Influência do hipoestrogenismo por ooforectomia na adaptação antioxidante em ratas wistar exercitadas regularmente

Post-menopause is a period of women s life cycle that is characterized by estrogen depletion and therefore increasing cardiovascular diseases, neurodegenerative disorders, urogenital atrophy, osteoporosis, hot flushes and sexual discomfort incidences. Estrogen is a hormone with comfirmed antioxidant action and its depletion is related to oxidative stress instalation and damaging various important biomolecules. Regular physical activity has been identified as a factor involved in reducing women s post-menopausal complications in addition to improving antioxidant defense by reducing the oxidative damage and consequently improving life s quality in this part of the population. This study aims to evaluate the influence of hypoestrogenism in antioxidant adaptation due to regular exercise, by determining reduced glutathione (GSH) and Thiobarbituric Acid Reactive Substances (SRAT) concentrations and antioxidant enzymes glutathione peroxidase (GPx), Superoxide Dismutase (SOD) and Catalase (CAT) activities in blood, brain and liver of rats. To achieve this goal we used 50 Wistar rats, weighing 180-250g which were divided into two groups, control - GC (25) and ooforectomized - GO (25). Each group was subdivided into five subgroups: Not-trained - S (5), Not-trained Acute Exercise - SEA (5), regular exercise 30 days - E30 (5), regular exercise 60 days - E60 (5) and regular exercise 90 days - E90 (5). Each of the three subgroups exercised regularly was subjected to acute exercise on the eve and the day of sacrifice to collect biological samples of blood, liver and brain and subsequent determination of SRAT concentration, GSH content and antioxidant enzymes GPx, SOD and CAT activities. The results indicated that the sedentary animals acutely exercised presented oxidative stress and regular physical activity led to antioxidant adaptation. In ooforectomized group the antioxidant adaptation seen in control animals showed to be impaired. Unlike the results from blood and liver, in brain there was a shield against oxidative damage originated by the exercise and that hypoestrogenism led to a loss of this natural antioxidant potential. Therefore, hypoestrogenism interferes negatively in antioxidant adaptation due to regular exercise

Transcription profiling of signal transduction-related genes in sugarcane tissues

A collection of 237,954 sugarcane ESTs was examined in search of signal transduction genes. Over 3,500 components involved in several aspects of signal transduction, transcription, development, cell cycle, stress responses and pathogen interaction were compiled into the Sugarcane Signal Transduction (SUCAST) Catalogue. Sequence comparisons and protein domain analysis revealed 477 receptors, 510 protein kinases, 107 protein phosphatases, 75 small GTPases, 17 G-proteins, 114 calcium and inositol metabolism proteins, and over 600 transcription factors. The elements were distributed into 29 main categories subdivided into 409 sub-categories. Genes with no matches in the public databases and of unknown function were also catalogued. A cDNA microarray was constructed to profile individual variation of plants cultivated in the field and transcript abundance in six plant organs (flowers, roots, leaves, lateral buds, and 1(st) and 4(th) internodes). From 1280 distinct elements analyzed, 217 (17%) presented differential expression in two biological samples of at least one of the tissues tested. A total of 153 genes (12%) presented highly similar expression levels in all tissues. A virtual profile matrix was constructed and the expression profiles were validated by real-time PCR. The expression data presented can aid in assigning function for the sugarcane genes and be useful for promoter characterization of this and other economically important grasses.

Oxidation of melatonin and its catabolites, N-1-acetyl-N (2)-formyl-5-methoxykynuramine and N-1-acetyl-5-methoxykynuramine, by activated leukocytes

