Diagnóstico molecular da malária em uma unidade de atenção terciária na Amazônia Brasileira

O exame de rotina para o diagnóstico da malária continua sendo a gota espessa, apesar da comprovada diminuição da sensibilidade e especificidade em situações de densidade parasitária baixa e infecções mistas. A reação em cadeia da polimerase vem sendo cada vez mais utilizada para a detecção molecular e identificação das espécies de plasmódio, por apresentar maior sensibilidade e especificidade. Foi realizada a nested-PCR em amostras de sangue total de 344 pacientes com síndrome febril aguda que se apresentaram para o diagnóstico de malária, em uma unidade terciária de saúde, em Manaus (Amazonas). Nenhum caso de malária por Plasmodium malariae foi diagnosticado à gota espessa ou PCR. Observou-se co-positividade de 96,7%, co-negatividade de 62,2% e coeficiente kappa de 0,44 entre PCR e gota espessa para Plasmodium falciparum. Para Plasmodium vivax, co-positividade de 100%, co-negatividade de 78,1% e coeficiente kappa de 0,56. Na detecção da malária mista, co-positividade de 100%, co-negatividade de 84,9% e coeficiente kappa de 0,26. A reação em cadeia da polimerase detectou alto número de infecções mistas nas amostras analisadas, mas seu uso rotineiro no diagnóstico da malária merece ainda ampla discussão.

Aspectos epidemiológicos de malária autóctone na mata atlântica, litoral norte, Estado de São Paulo, 1985 - 2006

Com o objetivo analisar a distribuição espacial e temporal de casos de malária autóctone, segundo: densidade parasitária, sintomas e atividade por ocasião da infecção. Foi feito estudo descritivo retrospectivo de 1985 a 2006, nos municípios de Ubatuba, Caraguatatuba, São Sebastião e Ilhabela. Os dados foram obtidos na ficha de investigação epidemiológica da Superintendência de Controle de Endemias e Sistema de Informação de Notificação de Agravos à Saúde. Dos 83 casos, 77% eram do sexo masculino. São Sebastião e Caraguatatuba apresentaram maior número de casos. Os indivíduos mais acometidos encontraram-se em idade produtiva com Plasmodium vivax, e densidade parasitária de um parasita a cada dois ou mais campos microscópicos. Lazer foi a atividade mais exercida pelos pacientes por ocasião da infecção. Os principais sintomas foram febre, cefaléia, sudorese e mialgia. Foram registrados 4 indivíduos assintomáticos. Esses dados devem contribuir para a melhoria das ações de descentralização do controle da malária na região considerando-a na suspeita clínica e/ou epidemiológica, laboratório de referência e recursos humanos treinados para o diagnóstico e tratamentos adequados.

Malária autóctone notificada no Estado de São Paulo: aspectos clínicos e epidemiológicos de 1980 a 2007

INTRODUÇÃO: A malária autóctone no Estado de São Paulo caracteriza-se por surtos esporádicos na região oeste e transmissão persistente na região leste onde ocorrem casos oligossintomáticos com baixa parasitemia pelo Plasmodium vivax. Os objetivos deste estudo foram: analisar a completitude das fichas de notificação de malária autóctone; estimar a tendência da incidência de casos autóctones no ESP de 1980 a 2007; analisar o comportamento clínico e epidemiológico dos casos em duas regiões de autoctonia neste período. MÉTODOS: Foi realizado um estudo descritivo com 18 variáveis das FIN de malária do ESP, analisadas em duas regiões e em dois períodos (1980-1993 e 1994-2007). Fontes de dados: SUCEN/SES/SP, SINAN/CVE/SES/SP e DATASUS. RESULTADOS: A completitude foi superior a 85% em 11 variáveis. A tendência da incidência foi decrescente. Foram notificados 821 casos autóctones, 91,6% na região leste, predominando Plasmodium vivax. A infecção assintomática teve maior porcentagem no segundo período (p<0,001). CONCLUSÕES: A completitude das informações foi considerada satisfatória. As diferenças clínicas encontradas merecem atenção da vigilância epidemiológica que deve lidar com o desafio da infecção assintomática por Plasmodium.

