PCR detection and analysis of Pasteurella multocida from the tonsils of slaughtered pigs in Vietnam

A total of 36 tonsil swab samples were collected from healthy swine prior to slaughter at the abattoirs in Can tho and Tien giang provinces of Southern Vietnam, The presence of Pasteurella multocida in these samples was detected by the combination of direct cultivation and isolation, mouse inoculation and the polymerase chain reaction (PM-PCR). P. multocida was detected in 16 samples by PCR, with 17 strains ultimately isolated. All samples were negative for serogroup B by HSB-PCR and conventional serotyping, with isolates identified as A:3, D:1 or D:3. In addition, all samples were determined to be negative for the P. multocida toxin (PMT). Characterisation of isolated P, multocida by REP-PCR and biotyping revealed nine distinct REP profiles and seven biotypes among the 17 isolates. Some correlation was seen with P. multocida isolated from a previous Australian outbreak of acute swine pasteurellosis, and those isolated from fowl cholera outbreaks in Vietnamese poultry. (C) 2000 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Intracellar signalling in the HGT-1 gastric cell line and in rat isolated parietal cells

The work presented in this thesis was undertaken to increase understanding of the intracellular mechanisms regulating acid secretion by gastric parietal cells. Investigation of the effects of protein kinase C on secretory activity induced by a variety of agents was a major objective. A further aim was to establish the sites at which epidermal growth factor (EGF) acts to stimulate prostaglandin E2 (PGE2) production and to inhibit acid secretion. These investigations were carried out by using the HGT-1 human gastric cancer cell line and freshly isolated rat parietal cells. In HGT-1 cells, the cyclic AMP response to histamine and to truncated glucagon-like peptide 1 (TGLP-1) was reduced when protein kinase C was activated by 12-0-tetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA). Receptor-binding studies and experiments in which cyclic AMP production in HGT-1 cells was stimulated by gastric inhibitory polypeptide, cholera toxin and forskolin suggested that the effect of TPA was mediated by uncoupling of the histamine H2 receptor from the guanine nucleotide regulatory protein Gs, possibly by phosphorylation of the receptor. An involvement of protein kinase C α in this effect was suggested because an antibody to this isoform specifically prevented the inhibitory effects of TPA on histamine-stimulated adenylate cyclase activity in a membrane fraction prepared from HGT-1 cells. Carbachol-stimulated secretory activity in parietal cells was specifically inhibited by Ro 31-8220, a bisindolylmaleimide inhibitor of protein kinase C. Thus protein kinase C may play a role in the activation of the secretory response to carbachol. In parietal cells prelabelled with [3H]-arachidonic acid or [3H]myristic acid, EGF did not affect [3H]-fatty acid or [3H] - diacylglycerol content. No evidence for effects of EGF on phosphatidylinositol glycan-specific phospholipase C, phospholipase A2 or on low Km cyclic AMP phosphodiesterase activities were found.

Mapeamento das projeções retinianas para o sistema óptico acessório, colículo superior e complexo pré-tectal do sagui (callithrix jacchus)

The accessory optical system, the pretectal complex, and superior colliculus are important control centers in a variety of eye movement, being extremely necessary for image formation, consequently to visual perception. The accessory optical system is constituted by the nuclei: dorsal terminal nucleus, lateral terminal nucleus, medial terminal nucleus and interstitial nucleus of the posterior superior fasciculus. From a functional point of view they contribute to the image stabilization, participating in the visuomotor activity where all system cells respond to slow eye movements and visual stimuli, which is important for the proper functioning of other visual systems. The pretectal complex comprises a group of nuclei situated in mesodiencephalic transition, they are: anterior pretectal nucleus, posterior pretectal nucleus, medial pretectal nucleus, olivary pretectal nucleus and the nucleus of the optic tract, all retinal projection recipients and functionally are related to the route of the pupillary light reflex and the optokinetic nystagmus. The superior colliculus is an important subcortical visual station formed by layers and has an important functional role in the control of eye movements and head in response to multisensory stimuli. Our aim was to make a mapping of retinal projections that focus on accessory optical system, the nuclei of pretectal complex and the superior colliculus, searching mainly for pretectal complex, better delineation of these structures through the anterograde tracing with the B subunit of cholera toxin (CTb) followed by immunohistochemistry and characterized (measured diameter) synaptic buttons present on the fibers / terminals of the nucleus complex pré-tectal. In our results accessory optical system, including a region which appears to be medial terminal nucleus and superior colliculus, were strongly marked by fibers / terminals immunoreactive CTb as well as pretectal complex in the nucleus: optic tract, olivary pretectal nucleus, anterior pretectal nucleus and posterior pretectal nucleus. According to the characterization of the buttons it was possible to make a better definition of these nucleus.

