Retinoids down-regulate telomerase and telomere length in a pathway distinct from leukemia cell differentiation

Human telomerase, a cellular reverse transcriptase (hTERT), is a nuclear ribonucleoprotein enzyme complex that catalyzes the synthesis and extension of telomeric DNA. This enzyme is specifically activated in most malignant tumors but is usually inactive in normal somatic cells, suggesting that telomerase plays an important role in cellular immortalization and tumorigenesis. Terminal maturation of tumor cells has been associated with the repression of telomerase activity. Using maturation-sensitive and -resistant NB4 cell lines, we analyzed the pattern of telomerase expression during the therapeutic treatment of acute promyelocytic leukemia (APL) by retinoids. Two pathways leading to the down-regulation of hTERT and telomerase activity were identified. The first pathway results in a rapid down-regulation of telomerase that is associated with retinoic acid receptor (RAR)-dependent maturation of NB4 cells. Furthermore, during NB4 cell maturation, obtained independently of RAR by retinoic X receptor (RXR)-specific agonists (rexinoids), no change in telomerase activity was observed, suggesting that hTERT regulation requires a specific signaling and occurs autonomously. A second pathway of hTERT regulation, identified in the RAR-responsive, maturation-resistant NB4-R1 cell line, results in a down-regulation of telomerase that develops slowly during two weeks of all-trans retinoic acid (ATRA) treatment. This pathway leads to telomere shortening, growth arrest, and cell death, all events that are overcome by ectopic expression of hTERT. These findings demonstrate a clear and full dissociation between the process of tumor cell maturation and the regulation of hTERT mRNA expression and telomerase activity by retinoids. We propose telomerase expression as an efficient and selective target of retinoids in the therapy of tumors.

RIG-E, a human homolog of the murine Ly-6 family, is induced by retinoic acid during the differentiation of acute promyelocytic leukemia cell.

In vivo all-trans-retinoic acid (ATRA), a differentiation inducer, is capable of causing clinical remission in about 90% of patients with acute promyelocytic leukemia (APL). The molecular basis for the differentiation of APL cells after treatment with ATRA remains obscure and may involve genes other than the known retinoid nuclear transcription factors. We report here the ATRA-induced gene expression in a cell line (NB4) derived from a patient with APL. By differential display-PCR, we isolated and characterized a novel gene (RIG-E) whose expression is up-regulated by ATRA. The gene is 4.0 kb long, consisting of four exons and three introns, and is localized on human chromosome region 8q24. The deduced amino acid sequence predicts a cell surface protein containing 20 amino acids at the N-terminal end corresponding to a signal peptide and an extracellular sequence containing 111 amino acids. The RIG-E coded protein shares some homology with CD59 and with a number of growth factor receptors. It shares high sequence homology with the murine LY-6 multigene family, whose members are small cysteine-rich proteins differentially expressed in several hematopoietic cell lines and appear to function in signal transduction. It seems that so far RIG-E is the closest human homolog of the LY-6 family. Expression of RIG-E is not restricted to myeloid differentiation, because it is also present in thymocytes and in a number of other tissues at different levels.

Plant species, biomass and environmental characteristics of relevés along the North America Arctic bioclimate gradient

Question: How do interactions between the physical environment and biotic properties of vegetation influence the formation of small patterned-ground features along the Arctic bioclimate gradient? Location: At 68° to 78°N: six locations along the Dalton Highway in arctic Alaska and three in Canada (Banks Island, Prince Patrick Island and Ellef Ringnes Island). Methods: We analysed floristic and structural vegetation, biomass and abiotic data (soil chemical and physical parameters, the n-factor [a soil thermal index] and spectral information [NDVI, LAI]) on 147 microhabitat releves of zonalpatterned-ground features. Using mapping, table analysis (JUICE) and ordination techniques (NMDS). Results: Table analysis using JUICE and the phi-coefficient to identify diagnostic species revealed clear groups of diagnostic plant taxa in four of the five zonal vegetation complexes. Plant communities and zonal complexes were generally well separated in the NMDS ordination. The Alaska and Canada communities were spatially separated in the ordination because of different glacial histories and location in separate floristic provinces, but there was no single controlling environmental gradient. Vegetation structure, particularly that of bryophytes and total biomass, strongly affected thermal properties of the soils. Patterned-ground complexes with the largest thermal differential between the patterned-ground features and the surrounding vegetation exhibited the clearest patterned-ground morphologies.

