Determina����o simult��nea de topiramato, carbamazepina, fenito��na e fenobarbital em plasma empregando cromatografia a g��s com detector de nitrog��nio e f��sforo

Topiramate and the other frequently co-administered antiepileptic drugs carbamazepine, phenytoin and phenobarbital were determined in 100 ��L plasma samples by gas chromatography with nitrogen phosphorus detection (GC-NPD), after a one-step liquid-liquid extraction with ethyl acetate, followed by flash methylation with trimethylphenylammonium hydroxide. Total chromatographic run time was 12.5 min. Intra-assay and inter-assay precision was 2.5-7.3% and 1.6-5.2%, respectively. Accuracy was 100.1-104.2%. The limit of quantitation was 1 ��g mL-1 for all analytes, proving suitable for routine application in therapeutic drug monitoring of antiepileptic drugs.

Quantification of the uranium concentration in human urine by inductively coupled plasma-sector field mass spectrometry (ICP-SFMS)

In this study, the validation of a method for analyzing the uranium (U) concentration in human urine samples by inductively coupled plasma-sector field mass spectrometry (ICP-SFMS) was conducted. PROCORAD (the Association for the Promotion of Quality Control in Radiotoxicological Analysis) provided two urine samples spiked with unknown contents of U (Sample A = 33.6 �� 1.0 ��g/L and Sample B = 3.3 �� 0.1 ��g/L) and one unspiked sample as a blank. The analyses were directly performed on the diluted urine samples (dilution factor = 1:20) in 5% v/v HNO3. The results obtained by ICP-SFMS corresponded well with the reference values, and the limits of detection were 235U = 0.049 �� 10-3 ��g/L and 238U = 7.37 �� 10-3 ��g/L. The ICP-SFMS technique has been shown to be successful in the analysis of the U concentration in human urine samples and for the quantification of isotopic ratios.

Determination of triamterene in human plasma and urine after its cloud point extraction

A new analytical approach was developed involving cloud point extraction (CPE) and spectrofluorimetric determination of triamterene (TM) in biological fluids. A urine or plasma sample was prepared and adjusted to pH 7, then TM was quickly extracted using CPE, using 0.05% (w/v) of Triton X-114 as the extractant. The main factors that affected the extraction efficiency (the pH of the sample, the Triton X-114 concentration, the addition of salt, the extraction time and temperature, and the centrifugation time and speed) were studied and optimized. The method gave calibration curves for TM with good linearities and correlation coefficients (r) higher than 0.99. The method showed good precision and accuracy, with intra- and inter-assay precisions of less than 8.50% at all concentrations. Standard addition recovery tests were carried out, and the recoveries ranged from 94.7% to 114%. The limits of detection and quantification were 3.90 and 11.7 ��g L-1, respectively, for urine and 5.80 and 18.0 ��g L-1, respectively, for plasma. The newly developed, environmentally friendly method was successfully used to extract and determine TM in human urine samples.

CONSTRU����O DE UM REATOR DE PLASMA DESCARGA CORONA PARA ELIMINA����O DE COMPOSTOS ORG��NICOS VOL��TEIS

The impacts derived from the emission of volatile organic compounds (VOC) into the atmosphere can have harmful consequences for human health and the environment. In this regard, the present paper proposes the construction of a low-cost cold plasma reactor for the treatment of these compounds. Tests with the prototype were performed to confirm the efficiency for BTEX (benzene, toluene and xylene) samples. Degradation efficiency was confirmed by the gas chromatography method.

MATERIAIS V��TREOS E LUZ: PARTE 1

2015 is the Year of Light, according to UNESCO. Chemistry has a close relationship with light and one of the materials that allows such synergy is glass. Depending on the chemical composition of the glass, it is possible to achieve technological applications for the whole range of wavelengths extending from the region of the microwave to gamma rays. This diversity of applications opens a large range of research where chemistry, as a central science, overlaps the fields of physics, engineering, medicine, etc., generating a huge amount of knowledge and technological products used for humanity. This review article aimed at discussing some families of glasses, illustrating some applications. Due to the extension of the theme, and all points raised, we thought it would be good to divide the article into two parts. In the first part we focus on the properties of heavy metal oxide glasses, fluoride glasses and chalcogenide glasses. In the second part we emphasize the properties of glassy thin films prepared by sol-gel methodology and some applications, of both glasses as the films in photonics, and more attention was given to the nonlinear properties and uses of photonic fibers.

