Micoses sistêmicas: fatores associados ao óbito em pacientes com infecção pelo vírus da imunodeficiência humana, Cuiabá, Estado de Mato Grosso, 2005-2008

A prevalência de micose sistêmica entre 1.300 pacientes portadores de HIV/Aids de Cuiabá, Mato Grosso foi de 4,6%, no período de 2005-2008. As espécies de fungos isoladas foram o Cryptococcus neoformans (50%), Cryptococcus gattii (1,6%), Cryptococcus spp (6,6%), Histoplasma capsulatum (38,3%) e Paracoccidioides brasiliensis (3,3%). Óbito foi registrado em 32 (53,3%) pacientes, sendo a criptococose a principal causa. A contagem de linfócitos T CD4+ foi baixa e semelhante entre os pacientes que sobreviveram ou faleceram por micose sistêmica. O etilismo (OR:8,2; IC95%: 1,4-62,1; p=0,005) e o nível médio de desidrogenase lática [758 (182) U/L vs 416 (268) U/L; p<0,001] foram as características independentemente associadas ao óbito dos pacientes do estudo. Os resultados mostram alta letalidade por micoses sistêmicas em pacientes portadores de HIV/Aids de Cuiabá e sugerem que características clínico-laboratoriais tais como o etilismo e a elevação precoce da desidrogenase lática podem ser fatores relacionados ao pior prognóstico nessas condições.

Oropharyngeal histoplasmosis: report of eleven cases and review of the literature

INTRODUCTION: Histoplasmosis is a systemic mycosis endemic in Brazil, especially in the State of Rio Grande do Sul, where Histoplasma capsulatum was isolated from the soil. H. capsulatum may compromise unusual areas, including the oropharynx, particularly in patients presenting disseminated histoplasmosis; which is associated with a state of immunosuppression, such as AIDS. METHODS: During database analysis of a total of 265 cases of histoplasmosis, the medical records of 11 patients with histological or microbiological diagnoses of oral histoplasmosis (OH) between 1987 and 2008 were retrospectively reviewed. RESULTS: This work reports 11 cases of OH, the majority presenting histopathological or microbiological evidence of disseminated histoplasmosis (DH). In the patients with DH, OH was the first manifestation of histoplasmosis. Five of the 11 patients discussed were HIV-seropositive with clinical and laboratory findings of AIDS. Four patients presented active pulmonary tuberculosis concomitant with histoplasmosis. Treatment was based on the use of itraconazole and amphotericin B deoxycholate. Eight patients responded successfully to therapy after one year, two did not come back for reevaluation and one died despite adequate therapy. CONCLUSIONS: Oral histoplasmosis is closely associated with immunosuppression status, especially in patients presenting AIDS; moreover, in many cases, OH is the first sign of disseminated histoplasmosis.

Histoplasmosis in immunocompetent individuals living in an endemic area in the Brazilian Southeast

Introduction The distribution of infection by Histoplasma capsulatum in Brazil is heterogeneous, and the number of cases affecting immunocompetent individuals is relatively small. This study reports the epidemiological and clinical data regarding histoplasmosis in non-immunosuppressed individuals. Methods The study included only the immunocompetent patients with histoplasmosis who were diagnosed between 1970 and 2012 at a university hospital located in Ribeirão Preto, State of São Paulo, Brazil. Clinical and epidemiological data were collected retrospectively from the patient records. Results Of the 123 patients analyzed, 95 had an active disease that manifested in the different clinical forms of histoplasmosis. Men were the predominant gender, and most patients resided in the Northeast of the State of São Paulo and in the nearby municipalities of the State of Minas Gerais. The risk factors for acquiring histoplasmosis and prolonged contact in a rural environment were recorded in 43.9% and 82.9% of cases, respectively. Smoking, alcoholism, and comorbidity rates were high among the patients with the chronic pulmonary and subacute/chronic disseminated forms of histoplasmosis. Many patients achieved clinical cure spontaneously, but 58.9% required antifungals; the disease lethality rate was 5.3%. Conclusions Immunocompetent individuals manifested the diverse clinical forms of histoplasmosis over a period of 4 decades, revealing an additional endemic area of this fungal disease in the Brazilian Southeast.

