Hitchhiking Trypanosoma cruzi minicircle DNA affects gene expression in human host cells via LINE-1 retrotransposon

The horizontal transfer of Trypanosoma cruzi mitochondrial minicircle DNA to the genomes of naturally infected humans may play an important role in the pathogenesis of Chagas disease. Minicircle integrations within LINE-1 elements create the potential for foreign DNA mobility within the host genome via the machinery associated with this retrotransposon. Here we document integration of minicircle DNA fragments in clonal human macrophage cell lines and their mobilization over time. The movement of an integration event in a clonal transfected cell line was tracked at three months and three years post-infection. The minicircle sequence integrated into a LINE-1 retrotransposon; one such foreign fragment subsequently relocated to another genomic location in association with associated LINE-1 elements. The p15 locus was altered at three years as a direct effect of minicircle/LINE-1 acquisition, resulting in elimination of p15 mRNA. Here we show for the first time a molecular pathology stemming from mobilization of a kDNA/LINE-1 mutation. These genomic changes and detected transcript variations are consistent with our hypothesis that minicircle integration is a causal component of parasite-independent, autoimmune-driven lesions seen in the heart and other target tissues associated with Chagas disease.

Susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to first-line antimycobacterial agents in a Brazilian hospital: assessing the utility of the tetrazolium (MTT) microplate assay

We conducted a cross-sectional, hospital-based study between January 2006-March 2008 to estimate the resistance of Mycobacterium tuberculosis to first-line drugs in patients with tuberculosis at a Brazilian hospital. We evaluated the performance of the [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide] (MTT) microplate assay compared with the Bactec-MGIT 960™ system for mycobacteria testing. The prevalence of resistance in M. tuberculosis was 6.7%. Multidrug-resistance [resistance to rifampicin (RMP) and isoniazid (INH)], INH-resistance and streptomycin (SM)-resistance accounted for 1%, 3.8% and 3.8% of all resistance, respectively, and all isolates were susceptible to ethambutol (EM). The resistance was primary in four cases and acquired in three cases and previous treatment was associated with resistance (p = 0.0129). Among the 119 M. tuberculosis isolates, complete concordance of the results for INH and EM was observed between the MTT microplate and Bactec-MGIT 960TM methods. The observed agreement for RMP was 99% (sensitivity: 90%) and 95.8% for SM (sensitivity 90.9%), lower than those for other drugs. The MTT colourimetric method is an accurate, simple and low-cost alternative in settings with limited resources.

Establishment and characterisation of a new cell line derived from Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae)

Insect cell cultures are an important biotechnological tool for basic and applied studies. The objective of this work was to establish and characterise a new cell line from Culex quinquefasciatus embryonic tissues. Embryonated eggs were taken as a source of tissue to make explants that were seeded in L-15, Grace's, Grace's/L-15, MM/VP12, Schneider's and DMEM culture media with a pH range from 6.7-6.9 and incubated at 28ºC. The morphological, cytogenetic, biochemical and molecular characteristics of the cell cultures were examined by observing the cell shapes, obtaining the karyotypes, using a cellulose-acetate electrophoretic system and performing random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction analysis, respectively. The Grace's/L-15 medium provided the optimal nutritional conditions for cell adhesion and proliferation. Approximately 40-60 days following the explant procedure, a confluent monolayer was formed. Cellular morphology in the primary cultures and the subcultures was heterogeneous, but in the monolayer the epithelioid morphology type predominated. A karyotype with a diploid number of six chromosomes (2n = 6) was observed. Isoenzymatic and molecular patterns of the mosquito cell cultures matched those obtained from the immature and adult forms of the same species. Eighteen subcultures were generated. These cell cultures potentially constitute a useful tool for use in biomedical applications.