Potencialidades anal��ticas do dietilditiofosfato de am��nio em espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado empregando extra����o em fase s��lida e sistemas de inje����o em fluxo

Um sistema de inje����o em fluxo envolvendo complexa����o com dietilditiofosfato de am��nio e sor����o de complexos met��licos em minicolunas de s��lica gel modificada por grupos octadecil C18 �� proposto para determina����es multielementares em espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado. Influ��ncia da concentra����o de reagentes, natureza do ��cido, tempo de rea����o, tempos de comuta����o, vaz��es e interfer��ncia de s��dio foram investigadas. ��gua ou solu����o 2% v/v HNO3 podem ser utilizadas para lavar a coluna antes da elui����o dos analitos com etanol. Amostras contendo 5000 mg Na L-1 e analisadas diretamente com o sistema proposto produzem uma concentra����o aparente de 63Cu de 0,45 ��g L-1; por outro lado n��o foi observada interfer��ncia para As, Pb, Bi, Se, In, Tl, Cd, Hg e 65Cu. Para 0,25 % w/v NH4DTP e 3 mL de solu����o de amostra, curvas anal��ticas para Bi, Cu, Pb, As, Se, In, Tl, Cd, Hg no intervalo de 0,10 a 2,00 ��g L-1 podem ser constru��das com boas correla����es (r2 > 0.998). A velocidade anal��tica e sensibilidade podem ser melhoradas pois dependem das condi����es de pr��-concentra����o e elui����o selecionadas. Com os par��metros acima fixados, limites de detec����o de 0.014 (Cu), 0.027 (As), 0.06 (Se), 0.02 (Cd), 0.029 (In), 0.043 (Hg), 0.02 (Tl), 0.06 (Pb) e 0.002 ��g L-1 (Bi) foram obtidos.

Plasma rico em plaquetas e fatores de crescimento: t��cnica de preparo e utiliza����o em cirurgia pl��stica

OBJETIVO: Estabelecer um m��todo barato e eficiente de prepara����o do plasma rico em plaquetas e fatores de crescimento para utiliza����o em cirurgia pl��stica. M��TODO: Foram realizados 20 testes atrav��s de centrifuga����o de sangue, variando-se a for��a e o tempo de centrifuga����o, para determinarmos o melhor m��todo que proporcione uma maior concentra����o plaquet��ria e mais 10 testes para comprovar a reprodutibilidade do m��todo. RESULTADOS: A utiliza����o de uma for��a de centrifuga����o de 300 g por 10 minutos na 1��. centrifuga����o e de 640 g por 10 minutos na 2��. centrifuga����o obtiveram as maiores concentra����es plaquet��rias, superiores a 4,5 vezes a concentra����o na amostra, e os testes foram reprodut��veis. CONCLUS��ES: Uma alta concentra����o plaquet��ria pode ser obtida por este protocolo de obten����o de plasma rico em plaquetas e fatores de crescimento e a forma����o do gel �� poss��vel atrav��s da utiliza����o de trombina aut��loga, tamb��m obtida pelo protocolo descrito, facilitando sua utiliza����o em cirurgia pl��stica, onde vem mostrando bons resultados na cicatriza����o de feridas e na integra����o de enxertos ��sseos e cut��neos.

Complementa����o por coagula����o com plasma de arg��nio ap��s a ressec����o endosc��pica completa pela t��cnica de fatiamento para grandes adenomas colorretais