MARKETING DE RELACIONAMENTO NAS INSTITUIÇÕES DE ENSINO SUPERIOR: Estudo de caso da Universidade Metodista de São Paulo e da Universidade Metodista de Piracicaba

O marketing de relacionamento como ferramenta para atrair e fidelizar os alunos do ensino superior privado é o tema desta pesquisa. Trata-se de um estudo de caso múltiplo incorporado enfocando a Universidade Metodista de São Paulo (UMESP) e a Universidade Metodista de Piracicaba (UNIMEP) e que tem como objetivos principais apontar fatores que motivam os estudantes a escolher determinadas instituições de ensino superior, identificar a maneira como elas atuam na tarefa de atraí-los com vistas a estabelecer um relacionamento e uma comunicação eficientes com esses públicos de interesse e fidelizálos, bem como analisar a real efetividade das ações desenvolvidas pelas IESs. Propõe-se uma incursão teórica para abordar motivações psicológicas, culturais, econômicas e sociais relacionadas ao ato de consumir e estabelecer uma correlação com o consumidor-aluno . Discutem-se também características do marketing de relacionamento associadas ao contexto educacional e apontam-se dificuldades/desafios vivenciados pelas instituições nos esforços de criar e estreitar os laços com os estudantes com vistas a tornar tais laços duradouros. Foram aplicados 1.400 questionários em ambas as universidades a fim de identificar, entre outros aspectos, atributos desejáveis de uma IES, fatores influenciadores para o abandono dela e características associadas a processos comunicacionais que representam diferenciais. O estudo apontou que, apesar de as dificuldades financeiras serem um componente que interfere na atração e na fidelização dos alunos, outros também são determinantes, como o nível de excelência de ensino, o corpo docente e a qualidade do relacionamento que as instituições de ensino estabelecem com tais públicos. Tal qualidade passa, obrigatoriamente, por atributos como liberdade para expressar ideias, espaço de diálogo e transparência na comunicação, elementos desafiadores ao modelo vigente e estimuladores a um novo fazer educacional.

(Table 2) Collection sites and number of specimens of Usnea subgenus Neuropogon species

Usnea species of the Neuropogon group are amongst the most widespread and abundant macrolichens in Antarctic regions. Four principal species, U. antarctica, U. aurantiaco-atra, U. sphacelata and U. subantarctica, have been described on morphological grounds. However, identification to species level is often difficult and atypical morphologies frequently arise. Over 400 specimens were collected on the Antarctic Peninsula and Falkland Islands. Both morphological and molecular characters (ITS and RPB1) were used to compare samples to clarify taxonomic relationships. Morphological characteristics used included presence of apothecia, apothecial rays, soredia, papillae, fibrils, pigmentation and the diameter of the central axis as a proportion of branch diameter. Results revealed a very close relationship between U. antarctica and U. aurantiaco-atra, suggesting that they might constitute a species pair or be conspecific. Usnea sphacelata was comprised of at least two genetically distinct groups with no clear differences in morphology. One group included the first reported fertile specimen of this species. Usnea subantarctica was phylogenetically distinct from the other main Antarctic Usnea species, but clustered with U. trachycarpa. Genetic variation was evident within all species although there was no clear correlation between geographic origin and genetic relatedness. Phylogenetic analyses indicated that species circumscription in the Neuropogon group needs revision, with the principal species being non-monophyletic. None of the morphological characters, or groups of characters, used in this study proved to be completely unambiguous markers for a single species. However, axis thickness was supported as being informative for the identification of monophyletic lineages within the group.

A Operacionalidade de um Departamento de Marketing do Sheraton Porto Hotel & SPA

O relatório apresentado reflete a experiência de nove meses de estágio no departamento de marketing do Sheraton Porto Hotel & SPA. Inicia-se com uma introdução ao conceito de marketing e ao de turismo, de seguida, à sua junção, ou seja, o marketing turístico, como surgiu, a sua importância e a sua evolução ao longo dos tempos, para melhor enquadramento das atividades desenvolvidas no estágio. Também neste ponto, irei focar a importância da internet no turismo, ou seja, o seu impacto nesta atividade que todos os anos atraí milhares de pessoas ao nosso país. Por fim, irei caracterizar o fenómeno do turismo na cidade do Porto, que tem vindo a aumentar ao longo dos anos, refletindo assim, as altas taxas de ocupação hoteleira, sendo o marketing o principal impulsionador para o crescimento desta cidade. No segundo ponto do relatório será caracterizada a cadeia que me acolheu durante o estágio, Starwood Hotels & Resorts, Inc, assim como, uma das sete marcas, neste caso, Sheraton Hotels & Resorts. Farei também referência a um dos maiores programas de fidelização, SPG (Starwood Preferred Guest), e das diversas campanhas que este programa desenvolve durante o ano, onde o papel do marketeer torna-se crucial para divulgação do mesmo. Realizarei uma breve caracterização do Sheraton Porto Hotel & SPA, assim como, o seu público-alvo, ocupação e darei a minha opinião crítica sobre o local de estágio. Ainda neste capítulo, irá ser retratado todas as tarefas diárias que executei durante os nove meses de estágio, assim como os novos programas, os novos conceitos que aprendi e todos os pontos-chave que ocorrem no dia-a-dia no departamento de marketing. Para finalizar este capítulo, irei realizar uma análise crítica e refletiva de meu estágio. No último capítulo deste relatório, estarão descritas duas das principais atividades desenvolvidas durante o estágio, com o objetivo da resolução de determinados problemas nomeadamente a criação de um site durante a época de natal e passagem de ano e a criação de um novo layout e imagem para promoção do New Yorker Bar, durante o mundial de futebol 2014. Irei também dar a minha opinião crítica, assim como, algumas sugestões que poderão ser implementadas no futuro. Este trabalho pretende mostrar as atividades de um marketeer numa das maiores cadeias internacionais, assim como, a sua contextualização literária e a realização de tarefas de gestão de marketing.