N-1-acetyl-N-2-formyl-5-methoxykynuramine (AFMK) and N-1-acetyl-5-methoxykynuramine (AMK), two melatonin catabolites, have been described as potent antioxidants. We aimed to follow the kinetics of AFMK and AMK formation when melatonin is oxidized by phorbol myristate acetate (PMA) and lipopolysaccharide (LPS)-activated leukocytes. An HPLC-based method was used for AFMK and AMK determination in neutrophil and peripheral blood mononuclear cell cultures supernatants. Samples were separated isocratically on a C18 reverse-phase column using acetonitrile/H2O (25:75) as the mobile phase. AFMK was detected by fluorescence (excitation 340 nm and emission 460 nm) and AMK by UV-VIS absorbance (254 nm). Activation of neutrophils and mononuclear cells with PMA produces larger amounts of AFMK than activation with LPS, probably due to the lower levels of reactive oxygen species formation and myeloperoxidase (MPO) degranulation that occurs when cells are stimulated with LPS. The concentration of AMK found in the supernatant was about 5-10% (from 18-hr cultures) compared with AFMK. This result may reflect its reactivity. Indeed AMK, but not AFMK, is easily oxidized by activated neutrophils in a MPO and hydrogen peroxide-dependent reaction. In conclusion, we defined a simple procedure for the determination of AFMK and AMK in biological samples and demonstrated the capacity of leukocytes to oxidize melatonin and AMK.

Coagglutination for viral DNA preparation of canine parvovirus for molecular diagnosis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

GFAAS Determination of Zinc in Fish Feed and Feces Using Slurry Sampling

This paper presents a simple, fast, and sensitive method to determine zinc in samples of feces and fish feed by electrothermal atomic absorption spectrometry through the direct introduction of slurries of the samples into the spectrometer's graphite tube. The procedure is based on the injection of 10 mu L of an acidified aqueous solution containing 0.50% w/v of feces or feed and 0.50% v/v HNO(3) into graphite tube. The limits of detection and quantification calculated for 20 readings of the blank of the standard slurries (0.50% w/v of feces or feed devoid of zinc) were 0.04 and 0.13 mu g L(-1) for the standard feces slurries and 0.05 and 0.17 mu g L(-1) for the standard feed slurries. The proposed method was applied in studies of digestibility of zinc in different fish feeds, and their results proved compatible with that obtained from samples mineralized by acid digestion using microwave oven.

Polymerase chain reaction and real-time PCR for diagnosing of Leishmania infantum chagasi in dogs

A importância do cão como reservatório de L. infantum chagasi no meio urbano tem estimulado a realização de inúmeros trabalhos de avaliação de técnicas de diagnóstico, uma vez que este procedimento, quando realizado corretamente, torna-se um importante passo na prevenção da doença em humanos. Dentre os métodos de diagnóstico, as técnicas moleculares têm adquirido destaque. Objetivou-se neste trabalho verificar o desempenho da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e da PCR em tempo real (qPCR) para diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) utilizando diferentes amostras biológicas. Para tanto foram utilizados 35 cães provenientes de uma área endêmica para LVC, onde foram utilizados para o diagnóstico molecular, aspirado de medula óssea, fragmentos de linfonodo e baço. Neste estudo a qPCR foi capaz de detectar um maior número de animais positivos quando comparada com a PCR. Já entre as diferentes amostras biológicas utilizadas não foi observada diferença significativa na detecção de DNA de L. infantumchagasi por meio da PCR e qPCR. Mesmo assim, considerando a facilidade de obtenção, o linfonodo pode ser considerada como a melhor amostra para diagnóstico molecular da infecção por L. infantum chagasi.

Association of midazolam with ketamine in giant Amazon river turtles Podocnemis expansa breed in captivity

OBJETIVO: Avaliar os efeitos de duas associações anestésicas em tartarugas da Amazônia em (Podocnemis expansa). MÉTODOS: Vinte P. expansa, hígidas, de ambos os sexos, com massa corporal entre 1,0 e 1,5 kg, de um criatório comercial localizado no vale do rio Araguaia, Goiás, Brasil, foram distribuídas em dois grupos (G1 n=10 e G2 n=10). Cada grupo recebeu um protocolo sendo: P1 = midazolam (2 mg/kg IM) com cetamina (20 mg/kg IM) e P2 = midazolam (2 mg/kg IM) com cetamina (60 mg/kg IM), aplicados nos grupos G1 e G2, respectivamente. Os fármacos foram aplicados no membro torácico esquerdo. Os parâmetros clínicos avaliados foram: locomoção, relaxamento muscular, resposta aos estímulos dolorosos nos membros torácico direito e pelvinos e freqüência cardíaca. Essas avaliações foram feitas no tempo 0 (imediatamente após a injeção) e nos tempos 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 150 e 180 minutos após as injeções. RESULTADOS: O G2 apresentou maior freqüência cardíaca que o G1 e imobilização mais rápida e prolongada. CONCLUSÃO: As sedações obtidas por esses protocolos (P1 e P2) foram satisfatórias, sendo possível a contenção farmacológica para a coleta de amostras biológicas e exame físico em P. expansa.