OBJETIVO: avaliar a efic��cia da complementa����o por coagula����o com plasma de arg��nio para reduzir a taxa de neoplasia residual ou recorrente ap��s ressec����o endosc��pica completa fragmentada de grandes adenomas s��sseis colorretais. M��TODOS: crit��rios de inclus��o: pacientes com grandes adenomas colorretais s��sseis, > 20mm, sem sinais morfol��gicos de infiltra����o profunda, submetidos �� ressec����o endosc��pica completa fragmentada estudada com cromoendoscopia e magnifica����o de imagens. Os pacientes foram randomizados em dois grupos: grupo 1 - nenhum procedimento adicional e, grupo 2 - complementa����o por coagula����o com plasma de arg��nio. O seguimento por colonoscopia foi realizado em tr��s, seis e 12 meses de p��s-operat��rio. Foi avaliada a taxa de neoplasia residual ou recidiva local. RESULTADOS: foram inclu��dos no estudo um total de 21 les��es. Onze les��es no grupo 1 e dez no grupo 2. Ocorreram duas neoplasias residuais ou recorr��ncias locais em cada grupo, detectadas em tr��s meses de acompanhamento. CONCLUS��O: a complementa����o por coagula����o com plasma de arg��nio ap��s uma aparente ressec����o endosc��pica completa em fragmentos de grandes adenomas s��sseis colorretais n��o parece reduzir a ocorr��ncia de les��o adenomatosa residual ou recidiva local.

Produ����o de interleucina-10 na gesta����o reduz a taxa de replica����o do HIV-1 em culturas de linf��citos maternos

OBJETIVO: avaliar a prolifera����o de c��lulas T e a produ����o de citocinas em gestantes infectadas pelo HIV-1 e seu impacto na replica����o viral in vitro. M��TODOS: sangue perif��rico de 12 gestantes infectadas pelo HIV-1 e de seus neonatos, bem como de 10 gestantes HIV-1 negativas, foi colhido e a quantidade de linf��citos TCD4+ e TCD8+ perif��ricos foi avaliada por citometria de fluxo. Para obter plasma ou c��lulas mononucleares perif��ricas (PBMC), as amostras foram centrifugadas na aus��ncia ou presen��a de um gradiente de Ficoll-Hypaque, respectivamente. As PBMC foram mantidas em cultura por sete dias na presen��a de fito-hemaglutinina mais IL-2 recombinante e a resposta linfoproliferativa de c��lulas T foi analisada pelo m��todo de exclus��o em azul de Trypan. Em alguns experimentos, as culturas foram mantidas na presen��a adicional de anticorpo anti-IL-10. Os plasmas e sobrenadantes das culturas de PBMC ativadas foram submetidos �� an��lise da produ����o de citocinas, pelo m��todo ELISA indireto, e a carga viral, detectada pelo RT-PCR. RESULTADOS: independente da carga viral plasm��tica, a resposta linfoproliferativa em culturas de c��lulas obtidas de gestantes infectadas pelo HIV foi inferior ��s amostras normais [4,2��0,37 vs 2,4��0,56 (x 10(6)) c��lulas/mL; p<0.005]. Tanto em gestantes normais quanto em pacientes com cargas virais baixas, os n��veis de IL-10 foram mais elevados que os das gestantes com elevada replica����o viral (9.790��3.224 vs 1.256��350 pg/mL; p=0.002). N��veis elevados de TNF-alfa no soro (7.200��2.440 vs 510��476 pg/mL) e nas culturas de c��lulas (21.350��15.230 vs 1.256��350 pg/mL) correlacionaram-se �� carga viral plasm��tica elevada e a infec����o neonatal. O bloqueio da IL-10 end��gena com anticorpos anti-IL-10 aumentou a replica����o do HIV-1 em cultura de c��lulas. CONCLUS��O: nossos resultados sugerem que a IL-10 exerce influ��ncia negativa na replica����o viral, o que provavelmente contribui para reduzir o risco de infec����o vertical.

Plasma rico em plaquetas no tratamento de tendinite induzida em eq��inos: avalia����o ultra-sonogr��fica