Malária em mulheres de idade de 10 a 49 anos, segundo o SIVEP- Malária, Manaus, Amazonas, 2003-2006

INTRODUÇÃO: O Sistema de Informação de Vigilância Epidemiológica SIVEP-Malária é um sistema de informação onde são notificados os casos de malária diagnosticados no Brasil, desde 2003. Este estudo analisou os casos de malária notificados em mulheres de 10 a 49 anos de idade, segundo a presença ou ausência de gestação no período de 2003-2006. MÉTODOS: Foi solicitado à Fundação de Vigilância em Saúde, a autorização para avaliação dos dados. RESULTADOS: Foram analisados 13.308 casos notificados no período, sendo 815 (6,1%) registrados em gestantes. Houve diminuição gradativa do número absoluto de casos entre gestantes e não gestantes. Em relação à espécie, 14,3% dos casos notificados foram causadas pelo Plasmodium falciparum; 85% pelo Plasmodium vivax e 0,6% pela associação dos dois. A frequência da infecção por Plasmodium falciparum foi maior entre gestantes que não gestantes (p>0,05). Embora a maior parte dos casos residam na zona leste da cidade, a zona oeste apareceu como o local de provável infecção em 39% dos casos. Observou-se picos endêmicos de malária entre as não gestantes nos meses de julho e agosto dos quatro anos analisados. CONCLUSÕES: Os dados mostram que o SIVEP-Malária é importante ferramenta para o conhecimento da distribuição da malária que deve ser usado para controle da endemia. Entretanto, os dados dos primeiros anos de funcionamento tiveram sua qualidade comprometida por falhas no preenchimento, usando o campo de notificação gravidez como exemplo.

Concurrent dengue and malaria in the Amazon region

INTRODUCTION: The Amazon region has extensive forested areas and natural ecosystems, providing favorable conditions for the existence of innumerous arboviruses. Over 200 arboviruses have been isolated in Brazil and about 40 are associated with human disease. Four out of 40 are considered to be of public health importance in Brazil: Dengue viruses (1-4), Oropouche, Mayaro and Yellow Fever. Along with these viruses, about 98% of the malaria cases are restricted to the Legal Amazon region. METHODS: This study aimed to investigate the presence of arboviruses in 111 clinical serum samples from patients living in Novo Repartimento (Pará), Plácido de Castro (Acre), Porto Velho (Rondônia) and Oiapoque (Amapá). The viral RNA was extracted and RT-PCR was performed followed by a Multiplex-Nested-PCR, using Flavivirus, Alphavirus and Orthobunyavirus generic and species-specific primers. RESULTS: Dengue virus serotype 2 was detected in two patients living in Novo Repartimento (Pará) that also presented active Plasmodium vivax infection. CONCLUSIONS: Despite scant data, this situation is likely to occur more frequently than detected in the Amazon region. Finally, it is important to remember that both diseases have similar clinical findings, thus the diagnosis could be made concomitantly for dengue and malaria in patients living or returning from areas where both diseases are endemic or during dengue outbreaks.

Diagnóstico tardio de malária em área endêmica de dengue na extra-Amazônia Brasileira: experiência recente de uma unidade sentinela no estado do Rio de Janeiro

INTRODUÇÃO: A letalidade da malária na região extra-amazônica é cerca de 80 vezes maior do que na Amazônia, que concentra 99,8% dos casos do país. Em áreas de transmissão de dengue, como o Rio de Janeiro, o atraso no diagnóstico e tratamento da malária dos pacientes com febre, provenientes de áreas endêmicas de malária, pode ser, entre outros fatores, devido à confusão entre o diagnóstico das duas doenças pelos generalistas da rede de assistência médica. Neste trabalho, apresentamos as consequências do atraso diagnóstico em três pacientes com malária por Plasmodium falciparum; P. malariae e P. vivax, que, após o périplo habitual para tratamento de dengue, procuraram a nossa instituição onde foram corretamente diagnosticados e submetidos aos tratamentos adequados. MÉTODOS: Descrição de três casos de malária diagnosticada tardiamente e encaminhados ao IPEC/ FIOCRUZ, entre os anos de 2007 e 2008. RESULTADOS: uma brasileira proveniente de Moçambique, primo-infectada por P. falciparum, com malária diagnosticada após 6 dias do início da febre, morreu com malária cerebral e choque. Outro paciente com malária por P. malariae teve um curso grave e prolongado, mas ficou curado após o tratamento específico. A terceira paciente diagnosticada tardiamente apresentou malária por P. vivax adquirida na região de Mata Atlântica no Estado do Rio. CONCLUSÕES: Os profissionais de saúde do Rio devem ser treinados para aperfeiçoar a vigilância e o tratamento oportuno da malária e evitar desfechos mórbidos e fatais. Sugere-se que uma investigação de focos de malária autóctone em áreas de mata no estado seja realizada.

