Caracterização molecular da resistência a antimicrobianos em Escherichia coli produtoras de β-lactamases de espectro alargado isoladas em cães e estudo da partilha de clones bacterianos entre animais de companhia e coabitantes humanos

A pressão seletiva originada pelo uso excessivo de antimicrobianos na medicina humana e veterinária tem contribuído para a emergência de estirpes bacterianas multirresistentes, sendo os estudos mais escassos relativamente à sua presença nos animais de companhia. Porque os animais e os seus proprietários partilham o mesmo espaço habitacional, apresentando comportamentos de contacto próximo, existe uma hipótese elevada de transferência microbiana inter-espécie. Ante esta possibilidade é importante escrutinar o papel dos animais de companhia enquanto reservatórios de estirpes e de genes de resistência, bem como a sua envolvência na disseminação de estirpes bacterianas multirresistentes. Importa também, investigar o papel das superfícies e objetos domésticos partilhados por ambos, como potenciadores deste fenómeno. O objetivo deste trabalho foi, identificar o filogrupo e fazer a caracterização molecular dos genes que conferem resistência aos β-lactâmicos e às quinolonas, em quarenta isolados de Escherichia coli produtoras de β-lactamases de espectro alargado (ESBL), obtidas em zaragatoas fecais de cães consultados no Hospital Veterinário do ICBAS-UP. Complementarmente pretendeu-se inferir sobre a partilha de clones de Escherichia coli e Enterococcus spp. com elevadas resistências, em cinco agregados familiares (humanos e seus animais de companhia) assim como avaliar a potencial disseminação de estirpes multirresistentes no ambiente doméstico. Previamente foram recolhidas zaragatoas de fezes, pelo e mucosa oral dos animais e em alguns casos, dos seus proprietários, e ainda do ambiente doméstico. As zaragatoas foram processadas e as estirpes isoladas com base em meios seletivos. Foram realizados testes de suscetibilidade antimicrobiana de modo a estabelecer o fenótipo de resistência de cada isolado. O DNA foi extraído por varias metodologias e técnicas de PCR foram utilizadas para caracterização de filogrupos (Escherichia coli) e identificação da espécie (Enterococcus spp.). A avaliação da proximidade filogenética entre isolados foi efetuada por ERIC PCR e PFGE. No conjunto de quarenta isolados produtores de ESBL e/ou resistentes a quinolonas verificou-se que 47,5% pertenciam ao filogrupo A, havendo uma menor prevalência do filogrupo D (25,0%), B1 (17,5%), e B2 (10,0%).A frequência de resistência nestes isolados é factualmente elevada, sendo reveladora de uma elevada pressão seletiva. Com exceção de dois isolados, os fenótipos foram justificados pela presença de β-lactamases. A frequência da presença de genes foi: 47% blaTEM, 34% blaSHV, 24% blaOXA , 18% blaCTX-M-15, 8% blaCTX-M-2, 3% blaCTX-M-9. Nos isolados resistentes às quinolonas verificou-se maioritariamente a presença de mutações nos genes cromossomais gyrA e parC, e em alguns casos a presença de um determinante de resistência mediado por plasmídeo – qnrS. Nos cinco “agregados familiares” (humanos e animais) estudados foi observada uma partilha frequente de clones de E. coli e Enterococcus faecalis com múltiplas resistências, isolados em fezes e mucosa oral de cães e gatos e fezes e mãos dos respetivos proprietários, evidenciando-se assim uma possível transferência direta entre coabitantes (agregados A, C, D, E). Ficou também comprovado com percentagens de similaridade genotípica superiores a 94% que essa disseminação também ocorre para o ambiente doméstico, envolvendo objetos dos animais e de uso comum (agregados A, E). Os resultados obtidos reforçam a necessidade de um uso prudente dos antimicrobianos, pois elevados padrões de resistências terão um impacto não só na qualidade de vida dos animais mas também na saúde humana. Adicionalmente importa sensibilizar os proprietários para a necessidade de uma maior vigilância relativamente às formas de interação com os animais, bem como para a adoção de medidas higiénicas cautelares após essa mesma interação.

