Comparison of serological responses in two different populations with pulmonary tuberculosis

Observational studies on the humoural immune responses of the Warao indigenous people from Delta Amacuro, an isolated area, were compared with urban residents of the Venezuelan capital. Mycobacterium tuberculosis-specific reactivities (IgM, IgE, sIgA, IgG and IgG subclasses) were measured by ELISA using PPD and 38-kDa M. tuberculosis antigens. A total of 294 individuals were studied, 162 Warao (indigenous people) and 132 Creole (non-indigenous people). The patient group consisted of 87 Warao patients and 58 Creole patients, while the control group consisted of 75 Warao controls and 74 Creole controls. Combinations among the isotypes studied were performed. The findings showed that for the Warao people, sensitivity to the combination including anti-PPD IgG and IgE was 92.0%, while for the Creole people, sensitivity to the combination including anti-PPD IgG but more so anti-PPD IgG1 and IgG2 was 90.0%. Simple tests were able to show higher specificities, which were population-specific; specificities were anti-PPD IgG3, 100.0% and anti-PPD IgM, 97.4% for the Warao and Creole peoples, respectively. In conclusion, while simple tests reached high specificity, the multi-isotype tests improved sensitivity; the latter shows this approach may be useful in diagnostic testing.

Tuberculin skin test and interferon-gamma release assay values are associated with antimicrobial peptides expression in polymorphonuclear cells during latent tuberculous infection

It has been reported that patients with progressive tuberculosis (TB) express abundant amounts of the antimicrobial peptides (AMPs) cathelicidin (LL-37) and human neutrophil peptide-1 (HNP-1) in circulating cells, whereas latent TB infected donors showed no differences when compared with purified protein derivative (PPD) and QuantiFERON®-TB Gold (QFT)-healthy individuals. The aim of this study was to determine whether LL-37 and HNP-1 production correlates with higher tuberculin skin test (TST) and QFT values in TB household contacts. Twenty-six TB household contact individuals between 26-58 years old TST and QFT positive with at last two years of latent TB infection were recruited. AMPs production by polymorphonuclear cells was determined by flow cytometry and correlation between TST and QFT values was analysed. Our results showed that there is a positive correlation between levels of HNP-1 and LL-37 production with reactivity to TST and/or QFT levels. This preliminary study suggests the potential use of the expression levels of these peptides as biomarkers for progression in latent infected individuals.

Serial QuantiFERON-TB Gold In-Tube assay and tuberculin skin test to diagnose latent tuberculosis in household Mexican contacts: conversion and reversion rates and associated factors using conventional and borderline zone definitions

A cohort of 123 adult contacts was followed for 18‐24 months (86 completed the follow-up) to compare conversion and reversion rates based on two serial measures of QuantiFERON (QFT) and tuberculin skin test (TST) (PPD from TUBERSOL, Aventis Pasteur, Canada) for diagnosing latent tuberculosis (TB) in household contacts of TB patients using conventional (C) and borderline zone (BZ) definitions. Questionnaires were used to obtain information regarding TB exposure, TB risk factors and socio-demographic data. QFT (IU/mL) conversion was defined as <0.35 to ≥0.35 (C) or <0.35 to >0.70 (BZ) and reversion was defined as ≥0.35 to <0.35 (C) or ≥0.35 to <0.20 (BZ); TST (mm) conversion was defined as <5 to ≥5 (C) or <5 to >10 (BZ) and reversion was defined as ≥5 to <5 (C). The QFT conversion and reversion rates were 10.5% and 7% with C and 8.1% and 4.7% with the BZ definitions, respectively. The TST rates were higher compared with QFT, especially with the C definitions (conversion 23.3%, reversion 9.3%). The QFT conversion and reversion rates were higher for TST ≥5; for TST, both rates were lower for QFT <0.35. No risk factors were associated with the probability of converting or reverting. The inconsistency and apparent randomness of serial testing is confusing and adds to the limitations of these tests and definitions to follow-up close TB contacts.

