EFEITO DO TRATAMENTO TÉRMICO SOBRE A ATIVIDADE DE PEROXIDASE (POD) E POLIFENOLOXIDASE (PPO) EM MAÇÃ (Mallus comunis)

O extrato enzimático foi preparado a partir da polpa e casca da maçã de cultivares Fuji e Gala utilizando tampão fosfato de sódio 100mM, pH 5,0 como solução extratora. Dentre as análises determinou-se a concentração de proteína nos extratos enzimáticos concentrados de polpa e casca, sendo que o cultivar Fuji apresentou teores mais elevados em comparação ao cultivar Gala. Os tratamentos térmicos foram realizados nas temperaturas de 60, 65, 70 e 75°C por períodos que variaram de 1 a 10 minutos, sendo observado diminuição da atividade de POD e PPO com o aumento da temperatura e tempo; no entanto a POD não chegou a ser inativada em nenhum dos tratamentos realizados. A PPO foi inativada totalmente após 10 minutos de tratamento a 75°C. A eletroforese mostrou uma composição diferente de isoenzimas aniônicas e catiônicas da peroxidase.

Características da atividade da peroxidase de abacaxis (Ananas comosus (L.) Merrill) da cultivar IAC Gomo-de-mel e do clone IAC-1

No presente trabalho foram estudadas as características bioquímicas das peroxidases de novos abacaxis, cultivar IAC Gomo-demel e clone IAC-1. As peroxidases dos sucos destes abacaxis apresentaram atividade ótima entre 45ºC e 50°C e entre 50°C e 55°C, respectivamente. Estas peroxidases apresentaram atividade ótima em pH 4,5 e mostraram-se estáveis na faixa de pH 4,0 a 9,0, retendo, após 24 horas de incubação a 50ºC, mais de 80% da atividade inicial. Foi observada regeneração parcial da atividade da peroxidase, após tratamento a 75ºC por 10 minutos. As peroxidases dos sucos dos abacaxis estudados foram inativadas, após tratamento a 90ºC por 2 minutos.

Peroxidase (POD) e polifenoloxidase (PPO) em polpa de goiaba (Psidium guajava R.)

A peroxidase E.C. 1.11.1.7 (POD) e a polifenoloxidase E.C. 1.10.3.1 (PPO) foram extraídas da polpa de goiaba. Os extratos foram preparados utilizando-se a polpa da goiaba e solução tampão fosfato de sódio 100mM com pH variando de 6,0 a 7,0 em intervalos de 0,1. Foi determinada a atividade enzimática da peroxidase e da polifenoloxidase desses extratos, a fim de se observar o melhor pH para a extração de cada enzima. O pH 6,3 foi considerado o melhor para a extração da POD da polpa de goiaba, enquanto que para PPO, o pH foi 6,8. Os extratos brutos de POD e PPO foram submetidos a temperaturas de 60 °C, 65 °C, 70 °C, 75 °C e 80 °C por um período de 0 a 10 min. Os resultados demonstraram um decréscimo da atividade enzimática nos extratos com o aumento da temperatura e do tempo. No entanto, a total inativação não foi atingida o que sugere a presença de isoenzimas termoresistentes.

Obtenção de nova fonte de peroxidase de folha de Copaifera langsdorffii Desf. com alta atividade

Objetivou-se neste trabalho extrair peroxidase de folha de Copaifera langsdorffii (COP), medir sua atividade, compará-la com a peroxidase de raiz forte (Horseradish peroxidase - HRP) e determinar o pH ótimo, a melhor solução extratora e o efeito de aditivos sobre a atividade da COP. Os resultados mostraram que a COP atingiu 81,6% da atividade de HRP e a faixa de pH ótimo foi de 5,5 a 6,0. A melhor solução extratora da enzima foi o tampão fosfato de sódio 50 mM, pH 6,0 e o melhor aditivo foi o PVPP. Concluindo, a COP apresenta atividade mais alta que outras peroxidases de diferentes fontes citadas na literatura.

Extração e caracterização parcial de peroxidase de folhas de Copaifera langsdorffii Desf.

