Characterization and oxygen binding properties of des-Arg human hemoglobin

The role of chloride in the stabilization of the deoxy conformation of hemoglobin (Hb), the low oxygen affinity state, has been studied in order to identify the nature of this binding. Previous studies have shown that arginines 141α could be involved in the binding of this ion to the protein. Thus, des-Arg Hb, human hemoglobin modified by removal of the α-chain C-terminal residue Arg141α, is a possible model for studies of these interactions. The loss of Arg141α and all the salt bridges in which it participates is associated with subtle structural perturbations of the α-chains, which include an increase in the conformational flexibility and further shift to the oxy state, increasing oxygen affinity. Thus, this Hb has been the target of many studies of structural and functional behavior along with medical applications. In the present study, we describe the biochemical characterization of des-Arg Hb by electrophoresis, high-performance liquid chromatography and mass spectroscopy. The effects of chloride binding on the oxygen affinity and on the cooperativity to des-Arg Hb and to native human hemoglobin, HbA, were measured and compared. We confirm that des-Arg Hb presents high oxygen affinity and low cooperativity in the presence of bound chloride and show that the binding of chloride to des-Arg does not change its functional characteristics as observed with HbA. These results indicate that Arg141α may be involved in the chloride effect on Hb oxygenation. Moreover, they show that these residues contribute to lower Hb oxygen affinity to a level compatible with its biological function.

The novel p.E89K mutation in the SRY gene inhibits DNA binding and causes the 46,XY disorder of sex development

Male sex determination in humans is controlled by the SRY gene, which encodes a transcriptional regulator containing a conserved high mobility group box domain (HMG-box) required for DNA binding. Mutations in the SRY HMG-box affect protein function, causing sex reversal phenotypes. In the present study, we describe a 19-year-old female presenting 46,XY karyotype with hypogonadism and primary amenorrhea that led to the diagnosis of 46,XY complete gonadal dysgenesis. The novel p.E89K missense mutation in the SRY HMG-box was identified as a de novo mutation. Electrophoretic mobility shift assays showed that p.E89K almost completely abolished SRY DNA-binding activity, suggesting that it is the cause of SRY function impairment. In addition, we report the occurrence of the p.G95R mutation in a 46,XY female with complete gonadal dysgenesis. According to the three-dimensional structure of the human SRY HMG-box, the substitution of the conserved glutamic acid residue by the basic lysine at position 89 introduces an extra positive charge adjacent to and between the positively charged residues R86 and K92, important for stabilizing the HMG-box helix 2 with DNA. Thus, we propose that an electrostatic repulsion caused by the proximity of these positive charges could destabilize the tip of helix 2, abrogating DNA interaction.

Nutritional aspects of nile tilapia (Oreochromis niloticus) silage

One third of the world's fishing produce is not directly used for human consumption. Instead, it is used for making animal food or is wasted as residue. It would be ideal to use the raw material thoroughly and to recover by-products, preventing the generation of residues. With the objectives of increasing the income and the production of the industry, as well as minimizing environmental and health problems from fish residue, chemical silage from Tilapia (Oreochromis niloticus) processing residues was developed after homogenization and acidification of the biomass with 3% formic acid: propionic, 1:1, addition of antioxidant BHT and maintenance of pH at approximately 4.0. Analyses to determine the moisture, protein, lipids and ash were carried out. The amino acids were examined in an auto analyzer after acid hydrolysis, except for the tryptophan which was determined through colorimetry. The tilapia silage presented contents that were similar to or higher than the FAO standards for all essential amino acids, except for the tryptophan. The highest values found were for glutamic acid, lysine and leucine. The results indicate a potential use of the silage prepared from the Nile tilapia processing residue as a protein source in the manufacturing of fish food.

