Heterologous desensitization of the glucagon-like peptide-1 receptor by phorbol esters requires phosphorylation of the cytoplasmic tail at four different sites.

Glucagon-like peptide-1 stimulates glucose-induced insulin secretion by binding to a specific G protein-coupled receptor that activates the adenylyl cyclase pathway. We previously demonstrated that heterologous desensitization of the receptor by protein kinase C correlated with phosphorylation in a 33-amino acid-long segment of the receptor carboxyl-terminal cytoplasmic tail. Here, we determined that the in vivo sites of phosphorylation are four serine doublets present at positions 431/432, 441/442, 444/445, and 451/452. In vitro phosphorylation of fusion proteins containing mutant receptor C-tails, however, indicated that whereas serines at position 431/432 were good substrates for protein kinase C (PKC), serines 444/445 and 451/452 were poor substrates, and serines 441/442 were not substrates. In addition, serine 416 was phosphorylated on fusion protein but not in intact cells. This indicated that in vivo a different PKC isoform or a PKC-activated kinase may phosphorylate the receptor. The role of phosphorylation on receptor desensitization was assessed using receptor mutants expressed in COS cells or Chinese hamster lung fibroblasts. Mutation of any single serine doublet to alanines reduced the extent of phorbol 12-myristate 13-acetate-induced desensitization, whereas substitution of any combination of two serine doublets suppressed it. Our data thus show that the glucagon-like peptide-1 receptor can be phosphorylated in response to phorbol 12-myristate 13-acetate on four different sites within the cytoplasmic tail. Furthermore, phosphorylation of at least three sites was required for desensitization, although maximal desensitization was only achieved when all four sites were phosphorylated.

Videoclip y cuerpo: el entre-lugar de los corpus mutantes

El videoclip, al unir imagen y música, se presenta como un producto audiovisual de éxito, capaz de movilizar cuerpos, miradas, gestos en una gozosa y prolífica fruición. El encuentro del videoclip y del cuerpo en esta investigación, además de marcar las influencias mutuas de ambos “cuerpos”, se interesa por la potencia del medio “clíptico” en la producción de nuevas corporeidades y de nuevas narrativas

Efectos de lo real. Discursos acerca de los cuerpos artificiales

Los cuerpos artificiales ( muñecos, autómatas, maniquíes) son tratados a través de tres tipos de discurso: del artificio, de la mirada y del deseo. Esta perspectiva permite abordarlos, no como representaciones ni como dobles (Döppelgänger) sino como significantes en el discurso , como objetos de deseo y como puntos de articulación de la mirada. En el discurso del artificio se pasa revista al binomio natural/artificial y , a través de distintos textos , El tratado de Hombre de René Descarrtes, la “teoría de los maniquíes” y la “generatio aequivoca” de Bruno Schulz, y el film Jidlo (Comida) de Jan Svankmajer, se hace lo propio con los paradigmas desde los que se ha metaforizado al cuerpo humano. En el discurso de la mirada, se los aborda desde la perspectiva psicoanalítica del campo escópico, a través de El hombre de la arena, de ETA Hoffmann. Los discursos del deseo tratan de algunos aspectos de esta pulsión : el deseo masculino desde La Eva futura de Villiers de l’Isle Adam, el “deseo de hijo”, a través del film Otesánek de Jan Svankmajer y la genericidad del deseo en dos novelas de Gaston Leroux , La muñeca sangrienta y la máquina de asesinar . Los cuerpos artificiales, así, podrían ser considerados, en su potencia significativa, no ya como dobles , sino como efectos de lo real, como “pequeños otros”, como “objetos a” lacanianos y como simulacros.

