. Thereby, this work can be the foundation of future studies regarding LAP1 and the regulation of multiple cellular processes and disease conditions.

Transforming Growth Factor-b1 polymorphism is not associated with chronic graft disease: evidence from a meta-analysis

Kidney transplantation has been recognised as the optimal treatment choice for most end stage renal disease patients and the increase of allograft survival rates is achieved through the refinement of novel immunosuppressive agents. Chronic Graft Disease (CGD) is a multifactorial process that likely includes a combination of immunological, apoptotic and inflammatory factors. The application of individualised immunosuppressive therapies will also depend on the identification of risk factors that can influence chronic disease. Despite being the subject of several independent studies, investigations of the relationship between transforming growth factor-b1 (TGF-b1) polymorphisms and kidney graft outcome continue to be plagued by contradictory conclusions.

Aflatoxin B1 and M1 Degradation by Lac2 from Pleurotus pulmonarius and Redox Mediators

Laccases (LCs) are multicopper oxidases that find application as versatile biocatalysts for the green bioremediation of environmental pollutants and xenobiotics. In this study we elucidate the degrading activity of Lac2 pure enzyme form Pleurotus pulmonarius towards aflatoxin B1 (AFB1) and M1 (AFM1). LC enzyme was purified using three chromatographic steps and identified as Lac2 through zymogram and LC-MS/MS. The degradation assays were performed in vitro at 25 °C for 72 h in buffer solution. AFB1 degradation by Lac2 direct oxidation was 23%. Toxin degradation was also investigated in the presence of three redox mediators, (2,2′-azino-bis-[3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid]) (ABTS) and two naturally-occurring phenols, acetosyringone (AS) and syringaldehyde (SA). The direct effect of the enzyme and the mediated action of Lac2 with redox mediators univocally proved the correlation between Lac2 activity and aflatoxins degradation. The degradation of AFB1 was enhanced by the addition of all mediators at 10 mM, with AS being the most effective (90% of degradation). AFM1 was completely degraded by Lac2 with all mediators at 10 mM. The novelty of this study relies on the identification of a pure enzyme as capable of degrading AFB1 and, for the first time, AFM1, and on the evidence that the mechanism of an effective degradation occurs via the mediation of natural phenolic compounds. These results opened new perspective for Lac2 application in the food and feed supply chains as a biotransforming agent of AFB1 and AFM1.

Glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP) directly affects collagen fibril diameter and collagen cross-linking in osteoblast cultures.

International audience

Glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP) dose-dependently reduces osteoclast differentiation and resorption

International audience

Plano de ação para aumento na adesão ao tratamento da hipertensão arterial sistêmica na UBS Sevilha B1 em Ribeirão das Neves/MG

Dados da Organização Mundial de Saúde apontam a existência de 600 milhões de pessoas acometidas pela Hipertensão Arterial Sistêmica (HAS), e cerca de 7,1 milhões de mortes anualmente, o que corresponde a 13% da mortalidade global. A HAS é a morbidade mais comum na população adulta e frequente nos serviços de emergência no Brasil. Estudos epidemiológicos sobre a hipertensão arterial são fundamentais para conhecer a distribuição da exposição e do adoecimento e as condições que influenciam a dinâmica de risco e controle na comunidade. O seguinte trabalho tem como objetivo principal elaborar um plano de ação para sistematização do atendimento aos hipertensos na área da UBS SEVILHA B1 em Ribeirão das Neves/MG. Para identificar o problema de saúde foi realizado um diagnóstico situacional pelo método da estimativa rápida para levantar dados que transformados em informações nos permitiram uma melhoria da qualidade geral de vida da comunidade, um controle pressórico de pacientes com diagnóstico de hipertensão arterial sistêmica, e, se possível diminuir encaminhamentos de pacientes hipertensos em caráter emergencial, etapas fundamentais no processo de planejamento que demandam muito trabalho da equipe de saúde com o atendimento brindado. A revisão bibliográfica incluiu descritores como "hipertensão", "hipertensão arterial sistêmica", "prevenção", "estratégia de saúde da família", "intervenção", "educação em saúde", incluindo sites de busca como o SciELO, Biblioteca Virtual da UFMG, das sociedades de Hipertensão e Cardiologia, portal do Ministério da Saúde, IBGE, notícias locais e nacionais sobre o assunto, o site da prefeitura local e informação pessoal dos Agentes de Saúde e enfermagem locais sobre o assunto. Selecionando sempre artigos publicados entre os anos de 1996 e 2015. O plano de ação seguiu o método Planejamento Estratégico Situacional. Concluiu-se que a abordagem da hipertensão deve envolver projetos que entendam a cultura local, tenham o alvo como sendo a comunidade e as famílias de risco para educação quanto a mudança de hábitos. Para isto é necessário a integração da equipe como um todo com possível articulação de diferentes estratégias, setores sociais e governamentais.

Grande número de dispersão de psicotrópicos de receituário B1 na área de abrangência do ESF Feliciana Lage

No território da ESF Feliciana Lage, a dispersão de receituário B1 e, portanto o número de usuários de psicotrópicos é um problema de saúde complexo, que atinge cerca de 6% da população total da área. O uso de psicotrópicos está relacionado a alguma morbidade ou benefício que a medicação ocasiona ao paciente. A morbidade e o meio social onde o indivíduo está inserido influenciam e são determinantes para esse número. Este trabalho representa um levantamento de dados e uma estratégia para o enfrentamento do uso abusivo e excessivo dessas medicações. Para atingir tal resultado foram definidos os nós críticos do problema: estresse e vulnerabilidade social, dependência do psicotrófico e carência de abordagem a essa população. Em seguida, foram definidos projetos para o enfrentamento destas dificuldades, que serão executados pelos membros da equipe de saúde da família.