40 resultados para Augusto dos Anjos


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Dissertação mest., Biotecnologia, Universidade do Algarve, 2010

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Disssertação de mest., Estudos Marinhos e Costeiros, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Univ. do Algarve, 2010

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Dissertação de mest., Arquitectura Paisagista, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Univ. do Algarve, 2011

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The production and puriWcation of gilthead sea bream recombinant parathyroid hormone related protein [sbPTHrP(1–125)] using an Escherichia coli system and one step puriWcation process with continuous elution gel electrophoresis is reported. The cDNA encoding sbPTHrP(1–125) was cloned into a prokaryotic expression vector pET-11a. The recombinant plasmid was used to transfect E. coli BL21(DE3) pLysS and sbPTHrP(1–125) synthesis was induced by addition of 1mM isopropyl- -D-thiogalactopyranoside. The rapid one step isolation method gave pure sbPTHrP(1–125) as judged by SDS–PAGE and yielded up to 40mg/L of culture medium (3.3mg protein/g of bacteria). The bioactivity of recombinant sbPTHrP(1–125) assessed using an in vitro scale bioassay was found to be equipotent to PTHrP(1–34) in stimulating cAMP accumulation. Assessment of the immunological reactivity of the isolated protein by Western blot revealed it cross-reacts with antisera speciWc for the N-terminal and C-terminal region of PTHrP. In a radioimmunoassay speciWc for piscine N-terminal (1–34 aa) PTHrP, the recombinant sbPTHrP(1–125) was equipotent with PTHrP(1–34) in displacing labelled 125I-PTHrP(1–36) PTHrP from the antisera. The availability of recombinant sbPTHrP will allow the development of region speciWc assays and studies aimed at deWning post-secretory processing of this protein and its biological activity in Wsh.

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Dissertação de mest., Recursos Hídricos, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Univ. do Algarve, 2011

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Whole animal studies have indicated that Ca2+ uptake by the gastrointestinal tract is regulated by the action of parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) in teleost fish. We have characterised PTH receptors (PTHR) in piscine enterocytes and established, by using aminoterminal PTHrP peptides, the amino acid residues important for receptor activation and for stabilising the ligand/receptor complex. Ligand binding of 125I-(1–35tyr) PTHrP to the membrane fraction of isolated sea bream enterocytes revealed the existence of a single saturable high-affinity receptor (KD=2.59 nM; Bmax=71 fmol/mg protein). Reverse transcription/polymerase chain reaction with specific primers for sea bream PTH1R and PTH3R confirmed the mRNA expression of only the later receptor. Fugu (1–34) PTHrP increased cAMP levels in enterocytes but had no effect on total inositol phosphate accumulation. The aminoterminal peptides (2–34)PTHrP, (3–34)PTHrP and (7–34) PTHrP bound efficiently to the receptor but were severely defective in stimulating cAMP in enterocyte cells indicating that the first six residues of piscine (1–34)PTHrP, although not important for receptor binding, are essential for activation of the adenylate cyclase/phosphokinase A (AC-PKA)-receptor-coupled intracellular signalling pathway. Therefore, PTHrP in teleosts acts on the gastrointestinal tract through PTH3R and the AC-PKA intracellular signalling pathway and might regulate Ca2+ uptake at this site. Ligand-receptor binding and activity throughout the vertebrates appears to be allocated to the same amino acid residues of the amino-terminal domain of the PTHrP molecule.

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Duas partes substantivas dividem o presente relatório: i) o estudo de uma prática teatral específica, sustentada numa pedagogia de natureza genética e consubstanciado na cocriação de um projeto teatral coletivo; ii) o estudo de um vocabulário específico, consubstanciado na redação de verbetes a partir da obra de alguns mestres de teatro contemporâneo e da minha própria experimentação. Através da prática teatral baseada no princípio geral da autenticidade pude chegar à compreensão e visão concreta de que o teatro é uma estética, uma técnica e uma ética ligadas entre si de forma interdependente, que um ator só aprende a amar o teatro quando chega a ser capaz de se autorrevelar e que um ator só se autorrevela quando é capaz de se entregar sem reservas à cocriação com os outros e com o público. Pelo estudo e redação dos verbetes compreendemos que o teatro é uma arte que acontece sempre no presente e que tanto a alma quanto a estética teatral subsistem na capacidade de o ator estar totalmente presente em cena, de tal modo que o inebriamento dionisíaco acontece apenas sob esta condição e, sem esta condição, ou quando esta condição se rompe, quebra-se o equilíbrio entre o dionisíaco e a racionalidade apolínea que acompanha a atuação.