Inteins in pathogenic fungi: a phylogenetic tool and perspectives for therapeutic applications

Inteins or "internal proteins" are coding sequences that are transcribed and translated with flanking sequences (exteins). After translation, the inteins are excised by an autocatalytic process and the host protein assumes its normal conformation and develops its expected function. These parasitic genetic elements have been found in important, conserved proteins in all three domains of life. Most of the eukaryotic inteins are present in the fungi kingdom and the PRP8 intein is one of the most widespread inteins, occurring in important pathogens such as Cryptococcus neoformans (varieties grubii and neoformans), Cryptococcus gattii, Histoplasma capsulatum and Paracoccidioides brasiliensis. The knowledge of conserved and non-conserved domains in inteins have opened up new opportunities for the study of population variability in pathogenic fungi, including their phylogenetic relationships and recognition or diagnoses of species. Furthermore, inteins in pathogenic fungi should also be considered a promising therapeutic drug target, since once the autocatalytic splicing is inhibited, the host protein, which is typically vital, will not be able to perform its normal function and the fungal cell will not survive or reproduce.

Histoplasmose pulmonar aguda: relato de uma microepidemia

Os autores relatam uma microepidemia de histoplasmose pulmonar, com cinco crianças que desenvolveram a doença em um período de 7 a 14 dias após a limpeza de um forno desativado para produção de carvão vegetal. Todas apresentaram quadro de febre alta persistente, tosse seca, astenia e anorexia, com 28 dias de evolução. Quando buscaram atendimento médico, uma delas encontrava-se taquipnéica, febril, com hepatomegalia e palidez cutânea, estando as restantes em regular estado geral e já sem febre. As radiografias de tórax demonstravam, em todos os casos, infiltrados reticulonodulares grosseiros, difusos e bilaterais, além de linfonodomegalias hilares. As tomografias computadorizadas evidenciaram pequenos nódulos difusos, com distribuição aleatória, além das linfonodomegalias. Os diagnósticos foram confirmados por meio da imunodifusão em gel para Histoplasma capsulatum, que foi positiva em todas as amostras pareadas coletadas com 15 dias de intervalo. Apenas uma criança necessitou de internação, por causa de importante queda no estado geral, sendo realizado tratamento de suporte e observação. Todas as crianças evoluíram com melhora clínica, sem o uso de antifúngicos, e foram submetidas a tomografias de controle após cerca de 50 dias, que demonstraram importante regressão das lesões.

Identification of fungemia agents using the polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis

Prompt and specific identification of fungemia agents is important in order to define clinical treatment. However, in most cases conventional culture identification can be considered to be time-consuming and not without errors. The aim of the present study was to identify the following fungemia agents: Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans, Cryptococcus gattii, and Histoplasma capsulatum using the polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis (PCR/RFLP). More specifically: a) to evaluate 3 different amplification regions, b) to investigate 3 different restriction enzymes, and c) to use the best PCR/RFLP procedure to indentify 60 fungemia agents from a culture collection. All 3 pairs of primers (ITS1/ITS4, NL4/ITS5 and Primer1/Primer2) were able to amplify DNA from the reference strains. However, the size of these PCR products did not permit the identification of all the species studied. Three restriction enzymes were used to digest the PCR products: HaeIII, Ddel and Bfal. Among the combinations of pairs of primers and restriction enzymes, only one (primer pair NL4/ITS5 and restriction enzyme Ddel) produced a specific RFLP pattern for each microorganism studied. Sixty cultures of fungemia agents (selected from the culture collection of Fundação de Medicina Tropical do Amazonas - FMTAM) were correctly identified by PCR/RFLP using the prime pair NL4/ITS5 and Ddel. We conclude that the method proved to be both simple and reproducible, and may offer potential advantages over phenotyping methods.

Histoplasmose disseminada em pacientes com Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (SIDA): estudo de 25 casos

São apresentados 25 casos de histoplasmose disseminada em pacientes com SIDA. O envolvimento mucocutâneo estabeleceu o diagnóstico de histoplasmose disseminada em 68% dos casos. Destacamos a importância da histoplasmose como infecção oportunística em paciente HIV positivo.