A population-based study of first and second-line drug-resistant tuberculosis in a high-burden area of the Mexico/United States border

The resistance of 139 Mycobacterium tuberculosis (MTB) isolates from the city of Monterrey, Northeast Mexico, to first and second-line anti-TB drugs was analysed. A total of 73 isolates were susceptible and 66 were resistant to anti-TB drugs. Monoresistance to streptomycin, isoniazid (INH) and ethambutol was observed in 29 cases. Resistance to INH was found in 52 cases and in 29 cases INH resistance was combined with resistance to two or three drugs. A total of 24 isolates were multidrug-resistant (MDR) resistant to at least INH and rifampicin and 11 MDR cases were resistant to five drugs. The proportion of MDR-TB among new TB cases in our target population was 0.72% (1/139 cases). The proportion of MDR-TB among previously treated cases was 25.18% (35/139 cases). The 13 polyresistant and 24 MDR isolates were assayed against the following seven second-line drugs: amikacin (AMK), kanamycin (KAN), capreomycin (CAP), clofazimine (CLF), ethionamide (ETH), ofloxacin (OFL) and cycloserine (CLS). Resistance to CLF, OFL or CLS was not observed. Resistance was detected to ETH (10.80%) and to AMK (2.70%), KAN (2.70%) and CAP (2.70%). One isolate of MDR with primary resistance was also resistant to three second-line drugs. Monterrey has a high prevalence of MDR-TB among previously treated cases and extensively drug-resistant-MTB strains may soon appear.

A human astrocytoma cell line is highly susceptible to infection with Trypanosoma cruzi

Astrocytes play a vital role in neuronal protection, homeostasis, vascular interchange and the local immune response. Some viruses and parasites can cross the blood-brain barrier and infect glia. Trypanosoma cruzi, the aetiological agent of Chagas disease, can seriously compromise the central nervous system, mainly in immune-suppressed individuals, but also during the acute phase of the infection. In this report, the infective capacity of T. cruzi in a human astrocyte tumour-derived cell line was studied. Astrocytes exposed to trypomastigotes (1:10 ratio) produced intracellular amastigotes and new trypomastigotes emerged by day 4 post-infection (p.i.). At day 6 p.i., 93% of the cells were infected. Using flow cytometry, changes were observed in both the expression of major histocompatibility complex class I and II molecules and the chemokine secretion pattern of astrocytes exposed to the parasite. Blocking the low-density lipoprotein receptor on astrocytes did not reduce parasite intracellular infection. Thus, T. cruzi can infect astrocytes and modulate the immune response during central nervous system infection.

Um estudo sobre os aspectos que contribuem para a adoção do canal on-line para compra de livros, CDs e DVDs

O objetivo neste estudo foi identificar os fatores relevantes na adoção do canal on-line para a realização de compras, tendo como principais referências os modelos Unified Theory of Acceptance and Use of Technology (UTAUT), de Venkatesh et al. (2003), de Heijden, Verhagen e Creemers (2003) e de Bramall, Schoefer e McKechnie (2004). Além da revisão da literatura dos assuntos pertinentes, foi realizada uma pesquisa de campo descritiva, de natureza quantitativa com uma amostra de 172 pessoas residentes na cidade de São Paulo, pertencentes às classes socioeconômicas A, B e C (critério Brasil), compradores de livros, CDs ou DVDs no canal off-line. Os dados coletados foram analisados com o uso de técnicas estatísticas nos contextos uni, bi e multivariado. Aplicou-se a técnica de modelagem de equações estruturais (MEE ou Structural Equation Modeling - SEM) para serem identificadas relações de dependência entre construtos e a contribuição de cada um deles na estimação das intenções de adoção da compra pela Internet. Entre os principais resultados encontrados, a atitude em relação ao uso da tecnologia, a confiança e a expectativa de desempenho figuraram como os aspectos mais relevantes para uma possível adoção do canal on-line.

Desenvolvimento de um curso on-line sobre o tema administração de medicamentos

O estudo descreveu o desenvolvimento de um curso on-line sobre o processo da administração de medicamentos - vias. Para tanto se utilizou o World Wide Web Course Tools (WebCT), que é um software que fornece várias ferramentas a supervisores e acesso a estudantes providos de uma senha a diversos ambientes. O material do curso foi subdivido em oito tópicos ilustrados: administração de medicamentos por via oral, sublingual, via parenteral, intradérmica, subcutânea, intramuscular, endovenosa e aplicação tópica e instilação, além das questões para avaliação de conhecimentos. Uma amostra de alunos de graduação da Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto - USP avaliou positivamente o curso. Pretende-se agora inseri-lo em disciplina curricular do ensino de graduação, como um recurso adicional à aprendizagem dos alunos.