Discurso político-acadêmico e integração das pessoas com deficiência: das aparências aos sentidos

Objetivamos analisar o Decreto 3.298/99 e os planos das disciplinas dos Cursos de Graduação em enfermagem para verificar inclusão do item participação do enfermeiro no processo de integração das Pessoas Portadoras de Deficiência-PPD. Lemos os planos das disciplinas de quatro universidades; recortamos as disciplinas em comum e as distribuímos conforme o nível de atenção em saúde. As proposições do Decreto são universais, igualitárias e democráticas, os planos encampam a maioria das ações recomendadas pelo Ministério da Saúde para prevenir as deficiências, contudo a prática acadêmica exercita a prevenção-tratamento, silenciando a respeito da inserção do Enfermeiro no processo de integração da PPD.

Análise espacial e de vizinhança no melhoramento genético de plantas

Três formas de análise espacial foram comparadas à análise do modelo linear Gauss-Markov normal em experimentos de Genética, tendo-se suposto os efeitos de progênies como aleatórios: médias móveis nos dados brutos (MM), médias móveis nos dados residuais (Papadakis - PPD) e análise espacial por meio de modelagem de covariâncias residuais (AE). Inicialmente, ignorou-se a informação do controle local, para testar a efetividade da análise espacial. Posteriormente, foi verificado se haveria melhoras com as diferentes formas de análise espacial aplicadas ao modelo completo, considerando-se o controle local do delineamento em látice. Os valores médios de razões, entre estimativas de componentes de variância e de herdabilidade, foram usados como guia de discussão sobre qual a melhor forma de análise. Em geral, ignorar o delineamento experimental e usar somente a informação espacial resultou em análises ineficientes. Os modelos MM e PPD, em média, melhoraram o modelo original justificado pelo delineamento, embora a AE não o tenha melhorado. A AE, apesar de ineficiente, não mudou as estimativas dos componentes de variância e de herdabilidade. Esta propriedade garante que a combinação de efeitos aleatórios para progênies e a AE não violam as suposições (algumas delas justificadas pelo delineamento). Isto é especialmente útil com experimentos amplos, com grande número de progênies.

Procedures for evaluating the tolerance of cassava genotypes to postharvest physiological deterioration

Abstract: The objective of this work was to define procedures to assess the tolerance of cassava genotypes to postharvest physiological deterioration (PPD) and to microbial deterioration (MD). Roots of six cassava genotypes were evaluated in two experiments, during storage under different environmental conditions: high temperature and low soil moisture; or low temperature and high soil moisture. Roots were treated or not with fungicide (carbendazim) before storage. Genotype reactions to MD and PPD were evaluated at 0, 2, 5, 10, 15, 20, and 30 days after harvest (DAH), in the proximal, medial, and distal parts of the roots. A diagrammatic scale was proposed to evaluate nonperipheral symptoms of PPD. Fungicide treatment and root position did not influence PPD expression; however, all factors had significant effect on MD severity. Genotypes differed as to their tolerance to PPD and MD. Both deterioration types were more pronounced during periods of higher humidity and lower temperatures. The fungicide treatment increased root shelf life by reducing MD severity up to 10 DAH. Whole roots showed low MD severity and high PPD expression up to 10 DAH, which enabled the assessment of PPD without significant interference of MD symptoms during this period.

Development of a diagrammatic scale for the evaluation of postharvest physiological deterioration in cassava roots

Abstract:The objective of this work was to develop a scale to assess the severity of postharvest physiological deterioration (PPD) of cassava roots, and to validate this scale for accuracy and reproducibility estimates. A diagrammatic scale (0 to 100%) for the damaged roots was analyzed according to precision, accuracy, and reproducibility. Seven evaluators (four with experience and three without it) quantified the PPD severity, with or without the scale, considering 150 roots with different levels of PPD. Without and with the use of the scale, respectively, the inexperienced evaluators obtained coefficients of determination (R2) from 0.76 to 0.86 and 0.87 to 0.92, and the experienced evaluators obtained R2 from 0.90 to 0.96 and 0.96 to 0.97. The values of the intercept (a) obtained by both the experienced and inexperienced evaluators who did not use the scale were all significant, while after using the scale, only two evaluators got values that were not significantly different from one. Evaluation reproducibility between the evaluators ranged from 0.61 to 0.91 for the inexperienced ones and from 0.83 to 0.95 for the experienced ones. The proposed diagrammatic scale was considered appropriate to estimate the severity of PPD in cassava roots, and can be used to identify sources of tolerance to postharvest deterioration.

