Inibição do vírus da hepatite C utilizando siRNAs direcionados para o genoma viral e proteínas celulares Hsps

Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE

Interação da proteina e2 do vírus da hepatite c com o receptor de ldl e cd81 presentes em células endoteliais e ativação da resposta inflamatória

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Processamento de farinha de resíduo de polpa de amora-preta (Rubus sp.) e avaliação de biocompostos

Pós-graduação em Biociências - FCLAS

Estudo da eficácia e citotoxicidade de filme e sistema emulsionado contendo ácido cafeico

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos do antidepressivo cloridrato de fluoxetina na integridade histológica dos túbulos seminíferos de ratos adultos

A fluoxetina, pertencente à classe dos inibidores da recaptação seletiva de serotonina, é um dos antidepressivos mais amplamente prescritos para o tratamento da depressão e de transtornos da ansiedade, como o transtorno obsessivo compulsivo. Considerando que, dentre os efeitos colaterais causados pela fluoxetina, têm sido relatados distúrbios na função sexual masculina, foi proposto avaliar a ação deste fármaco sobre a integridade morfológica dos túbulos seminíferos. Foram utilizados 16 ratos adultos, distribuídos em 2 grupos: grupo fluoxetina (GF) e grupo controle (GC). Os animais do GF receberam injeções intraperitoneais de fluoxetina (20mg/Kg) e os animais do GC receberam água destilada. O tratamento se estendeu por 11 dias consecutivos e, ao final do tratamento, foram obtidos os pesos corpóreo e testicular dos animais. Os testículos foram fixados e processados para inclusão em historesina e parafina. Nos cortes de historesina, as frequências de túbulos de acordo com o estágio do ciclo do epitélio seminífero e de túbulos seminíferos contendo células descamadas preenchendo a luz tubular foram obtidas, bem como os seguintes parâmetros morfométricos: área tubular total, área da luz tubular e área do epitélio seminífero. Os cortes em parafina foram submetidos ao método do TUNEL para detecção de morte celular. Os níveis séricos de testosterona também foram avaliados. Os resultados foram submetidos à análise estatística para avaliação das diferenças entre os grupos. O tratamento com fluoxetina causou redução significante do peso corpóreo dos animais e redução, embora não significante, do peso testicular absoluto. Além disso, uma redução significante nos níveis séricos de testosterona foi observada nos animais do GF. Os túbulos seminíferos apresentaram contorno irregular, depleção celular e intensa desorganização epitelial, bem como a presença de vacúolos e ...

Estudo fotodinâmico da clorofila a, azul de metileno e rosa bengala como agente inseticida contra Aedes aegypti

Photodynamic therapy, term introduced by von Tapeiner in 1900, can be defined as the administration of a non toxic drug, i.e., a dye, known as photosensitizer (FS), which subsequently will be illuminated with light of specific wavelength. PDT is based on the interaction among FS, oxygen and light, which through photochemical reactions cause cell death. The FS molecules must have a high probability to form the singlet state after the excitation, which can induce chemical changes in the neighborhood in two ways, called reactions type I and type II. The type II reaction is based on the exchange of energy to molecular oxygen, exciting it to its state of higher energy (singlet), which is highly reactive. The proposed mechanisms for cell death are linked to damage to the DNA, mitochondria and to the cytoplasmic membrane. Several pre‐clinical and clinical trials have been carried out and the PDT is already used in many countries for treatment mainly against certain types of cancer. The therapy also has been gaining strength in antimicrobial control, since the microorganisms have appeared increasingly resistant to current antibiotics. Another attempt to use the PDT is for the inactivation of macro‐organisms, such as micro‐crustaceans and mosquitoes. To this end I tested whether the photosensitizers methylene blue, rose Bengal and the chlorophyll a has insecticidal activity against the yellow fever and dengue vector mosquito, Aedes aegypti. Since these diseases have no effective treatments, its control is linked to the vector control, which has shown resistance to chemical pesticides used. Based on this, this work shows its importance, because it is a new type of mosquito control since all the photosensitizers used are low cost, do not generate toxic products at the concentrations used and showed good results in mortality. The best photosensitizer was rose Bengal... (Complete abstract click electronic access below)

