307 resultados para Animal cell culture
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Crude extract (CE) and aqueous (AqF) and ethyl acetate (EtOAcF) fractions of Guazuma ulmifolia LAM., Sterculiaceae and the corresponding AqF, EtOAcF of Stryphnodendron adstringens (MART.) COVILLE, Leguminosae were tested for their antiviral activity against poliovirus 1 (P-1) and bovine herpesvirus 1 (BHV-1) in HEp2 cultured cells. The antiviral activity was monitored by plaque assay and immunolluorescence assay (IFA) under virucidal and therapeutic protocols. The therapeutic protocol demonstrated statistically significant positive results with both plants and for both virus strains. The highest percentages of viral inhibition were found for G. ulmifolia EtOAcF which inhibited BHV-1 and P-1 replication by 100% and 99%, respectively (p < 0.05, Student's t-test). For S. adstringens, AqF was the most efficient, inhibiting BHV-1 and P-1 by 97% and 93%, respectively (p < 0.05). In the virucidal protocol, G. ulmifolia CE inhibited the replication of BHV-1 and P-1 by 60% and 26%, respectively (p < 0.05), while, for S. adstringens, inhibition of 62% (p < 0.05) was demonstrated only with EtOAcF for P-1. IFA demonstrated that the greatest reduction in fluorescent cell number occurred with G. ulmifolia, under the therapeutic protocol for both virus strains. However, AqF and EtOAcF of S. adstringens were most efficient with the virucidal protocol for P-1 In conclusion, we demonstrated that G. ulmifolia and S. adstringens inhibited BHV-1 and P-1 replication, as well as, blocked the synthesis of viral antigens in infected cell cultures.
Comparative in vitro study of the inhibition of human and hen esterases by methamidophos enantiomers
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
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A maioria dos plantios de bananeira ainda é realizada utilizando mudas tradicionais, mas outros métodos de propagação, como a micropropagação in vitro, vêm sendo desenvolvidos e aperfeiçoados, para elevar a taxa de multiplicação em curto espaço de tempo e melhorar a qualidade da produção de mudas. Contudo, a contaminação é um dos maiores problemas desta técnica. Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência da descontaminação de explantes de bananeira com o uso de diferentes concentrações de cloro ativo durante a assepsia do explante. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado e constituído de cinco tratamentos e cinco repetições, sendo cada repetição representada por 5 explantes em diferentes concentrações de cloro ativo, sendo: T1 (testemunha, sem cloro ativo); T2 (0,5%); T3 (1,0%); T4 (1,5%), e T5 (2%). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, e as médias, comparadas pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade. Os resultados permitiram concluir que a maior eficiência dentre os tratamentos testados foi a imersão dos explantes em hipoclorito de sódio com 2% de cloro ativo, sendo as doses testadas não tóxicas aos explantes, permitindo o desenvolvimento normal dos mesmos, concluindo assim que essa concentração possa ser utilizada para o controle de contaminações para micropropagação de bananeira cv. Grande Naine.
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Objetivo: Avaliar a existência de contaminação da câmara anterior durante a facectomia por facoemulsificação com implante de lente intra-ocular. Método: Foi realizado estudo prospectivo, avaliando-se 30 pacientes submetidos a facectomia por facoemulsificação com implante de lente intra-ocular, colhendo-se duas amostras de humor aquoso, uma obtida no início e outra no final da cirurgia. As amostras foram semeadas em meio de cultura para germes aeróbios, anaeróbios e fungos. Resultado: Todas as amostras avaliadas resultaram negativas. Conclusão: A contaminação da câmara anterior na cirurgia de facoemulsificação com implante de lente intra-ocular, usando os cuidados necessários, é infreqüente.
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OBJETIVO: Avaliar a taxa de proliferação de fibroblastos provenientes de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, quando expostos in vitro ao tacrolimus (FK 506). MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, controlado, avaliando-se 8 amostras de explantes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e 6 de cápsula de Tenon normal, obtidas na Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. A cápsula de Tenon normal foi colhida da região temporal inferior, do mesmo portador de pterígio. As amostras foram cultivadas em meio específico e posteriormente expostas ao tacrolimus 1M (FK 506), em única exposição, com avaliação da taxa de proliferação celular 1, 5, 12 e 19 dias após a exposição. RESULTADOS: Avaliando-se a proliferação dos fibroblastos provenientes de cápsula de Tenon de pterígios recidivados e da cápsula de Tenon normal, os fibroblastos expostos ao tacrolimus tiveram taxa de proliferação significativamente menor (p<0,05) do que quando não houve exposição a droga, quando a avaliação foi feita 1 dia após a exposição. Quando a avaliação foi feita 19 dias após a exposição, a taxa de proliferação foi maior nos grupos expostos a droga. CONCLUSÃO: Os fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon de pterígios recidivados apresentaram taxa de proliferação significativamente menor um dia após a exposição ao tacrolimus. Novos estudos devem ser realizados para definir dose e tempo de exposição dos fibroblastos a droga, com o intuito de definir se o tacrolimus pode ser útil como tratamento coadjuvante do pterígio.