Caracterização da farinha de bagaço de jabuticaba e propriedades funcionais dos extrusados

Estudaram-se as características de farinha de bagaço de jabuticaba fermentado e algumas propriedades funcionais (índice de expansão e índice de solubilidade) dos extrusados elaborados a partir deste bagaço e arroz, em proporções que variaram de 11,59 a 25% (bagaço/arroz). A farinha de bagaço de jabuticaba fermentado foi avaliada quanto à distribuição do tamanho de partícula, cor, sabor e aroma, composição centesimal, minerais e fibras. Algumas das características desta farinha foram comparadas com as das farinhas de bagaço de jabuticaba doce (sem fermentar) e arroz polido. O extrusor utilizado para obtenção das farinhas pré-gelatinizadas constituiu-se em um único parafuso com taxa de compressão de 1:3, com rotação variável (65,90 a 234,10 rpm). Usou-se uma matriz circular de 3 mm e uma taxa de alimentação de 5 kg/h. As temperaturas da 1ª e 2ª zonas de aquecimento do extrusor foram mantidas fixas (50 e 100 °C, respectivamente) e a 3ª zona variou entre 99,54 e 200,46 °C. A Metodologia de Superfície de Resposta foi usada para avaliar a tendência das propriedades funcionais frente às variações de bagaço na formulação e dos parâmetros do processo (temperatura e rotação do parafuso). Os resultados mostraram que a farinha de bagaço de jabuticaba fermentado é uma boa fonte de fibras, de proteínas e de minerais, constituída de partículas finas com aroma característico do fruto e de sabor azedo-adstringente e ligeiramente salgado. A expansão dos extrusados aumentou com o aumento da rotação do parafuso e diminuiu com o aumento da adição de farinha de bagaço de jabuticaba, apresentando um comportamento quadrático com o aumento da temperatura. O índice de solubilidade aumentou com o aumento da rotação do parafuso e com a diminuição da temperatura. Maiores índices de expansão (3,26) e de solubilidade (17,55%) foram alcançados numa formulação contendo aproximadamente 10% de bagaço de jabuticaba fermentado a 240 rpm e temperaturas de 130 e 100 °C, respectivamente. A farinha de bagaço de jabuticaba fermentado misturada com farinha de arroz polido poderá ser usada como matéria-prima para a produção de farinhas pré-gelatinizadas, se as circunstâncias operacionais apropriadas forem aplicadas.

Análise: indicadores de pesquisa do XX Congresso Brasileiro de Ciência e Tecnologia de Alimentos

Em outubro de 2006, a Regional do Paraná sediou em Curitiba o XX Congresso Brasileiro de Ciência e Tecnologia de Alimentos (XX CBCTA) com o tema Alimentos e Agroindústrias Brasileiras no Contexto Internacional. O objetivo deste Congresso foi discutir o desenvolvimento científico e tecnológico e a inovação na indústria de alimentos no cenário nacional e internacional. O programa científico foi abrangente e diversificado, com Conferências, Palestras, Mesas-Redondas, Curso de Atualização, Clínicas Tecnológicas, Visitas Técnicas e Apresentações de Trabalhos Científicos em oito áreas definidas pelo Congresso. Como resultado da realização do XX CBCTA, esta análise visa uma apresentação e discussão dos indicadores da pesquisa da área de Ciência e Tecnologia de Alimentos do País e contribuição ao desenvolvimento científico e tecnológico da área, bem como subsídios para órgãos de fomento para decisão de investimentos na pesquisa e na formação de recursos humanos. No XX CBCTA, foi apresentado um total de 2066 trabalhos científicos de todo o Brasil, com exceção do Estado de Rondônia. Os trabalhos foram registrados no banco de dados e utilizados para esta análise. As inscrições foram escolhidas de acordo com a área da pesquisa de cada trabalho, sob responsabilidade de cada autor. As áreas definidas pela Comissão Científica do Congresso foram: Embalagem (EB); Método Analítico (MA); Microbiologia, Micotoxicologia e Biotecnologia (MB); Nutrição, Saúde e Alimentação (NA); Processo e Desenvolvimento de Produto (PD); Qualidade de Alimentos (QA); Química e Bioquímica (QB); e Resíduo Agroindustrial e Meio Ambiente (RM). Foi utilizado o Programa da Microsoft® Office Excel para a composição dos gráficos, versão Windows XP.

Antibiotic residues in Brazilian UHT milk: a screening study

The aim of this research was to carry out a screening study to check the incidence of antimicrobial residues in Brazilian UHT milk according to rapid yoghurt method. Of the 100 (100%) samples analysed, 96 (96%) showed no traces of antibiotic residues while 4 (4%) indicated probable presence of antibiotic residues. The results suggest that the Brazilian Sanitary Surveillance Agency should apply continuous monitoring programs in order to obtain a safe product offering no health risks to consumers.