Augmentation de l’absorption intestinale à l’aide de promédicaments se liant aux gangliosides GM1

Le but de ce projet est de développer une approche biomimétique pour augmenter l'absorption de molécules actives peu perméables. Cette approche réplique le mécanisme d'internalisation de la toxine du choléra par sa liaison au récepteur GM1 à la surface des cellules intestinales. La technologie proposée est de synthétiser des promédicaments composés d'une molécule active, d'un espaceur et d'un peptide ayant de l'affinité pour le GM1. Les hypothèses de ce projet sont que le peptide faisant partie du promédicament augmentera l'absorption intestinale de médicaments peu perméables et que le complexe sera métabolisé rapidement après son absorption. Des prototypes de promédicaments ont été synthétisés et des essais de stabilité, d'affinité et de perméabilité sur les peptides et les promédicaments ont été développés et réalisés. Les résultats de cette étude ont démontré la possibilité de synthétiser des promédicaments à partir d'un peptide liant le GM1 et d'une molécule thérapeutique ayant une faible biodisponibilité. Les essais de stabilité, d'affinité et de perméabilité ont été optimisés et implémentés avec succès. Les études in vitro initiales ont rapporté des résultats prometteurs concernant les propriétés de liaison du peptide utilisé et d'un des promédicaments préparés. Par contre, les résultats des essais de stabilité ont montré un métabolisme partiel des promédicament dans le plasma ainsi qu'une instabilité des solutions mères. De plus, les essais de perméabilité se sont avérés non concluants. Les prochaines études porteront sur la préparation de nouveaux promédicaments par une approche similaire ainsi que sur l'investigation du mécanisme d'internalisation du peptide.

Epidemias bacterianas emergentes do século XXI

As doenças infeciosas distantes de serem um problema do passado têm aumentado drasticamente nestes últimos anos, causando epidemias emergentes, quer de origem bacteriana ou vírica ou de outros tipos de microrganismos. Esta dissertação tem como objetivo uma pesquisa atual bibliográfica sobre o estudo de algumas epidemias bacterianas emergentes do século XXI, como a Tuberculose, Cólera, Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) e Meningite Meningocócica, bem como os seus dados epidemiológicos. A Tuberculose é uma das doenças mais antigas, que apresenta uma elevada taxa de mortalidade e com o passar do tempo tem vindo a aumentar a nível mundial. A TB é causada por uma bactéria denominada Mycobacterium tuberculosis que normalmente afeta os pulmões e outros órgãos. O tratamento, a prevenção e o diagnóstico precoce são pontos essenciais, para ter um bom desfecho para o doente. A Cólera tem-se propagado pelo mundo desde o século XX. Esta doença caracteriza-se por uma diarreia aguda grave que é causada pela bactéria Vibrio cholerae. O seu tratamento se for realizado precocemente é tratado facilmente, com apenas hidratação com sais orais. A prevenção é uma medida essencial para ter um bom prognóstico, e evitar surtos emergentes desta infeção. Devido à sua virulência, Staphylococcus aureus é responsável por infeções graves adquiridas em hospital e na comunidade. Na maioria das vezes esta infeção é assintomática, mas pode causar infeções graves até mesmo fatais. Devido às resistências aos antibióticos β-lactâmicos e de outros tipos de antibióticos, e também devido ao aumento do número crescente de quadros infeciosos de MRSA, houve necessidade de novos antibióticos como o linezolide, as cefasloporinas de 5ª geração no combate a estas infeções. As medidas de prevenção são essenciais, visto que se não forem realizadas pode haver progressão da doença. Além de um estudo científico constante dos mecanismos de resistências desta bactéria, ser essencial. A meningite bacteriana é um grave problema de Saúde Pública devido à alta incidência em crianças. A meningite meningocócica é causada pela bactéria Neisseria meningitidis que origina um processo inflamatório das meninges. Há algum tempo atrás a mortalidade era elevada, mas com o advento da antibioterapia reduziu significativamente. As vacinas fizeram com que ocorresse uma mudança bastante significativa na epidemiologia desta patologia, e mais uma vez a prevenção é essencial.

Louis Pasteur

No presente trabalho procede-se a uma descrição sobre os aspetos considerados mais relevantes relativos à vida e à obra do extraordinário cientista e humanista do século XIX – Louis Pasteur. Contextualiza-se, também, em vários pontos, a sua obra com a de outros cientistas da época, enquadrando os trabalhos por si realizados em descobertas anteriores. Abordam-se os magníficos estudos feitos no âmbito da cristalografia (que muito contribuíram para a moderna estereoquímica) e da fermentação, como um mecanismo utilizado por certos microrganismos para produzir energia na ausência de oxigénio, facto totalmente inédito na época. Explica-se como Pasteur, de uma forma inteligentíssima, conseguiu pôr fim à velha teoria da geração espontânea. Refere-se como surgiu a genial ideia da pasteurização, termo em homenagem ao grande sábio, que veio a modificar toda a indústria do vinho, da cerveja e de tantos outros alimentos, estabelecendo a importância da microbiologia na indústria alimentar. Abordam-se os estudos realizados por Pasteur sobre doenças infeciosas (a pebrina, a cólera das galinhas, o carbúnculo e a raiva), incluindo os espetaculares procedimentos que conduziram à elaboração das primeiras vacinas que ensinaram aos cientistas mais novos a fabricar outras, salvando-se tantas vidas.