Prevalência da infecção tuberculosa em universitários da Universidade Estadual de Montes Claros, Minas Gerais

O objetivo deste estudo foi conhecer a taxa de infecção pelo bacilo da Tuberculose entre estudantes dos dois primeiros e dois últimos períodos dos cursos de Medicina e Enfermagem da Universidade Estadual de Montes Claros, além de verificar o conhecimento sobre a transmissão e prevenção da tuberculose ocupacional, bem como a utilização destas medidas preventivas. Realizou-se estudo transversal, em que todos os estudantes dos dois períodos iniciais e dois períodos finais do curso de Medicina e de Enfermagem foram submetidos a um questionário padrão e ao teste tuberculínico (PPD), para determinar a prevalência de infecção por tuberculose. Os resultados mostraram diferença de reação ao teste tuberculínico nos estudantes dos períodos iniciais e finais do curso médico, enquanto nos estudantes de Enfermagem não houve diferença entre os períodos. Ficou evidenciado o limitado conhecimento sobre a transmissão e prevenção da aquisição de tuberculose, o que aumenta os riscos de aquisição do bacilo.

Prevalência para tuberculose caprina no semi-árido paraibano

A tuberculose é uma enfermidade infecciosa, de distribuição mundial, provocada por micobactérias patogênicas, que afeta o homem e diversas espécies de mamíferos. Visando determinar a prevalência da Tuberculose Caprina e identificar fatores de risco associados à infecção foram tuberculinizados, através do Teste Tuberculínico Comparado (TCC), 1.866 caprinos de diferentes raças e idades, oriundas de 84 propriedades localizadas na microrregião de Monteiro, Estado da Paraíba, Brasil. A interpretação do TCC foi aferida pelo cálculo da diferença obtida entre as cutimetrias correspondentes às respectivas tuberculinas, antes e 72 horas após a inoculação: negativa, quando PPD bovina for menor que a aviária ou maior em até 1,8mm; suspeita ou inconclusiva, reação à PPD bovina maior que a aviária entre 1,9 e 2,4mm; positiva, reação à PPD bovina maior ou igual a aviária em 2,5mm. Das cabras submetidas ao TCC, 0,47% (9/1866), reagiram positivamente (IC 95% = 0,23-0,94%). A prevalência de propriedades positivas para a Tuberculose Caprina foi de 10,71% (IC 95% = 5,02-19,37%). Quando submetido à necropsia e exame histopatológico, um caprino positivo ao teste tuberculínico apresentou lesões compatíveis com tuberculose; também foi detectada a presença de Bacilos Álcool Ácidos Resistentes (BAAR) através da bacterioscopia direta; em relação ao tamanho do rebanho, as propriedades que possuíam um número maior de animais ( >25), apresentaram maior ocorrência da doença e a presença de infecção foi evidenciada nas propriedades que criavam bovinos em associação com caprinos e que não realizavam testes tuberculínicos nos bovinos.

Assessing the histopathology to depict the different stages of bovine tuberculosis infection in a naturally infected herd

The standard method for detection of bovine tuberculosis (TB) is the single intradermal tuberculin test (SITT). Nevertheless, current studies suggest that a single test is not enough to detect all cattle infected by TB, particularly when animals present different stages of infection. A dairy herd comprised of 270 cows was studied and 15 were reactive to SITT plus nine inconclusive animals. Blood samples (for IFN and ELISA) were collected from these 24 cows. At 30 days after injection of PPD, all the cows that were reactive to any of the employed tests were slaughtered, and tissues were processed by Bacteriology, Histopathology (HP) and PCR. According to HP 33.4% of the animals were positive, 45.8% inconclusive and 20.8% were negative. The inconclusive samples came from IFN positive animals, signalizing recent infection. Regarding the animals that were negative to HP, all of them were identified by IFN while ELISA was negative. Immune responses are different in recent and advanced infections, what supports the identification between chronically or recently infected animals. This multidisciplinary approach is mandatory for the interpretation of the various tools that are frequently employed for the diagnosis of TB and mainly to identify all infected animals.

