Cdc25B activity is regulated by 14-3-3

In the G2 phase cell cycle checkpoint arrest, the cdc25-dependent activation of cyclin B/cdc2, a critical step in regulating entry into mitosis, is blocked. Studies in yeast have demonstrated that the inhibition of cdc25 function involves 14-3-3 binding to cdc25, In humans, two cdc25 isoforms have roles in G2/M progression, cdc25B and cdc25C, both bind 14-3-3, Abrogating 14-3-3 binding to cdc25C attenuates the G2 checkpoint arrest, but the contribution of 14-3-3 binding to the regulation of cdc25B function is unknown. Here we demonstrate that high level over-expression of cdc25B in G2 checkpoint arrested cells can activate cyclin B/cdc2 and overcome the checkpoint arrest. Mutation of the major 14-3-3 binding site, S323, or removal of the N-terminal regulatory domain are strong activating mutations, increasing the efficiency with which the mutant forms of cdc25B not only overcome the arrest, but also initiate aberrant mitosis, We also demonstrate that 14-3-3 binding to the S323 site on cdc25B blocks access of the substrate cyclin/cdks to the catalytic site of the enzyme, thereby directly inhibiting the activity of cdc25B, This provides direct mechanistic evidence that 14-3-3 binding to cdc25B can regulate its activity, thereby controlling progression into mitosis.

Ataxia-telangiectasia-mutated (ATM) and NBS1-dependent phosphorylation of Chk1 on Ser-317 in response to ionizing radiation

In mammals, the ATM (ataxia-telangiectasia-mutated) and ATR (ATM and Rad3-related) protein kinases function as critical regulators of the cellular DNA damage response. The checkpoint functions of ATR and ATM are mediated, in part, by a pair of checkpoint effector kinases termed Chk1 and Chk2. In mammalian cells, evidence has been presented that Chk1 is devoted to the ATR signaling pathway and is modified by ATR in response to replication inhibition and UV-induced damage, whereas Chk2 functions primarily through ATM in response to ionizing radiation (IR), suggesting that Chk2 and Chk1 might have evolved to channel the DNA damage signal from ATM and ATR, respectively. We demonstrate here that the ATR-Chk1 and ATM-Chk2 pathways are not parallel branches of the DNA damage response pathway but instead show a high degree of cross-talk and connectivity. ATM does in fact signal to Chk1 in response to IR. Phosphorylation of Chk1 on Ser-317 in response to IR is ATM-dependent. We also show that functional NBS1 is required for phosphorylation of Chk1, indicating that NES1 might facilitate the access of Chk1 to ATM at the sites of DNA damage. Abrogation of Chk1 expression by RNA interference resulted in defects in IR-induced S and G2/M phase checkpoints; however, the overexpression of phosphorylation site mutant (S317A, S345A or S317A/S345A double mutant) Chk1 failed to interfere with these checkpoints. Surprisingly, the kinase-dead Chk1 (D130A) also failed to abrogate the S and G2 checkpoint through any obvious dominant negative effect toward endogenous Chk1. Therefore, further studies will be required to assess the contribution made by phosphorylation events to Chk1 regulation. Overall, the data presented in the study challenge the model in which Chk1 only functions downstream from ATR and indicate that ATM does signal to Chk1. In addition, this study also demonstrates that Chk1 is essential for IR-induced inhibition of DNA synthesis and the G2/M checkpoint.

