Genetic divergence between two sympatric species of the Lutzomyia longipalpis complex in the paralytic gene, a locus associated with insecticide resistance and lovesong production

The sandfly Lutzomyia longipalpis s.l. is the main vector of American Visceral Leishmaniasis. L. longipalpis s.l. is a species complex but until recently the existence of cryptic sibling species among Brazilian populations was a controversial issue. A fragment of paralytic (para), a voltage dependent sodium channel gene associated with insecticide resistance and courtship song production in Drosophila, was isolated and used as a molecular marker to study the divergence between two sympatric siblings of the L. longipalpis complex from Sobral, Brazil. The results revealed para as the first single locus DNA marker presenting fixed differences between the two species in this locality. In addition, two low frequency amino-acid changes in an otherwise very conserved region of the channel were observed, raising the possibility that it might be associated with incipient resistance in this vector. To the best of our knowledge, the present study represents the first population genetics analysis of insecticide resistance genes in this important leishmaniasis vector.

Tissue and serum immune response in chronic hepatitis C with mild histological lesions

The immunopathogenesis of chronic hepatitis C virus (HCV) infection is a matter of great controversy and has been suggested to involve a complex balance between cytokines with pro and anti-inflammatory activity. We investigated the expression of inflammatory cells and cytokines in the liver and serum of 51 chronically HCV infected patients and compared them to data from two sets of normal controls: 51 healthy blood donors and 33 liver biopsies of healthy liver donors. We also assessed the relationship between selected cytokines and cell populations in hepatic compartments and the disease stage. Compared with controls, hepatitis C patients had a greater expression of portal TNF-α, TGF-β and CD4+ and acinar IFN-γ, TNF-α, IL-1β and IL-4, as well as a higher serum concentration of IL-2, IL-10 and TGF-β. Significant positive correlations were found between portal CD4+ and TNF-α, portal CD8+ and TGF-β, portal CD45+RO and TNF-α, acinar CD45+RO and IFN-γ and acinar CD57+ and TGF-β. In conclusion, we have shown that (i) in this sample of predominantly mild disease, the immune response was associated with a pro-inflammatory response pattern, (ii) CD4+ T-lymphocytes played a major role in orchestrating the immune response and (iii) these events primarily took place in the portal space.

Sequencing of E2 and NS5A regions of HCV genotype 3a in Brazilian patients with chronic hepatitis

Hepatitis C virus (HCV) is a major cause of liver disease throughout the world. The NS5A and E2 proteins of HCV genotype 1 were reported to inhibit the double-stranded (ds) RNA-dependent protein kinase (PKR), which is involved in the cellular antiviral response induced by interferon (IFN). The response to IFN therapy is quite different between genotypes, with response rates among patients infected with types 2 and 3 that are two-three-fold higher than in patients infected with type 1. Interestingly, a significant percentage of HCV genotype 3-infected patients do not respond to treatment at all. The aim of this paper was to analyse the sequences of fragments of the E2 and NS5A regions from 33 outpatients infected with genotype 3a, including patients that have responded (SVR) or not responded (NR) to treatment. HCV RNA was extracted and amplified with specific primers for the NS5A and E2 regions and the PCR products were then sequenced. The sequences obtained covered amino acids (aa) 636-708 in E2 and in NS5A [including the IFN sensitivity determining region (ISDR), PKR-binding domain and extended V3 region)]. In the E2 and NS5A regions, we did observe aa changes among patients, but these changes were not statistically significant between the SVR and NR groups. In conclusion, our results suggest that the ISDR domain is not predictive of treatment success in patients infected with HCV genotype 3a.

