中能碳离子束对不同贯穿深度上黑色素瘤B16细胞的辐照存活效应

测量了 4 9.30MeV u及经脊形过滤器展宽的Bragg峰的 74 .55MeV u12 C离子束在不同贯穿深度上辐射后黑色素瘤B16细胞的存活率。结果显示 ,以存活为终点的B16细胞生物学效应与碳离子束能量沉积同步增大 ,即Bragg或展宽的Bragg峰区内细胞存活率远低于离子束入射或出射通道处的细胞存活率。通过实验测量与剂量平均LET结合的线性平方模型理论计算存活曲线的比较 ,发现在实验测量误差范围内两者符合较好。提示 :剂量平均LET结合线性平方模型可能是预测中能重离子束贯穿深度上B16细胞存活效应的一种有效的方法

油菜素内酯信号转导相关基因的克隆、鉴定和功能分析

油菜素甾醇类(Brassinosteroids，BRs)是一类新的植物内源激素，在植物整个生长发育周期中发挥着很重要的作用。拟南芥中BR信号转导途径基本清晰，从膜受体BRI1到细胞质中的负调控因子BIN2，再到核内的转录因子BZR1和BES1。但是从BR信号感知到细胞质内的传递，再到细胞核内的调控特异基因的表达都还有很多问题有待于进一步的探索。 本研究运用激活标签pDSK15-11对大约5000株拟南芥bzr1-1D进行了转化, 得到抗性植株约50000株，构建了一个拟南芥激活标签突变体库，从中筛选到和BR相关的突变体七个，并对其中的B26和B16突变体进行了详细的分析。此外还筛选到若干个和BR没有关系的突变体，并对其中的一个表皮毛缺陷的突变体B11进行了分析。 B26是一株恢复了bzr1-1D茎叶处打弯表型的突变体，并且具有矮化、叶色深绿、晚花等特点。B26部分抑制了bzr1-1D对BR合成抑制剂BRZ的不敏感性，但仍然对BR超敏感。BR上调的基因SAUR-AC1在bzr1-1D中表达上升，而在B26突变体中SAUR-AC1的表达量比bzr1-1D中有所下降。B26突变体显示的表型是依赖于bzr1-1D突变的。我们通过T-DNA侧翼序列，RT-PCR，以及重现实验证实造成突变表型的基因，并命名为BZS1。BZS1编码一个B类锌指蛋白，在植物发育的各个时期各个器官中都有表达。亚细胞定位分析显示BZS1定位于细胞质和细胞核中，以上这些结果说明BZS1可能在BR信号途径中是位于BZR1的下游，作为一个负的调节因子调控下游BR反应基因的表达。 B16是从突变体库中筛选得到的一个叶柄明显增长，营养生长期延长，开花晚，结实率比较低的突变体。T-DNA侧翼序列和基因表达分析显示B16突变体中T-DNA插入点附近的一个基因表达量升高，这一基因被命名为BZE1。BZE1编码一个含有bHLH结构域的蛋白。BZE1 RNAi转基因植株的叶柄比对照明显变短，说明BZE1调控叶柄的伸长。在B16突变体中，CPD和DWF4的表达较bzr1-1D中增强了，而SAUR-AC1的表达减弱了，这一结果说明BZE1过表达减弱了BZR1对CPD的反馈抑制。Pro35S:BZE1 /bzr1-1D转基因植株对BRZ的敏感度与bzr1-1D相似。BR不调节BZE1的转录水平，却可以促进BZE1蛋白在核内积累。这些结果都说明BR处理不改变BZE1的转录水平，只是通过促进BZE1在核内的积累增加，从而参与调控下游基因的表达，如CPD。随着这些突变体研究的进一步深入，将有助于我们更好的理解BR信号转导途径。 B11是一个叶片（包括莲座叶和茎生叶）和茎表皮毛缺失，但根毛发育正常的突变体，T-DNA侧翼序列和基因表达分析显示B11突变体表型是由于ETL1的过量表达造成的。ETL1可能是一个表皮毛特异表达的基因，对根毛的发育影响不大。功能缺失突变体etl1-1和野生型拟南芥具有相似的表皮毛数量和分布，根毛的数量和分布也没有明显的变化，这就说明ETL1可能与其他同源基因功能冗余。ETL1在gl1中表达量增加，由此推测ETL1在表皮毛的发育中可能起负调控的作用。