Actituds professionals dels funcionaris penitenciaris: l’efecte de la formació inicial

Aquesta recerca vol determinar quin ha estat el resultat de la formació inicial que han rebut els funcionaris penitenciaris que s’incorporen a tasques de vigilància dins dels centres penitenciaris de Catalunya dins del cos tècnic d’especialistes de serveis penitenciaris, durant el primer semestre de l’any 2007, i si aquesta formació que han rebut ha pogut influir en les actituds professionals d’aquests treballadors. Atès que aquest tipus de curs de formació inicial és de nova implementació s’ha pogut constituir un grup experimental (314 subjectes que han fet el curs) i un grup control (113 subjectes que han entrat directament sens haver fet el curs). El treball de camp es va dur a terme mitjançant la passació de qüestionaris pre-test i post-test, és a dir, abans de començar el curs de formació, febrer del 2007, quan va finalitzar la formació teòrica, abril del 2007, i al novembre 2007, un cop finalitzada la part teòrico-pràctica. Els resultats mostren una vegada han passat els 6 primers mesos d’exercici professional, uns resultats clarament favorables al grup experimental i evidencien un efecte positiu en la formació rebuda respecte a les actituds professionals dels funcionaris penitenciaris. En concret, els participants del grup experimental es perceben a sí mateixos amb una molt notable eficàcia en l’exercici de la feina penitenciària, respecte com es perceben els del grup control; així mateix els integrants del GE destaquen per una major orientació professional al servei a les persones i més alta desitjabilitat social, també manifesten una major motivació laboral intrínseca, a més a més d’evidenciar millors actituds vers els interns i major recolzament a la rehabilitació.

La figura di Nikola Tesla (1856-1943) in Tajna Nikole Tesle (1980)

Nikola Tesla è considerato, dai divulgatori scientifici che di lui si occupano, una figura chiave nella storia della scienza moderna e contemporanea, per l’importanza che hanno avuto le sue ricerche nello sviluppo di tecnologie del XX e XXI secolo. La sua attuale scarsa fama nel piano accademico contrasta con un’abbondante presenza di un Nikola Tesla come personaggio di finzione nelle arti popolari. Questa ricezione ambigua di Tesla potrebbe essere di fatto relazionata con il carattere utopico e visionario delle sue speranze nella scienza come mezzo di conoscenza per il miglioramento della società umana. Questo breve saggio si propone di analizzare come venga presentato il personaggio di Nikola Tesla nel lungometraggio jugoslavo Tajna Nikole Tesle, contribuendo così alla comprensione di come la narrativa di finzione possa sfruttare l’immagine di uno scienziato relativamente agli interessi politici legati a specifici contesti socio-storici.

Devenir femina virilis: de la virilización a la masculinización de la mujer, un camino entre el prestigio y el menosprecio

Esta investigación pretende hacer un pequeño recorrido por el espacio simbólico de la femina virilis. Se intenta destacar cuáles son sus orígenes, qué tipos de femina virilis hubo, sus exigencias y consecuencias, por ocupar este espacio de tránsito en hombre-mujer. A continuación, se intenta mostrar cómo utilizaron el cuerpo para escribir experiencia y, de qué manera algunas de ellas, se sirvieron del travestismo como recurso para subvertir su situación, en un cuerpo sexuado de mujer.

Límites teóricos de sujeto epistolar y sujeto poético románticos, en la literatura escrita por mujeres

El proyecto, desarrollado bajo los auspicios del grupo Cos i Textualitat, aborda las relaciones entre las categorías de sujeto poético y sujeto epistolar, en la literatura romántica escrita por mujeres, que abarca corpus textuales del siglo XIX y principios del siglo XX. Haciendo uso de las herramientas del comparatismo, de la teoría de la literatura y de los estudios de género y sexualidad, el proyecto en una primera instancia se detuvo a estudiar la obra de aquellas escritoras (en el ámbito de la literatura norteamericana, española e hispanomericana) que desarrollaron e impulsaron el subgénero de la cartapoema, y cómo dicho subgénero les permitía velar su espacio íntimo, enmascarar su identidad literaria y social, al tiempo que obtenían legitimación social en esta estrategia de escritura. De este modo, el proyecto insiste en las estrategias de lectura de este tipo de textos, marginados por la crítica literaria, y de un tratamiento clasificatorio ciertamente ambiguo, y al mismo tiempo contaminado por la lectura autobiográfica de los textos. Cabe destacar que el punto de partida de este proceso de investigación fue la obra de la escritora norteamericana Emily Dickinson (1830-1886), pero se extendió con posterioridad desde autoras del romanticismo hispanoamericano, incluso hasta llegar a autoras españolas que escapan al movimiento romántico, bien entrado ya el siglo XX.

Individual contributions of mutant protease and reverse transcriptase to viral infectivity, replication, and protein maturation of antiretroviral drug-resistant human immunodeficiency virus type 1.

Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) variants resistant to protease (PR) and reverse transcriptase (RT) inhibitors may display impaired infectivity and replication capacity. The individual contributions of mutated HIV-1 PR and RT to infectivity, replication, RT activity, and protein maturation (herein referred to as "fitness") in recombinant viruses were investigated by separately cloning PR, RT, and PR-RT cassettes from drug-resistant mutant viral isolates into the wild-type NL4-3 background. Both mutant PR and RT contributed to measurable deficits in fitness of viral constructs. In peripheral blood mononuclear cells, replication rates (means +/- standard deviations) of RT recombinants were 72.5% +/- 27.3% and replication rates of PR recombinants were 60.5% +/- 33.6% of the rates of NL4-3. PR mutant deficits were enhanced in CEM T cells, with relative replication rates of PR recombinants decreasing to 15.8% +/- 23.5% of NL4-3 replication rates. Cloning of the cognate RT improved fitness of some PR mutant clones. For a multidrug-resistant virus transmitted through sexual contact, RT constructs displayed a marked infectivity and replication deficit and diminished packaging of Pol proteins (RT content in virions diminished by 56.3% +/- 10.7%, and integrase content diminished by 23.3% +/- 18.4%), a novel mechanism for a decreased-fitness phenotype. Despite the identified impairment of recombinant clones, fitness of two of the three drug-resistant isolates was comparable to that of wild-type, susceptible viruses, suggestive of extensive compensation by genomic regions away from PR and RT. Only limited reversion of mutated positions to wild-type amino acids was observed for the native isolates over 100 viral replication cycles in the absence of drug selective pressure. These data underscore the complex relationship between PR and RT adaptive changes and viral evolution in antiretroviral drug-resistant HIV-1.

Hacia un entrenamiento del actor

Esta investigación está basada en la intención de crear una guía de entrenamiento para el actor, que busca asumir un compromiso con su cuerpo, como instrumento para la creación escénica. El trabajo del actor-actriz está irremediablemente vinculado a su cuerpo, todo lo humano se enmarca en un cuerpo vivido, en el espacio y en el tiempo, no es algo neutral. Sabemos que cada actor-actriz, tiene una noción de su esquema corporal, entendiendo por esquema corporal la representación en imágenes de los diferentes segmentos corporales que conforman nuestro cuerpo y la percepción de éste esquema corporal, estará en función de su capacidad de auto-percepción

Expression cloning of the pancreatic beta cell receptor for the gluco-incretin hormone glucagon-like peptide 1.

Glucagon-like peptide 1 (GLP-1) is a hormone derived from the preproglucagon molecule and is secreted by intestinal L cells. It is the most potent stimulator of glucose-induced insulin secretion and also suppresses in vivo acid secretion by gastric glands. A cDNA for the GLP-1 receptor was isolated by transient expression of a rat pancreatic islet cDNA library into COS cells; this was followed by binding of radiolabeled GLP-1 and screening by photographic emulsion autoradiography. The receptor transfected into COS cells binds GLP-1 with high affinity and is coupled to activation of adenylate cyclase. The receptor binds specifically GLP-1 and does not bind peptides of related structure and similar function, such as glucagon, gastric inhibitory peptide, vasoactive intestinal peptide, or secretin. The receptor is 463 amino acids long and contains seven transmembrane domains. Sequence homology is found only with the receptors for secretin, calcitonin, and parathyroid hormone, which form a newly characterized family of G-coupled receptors.

Adrenergic, dopaminergic, and muscarinic receptor stimulation leads to PKA phosphorylation of Na-K-ATPase.