Inhibition of rotavirus ECwt infection in ICR suckling mice by N-acetylcysteine, peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonists and cyclooxygenase-2 inhibitors

Live attenuated vaccines have recently been introduced for preventing rotavirus disease in children. However, alternative strategies for prevention and treatment of rotavirus infection are needed mainly in developing countries where low vaccine coverage occurs. In the present work, N-acetylcysteine (NAC), ascorbic acid (AA), some nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) agonists were tested for their ability to interfere with rotavirus ECwt infectivity as detected by the percentage of viral antigen-positive cells of small intestinal villi isolated from ECwt-infected ICR mice. Administration of 6 mg NAC/kg every 8 h for three days following the first diarrhoeal episode reduced viral infectivity by about 90%. Administration of AA, ibuprofen, diclofenac, pioglitazone or rosiglitazone decreased viral infectivity by about 55%, 90%, 35%, 32% and 25%, respectively. ECwt infection of mice increased expression of cyclooxygenase-2, ERp57, Hsc70, NF-κB, Hsp70, protein disulphide isomerase (PDI) and PPARγ in intestinal villus cells. NAC treatment of ECwt-infected mice reduced Hsc70 and PDI expression to levels similar to those observed in villi from uninfected control mice. The present results suggest that the drugs tested in the present work could be assayed in preventing or treating rotaviral diarrhoea in children and young animals.

Slow clearance of Plasmodium vivax with chloroquine amongst children younger than six months of age in the Brazilian Amazon

Plasmodium vivax is the most widespread parasite causing malaria, being especially prevalent in the Americas and Southeast Asia. Children are one of the most affected populations, especially in highly endemic areas. However, there are few studies evaluating the therapeutic response of infants with vivax malaria. This study retrospectively evaluated the parasitaemia clearance in children diagnosed with vivax malaria during the first five days of exclusive treatment with chloroquine (CQ). Infants aged less than six months old had a significantly slower parasitaemia clearance time compared to the group of infants and children between six months and 12 years old (Kaplan-Meier survival analysis; Wilcoxon test; p = 0.004). The impaired clearance of parasitaemia in younger children with vivax malaria is shown for the first time in Latin America. It is speculated that CQ pharmacokinetics in young children with vivax malaria is distinct, but this specific population may also allow the detection of CQ-resistant parasites during follow-up, due to the lack of previous immunity.

Influence of age on the haemoglobin concentration of malaria-infected patients in a reference centre in the Brazilian Amazon

Anaemia is amongst the major complications of malaria, a major public health problem in the Amazon Region in Latin America. We examined the haemoglobin (Hb) concentrations of malaria-infected patients and compared it to that of malaria-negative febrile patients and afebrile controls. The haematological parameters of febrile patients who had a thick-blood-smear performed at an infectious diseases reference centre of the Brazilian Amazon between December 2009-January 2012 were retrieved together with clinical data. An afebrile community control group was composed from a survey performed in a malaria-endemic area. Hb concentrations and anaemia prevalence were analysed according to clinical-epidemiological status and demographic characteristics. In total, 7,831 observations were included. Patients with Plasmodium falciparum infection had lower mean Hb concentrations (10.5 g/dL) followed by P. vivax-infected individuals (12.4 g/dL), community controls (12.8 g/dL) and malaria-negative febrile patients (13.1 g/dL) (p < 0.001). Age, gender and clinical-epidemiological status were strong independent predictors for both outcomes. Amongst malaria-infected individuals, women in the reproductive age had considerably lower Hb concentrations. In this moderate transmission intensity setting, both vivax and falciparum malaria are associated with reduced Hb concentrations and risk of anaemia throughout a wide age range.

Anopheles gambiae eicosanoids modulate Plasmodium berghei survival from oocyst to salivary gland invasion

Eicosanoids affect the immunity of several pathogen/insect models, but their role on the Anopheles gambiae response to Plasmodium is still unknown. Plasmodium berghei-infected mosquitoes were injected with an eicosanoid biosynthesis inhibitor, indomethacin (IN), or a substrate, arachidonic acid (AA), at day 7 or day 12 post-infection (p.i.). Salivary gland invasion was evaluated by sporozoite counts at day 21 p.i. IN promoted infection upon sporozoite release from oocysts, but inhibited infection when sporozoites were still maturing within the oocysts, as observed by a reduction in the number of sporozoites reaching the salivary glands. AA treatment had the opposite effect. We show for the first time that An. gambiae can modulate parasite survival through eicosanoids by exerting an antagonistic or agonistic effect on the parasite, depending on its stage of development.

