Efeitos do consumo materno e/ou paterno de extrato de amora-preta (Rubus spp.) na suscetibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária quimicamente induzida

O câncer de mama é o segundo tipo de neoplasia mais prevalente no mundo e o mais comum entre as mulheres. É descrito que o padrão de consumo alimentar materno e paterno está relacionado à suscetibilidade da prole ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis, inclusive o câncer. A amora-preta é uma das frutas com maior conteúdo antioxidante e seus compostos bioativos possuem atividade antioxidante, anticarcinogênica e anti-inflamatória. Sendo assim, o presente trabalho propõe avaliar os efeitos do consumo materno e/ou paterno de extrato de amora-preta (Rubus spp.) na suscetibilidade da prole feminina ao desenvolvimento de neoplasias mamárias quimicamente induzidas. Para tanto, camundongos da linhagem C57BL/6 foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: pai amora (PA), mãe amora (MA), pai e mãe amora (PMA) e controle (CTRL). Os pais receberam extrato de amora-preta logo após o desmame durante 8 semanas e as mães receberam o extrato durante a gestação e lactação. O extrato de amora-preta foi administrado na água de beber (0.84g de antocianinas/L) ad libitum. Os pais tratados com extrato de amora apresentaram redução na atividade enzimática da superóxido dismutase (SOD) e da catalase (CAT) no testículo (p<0.05 e p<0.001, respectivamente), aumento na capacidade antioxidante plasmática, na porcentagem de espermatozoides normais e na produção diária de espermatozóides em relação ao grupo controle (p<0.001 para todos). Além disso, os grupos PA, MA e PMA apresentaram aumento na taxa de prenhez (p<0.05) e redução da mortalidade perinatal (p<0.01, p<0.05 e p<0.001, respectivamente). Em relação à prole feminina não submetida à carcinogênese foi observada redução na capacidade antioxidante plasmática nos grupos PA (p<0.001) e MA (p<0.01), enquanto o grupo PMA apresentou aumento nesse parâmetro (p<0.001). No desenvolvimento da glândula mamária, houve aumento do desenvolvimento epitelial nos grupos PA, MA e PMA (p<0.001 para todos), de diferenciação nos grupos MA e PMA (p<0.01 para ambos) e da taxa de apoptose nos grupos MA e PMA (p<0.05), além de redução no número de TEBs nos grupos PA, MA e PMA (p<0.01, p<0.001 e p<0.001, respectivamente). Não foram observadas alterações significativas nas filhas submetidas à indução química da carcinogênese mamária por DMBA. Assim, é possível concluir que apesar de ter alterado o desenvolvimento da glândula mamária, o consumo materno e/ou paterno de extrato de amora-preta não foi capaz de impactar sobre a suscetibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária quimicamente induzida.

Espécies polinucleares de cobre e ferro com catalisadores de oxidação e modelos de sítios ativos