Feedback regarding students initial pharmaceutical internship from the University of Medicine and Pharmacy, Cluj-Napoca

Introduction/Aims: The purpose of the study is to evaluate the perception of the organization, the development and the evaluation of the initial stage in the internship of students, in order to improve these activities and to establish the adequate objectives in accordance with the changes concerning the concept of modern pharmacy. Materials and methods: An online survey was made using Google Docs ® -Create Form extension. All results were accumulated and computed using Microsoft Excel ®. The questionnaire consisted of 11 questions, structured on several levels: the objectives and how they can be achieved, internship organization, the internship training (effective participation in specific activities and integration in the pharmaceutical activity), the assessment, the profile of tutor / pharmacy. The questionnaire was completed by students from the Faculty of Pharmacy, University of Medicine and Pharmacy "Iuliu Haţieganu" Cluj Napoca, Romania. Results and discussions. The study was conducted on 308 students (60% of all students from the study years II-IV. 90% of the respondents had actually participated in the internship, whilst 10% only formally participated in this activity. The main responsibilities of the students were: storage and reception of pharmaceutical products (94%, respectively 79%) and working with the receipts (57%). Most of the students appreciate that they were integrated into the work in the pharmacy, this being due largely pharmacist tutor, who expressed interest and ability in mentoring activities. They appreciated that the role of tutor requires 3-5 years of professional experience. In terms of the internship objectives, these should aim at applying the knowledge gained until the graduation year, but also familiarization with activities which might turn into applications for the coming years. 43% of students believe that only 25% of the theoretical knowledge was useful during the internship. 90 % of the total questioned considered useful to develop a practice guideline adapted to the year of study. Conclusions. The professional training of the future pharmacist’s students depends largely on experience gained by students during the internship activity. Feed-back from the students’ shows that they are aware of the usefulness of the internship, but believe the objectives must be updated and a better correlation between work in pharmacy and theoretical knowledge has to be made. A first step is to develop a practical guide adapted to each year of study. The involvement of the tutor pharmacist is also essential to the success of this activity

Actualities on Nuclear Medicine Applications in Sports Medicine

Aims: This paper aims to address some of the main possible applications of actual Nuclear Medicine Imaging techniques and methodologies in the specific context of Sports Medicine, namely in two critical systems: musculoskeletal and cardiovascular. Discussion: At the musculoskeletal level, bone scintigraphy techniques proved to be a mean of diagnosis of functional orientation and high sensibility compared with other morphological imaging techniques in the detection and temporal evaluation of pathological situations, for instance allowing the acquisition of information of great relevance in athletes with stress fractures. On the other hand, infection/inflammation studies might be of an important added value to characterize specific situations, early diagnose of potential critical issues – so giving opportunity to precise, complete and fast solutions – while allowing the evaluation and eventual optimization of training programs. At cardiovascular system level, Nuclear Medicine had proved to be crucial in differential diagnosis between cardiac hypertrophy secondary to physical activity (the so called "athlete's heart") and hypertrophic cardiomyopathy, in the diagnosis and prognosis of changes in cardiac function in athletes, as well as in direct - and non-invasive - in vivo visualization of sympathetic cardiac innervation, something that seems to take more and more importance nowadays, namely in order to try to avoid sudden death episodes at intense physical effort. Also the clinical application of Positron Emission Tomography (PET) has becoming more and more widely recognized as promising. Conclusions: It has been concluded that Nuclear Medicine can become an important application in Sports Medicine. Its well established capabilities to early detection of processes involving functional properties allied to its high sensibility and the actual technical possibilities (namely those related with hybrid imaging, that allows to add information provided by high resolution morphological imaging techniques, such as CT and/or MRI) make it a powerful diagnostic tool, claiming to be used on an each day higher range of clinical applications related with all levels of sport activities. Since the improvements at equipment characteristics and detection levels allows the use of smaller and smaller doses, so minimizing radiation exposure it is believed by the authors that the increase of the use of NM tools in the Sports Medicine area should be considered.

