9 resultados para CARDIAC
em Université de Montréal, Canada
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Nos tudes ont dmontres que la formation de la cicatrice et la gurison sont associes avec lapparition de cellules de type myocytes cardiaques nestine(+) dans la rgion pri-infarcie. Prsentement, ltude examine le mcanisme, tel que lhypoxie ou les hormones neuronales, possiblement impliqu dans leur recrutement et de dvoiler leur origine cellulaire. La prsence de ces cellules a t dtecte dans les coeurs infarcies dune semaine et maintenue aprs neuf mois suite une sujtion coronaire complte. Aussi, ces cellules de type myocytes cardiaques nestine(+) ont t observes dans le coeur infarci humain. Lhypoxie reprsente un vnement prdominant suite un infarctus de myocarde, mais lexposition des rats normaux un environnement hypoxique na pas pu promouvoir lapparition de ces cellules. Autrement, linfusion de lagoniste -adrnergique non-slectif isoprotrnol (ISO) dans les rats adultes Sprague-Dawley a augment la protine nestine dans le ventricule gauche et a t associ avec la rapparition de cellules de type myocytes cardiaques nestine(+). Cela reprsente possiblement un effet secondaire suite la ncrose des myocytes cardiaques par ladministration disoprotrnol. Dernirement, on a identifi une sous-population de cellules nestine(+) dans le coeur normal du rat qui co-exprime les marqueurs de cellules cardiaques prognitrices Nkx-2.5 et GATA-4. Cette sous-population de cellules nestine/Nkx-2.5/GATA-4 pourrait reprsenter des substrats cellulaires qui puissent se diffrentier en cellules de type myocytes cardiaques nestine(+) suite une ischmie. Mots cls: nestine, isoprotrnol, ncrose, cellule souche, cellule prognitrice, myocyte cardiaque
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Il y a 4 isoforme de p38 : , , , and . MK5, l'origine identifi comme tant un rgulateur de PRAK (Regulated/Activated Protein Kinase), est maintenant connu pour tre active par la protine kinase p38 (qui est un mitogne activ par la protine kinase, MAPK). Cette dernire est implique dans les mcanismes de fibrose et d'apoptose pendant l'hypertrophie cardiaque. De plus, MK5 est galement active par les MAPKs atypiques; ERK3 et ERK4. Bien quelles soient fortement exprimes dans le coeur, le rle physiologique de MK5 et ERK3 demeure inconnu. Par consquent, nous avons tudi l'effet de la constriction aortique transversale (TAC) induisant un surcharge chronique de pression chez les souris htrozygotes knockout pour MK5 (MK5+/-) ou ERK3 (ERK3+/-) et pour leurs types sauvages (MK5+/+ et ERK3+/+). Deux sem post-TAC; le ratio de poids du coeur/poids corporel a t augment chez les 2 souris MK5+/- et MK5+/+. L'chocardiographie de la trans-thoracique dmontre que la surcharge de pression a altr la fonction diastolique du ventricule gauche chez MK5+/+, mais pas chez la souris MK5+/-. De plus, nous avons observ moins de dpt de collagne, valu par une coloration au trichrome de Masson, 2 et 3 sem post-TAC chez les souris MK5+/-. Paralllement, le niveau de lARNm de collagne type1 alpha-1 a t significativement diminu dans les coeurs des souris MK5+/-, 2 et 3 sem post-TAC. De mme, ERK3, mais pas ERK5 ni p38, co-IP avec MK5 dans les 2 modles des coeurs TAC; aigus ou chroniques. En revanche, lajout exognique de GST-MK5 a abaiss ERK4 et p38, mais pas ERK3 dans les lystes de coeur de souris. Par contre, GST-ERK3 et GST-p38 ne dmontrent aucune co-IP avec MK5. Ces donnes suggrent que dans le coeur seul ERK3, et non ERK4 ou p38, est capable dinteragir avec, et rguler MK5. A niveau physiologique MK5 interagit entirement avec ERK3 et par consquent MK5 nest pas disponible pour lier les protines exogniques. Les souris htrozygotes pour ERK3 (ERK3+/-) ont galement dmontr une rduction ou une absence de collagne et une faible expression dARNm du collagne type1 alpha1, 3 sem post-TAC. Ces rsultats dmontrent un important rle pro-fibrotique de la signalisation MK5-ERK3 pendant une surcharge chronique de pression.Nous avons galement dmontr 5 variant d'pissage de (MK5.1-5), y compris la forme originale (MK5.1). MK5.2 et MK5.5 subissent une dltion de 6 paires de base dans lexon 12 : MK5.3 manque l'exon 12 : MK5.4 et MK5.5 manquent les exons 2-6. L'expression des ARNm des diffrents variant d'pissage