Diferentes complexos de cobre(II), contendo ligantes do tipo base de Schiff e um grupamento imidazólico, com interesse bioinorgânico, catalítico e como novos materiais, foram preparados na forma de sais perclorato, nitrato ou cloreto e caracterizados através de diferentes técnicas espectroscópicas (UV/Vis, IR, EPR, Raman) e espectrometria de massa Tandem (ESI-MS/MS), além de análise elementar, condutividade molar e medidas de propriedades magnéticas. Alguns destes compostos, obtidos como cristais adequados, tiveram suas estruturas determinadas por cristalografia de raios-X. As espécies di- e polinucleares contendo pontes cloreto, mostraram desdobramentos das hiperfinas nos espectros de EPR, relacionados à presença do equilíbrio com a respectiva espécie mononuclear, devido à labilidade dos íons cloretos, dependendo do contra-íon e do tipo de solvente utilizado. Adicionalmente, em solução alcalina, estes compostos estão em equilíbrio com as correspondentes espécies polinucleares, onde os centros de cobre estão ligados através de um ligante imidazolato. Em meio alcalino, estes compostos polinucleares contendo ponte imidazolato foram também isolados e caracterizados por diferentes técnicas espectroscópicas e magnéticas. Através da variação estrutural e também do ligante-ponte foi possível modular o fenômeno da interação magnética entre os íons de cobre em estruturas correlatas di- e polinucleares. Os respectivos parâmetros magnéticos foram obtidos com ajuste das curvas experimentais de XM vs T, correlacionando-se muito bem com a geometria, ângulos e distâncias de ligação entre os íons, quando comparado com outros complexos similares descritos na literatura. Posteriormente, estudaram-se os fatores relacionados com a reatividade de todas essas espécies como catalisadores na oxidação de substratos de interesse (fenóis e aminas), através da variação do tamanho da cavidade nas estruturas cíclicas ou de variações no ligante coordenado ao redor do íon metálico. Vários deles se mostraram bons miméticos de tirosinases e catecol oxidases. Um novo complexo-modelo da citocromo c oxidase (CcO), utilizando a protoporfirina IX condensada ao quelato N,N,-bis[2-(1,2-metilbenzimidazolil)etil]amino e ao resíduo de glicil-L-histidina, foi sintetizado e caracterizado através de diferentes técnicas espectroscópicas, especialmente EPR. A adição de H2O2 ao sistema completamente oxidado, FeIII/CuII, a -55°C, ou o borbulhamento de oxigênio molecular a uma solução do complexo na sua forma reduzida, FeII/CuI, saturada de CO, resultou na formação de adutos com O2, de baixo spin, estáveis a baixas temperaturas.

Hydrogen Peroxide in Biocatalysis. A Dangerous Liaison

Hydrogen peroxide is a substrate or side-product in many enzyme-catalyzed reactions. For example, it is a side-product of oxidases, resulting from the re-oxidation of FAD with molecular oxygen, and it is a substrate for peroxidases and other enzymes. However, hydrogen peroxide is able to chemically modify the peptide core of the enzymes it interacts with, and also to produce the oxidation of some cofactors and prostetic groups (e.g., the hemo group). Thus, the development of strategies that may permit to increase the stability of enzymes in the presence of this deleterious reagent is an interesting target. This enhancement in enzyme stability has been attempted following almost all available strategies: site-directed mutagenesis (eliminating the most reactive moieties), medium engineering (using stabilizers), immobilization and chemical modification (trying to generate hydrophobic environments surrounding the enzyme, to confer higher rigidity to the protein or to generate oxidation-resistant groups), or the use of systems capable of decomposing hydrogen peroxide under very mild conditions. If hydrogen peroxide is just a side-product, its immediate removal has been reported to be the best solution. In some cases, when hydrogen peroxide is the substrate and its decomposition is not a sensible solution, researchers coupled one enzyme generating hydrogen peroxide “in situ” to the target enzyme resulting in a continuous supply of this reagent at low concentrations thus preventing enzyme inactivation. This review will focus on the general role of hydrogen peroxide in biocatalysis, the main mechanisms of enzyme inactivation produced by this reactive and the different strategies used to prevent enzyme inactivation caused by this “dangerous liaison”.

Respiratory gene clusters of Metallosphaera sedula - differential expression and transcriptional organization

Metallosphaera sedula is a thermoacidophilic Crenarchaeon which is capable of leaching metals from sulfidic ores. The authors have investigated the presence and expression of genes encoding respiratory complexes in this organism when grown heterotrophically or chemolithotrophically on either sulfur or pyrite. The presence of three gene clusters, encoding two terminal oxidase complexes, the quinol oxidase SoxABCD and the SoxM oxidase supercomplex, and a gene cluster encoding a high-potential cytochrome b and components of a bc(1) complex analogue (cbsBA-soxL2N gene cluster) was established. Expression studies showed that the soxM gene was expressed to high levels during heterotrophic growth of M. sedula on yeast extract, while the soxABCD mRNA was most abundant in cells grown on sulfur. Reduced-minus-oxidized difference spectra of cell membranes showed cytochrome-related peaks that correspond to published spectra of Sulfolobus-type terminal oxidase complexes. In pyrite-grown cells, expression levels of the two monitored oxidase gene clusters were reduced by a factor of 10-12 relative to maximal expression levels, although spectra of membranes clearly contained oxidase-associated haems, suggesting the presence of additional gene clusters encoding terminal oxidases in M. sedula. Pyrite- and sulfur-grown cells contained high levels of the cbsA transcript, which encodes a membrane-bound cytochrome b with a possible role in iron oxidation or chemolithotrophy. The cbsA gene is not co-transcribed with the soxL2N genes, and therefore does not appear to be an integral part of this bc(1) complex analogue. The data show for the first time the differential expression of the Sulfolobus-type terminal oxidase gene clusters in a Crenarchaeon in response to changing growth modes.