Parameter estimation and use of gamma interferon assay for the diagnosis of bovine tuberculosis in Brazil

This study aimed to evaluate the interference of tuberculin test on the gamma-interferon (INFg) assay, to estimate the sensitivity and specificity of the INFg assay in Brazilian conditions, and to simulate multiple testing using the comparative tuberculin test and the INFg assay. Three hundred-fifty cattle from two TB-free and two TB-infected herds were submitted to the comparative tuberculin test and the INFg assay. The comparative tuberculin test was performed using avian and bovine PPD. The INFg assay was performed by the BovigamTM kit (CSL Veterinary, Australia), according to the manufacturer's specifications. Sensitivity and specificity of the INFg assay were assessed by a Bayesian latent class model. These diagnostic parameters were also estimate for multiple testing. The results of INFg assay on D0 and D3 after the comparative tuberculin test were compared by the McNemar's test and kappa statistics. Results of mean optical density from INFg assay on both days were similar. Sensitivity and specificity of the INFg assay showed results varying (95% confidence intervals) from 72 to 100% and 74 to 100% respectively. Sensitivity of parallel testing was over 97.5%, while specificity of serial testing was over 99.7%. The INFg assay proved to be a very useful diagnostic method.

Padronização do teste imunoalérgico aplicado ao diagnóstico da tuberculose e micobacterioses em suínos (Sus scrofa) experimentalmente sensibilizados com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados

Foi investigado o valor diagnóstico da resposta alérgica cutânea em leitões experimentalmente sensibilizados, pela via intramuscular, com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados pelo calor.Foram utilizados 91 animais, divididos em quatro grupos: grupos A e B, cada um com 25 indivíduos, grupos C e D com 21 e 20 indivíduos respectivamente, balanceando-se as características de raça, linhagem, faixa etária e sexo. Aos 30 dias de idade, todos os animais foram submetidos a uma triagem com a aplicação de tuberculina PPD bovina, pela via intradérmica na base da orelha e não houve qualquer tipo de reação. Decorridos 60 dias do teste tuberculínico de triagem, o grupo A recebeu injeção intramuscular de 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. avium estirpe D4; o grupo B recebeu 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. bovis estirpe AN5; o grupo C (controle I), recebeu 0,5 mL do adjuvante oleoso; e o grupo D (controle II), recebeu 0,5 mL de solução fisiológica. Após 30 dias da sensibilização foi realizada a prova de tuberculinização comparativa com reação medida pela variação da espessura da pele com cutímetro de mola às 0h, 24h, 48h e 72h, após a aplicação das tuberculinas. No teste comparativo, lido às 48 ou 72 horas, a reação foi considerada negativa quando a diferença das reações entre o PPD bovino e o PPD aviário foi menor que 6,7 mm; suspeito ou inconclusivo quando a diferença se situou na faixa de 6,7 a 7,5 mm; e positiva de acordo com o tipo de PPD, considerando-se tuberculose para PPD M. bovis e micobacteriose para PPD M. avium, quando a diferença da reação foi superior a 7,5 mm.