Retardo no crescimento intrauterino, baixo peso ao nascer e prematuridade em recém-nascidos de grávidas com malária, na Colômbia

INTRODUÇÃO: É frequente a associação da malária com complicações como prematuridade, retardo no crescimento intrauterino, baixo peso ao nascer e mortalidade infantil, efeitos pouco estudados em áreas hipoendêmicas para malaria. O objetivo deste estudo foi analisar a relação da malária gestacional com estes efeitos em recém-nascidosnuma região endêmica para malária na Colômbia, entre 1993 e 2007. MÉTODOS: Foram estudadas as características em 1.716 recém-nascidos num estudo de coorte. Fez-se seguimento em 394 gestantes com malária (27% por Plasmodium falciparum e 73% por P. vivax) e 1.322 sem malária. RESULTADOS: Foi encontrada uma relação entre a exposição à malária na gestação e o risco maior de baixo peso ao nascer (RR = 1,37; 1,03-1,83), assim como estatura baixa (RR = 1,52; 1,25-1,85), retardo no crescimento intrauterino (RR = 1,29; 1,0-1,66) e prematuridade (RR = 1,68; 1,3-2,17). A frequência de nascimentos prematuros foi maior nas mães com malária por P. falciparum (77%) que aquelas com P. vivax (RR = 1,77; IC 95%: 1,2-2,6). CONCLUSÕES: O baixo peso ao nascer e o retardo no crescimento foi associado com malária na gestação na Colômbia. A infecção por P. vivax foi relacionada com efeitos adversos sobre o recém-nascido, de modo semelhante em relação ao P. falciparum.

Basic sanitation, socioeconomic conditions, and degree of risk for the presence and maintenance of malaria in a low-transmission area in the Brazilian Amazon

ABSTRACTINTRODUCTION:This study aimed to evaluate basic sanitation and socioeconomic indicators, reported cases of malaria, and risk of contracting malaria in the Ananindeua municipality, State of Pará.METHODS:Data on basic sanitation and socioeconomic dimensions were taken from the Brazilian Institute of Geography and Statistics [ Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE)] 2010 census. Epidemiological malaria information was taken from the Epidemiological Malaria Surveillance Information System [ Sistema de Informação de Vigilância Epidemiológica de Malária (SIVEP/Malaria)], between 2003 and 2013 of the Ministry of Health and from the SIVEP/Malaria forms of the municipality's Endemic Diseases Unit for 2,013 cases.RESULTS:Our data do not confirm the correlation among indicators of basic sanitation, socioeconomic conditions, and water supply with malaria cases. Of the 1,557 cases evaluated, most were caused by Plasmodium vivax , with rare cases of Plasmodium falciparum and mixed infections. There were 756 notifications in 2003. The number of reported cases was sharply reduced between 2006 and 2012, but a 142-case outbreak occurred in 2013. Ananindeua municipality's Annual Parasite Index indicated low risk in 2003 and no risk in other years, and the 2,013 cases were predominantly male individuals aged ≥40 years.CONCLUSIONS:Our data confirm the non-endemicity of malaria in the Ananindeua municipality, as the Annual Parasite Indices described for the years 2004-2013 classify it as a risk-free area. However, the 2013 outbreak indicates the need to strengthen prevention, surveillance, and control activities to reduce the risk of new outbreaks and consequent economic and social impacts on the population.

Pesquisa de campo sobre malária humana, numa área endêmica na amazônia brasileira

Realizou-se um estudo epidemiológico sobre malária na população humana residente no município de Ariquemes, Estado de Rondônia. Um formulário composto de questões dirigidas no setndo de obter dos colonizadores o grau de conhecimento sobre os fatores condicionados à malária, principalmente sobre o aspecto migracional e conhecimentos sobre a transmissão e terapêutica da enfermidade. O questionário foi aplicado em 936 chefes de famílias perfazendo um total de 4.633 indivíduos, representando 8% da população fixa do município de Ariquemes. De cada indivíduo foi coletada uma amostra de sangue e examinada para plasmódios. O estudo foi dividido e aplicado nas duas áreas, rural e urbana, do município, para fins de comparação. Dos 2.310 indivíduos estudados na área urbana, 68 eram portadores de infecção malárica, 69% com P. falciparum e 31% com P. vivax. Nos 2.323 residentes na área rural, detectou-se 151 casos de infecção, sendo 53% para P. falciparum e 47% para P. vivax. O sexo masculino foi o mais acometido e a faixa etárua de maior prevalência no setor urbano foi de 15 à 29 anos e no rural foi de 6 à 14 anos. Todos esses pacientes foram tratados radicalmente utilizando-se o esquema terapêutico da SUCAM orientado pela Organização Mundial da Saúde. Observou-se a ocorrência de exportação de casos de malária da área rural para urbana nas migrações internas. Mais de 50% da população desconhece o papel do mosquito na transmissão da malária e a grande maioria dos colonizadores são analfabetos ou alfabetizados até o 1o grau. A quase totalidade da população é oriunda dos estados do sul, principalmente do Estado do Paraná. Os esquemas assistenciais de saúde a essa população é bastante precário, talvez devido ao grande afluxo migracional na região.