Em recentes publicações têm sido descritos vários processos para obtenção de peroxidases. O propósito deste trabalho foi extrair peroxidase de folhas de Copaifera langsdorffii e caracterizar parcialmente a enzima usando planejamento experimental e teste univariado, para confirmação dos resultados obtidos por planejamento experimental. A atividade da peroxidase foi medida usando sistema guaiacol: peróxido de hidrogênio. A peroxidase isolada apresentou 81,6% da atividade da horseradish peroxidase e é de fácil obtenção, a partir de folhas de uma árvore abundante em todo o país. A peroxidase semi-purificada (COP) foi obtida pela precipitação do extrato bruto com acetona 65% (v.v-1), produzindo o pó cetônico. A COP apresentou atividade ótima na faixa de pH 5,0 a 7,0 e temperatura de 5 a 45 °C, com atividade máxima em pH 6,0 e 35 °C. A enzima mostrou-se estável em temperaturas inferiores a 50 °C e pH entre 4,5 e 9,0, por até 24 horas. A peroxidase foi inativada após 4 horas a 80 °C e após 3 minutos a 96 °C. Esta enzima demonstra possibilidade para ser usada como reagente para diagnósticos, construção de biossensores e outros métodos analíticos em vários campos da ciência.

Atividades das enzimas peroxidase (POD) e polifenoloxidase (PPO) nas uvas das cultivares benitaka e rubi e em seus sucos e geléias

A peroxidase e a polifenoloxidase estão relacionadas com o escurecimento de frutas, por isso o controle das atividades destas enzimas é de grande importância para a tecnologia de alimentos. Neste trabalho estudaram-se as atividades dessas enzimas nas uvas frescas das cultivares Benitaka e Rubi, bem como as suas termoestabilidades e as suas atividades enzimáticas residuais no suco e nas geléias (extra e light). Foi também avaliada a qualidade microbiológica dos produtos elaborados. As atividades da enzima POD, tanto da fração solúvel quanto da ionicamente ligada, foram semelhantes nas uvas das duas variedades, Benitaka e Rubi. A atividade da enzima polifenoloxidase foi maior na variedade Rubi. As operações de cocção e pasteurização foram mais eficientes para baixar as atividades enzimáticas residuais da POD e PPO quando aplicadas às geléias de uva, em comparação com o suco. Embora não foram suficientes para a total inativação enzimática, essas operações reduziram-nas consideravelmente, e foram eficientes para garantir seguridade microbiológica dos produtos, geléias e suco.

Polyphenoloxidase and peroxidase in avocado pulp (Persea americana Mill.)

The aim of the present investigation was to evaluate the enzymatic activity of polyphenoloxidase and peroxidase in avocado pulps, from the Northwest area of Paraná-Brazil, in order to compare the varieties on their enzymatic activity for both, minimum and industrial processing. Enzymatic extracts were prepared from avocado pulp of Choquete, Fortuna and Quintal varieties, in green and ripe maturation stage. Thermal treatment was applied with temperatures 60, 65, 70, 75 and 80 °C. The enzymatic activities were determined by using spectrophotometer. A decline of polyphenoloxidase activity was observed in all of the varieties when both, temperature and time increased. Total inactivation of enzymes was not observed in the largest temperature. Fortuna and Choquete variety showed the lowest polyphenoloxidase activity in the ripe stage. Soluble peroxidase showed activity in the green stage, whereas, ionically bound peroxidase activity increased with the change from green to ripe maturation stage in Choquete variety.

Deoxynivalenol (DON) degradation and peroxidase enzyme activity in submerged fermentation

This work aims to evaluate deoxynivalenol degradation by Aspergillus oryzae and Rhizopus oryzae in a submerged fermentation system and to correlate it to the activity of oxydo-reductase enzymes. The submerged medium consisted of sterile distilled water contaminated with 50 μg of DON and 4 × 10(6) spore.mL-1 inoculum of Aspergillus oryzae and Rhizopus oryzae species, respectively in each experiment. Sampling was performed every 24 hours for monitoring the peroxidase specific activity, and every 48 hours for determining mycotoxin levels. Results showed that the fungi species were able to decrease DON levels as the peroxidase activity increased. The 48 hours fermentation interval presented the highest peroxidase specific activity (ΔABS/minute.μg.protein-1), 800 and 198, while the highest DON degradation velocity was 10.8 and 12.4 ppb/hour, respectively in both cases for Rhizopus oryzae and Aspergillus oryzae.