Teste intradérmico com proteínas recombinantes de Mycobacterium bovis como antígenos em Cavia porcellus

O teste intradérmico para o diagnóstico da tuberculose bovina utiliza derivados proteicos purificados (PPD) de Mycobacterium bovis que são capazes de induzir reações de hipersensibilidade em animais infectados. No entanto, apresenta baixa especificidade devido à ocorrência de reações cruzadas com outras micobactérias. Neste sentido, o objetivo desse trabalho foi produzir proteínas recombinantes (ESAT-6, PE13, PE5 e ESX-1) de Mycobacterium bovis e avaliá-las como antígenos em teste intradérmico utilizando Cavia porcellus como modelo, e verificar se as condições empregadas na purificação (nativa ou desnaturante) interferem no desempenho antigênico dessas proteínas. As proteínas foram testadas em Cavia porcellus previamente sensibilizados com cepa M. bovis AN5 inativada, individualmente (160 µg) ou combinadas na forma de um coquetel (40 µg cada). O coquetel de proteínas induziu reações de hipersensibilidade nos animais sensibilizados significativamente superiores (p=0,002) as observadas nos animais não sensibilizados, possibilitando diferenciação. No entanto, as proteínas isoladamente não foram capazes de promover essa diferenciação. As condições de solubilização e purificação influenciaram o desempenho antigênico da proteína ESAT-6, pois, quando produzida em condição desnaturante desencadeou reações inespecíficas nos animais não sensibilizados, enquanto que aquela produzida em condições nativas e aplicada em concentrações de 6, 12, 24 e 48µg induziu reações significativas apenas nos animais sensibilizados, confirmando o seu potencial como antígeno.

Variações fenotípicas e potencial plástico de Eugenia calycina Cambess. (Myrtaceae) em uma área de transição cerrado-vereda

Este estudo teve como objetivo verificar a ocorrência de variações fenotípicas e o potencial plástico de Eugenia calycina em uma área com gradiente de transição entre vereda e cerrado propriamente dito (ppd). As subpopulações foram caracterizadas quanto ao peso de sementes, número de sementes por fruto e número de flores por planta. Além disto, foram detectadas diferenças nas densidades de ocorrência e taxas de parasitismo por larvas de moscas (Diptera: Tephritidae) em cada área. Houve também assincronia temporal na floração, iniciada tardiamente nas áreas de cerrado ppd. Utilizando-se um modelo de genética quantitativa, a partir de um experimento de replicação recíproca de "sementes irmãs" em solos provenientes de cada área, avaliou-se o potencial para plasticidade em três caracteres: altura da parte aérea, número e comprimento de folhas das plântulas. Diferenças nestes caracteres foram geradas não somente por divergências genéticas entre plantas, mas também por plasticidade fenotípica. Os genótipos apresentaram diferentes respostas plásticas, diferindo em sua habilidade de responder às influências ambientais. Os dados obtidos confirmam o papel da plasticidade fenotípica como mecanismo gerador de variabilidade fenotípica e apontam sua importância nos processos adaptativos e evolutivos envolvidos na formação de ecótipos nas áreas de cerrado recortadas por veredas.

Regulation of T cell response to leishmania antigens by determinants of histocompatibility leukocyte class I and II molecules

It has been shown that HLA class I molecules play a significant role in the regulation of the proliferation of T cells activated by mitogens and antigens. We evaluated the ability of mAb to a framework determinant of HLA class I molecules to regulate T cell proliferation and interferon gamma (IFN-g) production against leishmania, PPD, C. albicans and tetanus toxoid antigens in patients with tegumentary leishmaniasis and healthy subjects. The anti-major histocompatibility complex (MHC) mAb (W6/32) suppressed lymphocyte proliferation by 90% in cultures stimulated with aCD3, but the suppression was variable in cultures stimulated with leishmania antigen. This suppression ranged from 30-67% and was observed only in 5 of 11 patients. IFN-g production against leishmania antigen was also suppressed by anti-HLA class I mAb. In 3 patients IFN-g levels were suppressed by more than 60%, while in the other 2 cultures IFN-g levels were 36 and 10% lower than controls. The suppression by HLA class I mAb to the proliferative response in leishmaniasis patients and in healthy controls varied with the antigens and the patients or donors tested. To determine whether the suppression is directed at antigen presenting cells (APCs) or at the responding T cells, experiments with antigen-primed non-adherent cells, separately incubated with W6/32, were performed. Suppression of proliferation was only observed when the W6/32 mAb was added in the presence of T cells. These data provide evidence that a mAb directed at HLA class I framework determinants can suppress proliferation and cytokine secretion in response to several antigens.