Valor de los metodos directos e indirectos de diagnóstico en las micosis sitémicas asociadas al SIDA

Durante 5 años se estudiaron 117 pacientes con micosis sistémicas asociadas al SIDA: 74 criptococosis, 39 histoplasmosis y 4 con ambas enfermedades. Para el diagnóstico analizamos los siguientes materiales: escarificaciones de lesiones cutáneas o mucosas, aspirados de médula ósea, secreciones bronquiales, biopsias de diversos órganos, líquido cefalorraquídeo, hemocultivos y sueros para determinaciones serológicas. Fueron estudiadas en total 203 muestras de pacientes con histoplasmosis, el 46.3% de las mismas acusó la presencia de H. capsulatum. Las escarificaciones cutáneas exhibieron la mayor sensibilidad (94.7%), seguidas por las biopsias (80%) y los mielocultivos (42.1%). La demostración de anticuerpos circulantes por medio de 3 pruebas serológicas y con de 2 antígenos específicos dio resultados positivos en el 45.4% de los pacientes. Se estudiaron en total 413 especímenes de pacientes con criptococosis, la confirmación diagnóstica fue posible en el 69% de las muestras. El mayor rendimiento se obtuvo con el LCR (89.5%), le seguieron en sensibilidad los hemocultivos (61.2%), las escarificaciones cutáneas (42.9%) y los urocultivos (41.7%). La búsqueda de antígeno en los fluidos orgánicos fue positiva en casi todos los casos. La revisión que presentamos permitirá una búsqueda más racional y rápida de los métodos de diagnóstico en las micosis asociadas al SIDA.

Blood culture as a parameter of treatment effectiveness in experimental histoplasmosis of the hamster

The aim of this study was to determine the value of blood culture as a parameter of treatment effectiveness in experimental histoplasmosis. A total of thirty five hamsters, weighing approximately 120g, were inoculated intracardiacly with 0.1 ml of a suspension containing 4 x 10(7) cells/ml of the yeast phase of H. capsulatum. Treatments were started one week after the infection and lasted for 3 weeks. The azoles, (itraconazole, saperconazole and fluconazole) were administered once a day by gavage, at a dose of 8 mg/kg; Amphotericin B was given intraperitonealy every other day at a dose of 6mg/kg. Blood samples (1 ml) were obtained by heart punction from the 4th day after infection and were seeded in Sabouraud honey-agar and BHI-agar. The hamsters that survived were killed one week after treatment completion and the following criteria were considered for treatment evaluation: 1) rate of spontaneous death, at the end of the experience; 2) microscopic examination of Giemsa smears from liver and spleen and 3) determination of CFU in spleen cultures. Amphotericin B was the most effective drug, with negative blood cultures at day 20, negative spleen cultures in all cases and all the animals survived until the end of the study. Fluconazole was the less effective drug, blood cultures were positive during the whole experience, spleen cultures showed a similar average of CFU when compared with the control animals and 42.8% of these animals died. Saperconazole and itraconazole showed a similar activity, with survival of all hamsters and negative blood cultures at 23 and 26 days respectively. Blood culture seems to be valuable parameter for treatments' evaluation in experimental histoplasmosis of the hamster.

Histoplasmin and paracoccidioidin skin reactivity in infantile population of Northern Argentina

In order to estimate ages at which etiological agents of systemic mycoses initiate infection, histoplasmin and paracoccidioidin skin tests were performed in 344 children of both sexes, between 2 and 15 years old. They were selected from a statistically significant population sample Gral. San Martín city (Northeast Argentina). Tests were read 48h after injection and considered positive if a 5 mm on larger induration was present. Circulating antibodies were also evaluated by agar gel immunodiffusion. The overall infection rate for H. capsulatum was 9.2%, belonging to children from 4 to 14 years old, without significant differences among sexes. Five children from 2 to 14 years old were positive to paracoccidioidin (1.6%). None of the children had specific antibodies neither signs of active mycosis. Results show H. capsulatum infection can be found from age 4, while for P. brasiliensis the lower limit was two years old. These findings may contribute to better knowledge on infantile fungal infection in a geographical region where no previous references can be found.