Análise do cultivo de fibroblastos de pterígios primários e recidivados e da cápsula de Tenon normal
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OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon, provenientes de explantes de pterígios primários e recidivados e da conjuntiva normal. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, randomizado, avaliando-se 43 peças cirúrgicas, produto da exérese de 30 pterígios primários e 13 recidivados, além de fragmentos da cápsula de Tenon normal, obtida dos próprios portadores de pterígio. Foram avaliadas a taxa de proliferação, migração e confluência, analisadas segundo dados dos portadores como: idade, localização da lesão, tipo de lesão (tamanho, involutivo ou carnoso), primário ou recidivado. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 30 pterígios primários cultivados, 70% migraram e proliferaram e 60% chegaram à confluência. A migração, proliferação e confluência iniciaram-se mais precocemente nas culturas de fibroblastos provenientes de pterígios em comparação àquelas provenientes da Tenon normal. Os pterígios recidivados apresentaram migração mais precoce que os primários. Não houve diferença estatisticamente significativa quanto ao início da migração, proliferação e confluência entre os pterígios carnosos ou involutivos, assim como entre os pterígios de graus I-II e os de graus III-IV. CONCLUSÃO: O cultivo celular de fibroblastos de pterígios é mais viável que o de Tenon normal. A migração, proliferação e confluência diferem em pterígios primários e recidivados. Pterígios carnosos e involutivos são semelhantes em cultura, assim como não existe diferença entre os pterígios segundo o tamanho da lesão.
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Purpose: To evaluate the proliferation rate of recurrent pterygium and normal Tenon's capsule fibroblasts after exposure to triamcinolone.Methods: Explants of recurrent pterygia and normal Tenon's capsule of the same carrier were cultured. The fibroblasts were cultured and subcultured until the third passage and subsequently exposed to triamcinolone. The cell proliferation rate was evaluated 3, 6, 12 and 18 days after the exposure.Results: Fibroblasts exposed to triamcinolone had significantly lower proliferation rate (P < 0.05) compared to those not exposed, when the evaluation was performed 3, 6 and 12 days later. In the 18th day after exposure, there was a return in the proliferation rate, with statistical significance, only in the pterigyum fibroblasts.Conclusion: Both the fibroblasts from normal Tenon's capsule as from recurrent pterygia showed significantly lower proliferation rate after exposure to triamcinolone. After 18 days from the exposition, pterygium fibroblasts recovered the proliferation. The results suggested the triamcinolone might be useful as adjuvant in pterygium treatment.
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OBJETIVO: Avaliar o comportamento dos fibroblastos da cápsula de Tenon de pterígios e normais em cultura, quando expostos a ciclosporina 0,05%. MÉTODOS: Estudo prospectivo, controlado, do qual participaram 20 portadores de pterígio primário. Foram colhidas amostras da cápsula de Tenon normal e proveniente do pterígio, ambas do mesmo indivíduo, colocadas para crescimento em cultura e expostas a ciclosporina 0,05%. As avaliações foram feitas aos 3, 6, 12 e 17 dias após a exposição. RESULTADOS: Das amostras colhidas, 7 foram utilizadas para exposição a ciclosporina - 6 provenientes de pterígios e 1 da Tenon normal. Houve redução significativa na proliferação celular das culturas de fibroblastos expostos a ciclosporina (p<0,05). CONCLUSÃO: A ciclosporina 0,05% é capaz de inibir a proliferação de fibroblastos provenientes da cápsula de Tenon de pterígio e também da Tenon normal. Novos estudos devem ser providenciados para definir o papel da ciclosporina no tratamento do pterígio.