Prevalence of human papillomavirus infection, distribution of viral types and risk factors in cervical samples from human immunodeficiency virus-positive women attending three human immunodeficiency virus-acquired immune deficiency syndrome reference centres in northeastern Brazil

Human immunodeficiency virus (HIV)-positive patients have a greater prevalence of coinfection with human papillomavirus (HPV) is of high oncogenic risk. Indeed, the presence of the virus favours intraepithelial squamous cell lesion progression and may induce cancer. The aim of this study was to evaluate the prevalence of HPV infection, distribution of HPV types and risk factors among HIV-positive patients. Cervical samples from 450 HIV-positive patients were analysed with regard to oncotic cytology, colposcopy and HPV presence and type by means of polymerase chain reaction and sequencing. The results were analysed by comparing demographic data and data relating to HPV and HIV infection. The prevalence of HPV was 47.5%. Among the HPV-positive samples, 59% included viral types of high oncogenic risk. Multivariate analysis showed an association between HPV infection and the presence of cytological alterations (p = 0.003), age greater than or equal to 35 years (p = 0.002), number of partners greater than three (p = 0.002), CD4+ lymphocyte count < 200/mm3 (p = 0.041) and alcohol abuse (p = 0.004). Although high-risk HPV was present in the majority of the lesions studied, the low frequency of HPV 16 (3.3%), low occurrence of cervical lesions and preserved immunological state in most of the HIV-positive patients were factors that may explain the low occurrence of precancerous cervical lesions in this population.

CCR2 and CCR5 genes polymorphisms in women with cervical lesions from Pernambuco, Northeast Region of Brazil: a case-control study

Polymorphisms in chemokine receptors play an important role in the progression of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) to cervical cancer (CC). Our study examined the association of CCR2-64I (rs1799864) andCCR5-Δ32 (rs333) polymorphisms with susceptibility to develop cervical lesion (CIN and CC) in a Brazilian population. The genotyping of 139 women with cervical lesions and 151 women without cervical lesions for the CCR2-64I and CCR5-Δ32 polymorphisms were performed using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. The individuals carrying heterozygous or homozygous genotypes (GA+AA) for CCR2-64I polymorphisms seem to be at lower risk for cervical lesion [odds ratio (OR) = 0.37, p = 0.0008)]. The same was observed for the A allele (OR = 0.39, p = 0.0002), while no association was detected (p > 0.05) with CCR5-Δ32 polymorphism. Regarding the human papillomavirus (HPV) type, patients carrying the CCR2-64Ipolymorphism were protected against infection by HPV type 16 (OR = 0.35, p = 0.0184). In summary, our study showed a protective effect ofCCR2-64I rs1799864 polymorphism against the development of cervical lesions (CIN and CC) and in the susceptibility of HPV 16 infection.

O processo de socialização dos enfermeiros em um Centro de Tratamento Intensivo

O objetivo deste trabalho foi compreender o processo de socialização dos enfermeiros integrantes da subcultura de um Centro de Tratamento Intensivo (CTI). Acreditando que o CTI é uma subcultura do hospital e que os enfermeiros intensivistas compartilham de símbolos e significados que foram desenvolvidos através das interações sociais no contexto da Terapia Intensiva, fui buscar no interacionismo simbólico e na descrição etnográfica a fundamentação teórico - metodológica para o presente estudo. Para compreender o processo de interiorização dos universos simbólicos no CTI busquei descrever os sistemas temáticos de significados subjacentes às atividades dos enfermeiros intensivistas, através da observação participante, da entrevista etnográfica e da análise documental. Os resultados mostraram que o processo de socialização é permeado de sentimentos de insegurança, ansiedade, angústia, de incompetência e de medo, As causas destes sentimentos têm um forte componente na não vivência anterior e na lacuna da formação profissional. Este processo se dá formal e informalmente, mas é sempre referido como árduo, penoso; muitas vezes solitário; algumas vezes compartilhado.