Detection and neutralization of venom by ovine antiserum in experimental envenoming by Bothrops jararaca

In this study we optimized an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to evaluate bothropic venom levels in biological samples. These samples were obtained by two distinct protocols. In the first one, Swiss mice were injected with 1 LD 50 of Bothrops jararaca (B. jararaca) venom and 15 minutes later, animals were treated with ovine antibothropic serum. Blood and spleen homogenate samples were obtained 6 hours after antiserum therapy. Ovine antibothropic serum significantly neutralized venom levels in serum and spleen. In the second protocol, BALB/c mice were injected with 1 LD 50 of bothropic venom by either intraperitoneal (IP) or intradermal (ID) route and venom levels were evaluated 1, 3 and 6 hours after, in blood, spleen homogenates and urine. Serum and splenic venom levels were significantly higher in animals envenomed by IP route comparing with animals envenomed by ID route. Higher venom levels were also detected in urine samples from animals envenomed by IP route. However, these differences were not statistically significant. These results demonstrated that the optimized ELISA was adequate to quantify venom levels in different biological samples. This assay could, therefore, substitute the in vivo neutralizing assay and also be useful to evaluate the severity of human and experimental envenomations.

Ultrasound-assisted extraction of Na and K from swine feed and its application in a digestibility assay: A green analytical procedure

The study is aimed to evaluate the efficiency of ultrasound-assisted extraction (UAE) as a simple strategy focused on sample preparation for metal determination in biological samples. The extraction of sodium and potassium extraction was carried out from swine feed followed by determination of the concentration of these metals by flame atomic emission spectrometry (FAES). The experiment was performed to cover the study of the variables influencing the extraction process and its optimal conditions (sample mass, particle size, acid concentration, sonication time and ultrasound power); the determination of these analytical characteristics and method validation using certified reference material; and the analysis of pre-starter diets. The optimal conditions established conditions were as follows: mass: 100 mg, particle size:<60 μm, acid concentration: 0.10 mol L-1 HCl, sonication time: 50 s and ultrasound power: 102 W. The proposed method (UAE) was applied in digestibility assays of those nutrients present in different piglet pre-starter feeds and their results proved to be compatible with those obtained from mineralized samples (P < 0.05). The ultrasound extraction method was demonstrated to be an excellent alternative for handless sampling and operational costs and the method also has the advantage of does not generating toxic residues that may negatively affect human health and contaminate the environment. © 2013 Elsevier B.V. All rights reserved.

Padronização da coaglutinação na preparação de ácidos nucléicos do parvovírus canino e vírus da cinomose para diagnóstico molecular

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Exposição à mistura de pesticidas em baixas doses: validação de método e aplicação a tecido adiposo de animais de experimentação (ratos Lewis)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Desenvolvimento de procedimento em fluxo com detecção espectrofotométrica para análise de bromoprida em medicamentos e/ou fluido biológico

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Estudo da dieta do Lutjanus synagris (Linnaeus, 1758) e Ocyrus chrysurus (Bloch, 1791), teleostei :perciformes: lutjanidae, no banco dos abrolhos, Bahia, Brasil e pesca das principais espécies de lutjanídeos e serranídeos na região

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Zoologia) - IBRC

Distribuição espaço-temporal das larvas de camarões (Decapoda) no estuário do Rio Marapanim, Pará, litoral norte do Brasil