乌头碱类生物碱及其中药配伍规律的电喷雾质谱研究

利用电喷雾串联质谱（ESI-MSn）系统地研究了乌头属植物和中药煎煮液中的乌头碱型生物碱的质谱行为。实验表明，ESI-MSn不仅是一种灵敏的药用植物中乌头生物碱的分析方法，也是研究中药配伍规律和阐释中药复方合理内涵的有效工具。低能诱导碰撞解离肠导下，具有乌头碱骨架类型的生物碱断裂规律相似：丢失C8乙酰基或长链脂肪酰基是它们在MSZ中的特征断裂，在MS3和MS4中丢失1-4CH3OH，1-3H2O，CO，BzOH，CH3（N）或C2H5（N）是其他所有可能的断裂方式，并且结构的微小差别也能在串联质谱中得到反映。利用这些规律分析了生附子、生草乌、生草乌花、生白山草乌和制雪上一支蒿中的生物碱，我们不仅发现所有已知的化合物，还部分表征了50余种新化合物，其中具有15C，17C，19C和ZOC饱和或不饱和脂肪酰基，以10-OH-中乌头碱和10-OH-乌头碱为骨架的脂碱以及三脂型脂碱为首次在乌头属植物中发现。该结果提出了脂类生物碱在乌头属植物中普遍存在的可能性。另一方面，我们发现中药煎煮液具有缓冲溶液的性质，酸性和糖是影响剧毒性双酯型生物碱水解的两个因素。在pH5.0-5.5和糖的存在下，大部分双酯型生物碱水解为苯甲酰单酯型生物碱，少部分被转为脂碱，在pH2.8到3.5之间（半夏等与附子禁用中药煎煮液的pH），双酯型生物碱十分稳定，既不水解，也不转为脂碱。这样，我们不仅解释了传统中医药配伍理论的合理内涵，也表明她可能．存在着不足。此外，脂碱难溶于水，大部分脂碱煎煮后仍残留在药材组织中。最后，为评价脂碱的抗癌效果，我们用在水相下合成了8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱，体外实验表明，0.001mg／ml的8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱对肝癌细胞SMMC-7721和黑色素瘤细胞B16即具有很强的杀伤作用，并且提示它们可能具有不同的作用机制。