Pulsed EPR studies of a bacterial sulfite-oxidizing enzyme with pH-invariant hyperfine interactions from exchangeable protons

Variable-frequency pulsed electron paramagnetic resonance studies of the molybdenum(V) center of sulfite dehydrogenase (SDH) clearly show couplings from nearby exchangeable protons that are assigned to a (MoOHn)-O-v group. The hyperfine parameters for these exchangeable protons of SDH are the same at both low and high pH and similar to those for the high-pH forms of sulfite oxidases (SOs) from eukaryotes. The SDH proton parameters are distinctly different from the low-pH forms of chicken and human so.

Kinetic and structural evidence for the importance of Tyr236 for the integrity of the Mo active site in a bacterial sulfite dehydrogenase

The sulfite dehydrogenase from Starkeya novella is the only known sulfite-oxidizing enzyme that forms a permanent heterodimeric complex between a molybdenum and a heme c-containing subunit and can be crystallized in an electron transfer competent conformation. Tyr236 is a highly conserved active site residue in sulfite oxidoreductases and has been shown to interact with a nearby arginine and a molybdenum-oxo ligand that is involved in catalysis. We have created a Tyr236 to Phe substitution in the SorAB sulfite dehydrogenase. The purified SDHY236F protein has been characterized in terms of activity, structure, intramolecular electron transfer, and EPR properties. The substituted protein exhibited reduced turnover rates and substrate affinity as well as an altered reactivity toward molecular oxygen as an electron acceptor. Following reduction by sulfite and unlike SDHWT, the substituted enzyme was reoxidized quickly in the presence of molecular oxygen, a process reminiscent of the reactions of the sulfite oxidases. SDHY236F also exhibited the pH-dependent CW-EPR signals that are typically observed in vertebrate sulfite oxidases, allowing a direct link of CW-EPR properties to changes caused by a single-amino acid substitution. No quantifiable electron transfer was seen in laser flash photolysis experiments with SDHY236F. The crystal structure of SDHY236F clearly shows that as a result of the substitution the hydrogen bonding network surrounding the active site is disturbed, resulting in an increased mobility of the nearby arginine. These disruptions underline the importance of Tyr236 for the integrity of the substrate binding site and the optimal alignment of Arg55, which appears to be necessary for efficient electron transfer.

Structure of the active site of sulfite dehydrogenase from Starkeya novella

In this paper, we report the results of molybdenum K-edge X-ray absorption studies performed on the oxidized and reduced active sites of the sulfite dehydrogenase from Starkeya novella. Our results provide the first direct structural information on the active site of the oxidized form of this enzyme and confirm the conclusions derived from protein crystallography that the molybdenum coordination is analogous to that of the sulfite oxidases. The molybdenum atom of the oxidized enzyme is bound by two Mo=O ligands at 1.73 angstrom and three thiolate Mo-S ligands at 2.42 angstrom, whereas the reduced enzyme has one oxo at 1.74 angstrom, one long oxygen at 2.19 angstrom (characteristic of Mo-OH2), and three Mo-S ligands at 2.40 angstrom.

Is the generation of neo-antigenic determinants by free radicals central to the development of autoimmune rheumatoid disease?