No estuário de Marapanim-PA, pouco conhecimento existe sobre larvas de camarão, organismos de elevada importância ecológica e alguns de grande valor econômico. Com o objetivo de estudar a composição específica, a densidade e a distribuição espaço-temporal destas larvas no estuário em relação aos períodos do ano (seco, transição e chuvoso), zonas do estuário (1, 2 e 3), locais de coleta (A1, A2, A3, B1, B2 e B3) e perfis (A e B), foram realizadas coletas mensais de agosto/06 a julho/07. As amostras biológicas foram obtidas através de arrastos horizontais em cada local de coleta à aproximadamente 0,5 m da superfície da coluna d’água, com auxílio de uma rede de plâncton cônica (abertura de 0,5 m e malha de 200 μm). Também foram colhidos dados abióticos como, temperatura, salinidade e pH da água. No estuário de Marapanim-PA foram encontradas 4.644 larvas de camarão, compreendendo as infra-ordens Penaeidea e Caridea. Dentre as espécies e/ou famílias encontradas, as mais abundantes foram Alpheus estuariensis (302,59 larvas/m3), Palaemonidae (97,05 larvas/m3) e Sergestidae no estádio de elaphocaris (90,47 larvas/m3) , sendo A. estuariensis a mais frequente (76,39%). O período seco apresentou maior densidade, diversidade e riqueza de larvas de camarão. Na análise de agrupamento da densidade mensal das larvas houve a formação de três grupos, ao nível de similaridade de 65%, nos quais A. estuariensis foi dominante, além de ser a espécie que mais contribuiu para a similaridade dentro destes. A diferença entre agrupamentos se deu principalmente devido à densidade das larvas de Sergestidae, Palaemonidae e Xiphopenaeus kroyeri. Entre os fatores abióticos estudados, a salinidade foi o fator que mais influenciou a distribuição espaço-temporal das larvas de camarão no estuário de Marapanim-PA, região importante para o recrutamento dos estádios iniciais do ciclo de vida de algumas espécies.

Eficiência de diferentes abordagens metodológicas e caracterização das associações macrobentônicas estuarinas da zona costeira amazônica

As associações macrobentonicas estuarinas de regiões costeiras amazônicas foram caracterizadas usando diferentes aberturas de malha e profundidades de amostragem. As amostragens aconteceram na ilha de Algodoal e península de Ajuruteua (PA), nos períodos chuvoso e seco (junho e dezembro de 2007, respectivamente), nos habitats borda do mangue, mangue, areno-lamoso e arenoso. Em cada habitat foram coletadas oito amostras biológicas, utilizando tubo cilíndrico de 0,0079 m², assim como amostras para caracterização do substrato (textura, umidade e concentrações de matéria orgânica), e concentrações de clorofila a e feopigmentos. Cada amostra biológica foi dividida em três estratos (0-5, 5-10 e 10-20 cm), sendo cada estrato peneirado em malhas de 1,0, 0,5, 0,3 e 0,25 mm de abertura. Foram utilizadas técnicas univariadas (ANOVA) e multivariadas (MDS, ANOSIM, SIMPER e BIOENV) para a analise dos dados. A macrofauna foi composta por 68 táxons com dominância de Annelida (Tubificidae e Capitellidae). As malhas de 0,3 e 0,25 mm foram as mais eficientes na retenção de organismos e espécies, enquanto a malha de 1,0 mm perdeu quantidades significativas de organismos, sobretudo de Tubificidae. As amostras coletadas a 10 e 20 cm de profundidade não diferiram significativamente quanto numero de táxons e organismos. Foram observadas variações espaciais significativas na estrutura da macrofauna entre habitats em ambos os locais e ocasiões de amostragem, com densidade e riqueza superiores nos habitats lamosos. As variáveis ambientais mais correlacionas com a fauna foram a quantidade de argila, a concentração orgânica e o teor de umidade nos sedimentos. Foi possível concluir que: 1. A fauna bentônica na ilha de Algodoal e península de Ajuruteua foi composta por poucos táxons, sendo eles tipicamente estuarinas e de pequenas dimensões, dominada por Annelida; 2. para a caracterização da macrofauna bentônica e necessário a tomada de amostras somente ate a profundidade de 10 cm de sedimento e o peneiramento em malha de 0,3 mm de abertura; 3. os habitats lamosos tiveram geralmente maiores densidades e riqueza; 4. apenas na ilha de Algodoal se observou variação temporal na estrutura da macrofauna; 5. a quantidade de argila, feopigmentos e teor de umidade nos sedimentos foram os principais fatores responsáveis pela estruturação da fauna.