菜花烙铁头蛇毒去整合素的纯化、克隆及活性研究

蛇毒去整合素蛋白（disintegrin）家族一般具有分子量低、富含半胧氨酸和含有RGD三肽等结构特点，因其能与配基竞争结合细胞表面的整合素受体，干扰整合素的正常功能而呈现出多方面的生物学活性，如抑制血小板聚集、抑制肿瘤转移和诱导细胞凋亡等。本论文用凝胶过滤、反向高压液相等层析技术从我国云南产菜花烙铁头（Trimeresurusjerdonii）蛇毒中分离纯化到两个新的去整合素蛋白，分别命名为jerdonin和Jerdonatin。MALDI-TOF-MS测定jerdonin分子量为7483Da，jerdonatin分子量为80llDa，二者均属第二类去整合素。分别测定了其N末端25个氨基酸序列，发现与其它蛇毒来源的去整合素具有很高的相似性。提取菜花烙铁头毒腺总mRNA，通过反转录PCR（RT-PCR）扩增到两个去整合素cDNA序列，分别命名为TJDIS-1和TJDIS-2。TJDIS-1全长1528bp，TJDIS-2全长16O3bp，二者均包含编码信号肚区、前肤区、金属蛋白酶区、间隔肤区和去整合素区一属于P一H型金属蛋白酶家族。经推导的氨基酸序列和MALDI一TOF一MS分析，可确定TJDIS-1去整合素区编码jerdonin，TJDIS-2去整合素区编码jerdonotin。jerdonin全长71个氨基酸，jerdonatin全长72个氨基酸，二者均含12个半眺氨酸，且在C末端附近均含有去整合素家族的典型特征三肤序列一RGD。氨基酸序列比较分析显示，jerdon加与来源于侏响尾蛇（Sistrurusm.tergeminus）的去整合素tergeminin序列相似性最高，为82.2％。而jertionatin与来源于黄绿烙铁头（Trimeresurusflavoviridis）的去整合素CTF-I序列相似性最高，为97.2％，仅在RGD附近有两个氨基酸不同。jerdonin与jerdonatin序列相似性为67.6％。本论文还研究了jedonin和jerdonatin的生物学活性。二者均能强烈抑制ADP、胶原、凝血酶诱导的人血小板的聚集，IC50为100-300nM。jerdonin和jerdonatin还能够抑制B16肿瘤细胞增生，研究表明，jerdonin不仅能显著抑制肿块的生长，还能延长荷瘤小鼠的寿命。平均肿块体积由对照的5260．33枷，降低至2086.65mm3，小鼠平均寿命由对照的24.8天延长至30.5天，提高了22.98％。本论文也研究了jerdonin和jedonatin对小鼠精卵受精过程的影响，结果表明jordonotin能够呈剂量关系抑制精卵结合，但对精卵融合无影响。当jerdonatin用量为10.0μg／毗时，单个卵子的精子结合数由对照的95.31降为21.83。菜花烙铁头蛇毒去整合素蛋白的结构和活性鉴定，为去整合素家族的生物多样性研究提供了丰富的素材，同时也为血栓、肿瘤、生殖等生理或病理过程的研究提供了一个有力的工具。

重离子辐射提高腺病毒介导小鼠黑色素瘤细胞转染率的研究

探讨12C6+离子束辐射对用带有绿色荧光蛋白基因的缺陷性腺病毒(AdCMV-GFP)转染小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞系)的影响。采用不同剂量的12C6+重离子束辐射经AdCMV-GFP转染的B16细胞,利用流式细胞仪检测腺病毒的转染率。结果表明,12C6+重离子束辐射能提高腺病毒对B16细胞的转染率,且具有量效关系。此外,先转染后辐射法比起先辐射后转染法能更显著地提高转染率。

不同LET的重离子辐射对DSB诱导的影响

利用γ射线和不同LET的碳离子辐照小鼠B16黑色素瘤细胞的脱蛋白DNA ,采用脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描技术研究了DNA双链断裂 (DSB)与LET之间的关系。结果表明 :不同LET重离子诱导的PR都随剂量的增加而增加 ,并在超过一定的剂量之后逐渐趋于一个准阈值 :而不同LET的重离子诱导的L值都与剂量呈线性关系 ;对于诱导DSB的RBE值则随着LET的增加先呈上升趋势 ,在LET超过 10 0ke μm后下降。

重离子辐照诱导DNA双链断裂的剂量率效应

利用不同剂量率的 5 0MeV/u12C6+ 辐照B16黑色素瘤细胞的脱蛋白DNA ,采用脉冲场凝胶电泳技术对DNA双链断裂 (DSB)的诱导和片段的分布进行了研究。结果发现 ,在剂量率分别为3Gy/min和 30Gy/min的情况下 ,DNA片段释放百分比 (PR)都随着剂量的增加而增加 ,并在超过一定剂量之后趋于相似的准阈值 ;3Gy/min辐照诱导DSB的产额为 0 .4 0DSBs/ (10 0Mbp .Gy) ,30Gy/min辐照诱导的DSB产额准确值无法得到 ;30Gy/min辐照诱导DSB的截面为 2 .14μm2 ,是 3Gy/min的 3.1倍。所有结果都表明剂量率越高 ,诱导DSB越有效。另外 ,3Gy/min辐照诱导DSB片段在 -86 0kbp处有一个片段峰 ,而 30Gy/min没有 ,说明剂量率可以影响DSB片段的分布。

