Genetic Relatedness, Antimicrobial and Biocide Susceptibility Comparative Analysis of Methicillin-Resistant and -Susceptible Staphylococcus pseudintermedius from Portugal

Forty methicillin-resistant and -susceptible Staphylococcus pseudintermedius (MRSP and MSSP, respectively) from colonization and infection in dogs and cats were characterized for clonality, antimicrobial, and biocide susceptibility. MSSP were genetically more diverse than MRSP by multi-locus sequence typing and pulsed-field gel electrophoresis. Three different spa types (t06, t02, t05) and two SCCmec types (II-III and V) were detected in the MRSP isolates. All MRSP and two MSSP strains were multidrug-resistant. Several antibiotic resistance genes (mecA, blaZ, tet(M), tet(K), aac(6')-Ie-aph(2')-Ia, aph(3')-III, ant(6)-Ia, sat4, erm(B), lnu(A), dfr(G), and catpC221) were identified by microarray and double mutations in the gyrA and grlA genes and a single mutation in the rpoB gene were detected by sequence analysis. No differences were detected between MSSP and MRSP in the chlorhexidine acetate (CHA) minimum inhibitory concentrations (MICs). However, two MSSP had elevated MIC to triclosan (TCL) and one to benzalkonium chloride and ethidium bromide. One MSSP isolate harboured a qacA gene, while in another a qacB gene was detected. None of the isolates harboured the sh-fabI gene. Three of the biocide products studied had high bactericidal activity (Otodine(®), Clorexyderm Spot Gel(®), Dermocanis Piocure-M(®)), while Skingel(®) failed to achieve a five log reduction in the bacterial counting. S. pseudintermedius have become a serious therapeutic challenge in particular if methicillin- resistance and/or multidrug-resistance are involved. Biocides, like CHA and TCL, seem to be clinically effective and safe topical therapeutic options.

Emergence of methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius in Switzerland: three cases of urinary tract infections in cats

Methicillin resistance has emerged in clinical isolates of Staphylococcus pseudintermedius from cats in Switzerland. Three cats suffering from urinary tract infections were infected with methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP). Phenotypic and genotypic characterization of the resistance profile showed that the isolates displayed resistance to all beta-lactams and cephalosporins (blaZ, mecA), fluoroquinolones, tetracyclines [tet(K)], macrolides, lincosamides and streprogramins B [erm(B)], chloramphenicol (catpC221), trimethoprim [dfr(G)] and the aminoglycosides gentamicin [aac(6')-Ie-aph(2')-Ia], kanamycin and neomycin [aph(3')-III] and streptomycin [ant(6)-Ia]. They also harbor the leukocidin gene lukS-I. MRSP represents a new challenge for antibiotic therapy and this zoonotic bacteria may rapidly spread to animals and humans.

Nasal carriage of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) among Swiss veterinary health care providers: detection of livestock- and healthcare-associated clones.

We screened a total of 340 veterinarians (including general practitioners, small animal practitioners, large animal practitioners, veterinarians working in different veterinary services or industry), and 29 veterinary assistants for nasal carriage of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Staphylococcus pseudintermedius (MRSP) at the 2012 Swiss veterinary annual meeting. MRSA isolates (n = 14) were detected in 3.8 % (95 % CI 2.1 - 6.3 %) of the participants whereas MRSP was not detected. Large animal practitioners were carriers of livestock-associated MRSA (LA-MRSA) ST398-t011-V (n = 2), ST398-t011-IV (n = 4), and ST398-t034-V (n = 1). On the other hand, participants working with small animals harbored human healthcare-associated MRSA (HCA-MRSA) which belonged to epidemic lineages ST225-t003-II (n = 2), ST225-t014-II (n = 1), ST5-t002-II (n = 2), ST5-t283-IV (n = 1), and ST88-t186-IV (n = 1). HCA-MRSA harbored virulence factors such as enterotoxins, β-hemolysin converting phage and leukocidins. None of the MRSA isolates carried Panton-Valentine leukocidin (PVL). In addition to the methicillin resistance gene mecA, LA-MRSA ST398 isolates generally contained additional antibiotic resistance genes conferring resistance to tetracycline [tet(M) and tet(K)], trimethoprim [dfrK, dfrG], and the aminoglycosides gentamicin and kanamycin [aac(6')-Ie - aph(2')-Ia]. On the other hand, HCA-MRSA ST5 and ST225 mainly contained genes conferring resistance to the macrolide, lincosamide and streptogramin B antibiotics [erm(A)], to spectinomycin [ant(9)-Ia], amikacin and tobramycin [ant(4')-Ia], and to fluoroquinolones [amino acid substitutions in GrlA (S84L) and GyrA (S80F and S81P)]. MRSA carriage may represent an occupational risk and veterinarians should be aware of possible MRSA colonization and potential for developing infection or for transmitting these strains. Professional exposure to animals should be reported upon hospitalization and before medical intervention to allow for preventive measures. Infection prevention measures are also indicated in veterinary medicine to avoid MRSA transmission between humans and animals, and to limit the spread of MRSA both in the community, and to animal and human hospitals.

