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Mutagenesi sito specifica in vitro del genoma virale.
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Amplificazione, tramite PCR ed usando coppie di primers appositamente disegnate, del frammento del genoma virale in cui si desidera inserire la mutazione sito specifica.
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Sostituzione del frammento mutato nel genoma virale tramite taglio enzimatico e reazione di ligasi.
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Trasformazione di cellule di E. coli e selezione delle colonie contenenti il plasmide ricombinante.
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Trascrizione in vitro dell’RNA virale.
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Inoculo di piante test (C.
quinoa
) con gli RNA virali mutati.
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Osservazione e discussione dei risultati ottenuti.
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