a t vrifie par PCR en temps rel (qPCR). Bien que lexpression est ubiquitaire, l'abondance relative de chaque variant tait tissu-spcifique (coeur, rein, pancras, muscle squelettique, poumon, foie, et cerveau). En plus, l'abondance relative des variant dpissage varie pendant la surcharge de pression et le dveloppement postnatal du coeur. En outre, l'immunofluorescence a indiqu que MK5.1-5.3 se localise au noyau alors que MK5.4-5.5 est situ au niveau cytoplasmic dans les cellules HEK 293 non stimules. Suite une stimulation avec l'anisomycin, un activateur de p38 MAPK, MK5.1-5.3 se translocalise du noyau au cytoplasme alors quune petite fraction de MK5.4-5.5 translocalise vers le noyau. Ces variant d'pissage peuvent diversifier la signalisation de MK5-ERK3 dans coeur, mais leur rle exact oblige des recherches supplmentaires. Except lisoforme , toutes les isoformes de p38 sont exprimes dans le coeur et la forme est considre comme tant l'isoforme dominante. Lanalyse par qPCR et immunobuvardage de type western ont dmontr que p38 et p38 sont les deux isoformes prdominantes alors que p38 et p38 sont exprimes aux mmes niveaux dans le coeur de rat adulte. L'immunofluorescence a dmontr que p38 et p38 se trouvent dans le cytoplasme et le noyau. Cependant, suite la surcharge par TAC, p38 s'est accumul dans noyau tandis que la distribution de p38 est demeure inchange. Ainsi, l'abondance de p38 et sa translocalisation nuclaire suite la surcharge de pression indique un rle potentiel dans l'expression gnique pendant le remodelage cardiaque. En conclusion, nous avons mis en vidence pour la premire fois un rle pro-fibrotique pour la signalisation MK5-ERK3 pendant une surcharge chronique de pression. D'ailleurs, les niveaux comparables d'expression de p38 avec p38, et la localisation diffrentielle de p38 pendant la surcharge aigu ou chronique de pression suggrent diffrents rles possibles pour ces isoformes pendant le remodelage hypertrophique cardiaque.
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Mmoire numris par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Universit de Montral
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Contexte: La cardiopathie ischmique (IHD) reste une cause majeure de mortalit en Amrique du Nord. La thrapie cellulaire cardiaque (CCT) a merg comme une thrapie prometteuse pour aider gurir certaines malades cardiaques. Parmi les cellulaires avec proprits pluripotentes, les cellules stromales msenchymateuses (MSC) sont prometteuses. Cependant, plusieurs questions demeurent non rsolues et certaines dfis empchent l'application clinique de la CCT se dans l'IHD, tels que le faible taux de rtention cellulaire in situ, le suivi des cellules in vivo post-implantation et post-acheminements et l`apoptose. Ici, le traitement prliminaire des MSC avec des facteurs de croissance et leur couplage avec des nanoparticules (NP) seront tudis comme des mthodes pour optimiser MSC. Mthodes: Des MSCs provenant du rat (rMSC) et du cochon (pMSC) ont t isols partir de moelle osseuse. Les rMSC ont t prconditionnes avec SDF-1a, TSG-6 et PDGF-BB, et ensuite soumises une hypoxie, une privation de srum et a un stress oxydatif. Des tudes de cicatrisation ont galement t effectus avec rMSCs prconditionnes. En parallle, de nouvelles NP ferromagntiques lies aux silicones ont t synthtises. Les NPs ont t couples aux pMSCs suivant leur fonctionnalisation avec l`anticorps, CD44, un antigne de surface du MSC bien connu. Par la suite, les tudes de biocompatibilit ont t ralises sur pMSC-NP et en incluant des tests des processus cellulaires tels que la migration, l'adhsion, la prolifration et les proprits de la diffrenciation. Rsultats: Parmi toutes les cytokines testes, PDGF-BB a dmontr la plus grande capacit amliorer la survie de MSC dans des conditions d'hypoxie, de privation de srum et en reponse au stress oxydatif. La conjugaison de NP a attnu la migration et la prolifration des pMSCs, mais n`a pas chang leur capacit de diffrenciation. Enfin, la complexe du MSC-NP est dtectable par IRM. Conclusion: Nos donnes suggrent que de nouvelles stratgies, telles que traitement prliminaire de PDGF-BB et le couplage des nanoparticules ferromagntiques, peuvent tre considrs comme des avenues prometteuse pour optimiser les MSCs pour la CCT.