Augmentation de l’absorption intestinale à l’aide de promédicaments se liant aux gangliosides GM1

Le but de ce projet est de développer une approche biomimétique pour augmenter l'absorption de molécules actives peu perméables. Cette approche réplique le mécanisme d'internalisation de la toxine du choléra par sa liaison au récepteur GM1 à la surface des cellules intestinales. La technologie proposée est de synthétiser des promédicaments composés d'une molécule active, d'un espaceur et d'un peptide ayant de l'affinité pour le GM1. Les hypothèses de ce projet sont que le peptide faisant partie du promédicament augmentera l'absorption intestinale de médicaments peu perméables et que le complexe sera métabolisé rapidement après son absorption. Des prototypes de promédicaments ont été synthétisés et des essais de stabilité, d'affinité et de perméabilité sur les peptides et les promédicaments ont été développés et réalisés. Les résultats de cette étude ont démontré la possibilité de synthétiser des promédicaments à partir d'un peptide liant le GM1 et d'une molécule thérapeutique ayant une faible biodisponibilité. Les essais de stabilité, d'affinité et de perméabilité ont été optimisés et implémentés avec succès. Les études in vitro initiales ont rapporté des résultats prometteurs concernant les propriétés de liaison du peptide utilisé et d'un des promédicaments préparés. Par contre, les résultats des essais de stabilité ont montré un métabolisme partiel des promédicament dans le plasma ainsi qu'une instabilité des solutions mères. De plus, les essais de perméabilité se sont avérés non concluants. Les prochaines études porteront sur la préparation de nouveaux promédicaments par une approche similaire ainsi que sur l'investigation du mécanisme d'internalisation du peptide.

Neurofilaments and NFL-TBS.40-63 peptide penetrate oligodendrocytes through clathrin-dependent endocytosis to promote their growth and survival in vitro.

International audience

Anticancer and antibacterial secondary metabolites from the endophytic fungus Penicillium sp. CAM64 against multi-drug resistant Gram-negative bacteria.

Background: The emergence of multiple-drug resistance bacteria has become a major threat and thus calls for an urgent need to search for new effective and safe anti-bacterial agents. Objectives: This study aims to evaluate the anticancer and antibacterial activities of secondary metabolites from Penicillium sp. , an endophytic fungus associated with leaves of Garcinia nobilis . Methods: The culture filtrate from the fermentation of Penicillium sp. was extracted and analyzed by liquid chromatography– mass spectrometry, and the major metabolites were isolated and identified by spectroscopic analyses and by comparison with published data. The antibacterial activity of the compounds was assessed by broth microdilution method while the anticancer activity was determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. Results: The fractionation of the crude extract afforded penialidin A-C (1-3), citromycetin (4), p-hydroxyphenylglyoxalaldoxime (5) and brefelfin A (6). All of the compounds tested here showed antibacterial activity (MIC = 0.50 – 128 μg/mL) against Gramnegative multi-drug resistance bacteria, Vibrio cholerae (causative agent of dreadful disease cholera) and Shigella flexneri (causative agent of shigellosis), as well as the significant anticancer activity (LC50 = 0.88 – 9.21 μg/mL) against HeLa cells. Conclusion: The results obtained indicate that compounds 1-6 showed good antibacterial and anticancer activities with no toxicity to human red blood cells and normal Vero cells.

Gastrodiplomacia como herramienta de política exterior. estudio de caso: Perú

El presente trabajo tiene como objetivo analizar la manera mediante la cual Perú ha incor- porado la gastrodiplomacia a su estrategia de diplomacia cultural como componente de su política exterior. Con el fin de cumplir este propósito, se va a defender que desde el 2008 el país Inca ha incorporado la gastrodiplomacia a su estrategia de diplomacia cultural em- pleando dos herramientas. Primero, a través de su Plan de Política Exterior Cultural, en donde se señalan objetivos claros en temas de gastronomía. En segundo lugar, con el uso de su marca país mediante la cual se promociona al Perú como un país atractivo gracias a su amplia oferta gastronómica. El trabajo es de carácter analítico y descriptivo ya que pretende entender la manera en la que Perú incorporó la gastrodiplomacia en su política exterior y describir esos objetivos y características de su Plan de Política Exterior Cultural y de su estrategia de marca país.