HISTOPLASMIN SURVEY IN HIV-POSITIVE PATIENTS: RESULTS FROM AN ENDEMIC AREA IN NORTHEASTERN BRAZIL

SUMMARY Background. Disseminated histoplasmosis is common in AIDS patients with advanced immunosuppression in Ceará, Northeastern Brazil. The goal of this study was to determine the prevalence of Histoplasma infection in patients with HIV/AIDS living in Fortaleza, the capital of Ceará. Methods. Intradermal tests with histoplasmin (mycelial phase) were performed in 161 HIV patients with CD4 ≥ 350 cells/mm 3 . Evidence of recent illness was evaluated with immunodiffusion (ID) tests in 76 of these individuals. Results. A total of 11.8% of patients reacted to histoplasmin and 2.63% had ID test positive to Histoplasma. The presence of mango trees (Mangifera indica) in the patient neighborhood (OR = 2.870; 95% CI = 1.081-7.617; p = 0.040) and past activity involving soil (OR = 2.834; 95% CI = 1.045-7.687; p = 0.045) or visits to a farm (OR = 3.869; 95% CI = 1.189-12.591; p = 0.033) were significantly associated with Histoplasma infection. Conclusions. Patients with HIV living in Fortaleza have an expressive prevalence of infection with Histoplasma.

Microepidemia de histoplasmose na zona rural de Brasília - DF - 1967: II - Estudos Epidemiológico e Parasitológico da Fonte de Infecção

Neste trabalho são relatadas pesquisas parasitológicas e epiâemiológicas realizadas numa provável fonte de infecção de Histoplasmose da área rural do D. F. - Brasília, onde 14 pessoas contraíram a doença. Os estudos clínico, imunológico e radiológico foram anteriormente descritos. Os autores conseguiram isolar o H. capsulatum do solo da caverna e das vísceras e do sangue de morcegos (Phyllostomus hastatus hastatus, Pallas 1767) que nela habitavam. Resultaram negativas as tentativas de isolamento do fungo de animais sentinelas (cobaios), assim como não se obteve neles a viragem dos testes intradérmicos com histoplasmina. Em impressões de vísceras dos morcegos, constataram-se formas semelhantes as do T. gondii que posteriormente foram isoladas, em camundongos jovens, por inoculação de vísceras maceradas e sangue. Foram encontrados 2 ectoparasitos nos morcegos: Boophilus microplus e um díptero da família Streblidae. O ácaro albergava tripomastigotos do tipo cruzi, não sendo porém conseguido seu isolamento. No tubo digestivo dos quirópteros, foram retirados nematódeos (Histiostrongylus octaeantus) e cestódeos do gênero Mathevotaenia. Foram capturados, em torno da entrada da caverna, 2 exemplares de Cercomys cunicularis apereoide não sendo examinados sob o ponto de vista parasitológico. Testes intradérmicos realizados em 826 habitantes da área resultaram positivos em 184 (22,27%). A gruta, fonte da infecção, está localizada em uma formação calcárea, pertencente à série Bambuí, acreditando-se, pelos aspectos tectônicos, ser da idade siluriana. No Brasil, o isolamento de H. capsulatum de solo, guanos de morcegos e vísceras de roedores já tinham sido realizados; contudo, esta foi a primeira vez que se conseguiu isolá-lo do solo de uma caverna, fonte de infecção, e das vísceras e sangue de morcegos. Os resultados obtidos com os testes intradérmicos com histoplasmina demonstraram a prevalência de histoplasmose na área rural do DF e, conseqüentemente, a possibilidade de ocorrerem outra microepidemia ou aparecimento de casos isolados de histoplasmose-doença.