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La fibrillation auriculaire (FA) est le trouble du rythme le plus frquemment observ en pratique clinique. Elle constitue un risque important de morbi-mortalit. Le traitement de la FA reste un dfi majeur en lien avec les nombreux effets secondaires associs aux approches thrapeutiques actuelles. Dans ce contexte, une meilleure comprhension des mcanismes sous-jacents la FA est essentielle pour le dveloppement de nouvelles thrapies offrant un meilleur rapport bnfice/risque pour les patients. La FA est caractrise par i) un remodelage lectrique dltre associ le plus souvent ii) un remodelage structurel du myocarde favorisant la rcurrence et le maintien de larythmie. La diminution de la priode rfractaire effective au sein du tissu auriculaire est un lment clef du remodelage lectrique. Le remodelage structurel, quant lui, se manifeste principalement par une fibrose tissulaire qui altre la propagation de linflux lectrique dans les oreillettes. Les mcanismes molculaires impliqus dans la mise en place de ces deux substrats restent mal connus. Rcemment, le rle des microARNs (miARNs) a t point du doigt dans de nombreuses pathologies notamment cardiaques. Dans ce contexte les objectifs principaux de ce travail ont t i) d'acqurir une comprhension approfondie du rle des miARNs dans la rgulation de lexpression des canaux ioniques et ii) de mieux comprendre le rle de ces molcules dans linstallation dun substrat favorable a la FA. Nous avons, dans un premier temps, effectu une analyse bio-informatique combine des approches exprimentales spcifiques afin didentifier clairement les miARNs dmontrant un fort potentiel de rgulation des gnes codant pour lexpression des canaux ioniques cardiaques humains. Nous avons identifi un nombre limit de miARNs cardiaques qui possdaient ces proprits. Sur la base de ces rsultats, nous avons dmontr que laltration de l'expression des canaux ioniques, observe dans diverse maladies cardiaques (par exemple, les cardiomyopathies, lischmie myocardique, et la fibrillation auriculaire), peut tre soumise ces miARNs suggrant leur implication dans larythmognse. La rgulation du courant potassique IK1 est un facteur dterminant du remodelage lectrique auriculaire associe la FA. Les mcanismes molculaires sous-jacents sont peu connus. Nous avons mis lhypothse que l'altration de lexpression des miARNs soit corrle laugmentation de lexpression dIK1 dans la FA. Nous avons constat que lexpression de miR-26 est rduite dans la FA et quelle rgule IK1 en modulant lexpression de sa sous-unit Kir2.1. Nous avons dmontr que miR-26 est sous la rpression transcriptionnelle du facteur nuclaire des lymphocytes T activs (NFAT) et que lactivit accrue de NFATc3/c4, aboutit une expression rduite de miR-26. En consquence IK1 augmente lors de la FA. Nous avons enfin dmontr que linterfrence in vivo de miR-26 influence la susceptibilit la FA en rgulant IK1, confirmant le rle prpondrant de miR-26 dans le remodelage auriculaire lectrique. La fibrose auriculaire est un constituant majeur du remodelage structurel associ la FA, impliquant l'activation des fibroblastes et linflux cellulaire du Ca2 +. Nous avons cherch dterminer i) si le canal permable au Ca2+, TRPC3, jouait un