Estudo morfológico do fígado de camundongos expostos a ação do fipronil (ingrediente ativo do acaricida Frontline®)

O fipronil, ingrediente ativo do acaricida Frontiline®, é um derivado fenil-pirazólico e sua eficácia na eliminação de diversas pragas, mesmo em baixas concentrações, já foi demonstrada, porém, sua atuação sobre os organismos não alvos, ainda não foi totalmente esclarecida. Neste sentido, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos de diferentes doses do fipronil sobre o fígado de camundongos. Os resultados mostraram que os animais expostos ao fipronil apresentaram alterações ultraestruturais significativas no tecido e nas células hepáticas com evidente desorganização celular e citoplasmática dos hepatócitos, com aumento do número de organelas, principalmente mitocôndrias e retículo endoplasmático rugoso, organelas que, no caso dos indivíduos expostos, foram provavelmente responsáveis pela síntese de enzimas inativadoras do produto tóxico. Houve acúmulo de lipídeos no citoplasma dos hepatócitos (esteatose) além de extensas áreas vacuolizadas, principalmente em regiões próximas ao núcleo. As alterações observadas no núcleo dos hepatócitos sugeriram a ocorrência de processos de morte celular. As células de Kupffer aumentaram em número o que sugerindo aumento de processos fagocitários nos fígados dos animais expostos

Avaliação dos efeitos do piretróide permetrina nas glândulas salivares de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae)

Devido à grande importância médico-veterinária dos carrapatos e a ampla utilização de produtos químicos sintéticos para o seu controle, tais como a permetrina, o presente estudo trouxe uma análise morfofisiológica, citoquímica e da reorganização do citoesqueleto durante os processos de degeneração e de morte celular que ocorreram nas glândulas salivares de fêmeas semi-ingurgitadas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus quando expostas a 206, 1031 e 2062 ppm de permetrina. Os resultados obtidos mostraram que a permetrina é um potente agente químico que interfere na morfofisiologia do tecido glandular desta espécie, causando severas alterações na forma dos ácinos, bem como intensa vacuolização citoplasmática nas células acinares e acentuada desorganização do tecido glandular, culminando num avançado processo de degeneração, com consequente formação de corpos apoptóticos. Além disso, este piretróide comprometeu a capacidade de secreção das glândulas salivares, visto a drástica redução de proteínas, lipídeos e polissacarídeos nas diferentes células acinares. O material genético do tecido glandular também mostrou severas alterações induzidas pela permetrina, tais como: na forma e no tamanho do núcleo das células acinares, marginalização da cromatina, fragmentação nuclear, bem como surgimento de núcleos picnóticos, principalmente quando aplicadas as maiores concentrações do produto. Com relação à reorganização do citoesqueleto, os resultados revelaram que a permetrina foi capaz de modificar o citoesqueleto das glândulas salivares de R. sanguineus por meio de um processo gradual de desintegração à medida que as concentrações do acaricida aumentaram. Nestas células glandulares, os processos de morte celular ocorreram num ritmo mais acelerado do que em condições naturais, nas quais esse processo dar-se-ia somente no final do ingurgitamento da fêmea. Como consequência da...

Avaliação das propriedades antioxidantes da Curcumina em sistemas-modelo in vitro