O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito do plasma rico em plaquetas (PRP) no tratamento da tendinite induzida no tend��o do m��sculo flexor digital superficial (TFDS) de eq��inos mediante avalia����o ultra-sonogr��fica. Para isso foram utilizados seis eq��inos h��gidos machos castrados, com idade de 8-15 anos (x=12 anos). A tendinite do TFDS foi provocada em ambos os membros tor��cicos, mediante a administra����o intratend��nea de 2,5mg de colagenase (2,5mg.��L-1), sendo esse procedimento considerado o in��cio da fase experimental. Doze dias ap��s a indu����o da tendinite, os animais foram submetidos a dois tratamentos: sendo que na les��o efetuada no TFDS direito (grupo tratado, GT), foram administrados 2,5mL de PRP ativado com cloreto de c��lcio a 0,0125mol.L-1, contendo concentra����es variando de 320.000 a 500.000 plaquetas.��L-1; na tendinite do TFDS esquerdo (grupo controle, GC), foram injetados 2,5mL de solu����o salina a 0,9%. Ap��s cinco dias, os animais foram submetidos �� atividade f��sica controlada e progressiva durante 30 dias. Os exames ultra-sonogr��ficos foram realizados antes e ap��s indu����o da tendinite (48 horas ap��s e no 7��, 12��, 14��, 21��, 28��, 35��, 42�� dias do experimento), sendo avaliado a ��rea transversal do tend��o (ATT), ��rea transversal da les��o (ATL), o percentual da ATL, a intensidade e ecogenicidade da les��o, assim como o paralelismo das fibras col��genas. Os resultados revelaram redu����o (P<0,05) da ATL e do grau de ecogenicidade da les��o em fun����o do tempo, mas com diferen��a (P<0,05) entre grupos apenas para ATL, com valores menores no GT. O tratamento com PRP proporciona maior redu����o da ��rea da les��o, mensurada por ultra-sonografia.

Platelet activation: ultrastructure and morphometry in platelet-rich plasma of horses

This study was conducted to investigate the activation ability of the platelet-rich plasma (PRP) by pharmacological agents, as well as to verify the need or not of this activation for therapeutic use. The PRP was obtained from four healthy crossbred geldings aged 13 to 16 years (15��1years), and was processed for observation and quantification of the platelet morphology by using the transmission electron microscopy. All PRP samples were activated with 10% calcium chloride (CaCl2) solution, pure bovine thrombin or associated with CaCl2. The control (pure PRP) was not pharmacologically activated. In the pure PRP samples, 49% of the platelets were classified as state of activation uncertain, 41% as resting, 9% as fully activated and 1% as irreversibly damaged. Treatment with 10% CaCl2 provided a distribution of 54% platelets in state of activation uncertain, 24% as fully activated, 20% as resting, and 2% as irreversibly damaged. The platelet morphology of the bovine thrombin treated samples did not fit into classification adopted, as showing irregular shape with emission of large filamentous pseudopods, appearance of ruptured and whole granules in the remaining cytoplasm and extracellular environment. There was effect of the treatment on the platelet morphology (P=0.03). The 10% CaCl2 is an adequate platelet-activating agent. However, in cases the use of PRP under its liquid form is necessary, the use of pure PRP is recommended, since besides presenting an adequate percentage of fully activated platelets it also has significant amount of the resting type, which can be activated by substances found in the injured tissue.

Express��o g��nica do col��geno em ferida cut��nea de equinos tratada com plasma rico em plaquetas

