1 resultado para Clone
em Instituto Politécnico do Porto, Portugal
Resumo:
A presso seletiva originada pelo uso excessivo de antimicrobianos na medicina humana e veterinria tem contribudo para a emergncia de estirpes bacterianas multirresistentes, sendo os estudos mais escassos relativamente sua presena nos animais de companhia. Porque os animais e os seus proprietrios partilham o mesmo espao habitacional, apresentando comportamentos de contacto prximo, existe uma hiptese elevada de transferncia microbiana inter-espcie. Ante esta possibilidade importante escrutinar o papel dos animais de companhia enquanto reservatrios de estirpes e de genes de resistncia, bem como a sua envolvncia na disseminao de estirpes bacterianas multirresistentes. Importa tambm, investigar o papel das superfcies e objetos domsticos partilhados por ambos, como potenciadores deste fenmeno. O objetivo deste trabalho foi, identificar o filogrupo e fazer a caracterizao molecular dos genes que conferem resistncia aos -lactmicos e s quinolonas, em quarenta isolados de Escherichia coli produtoras de -lactamases de espectro alargado (ESBL), obtidas em zaragatoas fecais de ces consultados no Hospital Veterinrio do ICBAS-UP. Complementarmente pretendeu-se inferir sobre a partilha de clones de Escherichia coli e Enterococcus spp. com elevadas resistncias, em cinco agregados familiares (humanos e seus animais de companhia) assim como avaliar a potencial disseminao de estirpes multirresistentes no ambiente domstico. Previamente foram recolhidas zaragatoas de fezes, pelo e mucosa oral dos animais e em alguns casos, dos seus proprietrios, e ainda do ambiente domstico. As zaragatoas foram processadas e as estirpes isoladas com base em meios seletivos. Foram realizados testes de suscetibilidade antimicrobiana de modo a estabelecer o fentipo de resistncia de cada isolado. O DNA foi extrado por varias metodologias e tcnicas de PCR foram utilizadas para caracterizao de filogrupos (Escherichia coli) e identificao da espcie (Enterococcus spp.). A avaliao da proximidade filogentica entre isolados foi efetuada por ERIC PCR e PFGE. No conjunto de quarenta isolados produtores de ESBL e/ou resistentes a quinolonas verificou-se que 47,5% pertenciam ao filogrupo A, havendo uma menor prevalncia do filogrupo D (25,0%), B1 (17,5%), e B2 (10,0%).A frequncia de resistncia nestes isolados factualmente elevada, sendo reveladora de uma elevada presso seletiva. Com exceo de dois isolados, os fentipos foram justificados pela presena de -lactamases. A frequncia da presena de genes foi: 47% blaTEM, 34% blaSHV, 24% blaOXA , 18% blaCTX-M-15, 8% blaCTX-M-2, 3% blaCTX-M-9. Nos isolados resistentes s quinolonas verificou-se maioritariamente a presena de mutaes nos genes cromossomais gyrA e parC, e em alguns casos a presena de um determinante de resistncia mediado por plasmdeo qnrS. Nos cinco agregados familiares (humanos e animais) estudados foi observada uma partilha frequente de clones de E. coli e Enterococcus faecalis com mltiplas resistncias, isolados em fezes e mucosa oral de ces e gatos e fezes e mos dos respetivos proprietrios, evidenciando-se assim uma possvel transferncia direta entre coabitantes (agregados A, C, D, E). Ficou tambm comprovado com percentagens de similaridade genotpica superiores a 94% que essa disseminao tambm ocorre para o ambiente domstico, envolvendo objetos dos animais e de uso comum (agregados A, E). Os resultados obtidos reforam a necessidade de um uso prudente dos antimicrobianos, pois elevados padres de resistncias tero um impacto no s na qualidade de vida dos animais mas tambm na sade humana. Adicionalmente importa sensibilizar os proprietrios para a necessidade de uma maior vigilncia relativamente s formas de interao com os animais, bem como para a adoo de medidas higinicas cautelares aps essa mesma interao.