Estudos sôbre índice de siclemia

O índice de sinclêmicos encontrado foi de 10%, examinando-se uma amostra heterógenea de 1130 indivíduos de grupo étnico negróide e mestiços desta etnia. Foi negativa a pesquisa em 120 indivíduos caucasóides e 30 mongolóides. O "índice familiar de siclêmicos" - a percentagem desses indivíduos em um grupo de famílias - fornece um resultado mais proximo do verdadeiro número de siclêmicos em uma amostra de população. O método clássico fornece um número inferior ao existente na amostra estudada. A aplicação do teste de siclemia em Jurisprudência, Antropologia e Etnografia, poderá contribuir, na qualidade de método auxiliar, no estudo de vários problemas. São indicados como métodos de escolha: o de Emmel e o de maceração de tecidos conservados em solução de formol ou alcool. Êste último permite estudos retrospectivos. A estase circulatória parece não ser fator suficiente para a passagem da condição de siclêmico para anemico. O parasitismo da hemátia pelo Plasmodium vivax não impede o fenômeno da siclisação. Infecção por plasmodídeos (P. falciparum e P. vivax) não é fator suficiente para desencadear a doença. A importância da descoberta de Emmel (descoberta do fenômeno da siclisação) reside no conhecimento em doença heredofamiliar de fato novo de máxima significação: a possibilidade de identificar os indivíduos ainda na fase de latência, ou seja, no período que medeia entre o nascimento e a instalação dos primeiros sintomas da doença. A relação entre casos de anemia falciforme ocorridos em gerações por vêzes muito afastadas (fenômeno denominado "skipping" - salto - pelos autores de lingua inglêsa) é mantida através dos siclêmicos. Êsses indivíduos podem ser comparados aos portadores de germe no sentido empregado na profilaxia das doenças infectuosas. Exames periódicos dos siclêmicos poderiam contribuir para esclarecimento da patogenia e forneceriam dados úteis para a profilaxia da doença. Seriam de grande alcance medidas idênticas em outras doenças hereditárias...

Effects of immigration on the prevalence of malaria in rural areas of the Amazon basin of Brazil

Epidemiological studies were conducted on malaria in three rural areas of the Amazon basin in the State of Rondônia: the town of Costa Marques, Forte Príncipe da Beira (Fort), and an immigrant settlement in the nearby forest. These studies were instituted to document the malaria problem and to describe the role of immigration on its distribution and prevalence. Hospital records in the town show that the number of malaria cases increased five fold from 1983 to 1987 and that the predominant malaria parasite changel from Plasmodium vivax to P. falciparum. Increased malaria followed increased immigration and colonization of the forest. A series of epidemiologic studies suggested the linkage between malaria and immigration as the prevalence of malaria was 1-2% at the Fort, a stable community, 8-9% at Costa Marques, a growing community, and 14-26% in the new settlements in the forest.

Fecundity, parity, and adult feeding relationships among Nyssorhynchus malaria vectors from Venezuela

Relative to their pre-engorgement weights, nulliparous Anopheles nuneztovari consumed significantly smaller blood meals than A. marajoara, A. triannulatus or A. aquasalis. When females were deprived of sugar before blood feeding, only one-quarter of A. nuneztovari, but more than two-thirds of A. marajoara, A. triannulatus and A. aquasalis matured eggs. Sugar feeding before blood, or two sucessive blood meals by sugar-deprived females, increased the proportion of nulliparous a. nuneztovari which developed eggs, but not significantly so. Nearly all individuals of nulliparous, sugar-fed A. marajoara, A. triannulatus and A. aquasalis matured eggs after one blood feeding. Among A. nuneztovari, A. marajoara and A. aquasalis that matured some eggs in the laboratory, there were no positive correlations between the number of eggs developed and relative vlood mealsize. However, blood meals larger than the mean size significantly increased the chance that A. nuneztovari would develop some eggs. Mean fecundities of gravid A. nuneztovari and A. marajoara reared in the laboratory were significantly lower than those of the same species captured at human bait in nature. Post-engorgement access to sugar by A. nuneztovari (captured at human bait) did not influence fecundity, but significantly enhanced survivorship and the proporticon of individuals which retained eggs. Release-recapture experiments revealed that relatively small blood meals are typical of A. nuneztovari only during the first gonotrophic cycle. We suggest that multiple blood feeding, seemingly necessary for most A. nuneztovari to develop a first clutch of eggs, may increase the probability of infection with Plasmodium vivax where this mosquito species is a primary vector.