O plasma rico em plaquetas (PRP) �� um produto derivado da centrifuga����o do sangue total, cuja utiliza����o concentra-se em melhorar a repara����o de diferentes tecidos, tendo em vista os fatores de crescimento nele contido. Entretanto, os benef��cios da terapia no contexto cl��nico ainda n��o est��o totalmente esclarecidos. Objetivou-se avaliar a express��o dos genes dos col��genos tipos I e III durante diferentes fases do processo de cicatriza����o da pele tratada com PRP. Foram utilizados oito equinos machos castrados, mesti��os, h��gidos, com idade entre 16 e 17 (16,37��0,52) anos. Tr��s feridas em formato quadrangular (6,25cm��) foram confeccionadas nas regi��es gl��teas direita e esquerda de todos os animais. Doze horas ap��s indu����o das les��es, 0,5mL do PRP foi administrado em cada uma das quatro extremidades das feridas (T=grupo tratado), de uma das regi��es gl��teas, escolhida aleatoriamente. A regi��o contralateral foi utilizada como controle (NT=grupo n��o tratado). As feridas foram submetidas �� limpeza di��ria com ��gua Milli Q, e amostras foram obtidas com bi��psias utilizando-se Punch de 6mm de di��metro. Seis bi��psias de pele foram obtidas a primeira no dia de indu����o das les��es (T0), e as demais com 1 (T1) 2 (T2) 7 (T3) e 14 (T4) dias ap��s a realiza����o das feridas. A sexta bi��psia (T5) foi realizada ap��s o completo fechamento da pele. A avalia����o da express��o dos genes dos col��genos tipos I e III foi realizada pela t��cnica qRT-PCR e os dados analisados pelo teste de Bonferroni, t de Student, t pareado e an��lise de regress��o (p<0,05). Diferen��as (p<0,05), entre grupos, foram observadas para a express��o de ambos os col��genos nos T1 a T4, sendo maior nos animais do grupo T. O pico de express��o dos col��genos tipos I e III ocorreu no T5 para ambos os grupos, mas a maior express��o foi diferente (p<0,05) do tempo zero a partir do T3. Nos animais do grupo tratado a express��o dos col��genos come��ou a estabilizar no T5, enquanto que nos equinos do NT os valores permaneceram elevados. A administra����o local de uma ��nica dose do PRP em ferida cut��nea na regi��o gl��tea de equinos, resulta em maior express��o g��nica local dos col��genos tipos I e III. Entretanto, essa express��o n��o altera o tempo m��ximo de fechamento macrosc��pico da ferida.

Quantifica����o de fatores de crescimento na pele de equinos tratada com plasma rico em plaquetas

O plasma rico em plaquetas (PRP) �� um produto derivado da centrifuga����o do sangue total, sendo rico em fatores bioativos, como os de crescimento. Apesar da ampla utiliza����o em processos cicatriciais, h�� controv��rsia sobre a efic��cia da terapia na cicatriza����o cut��nea. O objetivo desse estudo foi quantificar e comparar a concentra����o dos fatores TGF-&#946;1 e PDGF-BB no PRP, plasma sangu��neo e pele, durante diferentes fases do processo de cicatriza����o da pele tratada ou n��o com PRP. Foram utilizados sete equinos machos castrados, mesti��os, h��gidos, com idade entre 16 e 17 (16,14��0,63) anos. Tr��s les��es em formato quadrangular (6,25cm��) foram produzidas cirurgicamente nas regi��es gl��teas direita e esquerda de todos os animais. Doze horas ap��s indu����o das feridas, 0,5mL do PRP foi administrado em cada uma das quatro extremidades das feridas de uma das regi��es gl��teas (Grupo tratado = GT), escolhida aleatoriamente. A regi��o contralateral foi utilizada como controle (GC). As feridas foram submetidas �� limpeza di��ria com ��gua Milli Q, e amostras foram obtidas mediante bi��psias realizadas com Punch de 6mm. Foram obtidas seis bi��psias de pele, sendo a primeira realizada logo ap��s a produ����o da ferida (T0), e as demais com 1 (T1) 2 (T2) 7 (T3) e 14 (T4) dias ap��s a indu����o da les��o. A sexta bi��psia (T5) foi obtida ap��s completo fechamento da pele, que ocorreu aproximadamente aos 37 dias (36,85��7,45, GC; 38,85��6,46, GT). Tamb��m foram obtidas amostras de sangue com EDTA em todos os tempos mencionados. A quantifica����o dos fatores de crescimento TGF-&#946;1 e PDGF-BB na pele, PRP e plasma sangu��neo foi realizada pela t��cnica ELISA. Os dados foram analisados estatisticamente pelo teste t, correla����o de Pearson e regress��o, utilizando n��vel de signific��ncia de 5%. N��o houve diferen��a entre os grupos, nos valores dos dois fatores de crescimento mensurados na pele, nos diferentes tempos. Tamb��m n��o houve correla����o entre a quantidade dos fatores de crescimento presentes na pele e no plasma. Por outro lado, correla����o positiva foi observada entre PRP e pele no grupo tratado, para os fatores de crescimento TGF-&#946;1 (r=0,31) e PDGF-BB (r=0,38), bem como entre ambos os fatores de crescimento presentes no PRP (r=0,81). Considerando as concentra����es dos fatores de crescimento no T0, os maiores valores cut��neos (p<0,05) do TGF-&#946;1, em ambos os grupos, ocorreram nos tempos T3 e T5. Valores mais elevados (p<0,05) do PDGF-BB ocorreram no T4 (GT) e T5 (GC). No plasma n��o houve altera����o nas concentra����es desses fatores em rela����o ao T0, o que sugere que o PRP n��o acarreta efeito sist��mico, quando os procedimentos adotados na presente pesquisa s��o utilizados. A administra����o local de PRP no volume estudado, 12 h ap��s indu����o cir��rgica de ferida cut��nea na regi��o gl��tea de equinos n��o ocasiona maiores concentra����es dos fatores de crescimento TGF-&#946;1 e PDGF-BB no plasma sangu��neo e pele, durante o processo de cicatriza����o.