Ocorrência de multiparasitismo em larvas de terceiro ínstar e pupas de Chrysomya megacephala (Fabricius) em condições de campo

Durante experimento de pesquisa envolvendo o parasitismo de larvas de terceiro ínstar e pupas de Chrysomya megacephala (Fabricius, 1794) em dois locais da cidade do Rio de Janeiro, RJ, observou-se a ocorrência de multiparasitismo em 1,83% das pupas expostas no Instituto Oswaldo Cruz (IOC) e em 2,16% expostas no Jardim Zoológico (ZOO). O experimento foi conduzido semanalmente de agosto de 1999 a julho de 2000. Em ambos os locais, houve a co-ocorrência de duas espécies por pupa e os parasitóides encontrados foram os himenópteros Tachinaephagus zealandicus Ashmead, 1904, Pachycrepoideus vindemiae (Rondani, 1875) e Nasonia vitripennis (Walker, 1836). 72,73% do multiparasitismo ocorreu no ZOO em julho de 2000. Em condições de multiparasitismo, T. zealandicus e P. vindemiae mantiveram seu hábito gregário e solitário, respectivamente, mas N. vitripennis foi encontrado solitário em algumas pupas.

Notas sobre a bionomia de Trichotrigona extranea Camargo & Moure (Hymenoptera, Apidae, Meliponini)

Três ninhos de T. extranea, encontrados nas matas de igapó, na localidade de Samaúma, foz do rio Daraã (64°45'35" W, 0°27'7" S), AM, Brasil, são descritos e ilustrados. Este é o único lugar onde esta espécie é conhecida. Todos os ninhos estavam em ocos de ramos secos de "Tanimbuca" - Buchenavia suaveolens Eichler (Combretaceae). Dois deles compartilhavam o oco com ninhos de Frieseomelitta sp. e um era solitário. Um ninho continha 46 células de cria, 43 operárias adultas e uma rainha fisogástrica; o segundo, 240 células, 117 operárias, 25 machos e uma rainha fisogástrica; o terceiro, 260 células, 163 operárias, uma rainha fisogástrica e uma pupa de rainha. As células são construídas na forma de cacho, como em Friseomelitta, e as células de rainha são do mesmo tamanho e forma que as de operária. Não há potes de alimento - este é o único Meliponini que se conhece que não armazena alimento. Supostamente, esta espécie tem hábitos cleptobióticos. Rainhas e machos são também descritos.

Ocupação diferencial do habitat por vespas do gênero Trypoxylon (Trypargilum) Latreille (Hymenoptera, Crabronidae)

Vespas do gênero Trypoxylon apresentam comportamento solitário e aprovisionam seus ninhos de forma massiva com aranhas paralisadas. Algumas espécies utilizam cavidades preexistentes para nidificação, o que facilita sua amostragem e estudo. Neste trabalho, dados sobre a biologia de nidificação de quatro espécies de Trypoxylon (Trypargilum) - T. rogenhoferi, T. lactitarse, T. aurifrons e T. nitidum - são apresentados. As espécies foram amostradas por meio de ninhos-armadilha durante três anos em Araras e dois anos em Rifaina e São Carlos (São Paulo). As localidades de estudo foram subdivididas em sítios de amostragem. Foram obtidos 2.698 ninhos de himenópteros solitários, dos quais 2.268 foram fundados por espécies de Trypoxylon. Intensa atividade de nidificação foi observada principalmente na estação quente e chuvosa (outubro-março). Os ninhos-armadilha utilizados para nidificação pelas diferentes espécies apresentaram dimensões significativamente diferentes. A família de aranhas mais utilizada para aprovisionamento foi Araneidae; no entanto, as espécies de vespas diferiram quanto às espécies forrageadas. O principal parasitóide das quatro espécies foi Melittobia, mas indivíduos das famílias Chrysididae, Ichneumonidae, Chalcididae e Sarcophagidae também foram verificados. Observou-se que as espécies de Trypoxylon coexistem temporalmente e que nas três localidades cada espécie nidificou com maior freqüência em um sítio particular, sugerindo uma ocupação diferencial do habitat. A partição do habitat aparentemente homogêneo pode ser resultado de "competição aparente" mediada por inimigos naturais comuns.