Identificação de zonas mortas da cóclea por meio do teste TEN

O audiograma ou o relato do paciente não é suficiente para determinar a presença ou não de zonas mortas na cóclea (ZMC), nem identificar sua extensão. OBJETIVO: Investigar, utilizando o teste TEN, ZMC de indivíduos com perda auditiva neurossensorial (PANS). CEDALVI/ HRAC-USP-Bauru, de agosto de 2003 a fevereiro de 2004. TIPO DE ESTUDO: Estudo de coorte contemporânea com corte transversal. Casuística e Métodos: O TEN foi aplicado nos grupos G1 (5 mulheres com limiares tonais aéreos dentro do padrão de normalidade); G2 (4 mulheres e 5 homens com PANS moderada plana); G3 (19 mulheres e 24 homens com PANS com o grau variando entre leve a profundo). RESULTADOS: Para G1, o valor de TEN para eliminar o tom de teste foi, em média, próximo ao limiar absoluto para todas as freqüências. Não foi observada ZMC em nenhuma das orelhas testadas do G2. Para as 76 orelhas do G3, 6 não apresentaram indício de ZM. CONCLUSÕES: O TEN é efetivo para indicar ZMC em indivíduos com PANS descendente. Há evidência de diferença na detecção do tom puro na presença de ruído entre indivíduos com PANS em altas freqüências e com PANS plana, pois se observou diferença significativa entre o limiar mascarado e absoluto apenas para PANS descendentes e não para as planas.

Resolução temporal de crianças: comparação entre audição normal, perda auditiva condutiva e distúrbio do processamento auditivo

A resolução temporal é essencial na percepção acústica da fala, podendo estar alterada nos distúrbios auditivos gerando prejuízos no desenvolvimento da linguagem. OBJETIVO: Comparar a resolução temporal de crianças com audição normal, perda auditiva condutiva e distúrbios do processamento auditivo. CASUÍSTICA E MÉTODO: A amostra foi de 31 crianças de 07 a 10 anos, divididas em três grupos: G1: 12 com audição normal, G2: sete com perda auditiva condutiva e G3: 12 com distúrbio do processamento auditivo. Os procedimentos de seleção foram: questionário aos responsáveis, avaliação audiológica e do processamento auditivo. O procedimento de pesquisa foi o teste de detecção de intervalos no silêncio realizado a 50 dB NS acima da média de 500, 1000 e 2000Hz na condição binaural em 500, 1000, 2000 e 4000Hz. Na análise dos dados foi utilizado o Teste de Wilcoxon, com nível de significância de 1%. RESULTADO: Observou-se que houve diferença entre os G1 e G2 e entre os G1 e G3 em todas as freqüências. Por outro lado, esta diferença não foi observada entre os G2 e G3. CONCLUSÃO A perda auditiva condutiva e o distúrbio do processamento auditivo têm influência no limiar de detecção de intervalos.

Comparison of pupil diameter and tear production in dogs treated with acepromazine, tramadol and their combination

Some ophthalmic surgeries require induction of mydriasis, however, drugs traditionally used for this purpose significantly reduces tear production. To evaluate the effect of acepromazine and tramadol, used alone or in combination, on pupil diameter, tear production, heart and respiratory rate, systolic blood pressure and rectal temperature, these drugs were administered to seven clinically normal dogs divided into three experimental groups (G1 - acepromazine; G2 - tramadol; G3 - tramadol + acepromazine) that differed only in the sedation protocol. Parameters were measured in four experimental moments. Miosis occurred in G1, in addition to reduced tear production and respiratory rate. No significant changes were found in the parameters assessed in G2, whereas in G3, there was decrease in tear production of the right eye, decrease in the respiratory rate and rectal temperature. Tramadol proved to be a drug suitable for pre-anesthetic procedures that require the maintenance of pupil diameter and keeps the tear production within normal parameters. However, the use of acepromazine alone or in combination with tramadol requires protection of the patient's eye surface to prevent the occurrence of undesirable ophthalmic changes.

Desempenho de gotejadores operando com efluente da castanha de caju sob distintas pressões de serviço

Este trabalho objetivou analisar o efeito de distintas pressões de serviço no coeficiente de variação da vazão (CVQ) de sistemas de irrigação por gotejamento, operando com água residuária da castanha de caju. O experimento foi montado no esquema de parcelas subsubdivididas, tendo, nas parcelas, as pressões de serviço (70, 140, 210 e 280 kPa), nas subparcelas, os modelos de gotejadores (G1, G2 e G3) e, nas subsubparcelas, os períodos das avaliações (0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140 e 160 horas), no delineamento inteiramente casualizado, com três repetições. O CVQ das unidades de irrigação, bem como as características físico-químicas da água residuária, foram determinados a cada 20 h, até completar o tempo de operação de 160 h. Os resultados indicaram que a água residuária da castanha de caju representa risco de obstrução de gotejadores, em relação às características pH, cálcio, magnésio, manganês e sólidos suspensos. O entupimento parcial dos gotejadores acarretou aumento do CVQ, nas unidades de irrigação; e as unidades de irrigação que funcionaram na pressão de serviço P1 (70 kPa) apresentaram maior nível de entupimento de gotejadores, em relação às demais, em função da menor velocidade de escoamento de efluente no interior dos emissores.