Panorama brasileiro do ensino de Enfermagem On-line

O objetivo deste estudo foi identificar os cursos de Ensino Superior Nacional de EAD por área de concentração, região geográfica, nível de formação e os cursos de EAD no ensino superior de Enfermagem. O método adotado foi um estudo exploratório descritivo em que foi realizado um levantamento nos sites e portais governamentais e não-governamentais relacionados à educação nacional e EAD das Instituições de Ensino Superior (IES) que praticam EAD. Nos resultados foram identificados apenas dois cursos de pós-graduação lato sensu oferecidos especificamente em Enfermagem. Assim, há necessidade de maior investimento das IES de Enfermagem na criação e avaliação de cursos de EAD, bem como de infra-estrutura e de implementação de uma política de capacitação tecnológica.

Desenvolvimento do curso de gerenciamento em enfermagem on-line: experiência exitosa entre Brasil e Portugal

RESUMO Objetivo Descrever a experiência no planejamento e desenvolvimento de um Curso de Atualização On-Line em Gerenciamento em Enfermagem destinado a enfermeiros nos contextos Brasil e Portugal. Método O desenho instrucional do Curso fundamentou-se na Teoria da Aprendizagem Significativa, na Andragogia e na Metodologia Dialética, valorizando a interação entre os atores e privilegiando os cenários de prática e a aplicação dos conceitos abordados. Resultados O Curso está estruturado em nove unidades teóricas, quatro estudos de caso e prova dissertativa. Foi avaliado positivamente pelos participantes, os quais referiram oportunidades de aquisição de novos conhecimentos; interação e intercâmbio de experiência; motivação em estudar os temas e autoaprendizagem. Conclusão Espera-se que a experiência descrita estimule a proposição de novos cursos e programas na modalidade de Educação a Distância, incrementando os processos de ensino e de aprendizagem para subsidiar análises futuras do seu impacto no desenvolvimento e no aprimoramento de competências gerenciais em enfermagem.

Caste polymorphism of apterous line of the Neotropical termite Nasutitermes corniger (Motschulsky) (Isoptera, Termitidae)

Termite societies are structured by individuals that can be grouped into castes and instars. The development of these instars in most species occurs in irregular patterns and sometimes is distinguished subcastes in physical systems that originate polymorphic soldiers and workers. In this study, we characterized the morphological diversity of castes of apterous in Nasutitermes corniger. We collected four colonies of N. corniger, one every three months between May 2011 and February 2012. Individuals of the nest were separated into groups: larval stages, workers and presoldiers and soldiers. A morphometric analysis was performed on individuals from each group based on head width, metatibia, antenna, and thorax length. The data were submitted to discriminant analysis to confirm different morphological types inside these groups. The apterous line of N. corniger is composed of one first larval instar and two second larval instar. The workers caste has two lines of development with four instars in a larger line and three instars in a lower line. Two morphological types were identified in presoldiers and soldiers. The pattern of castes was similar to other species of the genus, in which bifurcation into two lines of workers, one smaller and one larger occurs after the first molt.

Dicionários disponíveis on-line para aprendizes de inglês: estruturação e recursos

O artigo descreve a estrutura e as formas de acesso características dos dicionários eletrônicos do tipo on-line disponíveis ao aprendiz de língua inglesa, comparando o conteúdo e os recursos de dois dicionários monolíngues e dois dicionários bilíngües - o Cambridge Advanced Learner's Dictionary (CALD, 2009), o Merriam-Webster Learner's Dictionary (MWLD, 2009), o Reverso Dictionary English/Portuguese (RDEP, 2008) e o Wiktionary Inglês/Português (WIP, 2009). Discute-se a funcionalidade desses instrumentos em relação às demandas do aprendiz.