Conseqüências de diferentes sistemas de preparo do solo sobre a contaminação do solo, sedimentos e água por metais pesados

Este trabalho teve por objetivos determinar a influência de diferentes métodos de preparo do solo sobre as perdas por erosão de metais pesados e avaliar a contaminação dos sedimentos e da água do córrego principal da microbacia de Caetés, município de Paty do Alferes (RJ). A avaliação foi realizada durante os meses de dezembro de 1996 a março de 1997, no ciclo de cultivo do pepino (Cucumis sativus L ). Foram utilizadas parcelas do tipo Wischmeier, de tamanho de 22,0 x 4,0 m. Os tratamentos utilizados foram os seguintes: (a) aração com trator morro abaixo e queimado (MAQ); (b) aração com trator morro abaixo não queimado com restos de vegetação natural entre as linhas (MANQ); (c) aração com tração animal em nível, faixas de capim-colonião a cada 7,0 m (AA), e (d) cultivo mínimo, com preparo de covas em nível (CM). Avaliaram-se também os teores desses metais nos sedimentos de fundo e na água do córrego principal que drena a microbacia de Caetés. As perdas mais elevadas de metais pesados por erosão foram verificadas no tratamento MAQ, típico da região. Os sedimentos e a água do córrego da microbacia de Caetés mostraram incrementos nos teores totais de Cd, Ni, Pb, Zn e Mn de acordo com a posição de coleta na área. A água coletada no córrego e no açude apresentou concentrações de Cd, Mn e Pb acima dos padrões máximos estabelecidos para água potável. Os resultados obtidos neste trabalho permitem concluir que o uso intensivo de agroquímicos e as elevadas perdas de solo por erosão podem acarretar sérios riscos de contaminação da água do córrego da microbacia que é utilizada pelos animais e para irrigação.

Umidade crítica de compactação e densidade do solo máxima em resposta a sistemas de manejo num Latossolo Roxo

O termo compactação do solo refere-se à compressão do solo não saturado durante a qual existe um aumento da densidade do solo em conseqüência da redução de seu volume, pela expulsão do ar causado pelo manejo inadequado. Com o objetivo de estudar o efeito de diferentes sistemas de manejo na densidade do solo máxima (Ds máx), e na umidade crítica de compactação (Ucrít), realizou-se um experimento em um Latossolo Roxo da Região de Lavras (MG), submetido aos seguintes sistemas de manejo: preparo com arado de discos (AD), preparo com escarificador (CM), semeadura direta (SD), preparo com arado de aivecas (AA) e preparo intensivo com grade (GD). O experimento foi instalado, em novembro de 1994, em blocos casualizados. Foram realizadas três amostragens em 1996: em janeiro, antes da semeadura do feijão; em abril, antes da colheita do feijão, e em novembro, antes da semeadura do milho. As amostras deformadas foram coletadas nas camadas de 0-0,07 e 0,20-0,27 m de profundidade nos sistemas de manejo AD, CM e AA. No sistema de manejo SD, as amostras deformadas foram coletadas nas camadas de 0-0,07 e 0,25-0,32 m de profundidade e, no caso do sistema GD, nas camadas de 0-0,07 e 0,15-0,22 m de profundidade. A partir das curvas de compactação, obteve-se a densidade do solo máxima. Determinaram-se, ainda, o teor de argila e matéria orgânica (MO), o limite de plasticidade (LP) e a água retida a - 0,033 e - 0,01 MPa. Os valores de (Ds máx), (Ucrít) para os diferentes sistemas de manejo, época de coleta e profundidades, não foram estatisticamente diferentes, não sendo, portanto, influenciados pelos teores de argila e M.O. Verificou-se que a Ucrít corresponde a 90% do LP e a 90% da água retida a - 0,01 MPa é aproximadamente igual à água retida a - 0,033 MPa.