A curcumina, um pigmento natural extraído do rizoma da Curcuma longa L. é utilizada em alimentos, principalmente aqueles condimentados com curry e açafrão. Vários estudos demonstram seu efeito benéfico em diversas doenças, tais como: diabetes, hepatopatias, câncer, entre outras. Uma de suas propriedades é a atividade antioxidante, pois em pequenas quantidades é capaz de inibir ou retardar processos oxidativos. Para substanciar o estudo desta propriedade, comparou-se a capacidade de captura de espécies reativas radicalares e não radicalares pela curcumina, com padrões (biomoléculas, exceto o trolox) antioxidantes: ascorbato, crocina, glutationa, quercetina, rutina, trolox e urato, em sistemas-modelo in vitro, sobre a captura dos radicais: 2-2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) (ABTS●+ ); 2,2-difenil-1 picril-hidrazila (DPPH● ); ânion radical superóxido (O2 ●-); HOCl/OCl- e H2O2. Investigou-se também seu efeito inibitório na geração do HOCl no sistema, mieloperoxidase (MPO)/H2O2/Cl- (via clorinante) e na inibição da oxidação do guaiacol MPO/H2O2/Guaiacol (via peroxidativa). A curcumina nos ensaios com ABTS●+ ou O2 ●-, apresentou o 3° menor IC50, 4,93 e 99,66 µmol/L, respectivamente; com o DPPH● apresentou o 6° menor IC50, 24,70 µmol/L; com o HOCl/OCl- apresentou o menor IC50, 1,12µmol/L e no ensaio com o H2O2 não atingiu o IC50. No ensaio com o sistema MPO/H2O2/Cl-, observou-se alteração da banda de absorção (bleaching) da curcumina (420 nm), além disso, nos ensaios com a via clorinante (MPO/H2O2/Cl-) e revelados com 3, 3’, 5, 5’- tetrametilbenzidina (TMB) e iodeto de potássio em meio ácido, observou-se aumento da absorbância (650 nm), o que impossibilitou o estudo de sua inibição nesta via. Entretanto, na via peroxidativa, observou-se uma diminuição significativa da absorbância do produto de oxidação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Influência da restrição proteica gestacional e lactacional sobre a morfogênese da próstata de ratos

Nos últimos anos vem aumentando o reconhecimento mundial sobre a relevância da nutrição como pilar básico para o desenvolvimento econômico e social. Milhares de crianças têm seu crescimento retardado pela má nutrição, no entanto poucos trabalhos relacionam a desnutrição proteica materna e o desenvolvimento do sistema reprodutor masculino. Dessa forma, o presente trabalho tem por objetivo investigar os possíveis efeitos da restrição proteica gestacional e durante a lactação sobre a morfogênese do complexo prostático, tendo em vista que a etiologia das doenças prostáticas relaciona-se com fatores epigenéticos, e dentre eles, fatores toxicológicos e nutricionais. Após o acasalamento e diagnóstico da prenhês, dois grupos de mães foram constituídos: Normoproteico (NP, 17% proteína, n=7) e Hipoproteico (LP, 6% proteína, n=7). No segundo dia pós-nascimento (DPN2), as ninhadas foram inspecionadas e reduzidas para no máximo oito animais (preferencialmente machos), a distância anogenital foi mensurada e, 2 machos por ninhada foram mortos por decapitação para coleta do broto prostático no dia do nascimento. Após o nascimento dos filhotes, um grupo de mães do grupo hipoproteico continuou recebendo a ração hipoproteica (n=3), enquanto as demais passaram a receber a ração normoproteica (n=3). No dia 22, dia do desmame, 2 machos de cada ninhada foram pesados, mortos por decapitação e o complexo prostático foi coletado para as análises morfológicas e imunoistoquímicas. Foram investigados a morfologia geral e o padrão de distribuição dos elementos celulares e da matriz extracelular por métodos citoquímicos e morfométricos, e a imunorreatividade para os seguintes marcadores: receptor de andrógeno (AR), Ki67, α-actina, EGF-R e P63. Os índices de proliferação e morte celular (TUNEL) foram calculados. A prole LP apresentou uma redução significativa do peso corporal e da distância anogenital no DPN2. ...

