3 resultados para Gd3 chelates
em Repositório Científico do Instituto Politécnico de Lisboa - Portugal
Resumo:
The aim of this work was to devise a one-step purification procedure for monoclonal antibodies (MAbs) of IgG class by immobilized metal affinity chromatography (IMAC). Therefore, several stationary phases were prepared containing immobilized metal chelates in order to study the chromatographic behaviour of MAbs against wild-type amidase from Pseudomonas aeruginosa. Such MAbs adsorbed to Cu(II), Ni(II), Zn(II) and Co(II)-IDA agarose columns. The increase in ligand concentration and the use of longer spacer arms and higher pH values resulted in higher adsorption of MAbs into immobilized metal chelates. The dynamic binding capacity and the maximum binding capacity were 1.33 +/- 0.015 and 3.214 +/- 0.021 mg IgG/mL of sedimented commercial matrix, respectively. A K(D) of 4.53 x 10(-7) M was obtained from batch isotherm measurements. The combination of tailor-made stationary phases of IMAC and the correct selection of adsorption conditions permitted a one-step purification procedure to be devised for MAbs of IgG class. Culture supernatants containing MAbs were purified by IMAC on commercial-Zn(II) and EPI-30-IDA-Zn(II) Sepharose 6B columns and by affinity chromatography on Protein A-Sepharose CL-4B. This MAb preparation revealed on SDS-PAGE two protein bands with M(r) of 50 and 22 kDa corresponding to the heavy and light chains, respectively. Copyright (C) 2011 John Wiley & Sons, Ltd.
Resumo:
A investigao de novos compostos macrocclicos tetraaza tem sido intensificada ao longo das ltimas dcadas, uma vez que estes esto entre os melhores ligandos para complexao de ies metlicos. Desta forma, tanto a sntese destes compostos, como as propriedades dos seus complexos com ies metlicos provocaram o seu crescente interesse em variadssimas reas, das quais so exemplo a medicina, a biologia, a catlise, e a qumica analtica. Procuram-se ligandos especficos para determinados ies metlicos, mas que ao mesmo tempo se preparem por processos de sntese simples e eficazes que permitam uma maior utilizao ao nvel industrial. Com este trabalho procurou-se dar continuidade aos estudos desenvolvidos nesta rea desde 1980 pelo grupo de investigao onde me encontro inserida e assim obter ligandos novos com vista formao de complexos com ies metlicos estveis e aplicveis ao nvel da medicina e da farmacologia, com destaque para as aplicaes relacionadas com o diagnstico e a terapia de tumores. Assim, foram sintetizados quatro novos ligandos derivados de macrociclos tetraaza com 12 tomos no anel, dois deles com ponte cruzada curta tipo etano. A sntes baseou-se na funcionalizao destes macrociclos com braos pendentes metilnitrofenol ou metilfenol, originando assim os seguintes compostos: cb-do2nph, do2nph, cb-do2ph e do do2ph. Todos os compostos sintetizados foram caracterizados por diversas tcnicas analticas. Os compostos cb-do2nph e do2nph mostraram reduzida solubilidade em gua e em metanol:gua, pelo que no foi possvel a determinao de constantes por potenciometria. Preparam-se alguns complexos que se estudaram em soluo por espectroscopia electrnica e no estado slido por difraco de raios X. O composto do2ph s se obteve em pequena quantidade sem revelar a pureza necessria e, a sua sntese ainda ter de ser optimizada. Finalmente, o composto cb-do2ph foi sintetizado em quantidade suficiente para se poderem determinar as suas constantes de protonao e as constantes de estabilidade dos seus complexos com Cu 2+ e Zn 2+, pelo mtodo potenciomtrico, em soluo aquosa, temperatura de 298,2 K e fora inica 0,10M em N(CH 3)4NO3. Determinaram-se ainda por potenciometria as constantes de protonao bem como as constantes de estabilidade dos complexos com Mg2+, Cu2+, Zn 2+, Fe3+, Ga3+, In3+, Gd3+, do composto cbdbf-do2a, igualmente em soluo aquosa, temperatura de 298,2K e fora inica 0,10M em N(CH 3)4NO3. Para ambos os compostos, cb-do2ph e cbdbf-do2a, recorreu-se a titulaes por espectroscopia de RMN de 1H para a determinao da primeira constante, por esta ter um valor muito elevado (log K1 14), ou seja, estes compostos comportaram-se como esponjas de proto. Para obter informaes estruturais dos complexos de alguns ligandos com cobre (II) realizaram-se estudos por espectroscopia de absoro de UV-Vis e de RPE, tendo-se ainda obtido cristais de tamanho suficiente para a determinao de estruturas por difraco de raios X de alguns compostos e complexos de cobre (II) e Zinco(II).
Resumo:
Trabalho Final de Mestrado para obteno do grau de Mestre em Engenharia Qumica e Biolgica