Biomolecules are susceptible to many different post-translational modifications that have important effects on their function and stability, including glycosylation, glycation, phosphorylation and oxidation chemistries. Specific conversion of aspartic acid to its isoaspartyl derivative or arginine to citrulline leads to autoantibody production in models of rheumatoid disease, and ensuing autoantibodies cross-react with native antigens. Autoimmune conditions associate with increased activation of immune effector cells and production of free radical species via NADPH oxidases and nitric oxide synthases. Generation of neo-antigenic determinants by reactive oxygen and nitrogen species ROS and RNS) may contribute to epitope spreading in autoimmunity. The oxidation of amino acids by peroxynitrite, hypochlorous acid and other reactive oxygen species (ROS) increases the antigenicity of DNA, LDL and IgG, generating ligands for which autoantibodies show higher avidity. This review focuses on the evidence for ROS and RNS in promoting the autoimmune responses observed in diseases rheumatoid arthritis (RA) and systemic lupus erythematosus (SLE). It considers the evidence for ROS/RNS-induced antigenicity arising as a consequence of failure to remove or repair ROS/RNS damaged biomolecules and suggests that an associated defect, probably in T cell signal processing or/or antigen presentation, is required for the development of disease.

NADPH oxidase signaling and cardiac myocyte function

The NADPH oxidase family of enzymes has emerged as a major source of reactive oxygen species (ROS) that is important in diverse cellular functions including anti-microbial defence, inflammation and redox signaling. Of the five known NADPH oxidase isoforms, several are expressed in cardiovascular cells where they are involved in physiological and pathological processes such as the regulation of vascular tone, cell growth, migration, proliferation, hypertrophy, apoptosis and matrix deposition. This article reviews current knowledge regarding the role of NADPH oxidases in cardiomyocyte function in health and disease. © 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

Redox regulation of protein damage in plasma

The presence and concentrations of modified proteins circulating in plasma depend on rates of protein synthesis, modification and clearance. In early studies, the proteins most frequently analysed for damage were those which were more abundant in plasma (e.g. albumin and immunoglobulins) which exist at up to 10 orders of magnitude higher concentrations than other plasma proteins e.g. cytokines. However, advances in analytical techniques using mass spectrometry and immuno-affinity purification methods, have facilitated analysis of less abundant, modified proteins and the nature of modifications at specific sites is now being characterised. The damaging reactive species that cause protein modifications in plasma principally arise from reactive oxygen species (ROS) produced by NADPH oxidases (NOX), nitric oxide synthases (NOS) and oxygenase activities; reactive nitrogen species (RNS) from myeloperoxidase (MPO) and NOS activities; and hypochlorous acid from MPO. Secondary damage to proteins may be caused by oxidized lipids and glucose autooxidation.In this review, we focus on redox regulatory control of those enzymes and processes which control protein maturation during synthesis, produce reactive species, repair and remove damaged plasma proteins. We have highlighted the potential for alterations in the extracellular redox compartment to regulate intracellular redox state and, conversely, for intracellular oxidative stress to alter the cellular secretome and composition of extracellular vesicles. Through secreted, redox-active regulatory molecules, changes in redox state may be transmitted to distant sites. © 2014 The Authors.

NADPH oxidase and heart failure

Reactive oxygen species play important roles in the pathophysiology of chronic heart failure secondary to chronic left ventricular hypertrophy or myocardial infarction. Reactive oxygen species influence several components of the phenotype of the failing heart, including contractile function, interstitial fibrosis, endothelial dysfunction and myocyte hypertrophy. Recent studies implicate the production of reactive oxygen species by a family of NADPH oxidases in these effects. NADPH oxidases are activated in an isoform-specific manner by many pathophysiological stimuli and exert distinct downstream effects. Understanding NADPH oxidase activation and regulation, and their downstream effectors, could help to develop novel therapeutic targets.

Caracterização funcional da BaltMTx, uma miotoxina isolada da peçonha de Bothrops alternatus