Avaliação do Efeito Fotodinâmico sobre o Crescimento in vitro de Pythium insidiosum

Photodynamic Therapy (PDT) is a therapeutic method which employs a photosensitizer and light to cause cellular death. The chemical compounds have low or none toxicity for hosts cells. Under the incidence of light, in an appropriated wavelength, these chemical compounds produce reactive oxygen which affects the biomolecules of the target-cells. The specific illumination of the affected area increases the selectivity of the therapy, since the photodynamic process occurs only in the irradiated area. Pythiosis, for instance, is a life-threatening emerging disease caused by a fungus-like organism called Pythium insidiosum. The disease occurs in man and other animals, being mostly observed in horses. Human pythiosis may present as ophthalmic, cutaneous-subcutaneous and systemic forms of lesions. Due to the fact that P. insidiosum is not a true fungus, it is refractory to most antifungal drugs and the treatment of the disease is difficult. Extensive surgery procedures, such as limb amputation, are the treatment of choice, however relapses may occur frequently. Although not totally effective, the use of immunotherapy associated to surgery have shown some results. Considering that pythiosis is an emerging disease few explored in its etiological and therapeutic aspects, which are limited and few effective, it is of great importance to encourage the development of researches for new strategies of treatment. In this sense, it was evaluated the effect of PDT on in vitro growth of the pathogen employing two chemical compounds as photosensitizer, porphyrin and chlorine, at different concentrations in combination with several energetic dosages. Porphyrin showed inhibition of growth at 25mg/mL with 100J/cm2 of energetic dosage and chlorine showed similar results employing low concentrations (0,7, 1,0 and 1,3mg/mL) with 70J/cm2 of energetic dosage... (Complete abstract click electronic access below)

Terapia fotodinâmica e luz branca: aspectos analíticos e perspectivas da viabilidade do tratamento

Photodynamic Therapy (PDT) is a technique used to treat several types of lesions, such as cancer, microbial control, and esthetic dentistry cases. The performance of PDT involves the use of a photosensitizer (PS), which mainly will be located in cancer cells and is irradiated with visible light. This process, when it occurs in the presence of oxygen triggers the formation of reactive oxygen species that are cytotoxic to cells. These species cause cell death and subsequent tumor necrosis. The use of white light as a light source for multispectral Photodynamic Therapy and its consequences to the photodynamic effect is not yet completely established, and therefore there is interest in studying the parameters involved for analyzing the best conditions for applying treatment. The wavelength is crucial to improve the therapeutic effect, since both the optical properties of the biological tissue as the PS depend on these parameters. For FS studied in this work (Photogem®) are most often used wavelengths in the red region, due to their larger penetration depth in biological tissue. Thus, the light source becomes a fundamental aspect, their choice depends on the specific application and is based on the tumor location, light dose to be delivered and FS chosen. Despite all the advantages presented by lasers, the fact of having an emission spectrum essentially monochrome makes only one possible transition possible for the absorption of FS is used. Therefore, more extensive light sources such as light emitting diodes (LED), could be better used in some cases the laser, with the additional advantage of a reduced cost. Therefore, the choice of the white LED comes from an emission spectrum that still wider LED colors defined by allowing greater use of the several absorption bands and with varying depths of operation, according to the wavelength... (Complete abstract click electronic access below)

Caracterização fitoquímica e ensaios biológicos de Coleus blumei Benth

Coleus blumei Benth (Lamiaceae), popularly known in Brazil as heart-hurt or coleus-of-Java is an ornamental plant widely used due to the color of its leaves. Several species of the genus Coleus present compounds with antioxidant, antimicrobial and allopathic activities due to the presence of chemicals such coleonol, forskolin and rosmarinic acid. Therefore, this study aimed to carry out phytochemical study and biological tests to evaluate the antibacterial, antioxidant and allopathic activities of the 70% ethanol extract and its fractions ethyl acetate, dichloromethane and end aqueous fraction leaf of Coleus blumei Benth. The plant extract was prepared by turbolisis from the powder of dried leaves, as a solvent for extraction using 70% ethanol. The ethanol extract was fractionated with solvents dichloromethane and ethyl acetate. The phytochemical study identified the presence of saponins, free anthraquinones, flavonoids and anthocyanidins. In evaluating the antibacterial dichloromethane fraction showed activity against all microorganisms tested both in agar diffusion test and microdilution test. The 70% ethanol extract showed activity against the micro-organisms S. aureus and S. epidermidis in agar diffusion test and against all microorganisms tested in microdilution test. The ethyl acetate fraction showed activity against the micro-organism S. aureus in the agar diffusion test and against all microorganisms tested in microdilution test. The end aqueous fraction showed no activity against any micro-organism tested. In the test of evaluation activity allopathic dichloromethane fraction showed greater inhibition of seed germination and growth of tomato (Lycopersicon esculentum Mill), followed by 70% ethanolic extract, the ethyl acetate fraction and the end aqueous fraction. In testing the antioxidant activity with DPPH ethyl acetate fraction showed higher antioxidant activity followed... (Complete abstract click electronic access below)