rle dans la fibrose auriculaire en favorisant l'activation des fibroblastes et ii) tudi le rle potentiel des miARNs dans ce contexte. Nous avons dmontr que les canaux TRPC3 favorisent linflux du Ca2 +, activant la signalisation Ca2 +-dpendante ERK et en consquence activent la prolifration des fibroblastes. Nous avons galement dmontr que lexpression du TRPC3 est augmente dans la FA et que le blocage in vivo de TRPC3 empche le dveloppement de substrats relis la FA. Nous avons par ailleurs valid que miR-26 rgule les canaux TRPC3 en diminuant leur expression dans les fibroblastes. Enfin, nous avons montr que l'expression rduite du miR-26 est galement due lactivit augmente de NFATc3/c4 dans les fibroblastes, expliquant ainsi laugmentation de TRPC3 lors de la FA, confirmant la contribution de miR-26 dans le processus de remodelage structurel li la FA. En conclusion, nos rsultats mettent en vidence l'importance des miARNs dans la rgulation des canaux ioniques cardiaques. Notamment, miR-26 joue un rle important dans le remodelage lectrique et structurel associ la FA et ce, en rgulant IK1 et lexpression du canal TRPC3. Notre tude dmasque ainsi un mcanisme molculaire de contrle de la FA innovateur associant des miARNs. miR-26 en particulier reprsente apres ces travaux une nouvelle cible thrapeutique prometteuse pour traiter la FA.
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Le mecanisme biologique responsable pour laugmentation de lexpression de la proteine nestin dans les cellules souches neurales (CSN) du cur apres un infarctus du myocarde (IM) demeure inconnu. Des etudes anterieures ont demontre que le traitement au dexamethasone, un glucocorticoide aux proprietes anti-inflammatoires, abolit la regulation positive de nestin apres un IM. Ceci suggere un lien avec la reponse inflammatoire. Nous avons verifie dans cette etude lhypothese que la cytokine inflammatoire interleukin-1beta (IL-1beta) peut modifier le phenotype de cellules souches neurales. Le deuxieme objectif de letude fut detablir limpact, suivant un IM, de linhibition de la signalisation de IL-1beta sur la fonction et la guerison cardiaque. Suite a une ligature complete de lartere coronaire du rat male, le dysfonctionnement contractile du ventricule gauche fut associe a une regulation positive de la proteine nestin dans le myocarde non-infarci. Le traitement avec Xoma 052 (1 mg/kg), un anticorps anti-IL-1beta, 24h, 7 et 14 jours apres un evenement ischemique, eu aucun effet sur la taille de linfarctus ou la contractilite du ventricule gauche. De plus, le traitement avec Xoma 052 apres un IM na pu supprimer laugmentation de lexpression de nestin et Bcl-2 malgre une reduction modeste du niveau de la proteine Bax. Pour determiner directement le role de la reponse inflammatoire en labsence dischemie, nous avons injecte des rats males avec du LPS (10mg/kg, 18hrs). Dans le coeur du rat-LPS, nous avons note une augmentation significative du niveau dARNm de IL-1beta et de lexpression de la proteine nestin. Le pretraitement avec 10mg/kg de Xoma 052 a aboli laugmentation de lexpression de nestin dans le coeur des rats-LPS. Ces observations indiquent que les cellules souches neurales pourraient representer une cible potentielle de lIL-1beta.