三种瘤细胞对重离子和γ射线的辐射敏感性

目的　比较体外培养的瘤细胞对重离子和γ射线的辐射敏感性。方法　以人肝癌SMMC 772 1、宫颈癌HeLa和小鼠黑色素瘤B16细胞为材料 ,用集落形成法研究了细胞经γ射线和重离子处理后的存活情况。结果　细胞经γ射线处理后均表现为有肩区的存活曲线 ,属多靶击中模型。细胞经重离子处理后表现为无肩区的存活曲线 ,属单靶击中模型 ,在细胞存活分数为 5 0 %和 10 %时得到SMMC 772 1、HeLa、B16细胞的RBE值分别为 3 40、2 76、4 6 7和 1 88、1 5 3、2 2 2。结论　在相同剂量下 ,重离子能更有效地杀灭瘤细胞

重离子与X射线沿水介质入射深度诱导癌细胞失活的比较

采用Hela、B16两种细胞分别研究了X射线和重离子在水介质中入射的深度与相应细胞的存活率 (1-失活率 )。结果表明 :X射线与重离子在入射深度与细胞存活关系上有明显不同的变化规律。X射线的入射深度与其细胞存活率呈高度正相关性 ,r =0 .92 ;而重离子通过路径的细胞损伤率较小、且有一个细胞存活较高的坪区 (86 %— 92 % ) ,到射程末端细胞损伤率剧增 ,出现倒Bragg峰。提示 :重离子在深层肿瘤治疗上具有比X射线好的深度治疗分布

p53基因转导联合重离子辐射引起小鼠黑色素瘤细胞生长抑制及其机制的探讨

为了将放射治疗与基因治疗有机结合起来以寻求有效治疗恶性黑色素瘤的方法，采用了AdCMV-p53（AdCMV-GFP）转染B16细胞联合重离子（或X－射线）辐照的方法，观察辐射对基因转移效率的影响、外源性P53蛋白对重离子辐照诱导肿瘤细胞生长抑制和辐射增敏作用，以及外源性P53蛋白对重离子辐照诱导肿瘤细胞内蛋白表达的变化，现将本工作结果总结如下： 1.重离子照射可增加腺病毒载体介导p53基因转导效率，而且先转染后辐照法比先辐照后转染法能更显著的地增加基因转导效率。这样在最大限度提高基因转导效率的基础之上，同时又可以减少病毒使用量及辐照剂量。 2.p53基因转导联合重离子辐照能明显抑制细胞生长，诱导细胞凋亡，促进G0/G1期细胞阻滞。说明外源性野生型p53基因导入联合辐照可增加黑色素瘤细胞系B16的辐射敏感性。 3.重离子照射比X-射线照射能更明显增加腺病毒载体介导p53基因转导效率和G0/G1期细胞所占比例，可能是由于两种射线能量沉积的方式不同造成的。 4.重离子辐照联合p53基因转导诱导B16细胞中细胞信号通路发生变化，使得P53和P21表达明显增多，同时MDM2表达随时间而减少。推测导入的p53基因联合重离子辐照改变细胞内信号通路，从而诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞

低剂量重离子辐射诱导小鼠的适应性反应和褪黑素的辐射保护作用研究

研究目的： 1.研究碳离子辐射对小鼠不同组织抗氧化酶活性及细胞周期进程的影响。 2.研究低剂量碳离子预辐射对离体培养的黑色素瘤B16细胞及正常小鼠诱导的适应性反应。 3. 研究褪黑素（MLT）对碳离子的辐射损伤防护效应。 4. 研究碳离子层叠法辐照对H22荷瘤小鼠的治疗效果。研究方法： 1.采用不同剂量的碳离子辐照小鼠，用黄嘌呤氧化酶法检测外周血、肝脏及脑组织中抗氧化酶活性变化，流式细胞仪检测细胞周期阻滞情况。 2.采用低剂量碳离子预辐射离体培养的黑色素瘤B16细胞及正常小鼠，间隔4h后再以攻击剂量辐照，常规组织切片染色观察各组织器官病理变化，流式细胞仪检测细胞周期阻滞情况，黄嘌呤氧化酶法检测小鼠胸腺、脾脏及B16细胞中抗氧化酶活性，Western-blot法检测胸腺细胞及B16细胞中P53及P21蛋白表达情况，RT-PCR法检测CHK2及CDC25mRNA的表达水平。 3.在碳离子辐照小鼠1h前腹腔注射褪黑素，单细胞电泳方法检测胸腺、脾脏细胞的DNA损伤情况，微核法表征外周血的染色体损伤，黄嘌呤氧化酶法测定胸腺、脾脏细胞的抗氧化酶活性。 4.以碳离子层叠法辐照H22荷瘤小鼠，统计不同剂量照射后的肿瘤体积变化、肿瘤抑制率、肿瘤生长延迟天数及治愈率。结果： 1、小鼠血清和肝脏组织在辐射剂量较低（≤0.75Gy）时SOD活性高于对照组，随着辐射剂量的增高，SOD活性趋于降低；MDA含量在辐射剂量较低（≤0.3Gy）时低于对照，随着辐射剂量的增高其含量趋于升高；脑组织GSH浓度在照射剂量较低（≤0.5Gy）时大于对照组，随着照射剂量的升高其浓度趋于降低；低剂量辐射小鼠引起胸腺G2期细胞比例增加，脾脏G1期细胞比例增加。 2、小鼠肝脏、脾脏、肺脏及脑组织在攻击剂量辐射后，出现明显的病理变化，低剂量预辐射处理后病理变化减轻；低剂量预辐射增加胸腺G2期细胞及脾脏G1期细胞比例；相对于单纯攻击剂量辐射组，低剂量预辐射组胸腺组织P53及P21蛋白表达升高；CHK2 mRNA水平升高，CDC25 mRNA水平降低；脾脏及胸腺组织中SOD活性降低程度减弱，MDA含量升高趋势减弱。B16细胞经低剂量预辐射处理后上述指标均未发生明显变化。 3、与辐照处理组相比，褪黑素处理后小鼠的脾脏胸腺细胞DNA损伤拖尾率及彗尾长度明显降低；SOD活性升高，MDA含量降低，外周血微核率降低。 4、在不同剂量的碳离子辐照处理后观察的12天内，各组肿瘤生长速度减慢，生长延迟，肿瘤抑制率随时间而增加。15Gy照射组肿瘤生长速度最慢，肿瘤抑制率最大，肿瘤生长延迟最为明显，而且肿瘤治愈率达到30%。结论： 1． 低剂量12C6+离子全身辐照小鼠应激激活机体抗氧化系统，随辐射剂量的增加，机体抗氧化能力明显降低，导致脂质过氧化发生；低剂量的碳离子辐射导致小鼠胸腺细胞G2期阻滞，脾脏细胞发生G1期阻滞。 2． 低剂量12C6+离子预辐射引发小鼠正常机体产生适应性反应，减轻随后的大剂量辐射造成的损伤；低剂量12C6+离子预辐射对小鼠黑色素瘤B16细胞未引发适应性反应。 3． 15mg/kg的MLT可以对小鼠的重离子辐射损伤产生明显的防护效果。 4． 12C6+离子适形治疗小鼠移植性肿瘤H22，荷瘤鼠的存活时间、肿瘤体积变化、肿瘤的控制率、治愈率等结果显示，15Gy为最佳治疗剂量