Differentiation between Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococcus species by real-time PCR including detection of methicillin resistants in comparison to conventional microbiology testing.

BACKGROUND Staphylococcus aureus has long been recognized as a major pathogen. Methicillin-resistant strains of S. aureus (MRSA) and methicillin-resistant strains of S. epidermidis (MRSE) are among the most prevalent multiresistant pathogens worldwide, frequently causing nosocomial and community-acquired infections. METHODS In the present pilot study, we tested a polymerase chain reaction (PCR) method to quickly differentiate Staphylococci and identify the mecA gene in a clinical setting. RESULTS Compared to the conventional microbiology testing the real-time PCR assay had a higher detection rate for both S. aureus and coagulase-negative Staphylococci (CoNS; 55 vs. 32 for S. aureus and 63 vs. 24 for CoNS). Hands-on time preparing DNA, carrying out the PCR, and evaluating results was less than 5 h. CONCLUSIONS The assay is largely automated, easy to adapt, and has been shown to be rapid and reliable. Fast detection and differentiation of S. aureus, CoNS, and the mecA gene by means of this real-time PCR protocol may help expedite therapeutic decision-making and enable earlier adequate antibiotic treatment.

Contaminación microbiológica en ajos y suelos regados con efluentes domésticos tratados : Mendoza (Argentina)

Se presentan los resultados obtenidos de un ensayo a campo que se llevó a cabo en la Provincia de Mendoza, Argentina. El objetivo fue evaluar: a) la calidad microbiológica de los ajos regados con efluentes domésticos tratados en zanjas de oxidación y su aceptabilidad para consumo fresco y b) la contaminación residual en suelos. El ajo se cultivó en una parcela experimental regada con efluente y con agua limpia (testigo) mediante riego superficial. A partir de la cosecha se realizaron determinaciones de Escherichia coli y de Salmonella en los ajos, en tres oportunidades de muestreo, y en el suelo, en dos oportunidades. Los resultados fueron comparados con aquellos obtenidos en un estudio previo conducido en similares condiciones. Siguiendo los planes de muestreo de la Comisión Internacional para la Especificación Microbiológica de Alimentos para vegetales que se consumen crudos, se concluyó que los ajos estuvieron aptos para el consumo a los 20 días después de la cosecha y 26 días desde el último riego. No se detectó Salmonella ni en los ajos ni en los suelos.

Accesibilidad de personas con discapacidad auditiva a la gestión municipal

Como principal objetivo se propuso describir y evaluar en qué medida los productos, servicios, instalaciones y programas de la gestión municipal son accesibles para Personas con Discapacidad Auditiva (PCDA).

El uso del primer plano en El Cid : Estrategia retórica en el filme de Anthony Mann

Todo director cinematográfico construye su estética a partir de la(s) temática(s) que aborda y de toda una serie de recursos (económicos, artísticos, entre otros) que posee en el momento en que se lleva a cabo una filmación. Anthony Mann no escapa a esta regla. En 1961, filma en España El Cid, basada en la leyenda de Rodrigo Díaz de Vivar, célebre personaje históricoliterario. En ese entonces, este director cuenta con la posibilidad de incluir en los roles principales a figuras consagradas de la meca del cine: Hollywood. El papel del héroe cristiano español es interpretado por Charlton Heston y el de su esposa, Jimena, por Sofia Loren. Es probable que Anthony Mann haya utilizado determinados recursos cinematográficos en el afán de destacar/aprovechar la presencia estelar de dichas figuras. Este trabajo intentará analizar el uso del primer plano en el discurso de este filme y se tratará de explicar la construcción de la estética de este director considerando, además, la expectativa del público de la época en que se produjo la realización de dicha película.

El uso del primer plano en El Cid : Estrategia retórica en el filme de Anthony Mann

Todo director cinematográfico construye su estética a partir de la(s) temática(s) que aborda y de toda una serie de recursos (económicos, artísticos, entre otros) que posee en el momento en que se lleva a cabo una filmación. Anthony Mann no escapa a esta regla. En 1961, filma en España El Cid, basada en la leyenda de Rodrigo Díaz de Vivar, célebre personaje históricoliterario. En ese entonces, este director cuenta con la posibilidad de incluir en los roles principales a figuras consagradas de la meca del cine: Hollywood. El papel del héroe cristiano español es interpretado por Charlton Heston y el de su esposa, Jimena, por Sofia Loren. Es probable que Anthony Mann haya utilizado determinados recursos cinematográficos en el afán de destacar/aprovechar la presencia estelar de dichas figuras. Este trabajo intentará analizar el uso del primer plano en el discurso de este filme y se tratará de explicar la construcción de la estética de este director considerando, además, la expectativa del público de la época en que se produjo la realización de dicha película.