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Nurse Managers need today more than ever instruments that can be used to justify the billions of dollars that are invested in the healthcare sector annually. The objective of the study was to establish the validity and reliability of the Nursing Intensity Critical Care Questionnaire (NICCQ) in a cardiac surgery intensive care unit (CSICU) of a tertiary hospital. An expert panel evaluated the questionnaires content validity while generalizability theory was used to estimate the G and D coefficients. Decision studies enabled the investigators to determine if the current ward functioning of having one nurse rate one patient is adequate. Also, exploratory factorial analyses (EFA) preceded by principal component analyses (PCA) looked at establishing the factorial structure for the NICCQ. Finally, the NICCQ was correlated with a severity of illness score known as the Acute Physiology And Chronic Health Evaluation II (APACHE II) to estimate the correlation between patient illness and nursing intensity of care. The NICCQ was used by nurses using a sample of patients who had undergone cardiac surgery and were hospitalized on a CSICU of a tertiary teaching hospital. A convenience sample of nurses and patients on the CSICU was used to reflect the procedures and usual functioning of the unit. Each item on the questionnaire measured nursing intensity of care using a three point ordinal scale (Light, Moderate, and Severe) for the first 11 items, and a five point ordinal scale for the global assessment item (including the intermediate categories light/moderate and moderate/severe). The questionnaire proved to be both valid and able to be generalized to all nurses working in the CSICU. Overall results showed that 94.4% of the item generalizability coefficients indicated acceptable to excellent reliability, with most (86.1%) being larger than .90. The EFA established a simple 4 factor structure that explained little of the variance (32%). A correlation coefficient of 0.36 indicated that patient severity of illness is somewhat correlated with nursing intensity of care. The study showed that the NICCQ is a valid questionnaire with a generalizability coefficient that is large enough to be used by nurses managers for administrative purposes. Further research using larger samples would be needed to further test the factor structure of the NICCQ.
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La moxonidine, un mdicament antihypertenseur sympatholytique de type imidazolinique, agit au niveau de la mdulla du tronc crbral pour diminuer la pression artrielle, suite lactivation slective du rcepteur aux imidazolines I1 (rcepteur I1, aussi nomm nischarine). Traitement avec de la moxonidine prvient le dveloppement de lhypertrophie du ventricule gauche chez des rats hypertendus (SHR), associ une diminution de la synthse et une lvation transitoire de la fragmentation dADN, des effets antiprolifratifs et apoptotiques. Ces effets se prsentent probablement chez les fibroblastes, car lapoptose des cardiomyocytes pourrait dtriorer la fonction cardiaque. Ces effets apparaissent aussi avec des doses non hypotensives de moxonidine, suggrant lexistence deffets cardiaques directes. Le rcepteur I1 se trouv aussi dans les tissus cardiaques; son activation ex vivo par la moxonidine stimule la libration de lANP, ce qui montre que les rcepteurs I1 cardiaques sont fonctionnels malgr labsence de stimulation centrale. Sur la base de ces informations, en plus du i) rle des peptides natriurtiques comme inhibiteurs de lapoptose cardiaque et ii) des tudes qui lient le rcepteur I1 avec la maintenance de la matrix extracellulaire, on propose que, part les effets sympatholytiques centrales, les rcepteurs I1 cardiaques peuvent contrler la croissance-mort cellulaire. Lactivation du rcepteur I1 peut retarder la progression des cardiopathies vers la dfaillance cardiaque, en inhibant des signaux mal adaptatifs de prolifration et apoptose. Des tudes ont t effectues pour : 1. Explorer les effets in vivo sur la structure et la fonction cardiaque suite au traitement avec moxonidine chez le SHR et le hamster cardiomyopathique. 2. Dfinir les voies de signalisation impliques dans les changements secondaires au traitement avec moxonidine, spcifiquement sur les marqueurs inflammatoires et les voies de signalisation rgulant la croissance et la survie cellulaire (MAPK et Akt). 3. Explorer les effets in vitro de la surexpression et lactivation du rcepteur I1 sur la survie cellulaire dans des cellules HEK293. 