Avaliação dos efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos do fipronil, após fotodegradação, utilizando Allium cepa como organismo teste

Compounds released into the environment can induce genetic alterations in living organisms. A group of chemicals that shows proven toxicity is the pesticides, and the insecticides are the most harmful. The insecticides of the family phenylpyrazole have wide application both in agriculture and in homes. Fipronil, an insecticide of this chemical group, is widely used in various cultures and in homes, mainly for fighting fleas and ticks on dogs and cats. The use of fipronil may represent a risk to man and the environmental health, since this pesticide can potentially induce cell death, regardless of cell type. Fipronil, when in contact with the environment, can undergo various degradation processes, including photodegradation. The toxic effect of one of its metabolites derived from photodegradation, sulfone-fipronil, is approximately 20 fold as great as fipronil itself. The A. cepa test system was used to evaluate cytotoxic, genotoxicity and mutagenic effects of fipronil before and after phptodegradation. Seeds of Allium cepa were subjected to solutions of fipronil, pre-exposed or not exposed to degradation by sunlight. The germination tests were conducted both under the effect of light and in the dark. We evaluated the cumulative potential of this insecticide using 48 and 72-hours recovery tests. The results showed that when fipronil was previously exposed to the sun, it presented a greater genotoxic and mutagenic potential, showing that the metabolites formed by photodegradation can show more harmfull effects

Compostos fenólicos de 10 variedades de uva

Phenolic compounds represent one of the main groups of secondary metabolites. Due to their chemical diversity, they have a variety of functions in plants, such as protection against ultraviolet radiation, herbivores and pathogens, and attraction of pollinators or dispersers of fruits and seeds. For human, the phenolic compounds are used like food colorings and flavors and, due to their pharmacological properties, mainly to antioxidant activity, they are associated with several health benefits, such as delay senility, prevention and therapy of cardiovascular diseases and of some cancers. The grapes are considered one of the main source of phenolic compounds and the fruit and its products are consumed in Brazil and worldwide. Considering the phenolic compounds diversity and their different distribution in the grape parts, this work had like aims the extraction, identification and quantification of the main classes of phenolic compounds of 10 grape varieties. The content of total phenols, flavanols and anthocyanins were determined, respectively, according to the Folin-Ciocalteu, DMACA and comparison of pH spectrophotometric methods. The content of total phenols varied from 142.75 + 1.86 to 483.39 + 5.90 mg.L-1 in the peel and from 86.50 + 0.54 to 146.32 + 9.97 mg.L-1 in the pulp. The amount of total flavanols varied from 3.68 + 0.03 to 6.92 + 0.26 mg.L-1 in the peel and from 0.90 + 0.00 to 1.36 + 0.00 mg.L-1 in the pulp. The content of total anthocyanins varied from 7.00 + 0.99 to 406.56 + 39.50 mg.L-1 in the peel and from 2.88 + 0.28 to 46.36 + 1.89 mg.L-1 in the pulp. The phenolic compounds concentration was higher in the peel than in the pulp. The total phenols and anthocyanins varied a lot while the total flavanols were more constant. The flavanols represent the smaller portion of phenolic compounds