Nutritional factors in milk from Brazilian mothers delivering small for gestational age neonates

The composition of breast milk from brazilian mothers delivering low birthweight infants and its adequacy as a source of nutrients for this group has not yet been fully elucidated. A total of 209 milk samples from 66 women were analysed. The mothers were divided into three groups: G1, mothers delivering term babies of low birthweight (TSGA, n=16); G2, mothers delivering preterm babies of appropriate birthweight (PTAGA, n=20); G3, mothers delivering term babies of appropriate birthweight (TAGA, n=30). The following factors were analysed: osmolarity, total proteins and protein fractions, creamatocrit, sodium, potassium, calcium and magnesium. Milk samples were collected 48 h and 7, 15, 30 and 60 days after delivery. The groups did not differ significantly in terms of osmolarity, total proteins and fractions, creamatocrit, calcium, magnesium or potassium throughout the study period. Sodium levels were higher in all samples from mothers of TSGA infants and in samples from mothers of PTAGA infants on the 7th, 15th and 30th days than in milk from the TAGA group. The authors consider the needs of the low birthweight and TAGA infants and that these high sodium levels may be necessary for growth of low birthweight infants.

Efeito de estresse ambiental sobre a pressão arterial de trabalhadores

OBJETIVO: Analisar o comportamento de pressão arterial (PA) e a freqüência cardíaca (Fc) de indivíduos ao longo da jornada de trabalho em dois ambientes com estresses ambientais distintos. MÉTODOS: Foram avaliados 46 funcionários, trabalhadores de uma indústria processadora de madeira, de Botucatu, SP, sendo 27 funcionários da linha de produção (esforço físico moderado-intenso, altas temperaturas e elevados níveis de ruído) (G1), e 19 da administração (sem esforço físico, salas aclimatadas, baixos níveis de ruído) (G2). Todos foram submetidos a avaliação antropométrica da composição corporal (obesidade e adiposidade) e bioquímica do sangue (lipidemia) e, adicionalmente, o registro da PA e da Fc em três momentos do turno de serviço: início, meio e fim. RESULTADOS: Houve semelhança na variação da PA entre G1 e G2, mas com maiores elevações de PA e Fc em G1. Os resultados mostraram grande variabilidade na resposta da PA, levando à subdivisão dos grupos G1 e G2 em respondedores (GR, aumento maior de 10% na PA média) e não respondedores (GN). Os subgrupos GR e GN apresentaram semelhanças nos padrões antropométrico e bioquímico diferindo apenas na resposta pressórica e no caso do GR1 na história familiar de hipertensão. Comparando os subgrupos GR1 e GR2, foi constatado que os primeiros apresentaram maiores variações de PA e Fc que os segundos. CONCLUSÕES: A variação individual da resposta pressórica e da Fc conforme o tipo de estresse ambiental indica ser este um fator adicional a ser considerado na avaliação da pressão arterial e, talvez, na gênese da hipertensão arterial de operários.

Occupational exposure to Aflatoxin B1 in Portuguese swine farms

Aflatoxins were first isolated about 40 years ago afier outbreaks of disease and death in turkeys and cancer in rainbow trout fed with rations formulated from peanut and cottonseed meals. These toxins are secondary metabolites produced under certain conditions of temperature, p14 and humidity predominantiy by Aspergilius flavus and Aspergilius parasiticus fungi species. Among 18 different types of aflatoxins identified, major members are aflatoxin B1, B2, G1 and G2. Aflatoxin B1 (AFB1) is normaily predominant in cultures as well as in food products. AFB1 was shown to be genotoxic and a potent hepatocarcinogen. This mycotoxin is metabolized by the mixed function oxidase system to a number of hydroxylated metabolites including the 8,9-epoxide. The latter is considered to be the ultimate carcinogen that reacts with cellular deoxyribonucleic acid (DNA) and proteins to form covalent adducts.