4. Rechercher la localisation, rgulation et implication dans la croissance-mort cellulaire du rcepteur I1 in vitro (cardiomyocytes et fibroblastes), en rponse aux stimuli associs au remodelage cardiaque : norpinephrine, cytokines (IL-1, TNF-) et oxydants (H2O2). Nos tudes dmontrent que la moxonidine, en doses hypotensives et non-hypotensives, amliore la structure et la performance cardiaque chez le SHR par des mcanismes impliquant linhibition des cytokines et des voies de signalisation p38 MAPK et Akt. Chez le hamster cardiomyopathique, la moxonidine amliore la fonction cardiaque, module la rponse inflammatoire/anti-inflammatoire et attnue la mort cellulaire et la fibrose cardiaque. Les cellules HEK293 surexprimant la nischarine survivent et prolifrent plus en rponse la moxonidine; cet effet est associ linhibition des voies ERK, JNK et p38 MAPK. La surexpression de la nischarine protge aussi de la mort cellulaire induite par le TNF-, lIL-1 et le H2O2. En outre, le rcepteur I1 sexprime dans les cardiomyocytes et fibroblastes, son activation inhibe la mort des cardiomyocytes et la prolifration des fibroblastes induite par la norpinephrine, par des effets diffrentiels sur les MAPK et lAkt. Dans des conditions inflammatoires, la moxonidine/rcepteur aux imidazolines I1 protge les cardiomyocytes et facilite llimination des myofibroblastes par des effets contraires sur JNK, p38 MAPK et iNOS. Ces tudes dmontrent le potentiel du rcepteur I1/nischarine comme cible anti-hypertrophique et anti-fibrose niveau cardiaque. Lidentification des mcanismes cardioprotecteurs de la nischarine peut amener au dveloppement des traitements bass sur la surexpression de la nischarine chez des patients avec hypertrophie ventriculaire. Finalement, mme si leffet antihypertenseur des agonistes du rcepteur I1 centraux est salutaire, le dveloppement de nouveaux agonistes cardioslectifs du rcepteur I1 pourrait donner des bnfices additionnels chez des patients non hypertendus.
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La fibrillation auriculaire est le trouble du rythme le plus frquent chez l'homme. Elle conduit souvent de graves complications telles que l'insuffisance cardiaque et les accidents vasculaires crbraux. Un mcanisme neurogne de la fibrillation auriculaire mis en vidence. L'induction de tachyarythmie par stimulation du nerf mdiastinal a t propose comme modle pour tudier la fibrillation auriculaire neurogne. Dans cette thse, nous avons tudi l'activit des neurones cardiaques intrinsques et leurs interactions l'intrieur des plexus ganglionnaires de l'oreillette droite dans un modle canin de la fibrillation auriculaire neurogne. Ces activits ont t enregistres par un rseau multicanal de microlectrodes empal dans le plexus ganglionnaire de l'oreillette droite. L'enregistrement de l'activit neuronale a t effectu continument sur une priode de prs de 4 heures comprenant diffrentes interventions vasculaires (occlusion de l'aorte, de la veine cave infrieure, puis de l'artre coronaire descendante antrieure gauche), des stimuli mcaniques (toucher de l'oreillette ou du ventricule) et lectriques (stimulation du nerf vague ou des ganglions stellaires) ainsi que des pisodes induits de fibrillation auriculaire. L'identification et la classification neuronale ont t effectues en utilisant l'analyse en composantes principales et le partitionnement de donnes (cluster analysis) dans le logiciel Spike2. Une nouvelle mthode base sur l'analyse en composante principale est propose pour annuler l'activit auriculaire superpose sur le signal neuronal et ainsi augmenter la prcision de l'identification de la rponse neuronale et de la classification. En se basant sur la rponse neuronale, nous avons dfini des sous-types de neurones (affrent, effrent et les neurones des circuits locaux). Leur activit lie diffrents facteurs de stress nous ont permis de fournir une description plus dtaille du systme nerveux cardiaque intrinsque. La majorit des neurones enregistrs ont ragi des pisodes de fibrillation auriculaire en devenant plus actifs. Cette hyperactivit des neurones cardiaques intrinsques suggre que le contrle de cette activit pourrait aider prvenir la fibrillation auriculaire neurogne. Puisque la stimulation basse intensit du nerf vague affaiblit l'activit neuronale cardiaque intrinsque (en particulier pour les neurones affrents et convergents des circuits locaux), nous avons examin si cette intervention pouvait tre applique comme thrapie pour la fibrillation auriculaire. Nos rsultats montrent que la stimulation du nerf vague droit a t en mesure d'attnuer la fibrillation auriculaire dans 12 des 16 cas malgr un effet pro-arythmique dfavorable dans 1 des 16 cas. L'action protective a diminu au fil du temps et est devenue inefficace aprs ~ 40 minutes aprs 3 minutes de stimulation du nerf vague.