Alterações morfológicas da glândula supra-renal na síndrome da imunodeficiência adquirida

Na síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS) pode-se verificar o acometimento da supra-renal por efeito citopático direto pelo HIV, por infecções oportunistas ou neoplasias. Estes achados poderiam variar de acordo com a procedência do paciente, devido às doenças peculiares à região. Neste trabalho avaliou-se o comprometimento da supra-renal em quatorze pacientes que morreram de AIDS no Hospital Escola, em Uberaba. Treze eram do sexo masculino e treze brancos. A idade foi de 29,9 ± 7,8 anos e o índice de massa corporal foi de 19 ± 4,1kg/m2. Os fragmentos de supra-renal obtidos nas necropsias foram analisados em microscópio de luz. Encontramos inflamação em 100% dos casos, identificando-se o agente etiológico em oito (58,1%) casos. O Citomegalovírus foi identificado em sete casos, o Cryptococcus sp e o Herpes simplex em dois e o Histoplasma sp em um caso, estes achados são semelhantes aos da literatura. Em um caso, encontramos calcificação do parênquima e em outro, flebite da veia central. Em alguns casos que apresentavam lesão não foi possível identificar o agente etiológico, talvez em decorrência do efeito citopático direto pelo HIV ou devido a toxicidade das drogas utilizadas no tratamento da AIDS e das infecções oportunistas.

Alterações anatomopatológicas renais em indivíduos com a síndrome da imunodeficiência adquirida

As alterações anatomopatológicas renais foram estudadas em 119 casos de indivíduos com a síndrome da imunodeficiência humana adquirida (SIDA) no Hospital Escola da Faculdade de Medicina do Triângulo Mineiro, Uberaba MG. A partir das amostras de rim fixadas em formol, foram confeccionadas lâminas e analisadas ao microscópio de luz. Dos 119 casos estudados, 67 tiveram diagnóstico de nefrite túbulo intersticial (NTI), sendo 18 inespecíficas, 2 xantogranulomatosas e encontrou-se agente infeccioso em 48: fungos em 28 (16 Cryptococcus sp, 9 Histoplasma sp, 1 Candida sp e 2 Paracoccidioides brasiliensis); bactérias em 18 (9 Mycobacterium sp); vírus em 6, Citomegalovírus. Em 43 havia necrose tubular aguda (NTA). Outros diagnósticos foram: nefrocalcinose (15,1%) e hialinose arteriolar (22,7%). Encontrou-se também 2 casos com glomeruloesclerose segmentar focal (GESF) e um caso de hiperplasia mesangial difusa. Houve predomínio da NTI, que pode ser devido às infecções oportunistas, predominando as fúngicas; a toxicidade por drogas ou ainda devido a possível ação direta do próprio vírus. A necrose tubular aguda (NTA), foi a segunda causa em freqüência, de acometimento renal da amostra. Concluiu-se que o envolvimento renal nos pacientes com SIDA apresenta um espectro variado de processos patológicos, principalmente relacionados com infecções oportunistas, o tratamento e os procedimentos para diagnósticos, e ainda as nefropatias associadas ao vírus da imunodeficiência humana (VIH).

Identificação de agentes infecciosos pulmonares em autópsias de pacientes com a síndrome da imunodeficiência adquirida

As afecções pulmonares são freqüentes em indivíduos infectados pelo vírus da imunodeficiência humana. Neste trabalho, procurou-se identificar através de histoquímica e imunohistoquímica, agentes infecciosos nos pulmões de indivíduos portadores da síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA), autopsiados entre março de 1990 e julho de 2000 na FMTM. Fragmentos de pulmão de 40 indivíduos com SIDA autopsiados foram analisados histologicamente. Foram identificados agentes infecciosos em 34 (85%) casos dos 40 analisados, sendo que bactérias foram encontradas em 22 (55%) casos. Entre os agentes fúngicos o Pneumocystis carinii foi encontrado em oito (19,1%) casos; Cryptococcus sp em quatro (9,5%), Histoplasma sp em dois (4,8%) e Candida sp em um (2,4%) caso. Detectou-se também associação entre Pneumocystis carinii, Citomegalovirus e Cryptococcus sp; CMV e Toxoplasma gondii. Em cinco casos, Candida sp, CMV e Pneumocystis carinii estiveram associados a bactérias. Entre as infecções não bacterianas, os fungos foram os agentes infecciosos mais isolados dos pulmões em autópsias de indivíduos com SIDA, sendo o Pneumocystis carinii o mais freqüente.