Efeitos da ingestão de simbiótico e indol-3-carbinol sobre o processo de carcinogênese química de cólon em ratos Wistar alimentados com dieta contendo heme

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

O papel da pressão positiva durante a broncofibroscopia: ventilação não invasiva vs válvula de pressão positiva contínua

Introdução: A realização de broncofibroscopia (BF) a doentes com insuficiência Respiratória grave tem riscos e muitas vezes está contra-indicada. A aplicação de ventilação mecânica não invasiva (VMNI) para assistir a ventilação espontânea durante a BF pode ser constituir uma boa alternativa . Objectivo: Comparar a utilização de VMNI e do CPAP Boussignac (CB), durante a BF, em doentes hipoxémicos e/ou hipercápnicos. Materiais e Metodos: 9 pacientes (1feminino) com hipoxemia definida por PaO2/FiO2<200 com necessidade de (BF) foram elegíveis para o estudo. Cinco indivíduos foram randomizados para o grupo VMNI (G1) e 4 para o grupo CB (G2). Resultados: A pressão parcial arterial de oxigénio (PaO2) melhorou no grupo total: 65,9 (21,9) vs de 94,4 (75,9) pós BF, p=0,03, assim como a relação PaO2/FiO2: 131,7 (129,0) e 150,7 (161, 3), pós BF, p=0,04. A saturação periférica de O2 média durante a BF não foi significativamente diferente comparando os dois grupos: 96,1 (6,9) no G1 vs 97,3 (0,3) no G2, (p=0,62). No G1, 1 paciente foi intubado. Conclusão: Estes resultados sugerem que a pressão positiva tem um papel importante como técnica coadjuvante da BF em pacientes hipoxémicos graves (PaO2/FiO2<200). Neste estudo preliminar nenhuma vantagem da VMNI vs CB.

Bem-estar psicológico e qualidade de vida em pessoas idosas

Dissertação de Mestrado em Psicologia da Educação, especialidade em Contextos Comunitários.

Avaliação da influência dos estímulos alimentares na actividade extracardíaca

Mestrado em Medicina Nuclear - Ramo de especialização: Radiofarmácia

Cumulative mortality of Aedes aegypti larvae treated with compounds

OBJECTIVE To evaluate the larvicidal activity of Azadirachta indica, Melaleuca alternifolia, carapa guianensis essential oils and fermented extract of Carica papaya against Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae). METHODS The larvicide test was performed in triplicate with 300 larvae for each experimental group using the third larval stage, which were exposed for 24h. The groups were: positive control with industrial larvicide (BTI) in concentrations of 0.37 ppm (PC1) and 0.06 ppm (PC2); treated with compounds of essential oils and fermented extract, 50.0% concentration (G1); treated with compounds of essential oils and fermented extract, 25.0% concentration (G2); treated with compounds of essential oils and fermented extract, 12.5% concentration (G3); and negative control group using water (NC1) and using dimethyl (NC2). The larvae were monitored every 60 min using direct visualization. RESULTS No mortality occurred in experimental groups NC1 and NC2 in the 24h exposure period, whereas there was 100% mortality in the PC1 and PC2 groups compared to NC1 and NC2. Mortality rates of 65.0%, 50.0% and 78.0% were observed in the groups G1, G2 and G3 respectively, compared with NC1 and NC2. CONCLUSIONS The association between three essential oils from Azadirachta indica, Melaleuca alternifolia, Carapa guianensis and fermented extract of Carica papaya was efficient at all concentrations. Therefore, it can be used in Aedes aegypti Liverpool third larvae stage control programs.

Implementação de métodos moleculares para o diagnóstico precoce de leptospirose humana

Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obtenção do grau de Mestre em Biotecnologia