CHAPTER II: Snake venoms are a complex mixture of organic and inorganic compounds, proteins and peptides such as aminotransferases, acetylcholinesterase, hyaluronidases, L-amino acid oxidase, phospholipase A2, metalloproteases, serine proteases, lectins, disintegrins, and others. Phospholipase A2 directly or indirectly influence the pathophysiological effect on envenomation, as well as their participation in the digestion of the prey. They have several other activities such as hemolytic indirect action, cardiotoxicity, aggregating of platelets, anticoagulant, edema, myotoxic and inflammatory activities. In this work, we describe the functional characterization of BaltMTx, a PLA2 from Bothrops alternatus that inhibits platelet aggregation and present bactericidal effect. The purification of BaltMTx was carried out through three chromatographic steps (ion-exchange on a DEAE-Sephacel column, followed by hydrophobic chromatography on Phenyl–Sepharose and affinity chromatography on HiTrap™ Heparin HP). The protein was purified to homogeneity as judged by its migration profile in SDS–PAGE stained with coomassie blue, and showed a molecular mass of about 15 kDa under reducing conditions and approximately 25 kDa in non-reducing conditions. BaltMTx showed a rather specific inhibitory effect on platelet aggregation induced by epinephrine in human platelet-rich plasma in a dose-dependent manner, whereas it had little or no effect on platelet aggregation induced by collagen or adenosine diphosphate. BaltMTx also showed antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli. High concentrations of BatlMTx stimulated the proliferation of Leishmania (Leishmania) infantum and Leishmania (Viania) braziliensis. BaltMTx induced production of inflammatory mediators such as IL-10, IL-12, TNF-α and NO. BaltMTx could be of medical interest as a new tool for the development of novel therapeutic agents for the prevention and treatment of thrombotic disorders as well as bactericidal agent.

Avaliação da Capacidade Antioxidante e da Estabilidade Após Embalamento a Vácuo de Hambúrgueres de Pata-roxa (Scyliorhinus canicula).

Toneladas de pescado são desperdiçadas diariamente aquando do processamento do peixe e o hambúrguer de pata-roxa foi desenvolvido para reaproveitar esse pescado subvalorizado e para ser uma fonte nutricional rica em antioxidantes. No presente trabalho, pretendeu-se comprovar o potencial antioxidante antes e após o tratamento térmico do hambúrguer de pata-roxa, e o potencial citotóxico e antiproliferativo sobre um modelo celular do cancro da mama (MCF-7). Foi também observada a estabilidade do hambúrguer de pata-roxa embalado a vácuo e refrigerado. A extração dos compostos fitoquímicos foi realizada com solventes de polaridade distinta (água, metanol e diclorometano) e com diferentes durações do processo (12h e 24h). O tratamento térmico aplicado foi vinte minutos a 180ºC. O potencial antioxidante foi avaliado pela capacidade de redução do radical livre 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH) e pela capacidade de redução de radicais de oxigénio (ORAC), e através da quantificação total de polifenóis (QTP) pelo método de Folin-Ciocalteu (FC). O potencial citotóxico e antiproliferativo foi avaliado na linha celular MCF-7, cujos resultados foram revelados por ensaios espectrofotométricos (método do brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT)) e fluorimétricos (método de acetoxi-metil éster de calceína (calceína-AM)). A estabilidade do hambúrguer de pataroxa em vácuo e refrigerado foi avaliada através do estudo microbiológico com metodologias de referência (contagens de “totais” e produtores de sulfureto de hidrogénio (H2S) aeróbios e anaeróbios, esporos de Clostridium sulfitos-redutores, enterobactérias, Escherichia coli e pesquisa de Salmonella spp.), da determinação do índice de ácido tiobarbitúrico (TBA) e da avaliação da cor do hambúrguer pelo sistema CIE-L*a*b*. Os ensaios de DPPH e ORAC comprovaram a atividade antioxidante do extrato de hambúrguer de pata-roxa (metanol, 12h) com 79,5% de redução do DPPH e 8603,01μmol ET/100g para amostras sem tratamento térmico, e 87,4% de redução do DPPH e 2567,27μmol ET/100g para amostras com tratamento térmico. Quanto ao conteúdo fenólico, os extratos (metanol, 12h) revelaram 17,13mg EAG/100g do hambúrguer cru e 31,81mg EAG/100g do hambúrguer cozinhado. A extração de 24 horas não aumentou a quantidade de compostos fitoquímicos presentes no extrato. O hambúrguer apenas revelou ainda um potencial citotóxico in vitro relevante na linha celular MCF-7 (1mg/mL, 24h).Apesar do abuso observado na temperatura de armazenamento em refrigeração (temperatura média de 10,3ºC), o hambúrguer de pata-roxa cru, quando submetido ao embalamento a vácuo, apresentou um aumento no período de vida útil de prateleira de 4 dias relativamente à pata-roxa. Foi detetada a presença de esporos de Clostridium sulfito-redutores e 1,0x101ufc E. coli por 1g de hambúrguer de pata-roxa. Não foi detetada a presença de Salmonella spp. O índice de TBA manteve-se estável, mas o hambúrguer de pata-roxa sofreu uma perda na vivacidade (Cab) e na tonalidade (hab) da cor ao fim de 6 dias em refrigeração. É necessário continuar o estudo para melhorar o novo produto alimentar funcional, mas o presente trabalho permitiu concluir que o hambúrguer de pata-roxa reúne as condições para ter um elevado potencial antioxidante, apresentar maior estabilidade em armazenamento e, em simultâneo, constituir uma solução para o desperdício de pescado.