重离子束治癌相关生物学效应及机理研究

重离子束治癌是当今放射治疗中最科学、最先进、最有效的方法，是有代表性的高技术。目前仅有美、日、德实现了该技术，并已取得常规疗法难以实现的疗效。我国近年来开展了“重离子束治癌技术的基础研究”，其中，放射生物学及机理研究是重要内容。本论文从细胞、DNA分子、以及动物个体的三个不同层次上分别研究了重离子束治癌相关的生物学问题。在细胞研究方面。采用HeLa、B 16两种细胞分别研究了X一射线和重离子在水介质中入射的深度与相应细胞的存活率(1一失活率)，结果表明：X一射线对细胞的损伤随深度而逐渐衰减(或细胞存活随深度逐渐增加)，而重离子对细胞的损伤则为Bragg曲线(或细胞存活为倒Bragg曲线)。研究了25MeV／u ~(40)Ar~(14+)辐照人肝癌细胞SMMC一7721的微核及存活的动态变化，结果表明： 单次照射与分次照射的微核率随时间的变化规律在96h内没有明显区别，受照(单次、分次) 肝癌细胞的存活数随时间表现出衰减趋势，微核率与细胞存活数关系的动态变化为负相关性。研究了6MV X-射线和125．5keV／μm的重离子辐照B 1 6、V79细胞的2Gy存活率(SF2)，结果表明：B16和V79细胞的存活率(P<0．01)依赖于不同的辐射性质(X-射线、~(12)C离子)，其X-射线与~(12)C离子辐射这两种细胞的存活率之比分别为5．4和1．43，即~(12)C离子辐射增强了X-射线抗性细胞系的敏感性，从而显示了重离子治疗癌症的优势。研究了125．5keV／um的碳离子辐照小鼠黑色素瘤B16、人的宫颈癌HeLa、中国仓鼠肺V79、人的肝癌SMMC-7721四种细胞的相对生物学效率(RBE)，得．到了RBE依赖于细胞种类的关系、RBE随细胞存活水平的升高而增加的关系、以及当LET≥125．5keV／μm时，RBE随着LET的增大而变小的关系。在DNA分子研究方面。研究了125．5keV／μm~(12)C~(6+)辐照小鼠黑色素瘤B 16、中国仓鼠肺V79、人的宫颈癌HeLa、人的肝癌SMMC一7721细胞的灵敏度(由D50表示)、DNA双链断裂(DSB)和DNA双链断裂片段分布，结果表明：细胞敏感性与DNA双链断裂之间没有一致的关系，提出了细胞辐射敏感性的一种可能的分子机理，即DNA序列敏感性位点协同DNA双链断裂互补性机理。由此解释了四种细胞系的不同敏感性问题。在动物个体研究方面。研究了57．28MeV／u氧离子50Gy一次性局部照射对B16黑色素瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用，并观测了受照小鼠的死亡情况，结果表明：照射B16黑色素瘤后第10天观察，肿瘤生长延迟为6天、肿瘤抑制率为66％，耐受剂量小于50Gy。研究了50MeV／u ~(12)C~(6+)离子辐照对小鼠移植性肿瘤S180的抑制作用、控制率、治愈率和病理组织学变化，结果表明：各剂量组对S180肉瘤的抑制作用均大于90％，高剂量组抑瘤作用明显强于低、中剂量组(P