As manifestações artísticas urbanas e o ensino de artes visuais

O presente estudo, inserido no Mestrado em Ensino de Artes Visuais no 3.º ciclo do Ensino Básico e no Ensino Secundário, aborda a importância das Manifestações Artística Urbanas no ensino de Artes Visuais. Esta investigação pretende analisar a forma como estas manifestações podem ser adaptadas ao currículo do programa da disciplina de desenho numa escola secundária artística, no sentido de munir os alunos de capacidade crítica para o atual estado da arte, assim como atraí-los para o desenho, levando-os a descobrir e desenvolver seu próprio traço. O facto de a prática de ensino supervisionada se ter realizado na Escola Artística Soares dos Reis, no Porto, uma das mais prestigiadas instituições artísticas em Portugal, privilegiou e potenciou a investigação tendo em conta a cultura artística e urbana demostrada pela comunidade escolar.

Perceção de emoções no canto: a importância dos estímulos auditivo e visual

Este estudo pretendeu examinar a importância dos estímulos auditivo (interpre-tação vocal do cantor) e visual (expressão facial do cantor) na perceção de emo-ções pelo público de uma performance de canto. Para tal, foram gravados, atra-vés de vídeo e áudio, dois cantores a interpretar pequenas frases melódicas com a intenção de expressar, isoladamente, as seis emoções básicas: alegria, tristeza, raiva, medo, surpresa e nojo. Para validar a expressividade dos canto-res, foi medida, através de eletromiografia, a atividade dos músculos faciais du-rante a performance da emoção e foram apresentadas as gravações áudio a um painel de especialistas que as caracterizaram em termos acústicos. Com base nas gravações audiovisuais dos cantores, foi criado um teste percetual no qual se pretendia que o ouvinte reconhecesse a emoção comunicada a partir apenas do áudio, apenas do vídeo, ou ambos. Comparando as respostas dadas, os re-sultados evidenciaram que o estímulo visual é mais eficaz do que o auditivo, e que a junção dos dois estímulos é a modalidade mais eficiente na perceção de emoções pelo público de uma performance de canto.

Estado nutricional e efeito da vitamina A na resposta imune frente à infecção por Leishmania Infantum

Nutritional status is an important determinant to the response against Leishmania infection, although few studies have characterized the molecular basis for the association found between malnutrition and the disease. Vitamin A supplementation has long been used in developing countries to prevent mortality by diarrheal and respiratory diseases, but there are no studies on the role of vitamin A in Leishmania infection, although we and others have found vitamin A deficiency in visceral Leishmaniasis (VL). Regulatory T cells are induced in vitro by vitamin A metabolites and are considered important cells implicated T CD4+ cell suppression in human VL. This work aimed to examine the correlation of nutritional status and the effect of vitamin A in the response against Leishmania infantum infection. A total of 179 children were studied: 31 had active VL, 33 VL history, 44 were DTH+ and 71 were DTH- and had negative antibody to Leishmania (DTH-/Ac-). Peripheral blood monuclear cells were isolated in a subgroup of 10 active VL and 16 DTH-/Ac- children and cultivated for 20h under 5 different conditions: 1) Medium, 2) Soluble promastigote L. infantum antigens (SLA), 3) All-trans retinoic acid (ATRA), 4) SLA + ATRA and 5) Concanavalin A. T CD4+CD25highFoxp3+, T CD4+CD25-Foxp3- and CD14+ monocytes were stained and studied by flow cytometry for IL-10, TGF-β and IL-17 production. Nutritional status was compromised in VL children, which presented lower BMI/Age and retinol concentrations when compared to healthy controls. We found a negative correlation between nutritional status (measured by BMI/Age and serum retinol) and anti-Leishmania antibodies and acute phase proteins. There was no correlation between nutritional status and parasite load. ATRA presented a dual effect in Treg cells and monocytes: In healthy children (DTH-/Ac-), it induced a regulatory response, increasing IL-10 and TGF-β production; in VL children it modulated the immune response, preventing increased IL-10 production after SLA stimulation. Furthermore, we found a positive correlation between BMI/Age and IL-17 production and negative correlation between serum retinol and IL-10 and TGF-β production in T CD4+CD25highFoxp3+ cells after SLA stimulus. Our results show a potential dual role of vitamin A in the immune system: improvement of regulatory profile during homeostasis and down modulation of IL-10 in Treg cells and monocytes during symptomatic VL. Therefore, the use of vitamin A concomitant to VL therapy might improve recovery from disease status in Leishmania infantum infection