FITOTOXICIDADE DE FUNGICIDAS, ACARICIDAS E INSETICIDAS, SOBRE O MAMOEIRO (Carica papaya L.) CULTIVAR SUNRISE SOLO IMPROVED LINE 72/12 EM CONDIÇÕES DE CAMPO

A presente pesquisa teve como objetivo estudar os efeitos fitotóxicos de fungicidas, acaricidas e inseticidas e algumas associações entre eles, em plantas de mamoeiros (Carica papaya L.) cv. Sunrise Solo Improved Line 72/12, em condições de campo, no município de São Mateus -- ES, pertencente à maior região produtora do Estado. O experimento foi arranjado em delineamento de blocos casualizados, com 4 repetições e 03 plantas úteis por parcela. Foram utilizados os seguintes produtos, com as respectivas doses, para cada 100 L de água: chlorothalonil (Daconil PM-200g); mancozeb (Dithane PM -- 200g); oxicloreto de cobre (Reconil -- 400g); thiabendazole (Tecto 450 -- 100ml); dicofol + tetradifon (Carbax -- 200ml); triazophós (Hostathion 400 BR -- 150ml); óxido de fenbutatina (Torque 500 SC -- 60ml); e abamectin (Vertimec 18 CE -- 50ml): Analisou-se a fitotoxicidade dos produtos testados, em relação à altura da planta, nº de folhas, número de flores e frutos ; diâmetro do caule e queimaduras ou injúrias foliares. As datas das avaliações foram: 01 dia antes das pulverizações, 15 dias e 30 dias após as mesmas. Os fungicidas Daconil BR, Reconil e Tecto 450; o fungicida acaricida Dithane PM; os acaricidas Carbax e Torque 500 SC; e o inseticida-acaricida Vertimec 18 CE, aplicados isoladamente, não afetaram o crescimento e a produção das plantas, nem causaram injúrias nas folhas das mesmas. A associação de fungicidas e fungicida-acaricida, com os acaricidas, ou inseticida-acaricida, não mostrou nenhum efeito fitotóxico sobre os parâmetros de crescimento avaliados, nem causaram queimaduras ou injúrias foliares.

Fitotoxicidade de fungicidas, acaricidas e inseticidas sobre o mamoeiro (Carica papaya L.) cultivar sunrise solo improved line 72/12

Estudaram-se os efeitos fitotóxicos de fungicidas, acaricidas e inseticidas e algumas associações entre eles, em plantas de mamoeiros (Carica papaya L.) cv. Sunrise Solo Improved Line 72/12, em condições de verão, no município de São Mateus - ES, localizado na região produtora do Estado. O experimento foi arranjado em delineamento de blocos casualizados, com 4 repetições e 03 plantas úteis por parcela experimental. Foram utilizados os seguintes produtos, com as respectivas doses, para cada 100 l de água: abamectin (Vertimec 18 CE - 50 ml); dicofol + tetradiphon (Carbax - 200 ml), fenbutatin oxide (Torque 500 SC - 60 ml); mancozeb (Dithane PM - 200g); oxicloreto de cobre (Reconil - 400g) e thiabendazole (Tecto 450 - 100ml). Analisou-se a fitotoxicidade dos produtos em relação à altura da planta, nº de folhas, número de flores e frutos ; diâmetro do caule e queimaduras ou injúrias foliares. As medições e contagens foram feitas um dia antes das pulverizações, 15 e 30 dias após. Constatou-se que o Vertimec 18 CE, associado ao Reconil ou ao Tecto 450, ocasionou leves injúrias foliares, detectadas aos 15 dias após as pulverizações, que se tornaram praticamente imperceptíveis, aos 30 dias após as pulverizações; e que Dithane PM, Reconil, Tecto 450, Carbax, Torque 500 SC, Dithane PM + Carbax, Dithane PM + Torque 500 SC, Dithane PM + Vertimec 18 CE, Reconil + Carbax, Reconil + Torque 500 SC, Tecto 450 + Carbax e, Tecto 450 + + Torque 500 SC não interferiram nos parâmetros de desenvolvimento e de produção estudados, bem como não causaram injúrias ou queimaduras nas folhas dos mamoeiros.

Automated flow-injection method for cadmium determination with pre-concentration and reagent preparation on-line

The spectrophotometric determination of Cd(II) using a flow injection system provided with a solid-phase reactor for cadmium preconcentration and on-line reagent preparation, is described. It is based on the formation of a dithizone-Cd complex in basic medium. The calibration curve is linear between 6 and 300 µg L-1 Cd(II), with a detection limit of 5.4 µg L-1, an RSD of 3.7% (10 replicates in duplicate) and a sample frequency of 11.4 h-1. The proposed method was satisfactorily applied to the determination of Cd(II) in surface, well and drinking waters.