El uso del primer plano en El Cid : Estrategia retórica en el filme de Anthony Mann

Todo director cinematográfico construye su estética a partir de la(s) temática(s) que aborda y de toda una serie de recursos (económicos, artísticos, entre otros) que posee en el momento en que se lleva a cabo una filmación. Anthony Mann no escapa a esta regla. En 1961, filma en España El Cid, basada en la leyenda de Rodrigo Díaz de Vivar, célebre personaje históricoliterario. En ese entonces, este director cuenta con la posibilidad de incluir en los roles principales a figuras consagradas de la meca del cine: Hollywood. El papel del héroe cristiano español es interpretado por Charlton Heston y el de su esposa, Jimena, por Sofia Loren. Es probable que Anthony Mann haya utilizado determinados recursos cinematográficos en el afán de destacar/aprovechar la presencia estelar de dichas figuras. Este trabajo intentará analizar el uso del primer plano en el discurso de este filme y se tratará de explicar la construcción de la estética de este director considerando, además, la expectativa del público de la época en que se produjo la realización de dicha película.

Recuperación ambiental de la playa de Zahora

El proyecto tiene por objeto el estudio detallado de la dinámica litoral en la unidad costera en la que se enmarca la zona de interés, limitada septentrionalmente por la desembocadura del Río Salado y por el Cabo de Trafalgar al Sur, con el fin de poder diseñar una suficiente y adecuada aportación de arenas para conseguir la regeneración y recuperación ambiental de la Playa de Zahora, que ha venido sufriendo episodios erosivos en los últimos años. La configuración del tramo de costa gaditano al Sur de Conil (tramo en el que se ubica la zona de estudio) ha sido trazada en sus líneas generales por la actividad tectónica reciente. La línea de costa corre hacia el Sur en un zig-zag que va formando líneas paralelas a las dos direcciones principales de fractura de la zona. Los bloques individualizados por el sistema de fallas han sufrido una serie compleja de movimientos diferenciales de elevación, hundimiento y basculamiento debido a los movimientos diferenciales de las placas euroasiática y africana. Los procesos sedimentarios cuaternarios así como la acción erosiva de los agentes marinos, han ido rellenando entrantes y suavizando salientes, pero a pesar de esto, la forma de la línea de costa aún constituye un reflejo de la tectónica, así que puede decirse que el tramo de costa gaditana comprendido entre Conil y Tarifa, está ligado fundamentalmente a fenómenos tectónicos, jugando la dinámica sedimentaria un papel más secundario en la configuración general del litoral. La Playa de Zahora, lejos de ser estable, ha ido sufriendo erosiones continuadas ocasionando retrocesos anuales de orden métrico, habiendo sido necesario efectuar aportaciones esporádicas de arena a lo largo de los años con objeto de paliar su deterioro. El proyecto plantea unas actuaciones tendentes a la regeneración de esta playa, satisfaciendo la demanda existente. Las actuaciones proyectadas suponen la aportación de material sedimentario procedente del yacimiento existente en El Placer de Meca, a profundidades comprendidas entre 15 m y 20 m. El yacimiento se conforma como una gran duna submarina, situada a unos 6 km del frente costero. Asimismo se contemplan, junto con dicha aportación, otras dos alternativas, consistentes en la construcción de un espigón curvo para la contención de dichas arenas y, por otro lado, la construcción de un dique exento paralelo a la costa.

Edición diplomática, traducción y estudio de la obra Nişāb al-ajbār wa-taḏkirat al-ajyār de Ibn al-Şabbāḥ (s. IX H./XV e.C.)

La tesis doctoral tiene como objetivo la edición, traducción y estudio de la obra de viajes autobiográfica Nişāb al-ajbār wa-taḏkirat al-ajyār del converso al islam Abd Allāh Ibn al-Şabbāḥ, peregrino asceta que recorrió el mundo árabe musulmán en el s.XV, en base al manuscrito unicum en árabe depositado en la Bibliotèque Nationale de Túnez. En primer lugar se hace una edición diplomática del unicum, con abundantes apreciaciones y correcciones en notas a pie de página de la riḥla (relato de viajes). En segundo lugar, se aporta una traducción al español y, por último, se incluye un estudio en el que se pone de manifiesto el origen setabense del autor, se fija una cronología para el autor y obra, se estudian las peculiaridades lingüísticas del unicum así como las fases en la composición de la obra y se estudian las ilustraciones de la Meca, Medina, Hebrón y Jerusalén que están reflejadas en el manuscrito

Analisi strutturale della testa di un supporto al bagno di saldatura elicoidale per tubi di acciaio

Nella presente tesi viene condotta l'analisi strutturale della testa di un supporto al bagno di saldatura elicoidale per tubi di acciaio. Dopo una breve introduzione sui tubi di acciaio e sul Metodo agli Elementi Finiti, si analizza la testa utilizzando un software open source. I risultati ottenuti consentono di ottimizzare la geometria della testa.