碳离子辐照后细胞的适应性反应及单一时相细胞的相对生物学效应

目的：探讨低剂量碳离子辐照细胞引起的适应性反应,将低剂量效应的研究范围拓宽至高LET电离辐射领域;研究单一时相细胞经低能碳离子辐照后,存活曲线、失活截面和相对生物学效应与细胞周期各时期的关系.材料与方法：采有中国仓鼠肺V79细胞和小鼠黑色素瘤B16细胞,利用兰州近代物理研究所重离子研究装置（HIRFL）产生的碳离子,主要以细胞存活分数和细胞微核率为生物终点,探讨高LET的碳离子对V79细胞和B16细胞的低剂量效应.采用中国仓鼠卵巢细胞CHO-K和细胞同步化方法,利用德国GSI的直线加速器（Unilac）终端产生的低能碳离子,以细胞存活分数为生物终点,研究单一时相细胞经低能碳离子辐照后,存活曲线、失活截面与细胞周期各时期的关系,并与X射线的结果作了比较,得出了各时期细胞的相对生物学效应.结果：低剂量碳离子辐照细胞引起的生物学效应：1.和γ射线一样,低剂量重离子,如0.02Gy的碳离子辐照也能提高细胞的克隆形成率.这种集落形成能力的提高可能与低剂量辐照使细胞对受损DNA的修复能力增强有关.2.从细胞存活分类来看,0.02Gy预处理能使V79和B16两种细胞产生较明显的适应性反应;0.05Gy预处理引起V79细胞的适应性反应不明显,未能引起B16细胞的适应性反应.3.从细胞微核率来看,0.02Gy预处理能引起两种细胞的适应性反应;0.05Gy预处理未能引起两种细胞的适应性反应,并且已表现出协同损伤的趋势.4.高LET的碳离子和低LET射线一样,可以诱导细胞的兴奋效应或适应性反应.但诱导剂量D1不宜过高.

LiF-KCl熔盐溶液的径向分布函数

本文利用X射线散射技术测定和Monte Carlo计算机模拟计算,获得了LiF-KCl熔体的径向分布函数。实验发现,在互易系LiF-KCl熔体中,小离子Li~+与F~-更易形成结合较为紧密的集团,而大离子K~+与Cl~-的结合相对较为松地,即出现“大大小小”效应。

The antitumor effect of bromophenol derivatives in vitro and Leathesia nana extract in vivo

To investigate the antitumor effect of bromophenol derivatives in vitro and Leathesia nana extract in vivo, six bromophenol derivatives 6-(2,3-dibromo-4,5-dihydroxybenzyl)-2,3-dibromo-4,5-dihydroxy benzyl methyl ether (1), (+)-3-(2,3-dibromo-4,5-dihydroxyphenyl)-4-bromo-5,6-dihydroxy-1,3-dihydroisobenzofuran (2), 3-bromo-4-(2,3-dibromo-4,5-dihydroxybenzyl)-5-methoxymethyl-pyrocatechol (3), 2,2',3,3'-tetrabromo-4,4',5,5'-tetrahydroxy-diphenylmethane (4), bis(2,3-dibromo-4,5-dihydroxybenzyl) ether (5), 2,2',3-tribromo-3',4,4',5-tetrahydroxy-6'-ethyloxymethyldiphenylmethane (6) were isolated from brown alga Leathesia nana, and their cytotoxicity were tested by MTT assays in human cancer cell lines A549, BGC-823, MCF-7, B16-BL6, HT-1080, A2780, Bel7402 and HCT-8. Their inhibitory activity against protein tyrosine kinase (PTK) with over-expression of c-kit was analyzed also by ELISA. The antitumor activity of ethanolic extraction of Leathesia nana (EELN) was evaluated on S-180-bearing mice. All compounds showed very potent cytotoxicity against all of the eight cancer cell lines with IC50 below 10 mu g/mL. In PTK inhibition study, all bromophenol derivatives showed moderate inhibitory activity and compounds 2, 5 and 6 showed significant bioactivity with the inhibition ratio of 77.5%, 80.1% and 71.4%, respectively. Pharmacological studies reveal that EELN could inhibit the growth of Sarcoma 180 tumor and increase the indices of thymus and spleen to improve the immune system remarkably in vivo. Results indicated that the bromophenol derivatives and EELN can be used as potent antitumor agents for PTK over-expression of c-kit and considered in a new therapeutic strategy for treatment of cancer.