Image upsampling algorithms applied on Nuclear Medicine: comparision of hqnx and nxSaI algorithms families with two interpolation algorithms - nearest neighbour and bicubic interpolation

Introduction: Image resizing is a normal feature incorporated into the Nuclear Medicine digital imaging. Upsampling is done by manufacturers to adequately fit more the acquired images on the display screen and it is applied when there is a need to increase - or decrease - the total number of pixels. This paper pretends to compare the “hqnx” and the “nxSaI” magnification algorithms with two interpolation algorithms – “nearest neighbor” and “bicubic interpolation” – in the image upsampling operations. Material and Methods: Three distinct Nuclear Medicine images were enlarged 2 and 4 times with the different digital image resizing algorithms (nearest neighbor, bicubic interpolation nxSaI and hqnx). To evaluate the pixel’s changes between the different output images, 3D whole image plot profiles and surface plots were used as an addition to the visual approach in the 4x upsampled images. Results: In the 2x enlarged images the visual differences were not so noteworthy. Although, it was clearly noticed that bicubic interpolation presented the best results. In the 4x enlarged images the differences were significant, with the bicubic interpolated images presenting the best results. Hqnx resized images presented better quality than 4xSaI and nearest neighbor interpolated images, however, its intense “halo effect” affects greatly the definition and boundaries of the image contents. Conclusion: The hqnx and the nxSaI algorithms were designed for images with clear edges and so its use in Nuclear Medicine images is obviously inadequate. Bicubic interpolation seems, from the algorithms studied, the most suitable and its each day wider applications seem to show it, being assumed as a multi-image type efficient algorithm.

Nephrotoxicity effects of the wood preservative chromium copper arsenate on mice: histopathological and quantitative approaches

Chromium copper arsenate(CCA)was used for the protection of wood building material suntil the restriction by EPA in2002. During a short period of time 14–24h,a comparative nephrotoxicity study was performed regarding the effects of CCA and its compounds per se. Histopathological and histochemical features were correlated with the concentration of the total arsenic and chromium in mice kidney. Animals were subcutaneously injected with CCA(7.2mg/kg arsenic and 10.2mg/kg chromium per body weight), CrO3 (10.2 mg/kg),As2O5 (7.2 mg/kg)andNaCl(0.9%) per se. The histopathological examination of the renal sections evidenced acute tubular necrosis in the groups of animals exposed to CCA(in both periods of time). Although the same contents of pentavalent arsenic and hexavalent chromium were injected in treated animals with CCA and with the prepared solutions of As2O5 and CrO3, the arsenic concentration on kidneys of CCA-exposed animals was much higher than those in animals exposed to As2O5 (32- and28-fold higher at 14 and 24h,respectively). However,the elimination of chromium seems to occur similarly in the kidneys of animals treated with CCA and CrO3 per se. Interactions among the components of CCA result in a marked decrease of the ability of kidney to eliminate simultaneously both analytes.The nephrotoxicity of CCA was higher than its components per se, evidencing a possible synergetic effect.

A Veterinária, os Medicamentos e a Formação dos Profissionais de Farmácia

É cada vez mais proeminente abordarmos a temática da medicina veterinária devido à necessidade de formação dos profissionais e dos cuidados requeridos nas vertentes homem/animal/ambiente. Com o principal objetivo de conhecer se a base de formação dos profissionais de farmácia é suficiente e tem resultados na satisfação das necessidades de todos os utentes com animais, foi levantado um estudo de artigos já publicados sobre o tema e posteriormente um questionário online para possível comparação dos resultados com a realidade. Abordam-se temas como: intoxicações em animais, regulamentação sobre este tipo de medicamentos, aconselhamento e consumo de medicamentos veterinários, saúde pública, algumas terapias complementares e finalmente a formação dos profissionais de farmácia. Os resultados obtidos a nível da formação destes profissionais não foram os mais satisfatórios, embora este resultado no futuro possa ser melhorado visto que há interesse por parte dos inquiridos em obter formação sobre a área. Aplicou-se um estudo observacional, do tipo transversal e analítico. A população alvo são os profissionais de farmácia portugueses. Para a recolha destas informações foi utilizado um questionário online, anónimo, confidencial e voluntário a 400profissionais. A amostra é constituída maioritariamente por indivíduos do género feminino (75%), sendo a faixa etária mais frequente dos 23 aos 25 anos (41%). Verificou-se que mais de 70% dos profissionais trabalham num local onde se vendem medicamentos veterinários e embora apenas 21% tenha tido uma formação na área. É de notar que 69% sentiu dificuldades no preenchimento do questionário e 94% considera importante obter uma formação extra nesta área, principalmente em temáticas como medicação, prevenção de doenças e alimentação.