Malaria seroepidemiology: comparison between indirect fluorescent antibody test and enzyme immunoassay using bloodspot eluates

Blood sampling on filter paper is a current practice seroepidemiological studies by indirect fluorescent antibody test (IFAT). There is, however, scant comparative information about the use of bloodspot eluates for detection of malarial IgG antibodies simultaneously by IFAT and enzyme immunoassay (ELISA). Here we report data obtained by both serological methods done on 219 bloodspot eluate samples collected in a rural community in Brazilian Amazon Basin (Alto Paraíso, Ariquemes municipality) where malaria is endemic. Plasmodium falciparum and P. vivax thick smear antigens were used in the IFAT; a detergent-soluble P. falciparum antigen was prepared for ELISA. Substantial agreement of results (Kappa coefficient k = 0.686) was observed when P. falciparum antigen was used in both tests, and IFAT titers were found to be strongly correlated ELISA antibody units (Spearman correlation coeficient rs = 0.818, p < 0.0001). Only moderate agreement (k = 0.467) between IFAT with P. vivax antigen and ELISA with P. falciparum antigen was observed. Spearman correlation coefficient value between quantitative results (IFAT titers and ELISA antibody units) in this case was numerically lowe (rs = 0.540, p < 0.0001). Our results suggest that, with P. falciparum antigen, both IFAT and ELISA performed on bloodspot eluates are equivalent for seropidemiological purposes.

Development of an immunoenzymatic assay using a monoclonal antibody against a 50-kDa catabolite from the P126 Plasmodium falciparum protein to the diagnosis of malaria infection

The WHO criterion of defering any donation of blood by a confirmed case of malaria for three years after cessation of therapy can not be applied in areas where malaria in endemic. For this reason we developed an immunoenzymatic assay for the detection of plasmodial antigens for blood screening in malararial endemic areas. So, we tested sera from 191 individuals. Among patients with active disease 100% of the cases of Plasmodium falciparum or mixed infections and 91.7% of those with P. vivax were positive for the presence of plasmodial antigens. The lower parasitaemia detected was 0.0003% for P. vivax malária. When the frequency of positive circulating malarial antigens was evaluated among asymptomatic and symptomatic individuals with negative TBS, positive results were found in respectively 38.7% and 17.7% of the individuals studied in the 30 days after confirmed malaria attack. Data provide by these assays have shown that ELISA seemed to be more sensitive than parasitological examination for malaria diagnosis. This test by virtue of its high sensivity and the facilities in processing a large number of specimens, can prove to be useful in endemic areas for the recognition of asymptomatic malaria and screening of blood donors.

Cytokines and dysregulation of the immune response in human malaria

The dysregulation of the immune response by malaria parasite has been considered as a possible constraint to the effectiveness of malaria vaccination. In spite of the important role interleukin-I (IL-1) in malaria are lacking. We found that only 2 out of 35 subjectswith acute malaria showed increased levels of serum IL-1 alpha by enzyme immunoassay. To assess whether IL-1 could interfere with T- lymphocyte responses, blood mononuclear cells from patients infected with Plasmodium falciparum, P. vivax, or healthy subjects were cultured with phytohemagglutinin, and lymphocyte proliferation measured 72h later by 3H-thymidine incorporation. Our data showed that T-lymphocyte responses are depressed both in P. falciparum (10,500 ñ 2,900) and P. vivax malaria (13,000 ñ 3,300), as compared to that of healthy individuals (27,000 ñ 3,000). Addition of IL-1 partially reserved depression of malaria lymphocytes, but had no effect on normal cells. On the other hand, T-lymphocytes from malaria infected-subjects presented a minimal decrease in proliferation, when cultured in the presence of exogenous PGE2. These data indicate the occurrence of two defects of immunoregulation in malaria: a deficiency of IL-1 production by monocytes/macrophages, and an increased resistance of lymphocytes to the antiproliferative effect of PGE2.