Avaliação da sensibilidade ao H2O2 de diferentes linhas celulares humanas: estabelecimento de modelos celulares para avaliação da capacidade antioxidante de moléculas ou extratos

Os organismos marinhos são considerados uma fonte de novos compostos bioativos com enorme potencial biotecnológico. As bactérias associadas a macroalgas têm vindo a ser estudadas devido à produção de metabolitos secundários com atividades biológicas. Neste trabalho foram isoladas e identificadas 90 bactérias associadas às macroalgas Asparagopsis armata, Bifurcaria bifurcata e Sphaerococcus coronopifolius com diferentes características fenotípicas, sendo identificadas relativamente ao seu género através da sequenciação do gene 16S RNA. A extração de compostos bioativos foi realizada com os solventes metanol e diclorometano (1:1). A capacidade antioxidante dos extratos das bactérias associadas foi avaliada através do método fluorimétrico ORAC (oxygen radical absorbent capacity), da quantificação total de polifenóis (QTP) e da capacidade de redução do radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). O efeito citotóxico do H2O2 foi testado nos modelos celulares SH-SY5Y, MCF-7 e HepG-2, representativos de células humanas neuronais, epiteliais da glândula mamária e hepáticas, respetivamente. Os extratos com maior capacidade antioxidante foram testados nos modelos celulares em condições de stress oxidativo induzido pelo H2O2. Os resultados foram revelados pelo método de 3-[4,5- dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT). O género de bactérias mais representativo identificado em associação com Asparagopsis armata, Bifurcaria Bifurcata e Sphaerococcus coronopifolius foi Vibrio sp. com 40%, 48,72% e 28,57%, respetivamente. Os géneros de bactérias menos representativos identificados em associação com Asparagopsis armata foram Bacillus sp., Cobetia sp. e Erwinia sp., com uma ocorrência de 3,33%. Por sua vez, Citricoccus sp., Cellulophaga sp., Ruegeria sp. e Staphylococcus sp. foram os géneros de bactérias menos representativos associados a Bifurcaria Bifurcata (2,56%). Os géneros menos representativos identificados em associação com Sphaerococcus coronopifolius foram Bacillus sp. e Holomonas sp. com uma ocorrência de 9,52%. O extrato da bactéria associada que apresentou maior potencial antioxidante avaliado pelos métodos de ORAC (3603,66 ± 80,14 μmol eq. Trolox/g extrato), QTP (53,854 ± 3,02 mg eq. ácido gál./g extrato) e DPPH (20,21 (14,41-28,34) μg.mL-1) foi a BB16 (Shewanella sp.), associada à alga Bifurcaria bifurcata. O efeito induzido pelo H2O2 foi bastante distinto na redução da viabilidade celular, com IC50 distintos, nas células SH-SY5Y (206,0 μM (150,4 – 282,2)), MCF-7 (450,2 μM (388,0 – 522,5)) e HepG-2 (1058,0 μM (847,3 – 1321,0)).A elevada atividade antioxidante do extrato da bactéria associada à alga Bifurcaria bifurcata (0,1mg.mL-1; BB16 – Shewanella sp.) permitiu a prevenção do efeito induzido pelo H2O2 na linha celular SH-SY5Y (IC50 - 431,7 μM (360,1 – 517,6). Em conclusão, as bactérias associadas das macroalgas Asparagopsis armata, Bifurcaria bifurcata e Sphaerococcus coronopifolius podem ser uma excelente e interessante fonte de compostos marinhos naturais com um elevado potencial antioxidante.