Na-K-adenosinetriphosphatase (Na-K-ATPase) is a potential target for phosphorylation by protein kinase A (PKA) and C (PKC). We have investigated whether the Na-K-ATPase alpha-subunit becomes phosphorylated at its PKA or PKC phosphorylation sites upon stimulation of G protein-coupled receptors primarily linked either to the PKA or the PKC pathway. COS-7 cells, transiently or stably expressing Bufo marinus Na-K-ATPase wild-type alpha- or mutant alpha-subunits affected in its PKA or PKC phosphorylation site, were transfected with recombinant DNA encoding beta 2- or alpha 1-adrenergic (AR), dopaminergic (D1A-R), or muscarinic cholinergic (M1-AChR) receptor subspecies. Agonist stimulation of beta 2-AR or D1A-R led to phosphorylation of the wild-type alpha-subunit, as well as the PKC mutant, but not of the PKA mutant, indicating that these receptors can phosphorylate the Na-K-ATPase via PKA activation. Surprisingly, stimulation of the alpha 1B-AR, alpha 1C-AR, and M1-AChR also increased the phosphorylation of the wild-type alpha-subunit and its PKC mutant but not of its PKA mutant. Thus the phosphorylation induced by these primarily phospholipase C-linked receptors seems mainly mediated by PKA activation. These data indicate that the Na-K-ATPase alpha-subunit can act as an ultimate target for PKA phosphorylation in a cascade starting with agonist-receptor interaction and leading finally to a phosphorylation-mediated regulation of the enzyme.

Cell surface expression of a functional rubella virus E1 glycoprotein by addition of a GPI anchor.

Rubella virus (RV) envelope glycoproteins E1 and E2 are targeted to the Golgi as heterodimers. While E2 contains a transmembrane Golgi retention signal, E1 is arrested in a pre-Golgi compartment in the absence of E2, and appears to require heterodimerization in order to reach the Golgi. Various forms of E1 with deletions in the ectodomain or lacking the cytoplasmic (CT) and transmembrane (TM) domains, as well as the 29 C-terminal amino acid residues of the ectodomain were also retained intracellularly. We therefore investigated the possibility of targetting E1 to the plasma membrane by addition of a glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchor. We found that E1GPI was transported to the cell surface where it retained the hemadsorption activity characteristic of the wild-type E1/E2 heterodimer. Furthermore, coexpression of a mammalian GPI-specific phospholipase D (GPI-PLD) resulted in the release of E1GPI and in constitutive expression of a soluble form of E1. This study thus demonstrates that the GPI anchor has a dominant effect over the E1 pre-Golgi retention signal and that E1 is sufficient for hemadsorption.

Nanomaterials in the European Union [the quest for a regulatory regime]

Mentre que les nanotecnologies s'espera que porti beneficis importants en molts sectors i contribuir a la competitivitat, hi ha un creixent cos de dades científiques que indiquin que hi ha motius raonables per témer que els nanomaterials en particular pot donar lloc a els possibles riscos i efectes nocius per a la salut i el medi ambient. El meu objectiu és examinar com la Unió Europea està donant forma a un règim regulatori per nanomaterials: l'opció regulatòria escollida, la legislació vigent aplicable i la seva eficàcia (amb especial atenció sobre REACH buits normatius), la posició adoptada per la els diferents actors en aquest procés i l'evolució prevista legal en el curt termini.

La parola raccontata dai cavalieri-narratori nella "Continuation du Roman de Meliadus" (ms. Ferrell 5)

Copiato nell'Italia del Nord verso il 1350, il manoscritto Ferrell 5 è oggi il solo testimone della "Continuation du Roman de Meliadus" che racconta le avventure di Artù, di Meliadus il padre di Tristano, e del Buon Cavaliere senza Paura padre di Dinadan, partiti alla ricerca di Morholt, prigioniero su di un'isola lontana. Ora, questa inchiesta è solo un pretesto: al centro dell'interesse dei tre re non sta tanto l'avventura promessa quanto i racconti che essi collezionano in occasione dei diversi scali di questo viaggio per mare, durante il quale non succede quasi niente. La ricerca di Morholt agisce quale racconto-cornice che non solo mette in scena le condizioni della presa di parola da parte dei cavalieri-narratori e organizza i racconti, anzi li drammatizza, ma funziona anche da matrice che informa, feconda e rigenera questi stessi racconti. Quanto all'isolamento, imposto dalla navigazione, esso permette lo sbocciare di una piccola ma prestigiosa società di narratori che non ha nulla da invidiare a quella delle raccolte di novelle. Così, un racconto dopo l'altro, si definisce un'arte di narrare che espone ed esplora i legami tra valore del racconto e bontà della cavalleria: la perfezione poetica, fonte del piacere estetico, è solo l'altra faccia della perfezione cavalleresca.