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A variety of chemicals can adversely affect the immune system and influence tumor development. The modifying potential of chemical carcinogens on the lymphoid organs and cytokine production of rats submitted to a medium-term initiation-promotion bioassay for carcinogenesis was investigated. Male Wistar rats were sequentially initiated with N-nitrosodiethylamine (DEN), N-methyl-N-nitrosourea (MNU), N-butyl-N-(4hydroxybutyl)nitrosamine (BBN), dihydroxy-di-n-propylnitrosamine (DHPN), and 1,2-dimethylhydrazine (DMH) during 4 weeks. Two initiated groups received phenobarbital (PB) or 2-acetyl amino fluorene (2-AAF) for 25 weeks and two noninitiated groups received only PB or 2-AAF. A nontreated group was used as control. Lymphohematopoietic organs, liver, kidneys, lung, intestines, and Zymbal's gland were removed for histological analysis. Interleukin (IL)-2, IL-12, interferon gamma (IFN-gamma), tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), IL-10, and transforming growth factor betal (TGF-beta1) levels were determined by ELISA in spleen cell culture supernatants. At the fourth week, exposure to the initiating carcinogens resulted in cell depletion of the thymus, spleen and bone marrow, and impairment of IL-2, IL-12, and IFN-gamma production. However, at the 30th week, no important alterations were observed both in lymphoid organs and cytokine production in the different groups. The results indicate that the initiating carcinogens used in the present protocol exert toxic effects on the lymphoid organs and affect the production of cytokines at the initiation step of carcinogenesis. This early and reversible depression of the immune surveillance may contribute to the survival of initiated cells facilitating the development of future neoplasia. (C) 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
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The aim of this study was to evaluate the application of PCR technique for the detection of BoHV-5 in routinely formalin-fixed, paraffin-embedded brain tissues in 20 naturally infected calves affected by fatal meningoencephalitis. Brains were divided into two halves, one kept fresh for virus isolation and PCR assay, targeting the glycoprotein C gene from BoHV-5 genome. The other half brain, corresponding to posterior cortex region, was submitted to formalin fixation and embedded into paraffin blocks for microscopic evaluation and total DNA isolation. Most of the slides showed severe multifocal non-supurative encephalitis with neuronal degeneration, neurophagia, and no acidophilic intranuclear inclusions could be found in neurons and glial. The 20 fresh samples were confirmed, by virus isolation and PCR assay, as having the BoHV-5 virus and, respective glicoprotein C sequence, while 15 of 20 formalin-fixed, paraffin-embedded samples were considered positive for the same analysis. The results revealed the first description of PCR efficiency, applied to formalin-fixed, paraffin-embedded brain collected from naturally infected calves, improving the detection of BoHV-5 from archival samples in South America. (c) 2007 Published by Elsevier B.V.
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
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This study evaluated the cytotoxic effects of a carbamide peroxide (CP) bleaching gel at different concentrations on odontoblast-like cells. Immortalized cells of the MDPC-23 cell line (30,000 cells/cm(2)) were incubated for 48 h. The bleaching gel was diluted in DMEM culture medium originating extracts with different CP concentrations. The amount (mu g/mL) of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) released from each extract was measured by the leukocrystal violet/horseradish peroxidase enzyme assay. Five groups (n = 10) were formed according to the CP concentration in the extracts: G1-DMEM (control); G2-0.0001 % CP (0.025 mu g/mL H(2)O(2)); G3-0.001% CP (0.43 mu g/mL H(2)O(2)); G4-0.01% CP (2.21 mu g/mL H(2)O(2)); and G5-0.1 % CP (29.74 mu g/mL H(2)O(2)). MDPC-23 cells were exposed to the bleaching gel extracts for 60 min and cell metabolism was evaluated by the NITT assay. Data were analyzed statistically by one-way ANOVA and Tukey's test (alpha = 0.05). Cell morphology was examined by scanning electron microscopy. The percentages of viable cells were as follows: G1, 100%; G2, 89.41%; G3, 82.4%; G4, 61.5%; and G5, 23.0%. G2 and G3 did not differ significantly (p > 0.05) from G1. The most severe cytotoxic effects were observed in G3 and G4. In conclusion, even at low concentrations, the CP gel extracts presented cytotoxic effects. This cytotoxicity was dose-dependent, and the 0.1% CP concentration caused the most intense cytopathic effects to the MDPC-23 cells. (C) 2009 Wiley Periodicals, Inc. J Biomed Mater Res Part B: Appl Biomater 9013: 907-912, 2009
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)