64 resultados para ABTS
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Ps-graduao em Biocincias e Biotecnologia Aplicadas Farmcia - FCFAR
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Ps-graduao em Biotecnologia - IQ
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Ps-graduao em Alimentos e Nutrio - FCFAR
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Ps-graduao em Alimentos e Nutrio - FCFAR
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Ps-graduao em Cincias Farmacuticas - FCFAR
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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The aim of the present study was to evaluate the efficacy of peroxidase immobilized on corncob powder for the discoloration of dye. Peroxidase was extracted from soybean seed coat, followed by amination of the surface of the tertiary structure. The aminated peroxidase was immobilized on highly activated corncob powder and employed for the discoloration of bromophenol blue. Amination was performed with 10 or 50 mmol.L-1carbodiimide and 1 mol.L-1ethylenediamine. The amount of protein in the extract was 0.235 0.011 mg.mL-1and specific peroxidase activity was 86.06 1.52 mol min-1.mg-1, using 1 mmol.L-1ABTS as substrate. Ten mmol.L-1and 50 mmol.L-1 aminated peroxidase retained 88 and 100% of the initial activity. Following covalent immobilization on a corncob powder-glyoxyl support, 10 and 50 mmol.L-1aminated peroxidase retained 74 and 86% of activity, respectively. Derivatives were used for the discoloration of 0.02 mmol.L-1bromophenol blue solution. After 30 min, 93 and 89% discoloration was achieved with the 10 mmol.L-1and 50 mmol.L-1derivatives, respectively. Moreover, these derivatives retained 60% of the catalytic properties when used three times. Peroxidase extracted from soybean seed coat immobilized on a low-cost corncob powder support exhibited improved thermal stability. Keywords: Peroxidases. Multipoint immobilization of enzymes. Aminated enzymes. Corncob powder. RESUMO Descolorao de azul de bromofenol utilizando peroxidase imobilizada em p de sabugo de milho altamente ativado Nesta pesquisa a enzima peroxidase foi extrada do tegumento de sementes de soja, e a superfcie da estrutura terciria foi aminada. A peroxidase aminada foi imobilizada em suporte p de sabugo de milho altamente ativado e utilizado na descolorao de azul de bromofenol. A aminao da peroxidase foi realizada com carbodiimida em concentraes de 10 e 50 mmol.L-1, e 1 mol.L-1de etilenodiamina. A quantidade de protenas no extrato foi de 0,235 0,011 mg.mL-1, e a atividade especfica da peroxidase foi 86,06 1,52 mol min-1.mg-1, usando 1 mmol.L-1de ABTS como substrato. A peroxidase aminada a 10 mmol.L-1reteve 88% e a aminada a 50 mmol.L-1reteve 100% da atividade inicial. As peroxidases aminadas a 10 ou 50 mmol.L-1foram covalentemente imobilizadas em suporte glioxil-p de sabugo de milho com atividade recuperada de 74% e 86%, respectivamente. Os derivados obtidos foram utilizados na descolorao de soluo de azul de bromofenol 0,02 mmol.L-1. Aps 30 min 93% de descolorao foram alcanados com o derivado glioxil-p de sabugo de milho com a peroxidase aminada 10 mmol.L-1e 89% com a aminada 50 mmol.L-1. Estes derivados mantiveram 60% das propriedades catalticas, quando utilizado por trs vezes. A peroxidase extrada do tegumento da semente de soja imobilizada em suporte de baixo custo p de sabugo de milho apresentou melhoria na estabilidade trmica da enzima. Palavras-chave: Peroxidases. Imobilizao multipontual de enzimas. Aminao de enzimas. P de sabugo de milho.
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
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Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
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A curcumina, um pigmento natural extrado do rizoma da Curcuma longa L. utilizada em alimentos, principalmente aqueles condimentados com curry e aafro. Vrios estudos demonstram seu efeito benfico em diversas doenas, tais como: diabetes, hepatopatias, cncer, entre outras. Uma de suas propriedades a atividade antioxidante, pois em pequenas quantidades capaz de inibir ou retardar processos oxidativos. Para substanciar o estudo desta propriedade, comparou-se a capacidade de captura de espcies reativas radicalares e no radicalares pela curcumina, com padres (biomolculas, exceto o trolox) antioxidantes: ascorbato, crocina, glutationa, quercetina, rutina, trolox e urato, em sistemas-modelo in vitro, sobre a captura dos radicais: 2-2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-cido sulfnico) (ABTS+ ); 2,2-difenil-1 picril-hidrazila (DPPH ); nion radical superxido (O2 -); HOCl/OCl- e H2O2. Investigou-se tambm seu efeito inibitrio na gerao do HOCl no sistema, mieloperoxidase (MPO)/H2O2/Cl- (via clorinante) e na inibio da oxidao do guaiacol MPO/H2O2/Guaiacol (via peroxidativa). A curcumina nos ensaios com ABTS+ ou O2 -, apresentou o 3 menor IC50, 4,93 e 99,66 mol/L, respectivamente; com o DPPH apresentou o 6 menor IC50, 24,70 mol/L; com o HOCl/OCl- apresentou o menor IC50, 1,12mol/L e no ensaio com o H2O2 no atingiu o IC50. No ensaio com o sistema MPO/H2O2/Cl-, observou-se alterao da banda de absoro (bleaching) da curcumina (420 nm), alm disso, nos ensaios com a via clorinante (MPO/H2O2/Cl-) e revelados com 3, 3, 5, 5- tetrametilbenzidina (TMB) e iodeto de potssio em meio cido, observou-se aumento da absorbncia (650 nm), o que impossibilitou o estudo de sua inibio nesta via. Entretanto, na via peroxidativa, observou-se uma diminuio significativa da absorbncia do produto de oxidao... (Resumo completo, clicar acesso eletrnico abaixo)