Babesia bovis: expression of adhesion molecules in bovine umbilical endothelial cells stimulated with plasma from infected cattle

Ten male, 12-month-old Jersey with intact spleens, serologically and parasitologically free from Babesia were housed individually in an arthropod-free isolation system from birth and throughout entire experiment. The animals were randomly divided into two groups. Five animals (group A) were intravenously inoculated with 6.6 X10(7) red blood cells parasitized with pathogenic sample of Babesia bovis (passage 7 BboUFV-1), for the subsequent "ex vivo" determination of the expression of adhesion molecules. Five non-inoculated animals (group B) were used as the negative control. The expression of the adhesion molecules ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and thrombospondin (TSP) was measured in bovine umbilical vein endothelial cells (BUVECs). The endothelial cells stimulated with a pool of plasma from animals infected with the BboUFV-1 7th passage sample had a much more intense immunostaining of ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and TSP, compared to the cells which did not received the stimulus. The results suggest that proinflammatory cytokines released in the acute phase of babesiosis may be involved in the expression of adhesion molecules thereby implicating them in the pathophysiology of babesiosis caused by B. bovis.

Padroniza����o de t��cnica manual para obten����o de plasma rico em plaquetas de bovino

Resumo: Para padroniza����o de uma t��cnica manual para a obten����o de plasma rico em plaquetas (PRP) aut��logo em bovinos com custo reduzido (m��todo manual) e de boa qualidade (capacidade de concentrar plaquetas, alta concentra����o de fatores de crescimento e contamina����o reduzida com leuc��citos e eritr��citos), que poder�� ser utilizado como um agente modulador da resposta imune de vacas com diferentes enfermidades, 450 ml de sangue total de nove vacas clinicamente saud��veis e com perfil hematol��gico normal foi coletado em bolsas de sangue CPDA-1 e processado dentro de quatro horas ap��s a coleta. O sangue foi separado em al��quotas para avaliar 8 protocolos (P) de centrifuga����o dupla que variaram quanto a velocidade e o tempo de centrifuga����o. A contagem de plaquetas, eritr��citos e leuc��citos na suspens��o obtida (PRP) foi realizada pelo m��todo manual em c��mara de Neubauer: P5 (400g e 800g ambos durante 10 min) foi o protocolo com maior n��mero de plaquetas, seguido por P3 (120g e 473g ambos durante 10 min), P4 (300g e 640g durante 10 min cada), P6 (640g durante 10 min e 640g durante 5 min), P8 (640g durante 5 min e 120g durante 10 min) e P7 (720g e 720g durante 5 min) e diferentes (p<0,05) dos menores valores encontrados em P1 (120g e 240g, ambos por 5 minutos) e P2 (120g e 473g ambos por 5 min). Em rela����o aos eritr��citos, P8, P7, P6, P5 e P4 apresentaram menores concentra����es e maiores valores (p<0,05) foram observados em P3 e P2. Menores quantidades de leuc��citos foram observadas em P5, P6, P8 e P7 com o maior valor obtido em P2 (p<0,05). Todos os protocolos (P1 a P8) foram eficientes em concentrar plaquetas sendo o valor mais baixo (3,65��0,79) observado em P1. Em rela����o aos fatores de crescimento ao se mensurar TGF- 1, os protocolos P1 e P8 evidenciaram valores mais elevados. De acordo com os resultados obtidos os protocolos P5 e P8 apresentaram os melhores resultados para confec����o de PRP bovino.