Dulzuras en el morir motivadas del amor de Dios, y del dolor de las culpas : sacadas de los evangelios, prophetas, y de muchos santos, y graves autores ... /

Mode of access: Internet.

A PCR method for the identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) from screening swabs

Aim: The aim of this study was to assess the discriminatory power and potential turn around time ( TAT) of a PCR-based method for the detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) from screening swabs. Methods: Screening swabs were examined using the current laboratory protocol of direct culture on mannitol salt agar supplemented with oxacillin (MSAO-direct). The PCR method involved pre-incubation in broth for 4 hours followed by a multiplex PCR with primers directed to mecA and nuc genes of MRSA. The reference standard was determined by pre-incubation in broth for 4 hours followed by culture on MSAO (MSAO-broth). Results: A total of 256 swabs was analysed. The rates of detection of MRSA using MSAO-direct, MSAO-broth and PCR were 10.2, 13.3 and 10.2%, respectively. For PCR, the sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive values were 66.7% (95% CI 51.9 - 83.3%), 98.6% ( 95% CI 97.1 - 100%), 84.6% ( 95% CI 76.2 - 100%) and 95.2% ( 95% CI 92.4 - 98.0%), respectively, and these results were almost identical to those obtained from MSAO-direct. The agreement between MSAO-direct and PCR was 61.5% ( 95% CI 42.8 - 80.2%) for positive results, 95.6% ( 95% CI 93.0 - 98.2%) for negative results and overall was 92.2% ( 95% CI 88.9 - 95.5%). Conclusions: ( 1) The discriminatory power of PCR and MSAO-direct is similar but the level of agreement, especially for true positive results, is low. ( 2) The potential TAT for the PCR method provides a marked advantage over conventional methods. ( 3) Further modifications to the PCR method such as increased broth incubation time, use of selective broth and adaptation to real-time PCR may lead to improvement in sensitivity and TAT.

Desenvolvimento de um Produto para Determinação do Tipo Sanguíneo de Humanos

Esta dissertação relata o desenvolvimento de um produto para determinação do tipo san-guíneo de humanos. A necessidade de criar um produto eficiente e capaz de determinar o tipo sanguíneo em situações de emergências surge da possibilidade das análises serem realizadas em momentos críticos, onde se pretende eliminar o erro humano e minimizar os riscos de incompatibi-lidade nas transfusões sanguíneas. A proposta pretende resolver problemas dos procedimentos realizados na análise do tipo sanguíneo em situações de emergência, que são realizados pelos técnicos da saúde, em ambien-tes da saúde, fixos ou móveis. Atualmente, o processo de análise de grupo sanguíneo, nestas si-tuações, ocorre manualmente através do procedimento de teste em lâmina. Este consiste na reco-lha de sangue e respectiva mistura com os reagentes específicos, a fim de determinar a aglutina-ção do sangue. Os resultados são observados macroscopicamente. Com base na técnica da tipagem manual, desenvolveu-se um produto com os mesmos princípios, semiautomático e com um rápido tempo de resposta, sem interferência humana na in-terpretação dos resultados, eliminando possíveis erros. Para solucionar os aspetos técnicos e me-cânicos, incorporaram-se tecnologias inovadoras, sendo elas resultado do trabalho interdisciplinar com das áreas do Design Industrial e as Engenharias Eletrónica e Mecânica. O sistema eletrónico incorporado utiliza o sistema de controlo Lilliput. Este sistema processa a informação recorrendo a processamento de imagem (através do software LabVIEW) e deteta automaticamente a ocorrência de aglutinação. O tipo sanguíneo é assim determinado num curto intervalo de tempo (aproxima-damente, dois minutos), o que viabiliza a utilização da técnica em situações de emergências. O projeto mecânico do sistema foi desenvolvido com recurso ao software Solidworks. Fo-ram realizadas simulações e testes com um rotary motor para viabilizar o funcionamento do meca-nismo. O sistema mecânico de agitação das amostras é simples, inovador e possui um elevado valor acrescentado, sendo nesse caso uma mais-valia na segurança dos utilizadores. O produto desenvolvido consegue atingir o objetivo do trabalho, realizando a determinação do tipo sanguíneo dos humanos em 5 minutos, sendo eficaz e funcional. É um produto com aspec-to formal que atribui a sua ergonomia adaptada ao utilizador, sendo assim portátil, de fácil uso e manuseio.