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In this work, a comprehensive review on automatic analysis of Proteomics and Genomics images is presented. Special emphasis is given to a particularly complex image produced by a technique called Two-Dimensional Gel Electrophoresis (2-DE), with thousands of spots (or blobs). Automatic methods for the detection, segmentation and matching of blob like features are discussed and proposed. In particular, a very robust procedure was achieved for processing 2-DE images, consisting mainly of two steps: a) A very trustworthy new approach for the automatic detection and segmentation of spots, based on the Watershed Transform, without any foreknowledge of spot shape or size, and without user intervention; b) A new method for spot matching, based on image registration, that performs well for either global or local distortions. The results of the proposed methods are compared to state-of-the-art academic and commercial products.

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Neste trabalho analisamos os acontecimentos de vida stressantes e/ou negativos experienciados por adolescentes imigrantes e nativos portugueses. Foram inquiridos 537 adolescentes, 179 imigrantes e 358 nativos. Para a avaliação das variáveis em estudo foi utilizado o Inventário de Acontecimentos de Vida Stressantes e ainda um questionário para recolha de dados sóciodemográficos a serem preenchidos pelos Adolescentes. Os resultados obtidos sugerem que na amostra total, os acontecimentos de vida stressantes (AVS) mais recorrentes foram a mudança de colegas de turma e a morte de um familiar, enquanto os AVS com maior impacto foram a morte de um familiar e a doença de um familiar. Os acontecimentos de vida stressantes mais frequentes nos adolescentes nativos foram a mudança de colegas de turma, a morte de um familiar e a mudança de escola. Os AVS relatados pelos adolescentes nativos como tendo maior impacto negativo foram a morte e a doença de um familiar. Por sua vez, nos adolescentes imigrantes, os AVS mais frequentes foram a mudança de colegas de turma e a mudança de casa. De igual modo, no que se refere ao impacto dos acontecimentos vitais reportado por estes adolescentes (i.e., morte e doença de algum familiar), este foi semelhante ao dos nativos. Relativamente ao número de AVS, os nativos reportaram um número de eventos mais elevado, todavia, os AVS que os imigrantes experienciaram foram reportados como tendo um maior impacto negativo, comparativamente com o experienciado pelos nativos. Contudo, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre o grupo de adolescentes nativos e grupo de adolescentes imigrantes relativamente quer ao número de AVS, quer ao seu impacto negativo.

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Localizada na parte sul da costa da Galiza, a ria de Arousa, tem um interesse particular devido à sua importante indústria de exploração de marisco, especialmente culturas de bivalves. O crescimento, qualidade e mortalidade destes bivalves não só são afetados por possíveis incidentes de poluição, mas também por episódios de grande run-off, que podem produzir decréscimos sazonais significativos de salinidade. Neste contexto, a presente dissertação pretende contribuir para uma melhor compreensão de como as plumas de água doce provenientes dos rios vão influenciar os gradientes de salinidade e temperatura no estuário da ria de Arousa. O objetivo é proceder a uma melhoria da previsão hidrodinâmica do modelo operacional oceanográfico desta ria, que é executado diariamente pela MeteoGalicia. Para atingir esse objectivo executaram-se simulações numéricas para diferentes cenários de forçamento. Foram escolhidos dois períodos com diferentes condições meteorológicas: um período de inverno, coincidindo com chuvas fortes e um período de verão, coincidindo com a ausência de precipitação. Foi aplicado o modelo hidrodinâmico MOHID (Hydrodynamic Model) para simular os processos físicos da ria de Arousa, utilizando a metodologia de modelos encaixados. O forçamento para a superfície foi imposto através do modelo atmosférico WRF (Weather Regional Forecast), que fornece as variáveis meteorológicas necessárias. Para fronteira terra, uma ferramenta hidrológica foi implementada, o modelo SWAT (Soil water Assessment Tool), este providencia as descargas de água doce para os principais rios da região. É feita neste trabalho uma descrição da implementação deste sistema, assim como a caracterização da área de estudo. Os resultados do modelo foram comparados com medidas provenientes de bóias oceanográficas e perfis de CTDs (Conductivity-Temperature-Depth instrument) em diferentes localizações.