Desenvolvimento de produtos alimentares com algas edíveis da costa de Peniche (Portugal): Chá de algas com elevado poder antioxidante

O chá é a bebida mais consumida no mundo depois da água, no entanto, é no continente Asiático que é mais consumido. Existem vários tipos diferentes de chá “descendentes” da planta Camellia sinensis. É uma bebida multifacetada e benéfica para o próprio consumidor, devido às suas propriedades organoléticas e propriedades benéficas para a saúde (presença de antioxidantes). Hoje em dia existe uma crescente procura por produtos inovadores, de elevada qualidade nutricional, nomeadamente produtos alimentares com propriedades diuréticas ou dietéticas. Por outro lado, os organismos marinhos têm-se revelado como fonte de compostos bioativos com elevado potencial. Nomeadamente as algas que têm demonstrado produzir moléculas, pelo seu metabolismo secundário, com aplicação alimentar, farmacológica, entre outras. Desta forma, o principal objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade da alga Fucus Spiralis, uma alga edível com elevado poder antioxidante, na transferência de antioxidantes durante a preparação de uma tisana, para o desenvolvimento de uma bebida inovadora “chá de alga”. Por outro lado, este trabalho teve também como objetivo fazer uma nova tisana “variante” do chá verde alga Fucus Spiralis. De modo a estudar o melhor processo para a secagem da alga, esta foi seca através de três métodos: liofilização, em estufa e no secador Tray-drier. Para os três métodos foram avaliados vários parâmetros químicos, como a quantificação de polifenóis totais, cor, aW e teor de humidade. As análises foram realizadas logo após a secagem. Ao longo do tempo (60 dias), foi também medido a quantificação de polifenóis com a alga embalada a vácuo e sem estar embalada a vácuo. Finalmente, adicionando a alga, o chá verde e aditivos alimentares, procederam-se a três diferentes processos de conservação: esterilização, pasteurização e filtração (filtro 0,22μm). Após estes tratamentos foi realizado um estudo microbiológico, a variação de cor e a quantificação de polifenóis totais ao longo de 30 dias. O menor valor obtido de aW foi observado para a alga liofilizada. Por outro lado os menores valores de humidade foram obtidos pela secagem por liofilização e pela utilização da estufa ventilada. A realização da tisana de Fucus spiralis revelou a libertação de antioxidantes em todos os processos de secagem e para todas as concentrações testadas (0,1g; 0,5g e 1g/300mL). No entanto, a libertação de polifenóis revelou-se apenas dependente do processo de secagem para a concentração de 0,5 g/300 mL, onde a quantificação total de polifenóis foi superior para o processo de liofilização (0,246 ± 0,049 mg equivalentes de ácido gálico/mL). Este valor não apresentou diferenças estatisticamente significativas com os polifenóis quantificados para a concentração de 1g/300mL. O armazenamento da alga Fucus spiralis ao longo de 60 dias em vácuo ou na ausência de vácuo não provocaram alterações na quantificação total de polifenóis e foi independente do processo de secagem. Durante os 60 dias ocorreu uma diminuição dependente do tempo dos polifenóis libertados para a tisana de alga. Esta diminuição foi particularmente acentuada até aos 15 dias. A formulação de uma tisana com 0,5g da alga Fucus spiralis e 0,5g de chá verde revelou-se, tendencialmente, com maior concentração de polifenóis de que uma tisana com 1 g de chá verde ou 1 g. Para a tisana com 0,5g da alga Fucus spiralis e 0,5g de chá verde o processo de esterilização e pasteurização não impediram o crescimento de microrganismo ao final de 30 dias de armazenamento da tisana. Contrariamente, o processo de filtração garantiu ausência de carga bacteriana durante os 30 dias de armazenamento. Por outro lado os níveis de polifenóis diminuíram ligeiramente ao longo do tempo de armazenamento, mas de um modo independente do processo de conservação. Desta forma, as tisanas de alga (Fucus spiralis) e chá verde desenvolvidas no presente trabalho, quando liofilizadas e filtradas, apresentaram um elevado potencial antioxidante, apresentando-se como um produto inovador para a indústria alimentar.