Investigation of glutathione peroxidase activity in chicken meat under different experimental conditions

Due to the fact that previous studies on the enzymatic activity of Glutathione peroxidase (GSH-Px) diverge widely in their methodology and results, this study aimed to investigate the influence of different analytical conditions on GSH-Px activity in chicken thighs from broilers that were fed different diets with different sources and concentrations of selenium. GSH-Px activity was evaluated six hours after slaughter and 120 days after frozen storage at -18 ºC. The different analytical conditions included time of pre-incubation (0, 10 and 30 minutes), reaction medium, types of substrate (H2O2 (0.72 mM, 7.2 mM, and 72 mM) and Terc-butil hydroperoxide 15 mM), and different buffer concentrations (buffer 1, potassium phosphate 50 mM pH 7.0 + EDTA 1 mM + mercaptoethanol 1 mM, and buffer 2, tris-HCl 50 mM pH 7.6 + EDTA 1 mM + mercapthanol 5 mM). The results show that the highest GSH-Px activity was observed when enzyme and substrate were in contact at 22 ºC without any pre-incubation, and that, when used at concentrations above 0.72 mM, hydrogen peroxide saturated the GSH-Px enzyme and inhibited its activity. The enzyme presented higher affinity to hydrogen peroxide when compared to terc-butil peroxide, and the addition of a buffer containing mercaptoethanol did not increase GSH-Px enzymatic activity. The activity of GSH-Px was not influenced by the source and concentration of selenium in the diet either. The obtained results allowed the determination of the best temperature of contact between the enzyme and substrate (22 ºC), the optimum concentration, and the type of substrate and buffer to be used. This information is extremely useful for future studies on GSH-Px activity in meat due to the divergence and little information found in the literature.

Thermal inactivation of polyphenoloxidase and peroxidase in Jubileu clingstone peach and yeast isolated from its spoiled puree

The thermal inactivation of yeast isolated from spoiled Jubileu peach puree and that of polyphenoloxidase (PPO) and peroxidase (POD) in cv. Jubileu, which is widely cultivated in southern Rio Grande do Sul state, Brazil, were studied. PPO and POD were extracted using the protein powder method and submitted to partial purification by precipitation followed by dialysis. The enzymatic activity was determined measuring the increase in absorbance at 420 nm for PPO and 470 nm for POD. The yeast used in this investigation was isolated from spoiled Jubileu peach puree at 22 °Brix, with total initial microbial count of 22 × 10² UFCmL- 1. Stock cultures were maintained on potato dextrose agar (PDA) slants at 4 °C and pH 5 for later use for microbial growth. In all cases, kinetic analysis of the results suggests that the thermal inactivation was well described by a first-order kinetic model, and the temperature dependence was significantly represented by the Arrhenius law. Both enzymes were affected by heat denaturation, and PPO was more thermostable. PPO was also more thermosTable than the yeast isolated from peach puree. The D60-values were 1.53 and 1.87 min for PPO and yeast isolated from spoiled Jubileu peach puree, respectively.

Peroxidase activity and sensory quality of ready to cook mixed vegetables for soup: combined effect of biopreservatives and refrigerated storage

Enzymatic senescence processes and browning of fresh cut vegetables negatively affect their sensory properties and nutritional value and finally result in the rejection of affected products by consumers. In order to prevent quality decay, the combined effects of natural antioxidants and storage temperature on peroxidase activity and sensory attributes (overall visual quality, browning and odor) of individual and mixed vegetables for soup (butternut squash, leek and celery) were evaluated. Fresh cut vegetables were treated with antioxidant solutions as tea tree essential oil (15 μl/mL), propolis extract (15 μl/mL) and gallic acid (2 mg/mL) and stored at optimal (5 °C) and abusive (15 °C) temperature for a maximum of 14 days. The application of natural preservatives, plus optimal storage conditions, exerted significant inhibitory effects in peroxidase activity of squash, celery and mixed vegetables throughout the storage. Furthermore, propolis treatment applied on mixed vegetables retarded browning appearance and preserved the visual quality for a longer period when compared to untreated product.