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从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法的1.51倍.柱复性后的单链抗体亲和力测定的解离常数Kd为73.5nmol/mL.为进一步研究单链抗体H12的功能奠定了基础.
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Using a 2-D hybrid model, the authors have found that external currents play an important role in the plasma parameters in the reactor. The plasma density, temperature and electrostatic potential would be significantly influenced by the applied external currents.
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利用开放的V型三能级原子系统密度矩阵运动方程的数值解,从不同角度研究了原子自发辐射诱导相干(SGC)对系统吸收和色散的影响。研究发现,这种相干性可导致无粒子数反转激光(LWI)、电磁感应透明(EIT)和无吸收高色散。研究还表明,这种相干性越强,获得最大无反转增益所需的驱动场Rabi频率的值越大而所需的非相干泵浦速率R的值越小;随着原子退出速率的增大,无反转增益逐渐减小并最终转变为吸收,而且增益减小的速度随这种相干性的增强而加快。
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Inverse symmetric Dammann grating is a special grating, whose transition points are reflection symmetric about the midpoint with inverse phase offset in one period. It can produce even-numbered or odd-numbered array illumination when the phase modulations are pi or a specific value. Numerical solutions optimized by the steepest-descent algorithm for binary phase and multilevel phases with splitting ratio from I x 4 to 1 x 14 are given. Fabrication of 1 x 6 array without the zero-order intensity and 1 x 7 array with the zero-order intensity are made from the same amplitude mask. A 6 x 6 output without the crossed zero-orders was achieved by crossing two one-dimensional 1 x 6 inverse symmetric Dammann gratings. This grating may have potential value for practical applications. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.
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Intense Tm3+ blue upconversion emission has been observed in Tm3+-Yb3+ codoped oxyfluoride tellurite glass under excitation with a diode laser at 976 nm. Three emission bands centered at 475, 650 and 796 nm corresponding to the transitions (1)G(4) -> H-3(6), (1)G(4) -> H-3(4) and F-3(4) -> H-3(6), respectively, simultaneously occur. The dependence of upconversion intensities on Tm3+ ions concentration and excitation power are investigated. For fixed Yb2O3 concentrations of 5.0 mol%, the maximum upconversion intensity was obtained with Tm2O3 concentration of about 0.1 mol%. The blue upconversion luminescence lifetimes of the Tm3+ transitions (1)G(4) -> H-3(6) are measured. The results are evaluated by the possible upconversion mechanisms.
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茉莉酸是植物信号传递以及诱导植物产生防御反应的关键诱导激素之一,广泛存在于高等植物中,并在植物病虫害防御的信号传导通路中起着重要的作用。茉莉酸可以诱导植物抗性基因表达,产生茉莉酸调节蛋白来抵御病虫害。在禾本科的大麦中发现了一个分子量在32kDa茉莉酸调节蛋白家族(JPR-32),但其功能一直没有深入的研究。 木菠萝素是从桂木属木菠萝的种子中分离的一种可以和半乳糖或甘露糖特异结合的凝集素。近来的研究表明,植物的凝集素具有多种功能,主要有:可作为储存蛋白,对储存物质进行包装、运输;作为植物细胞的有丝分裂因子,参与细胞壁的延伸;生长调节及运输碳水化合物;具有酶的功能;参与豆科植物感染结瘤;协同其它防御蛋白参与植物防御反应。植物凝集素的功能复杂各异,对木菠萝素的功能研究更是相对较少。 本文在小麦中克隆出的cDNA(本文命名为Ta-JA1基因),该基因cDNA全长1158bp,编码304个氨基酸,分子量32.7kDa,与JPR-32蛋白质家族的基因序列具有很高的同源性。从蛋白结构分析中显示,Ta-JA1基因有两个典型的功能结构域:N末端的茉莉酸诱导的防御反应结构域和C末端的木菠萝素相关结构域。为我们研究这个新的蛋白家族的功能提供了一个典型的模式蛋白。本文即从Ta-JA1基因出发来研究这一类蛋白的相关功能。在此,我们构建了Ta-JA1基因的pBI121表达载体,并通过农杆菌介导叶圆片法转化烟草,成功获得转基因植株。通过硫酸铵盐析法获得了植物Ta-JA1蛋白粗提品,效率在0.01%左右。使用蛋白粗提物进行凝血效应分析,转基因植株的蛋白粗样品可以凝集新鲜的兔血,说明Ta-JA1蛋白具有植物凝集素的基本性质。选取烟草上典型的三类病原体:烟草花叶病毒,烟草黑胫病菌和烟草野火病菌。分别对转基因烟草进行侵染,并观察统计其抗病性,发现转基因烟草对烟草花叶病毒和烟草黑胫病具有显著的抗性,对烟草野火病也具有一定的抑制作用。通过与野生型烟草在抗盐,抗旱,抗虫和生长发育等方面的统计比较与分析,可以看出,基因烟草在抗逆性上也有了显著的提高,虽然Ta-JA1的过量表达没有影响转基因烟草的整体生长进程,开花期和结实情况与对照烟草相比也无明显变化,但是转基因烟草的种子在萌发时间上有了显著提高,一定数量上还表现出愈合的花冠筒上出现不同程度开裂,花冠筒上有附生舌状花瓣,及带有花瓣状颜色的花萼等异常花表型。
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目的 研究中华眼镜蛇毒因子(CVF)消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响.方法 以近交系BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立腹腔异位心脏移植模型.实验分为2组,每组8只.CVF组:心脏移植术前3 d、2 d时,经受者尾静脉注射CVF 50 μg/kg;术前12 h至移植心停跳时,经尾静脉注射CVF 20 μg/kg,每2 d注射1次.对照组:术前、术后不给予受者任何特殊处理.术后观察移植心的存活时间,测定术后第1、3、5和6d及移植心停跳时的血清总补体活性(CH50法)、移植心C3沉积及CD3+T细胞浸润情况,并观察移植心的病理变化.结果 CVF组和对照组的移植心存活时间分别为(11.69±0.72)d和(6.65±0.35)d,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).CVF组移植心组织内C3沉积和CD3+T细胞浸润程度均较对照组同期明显减轻,病理损害程度也较对照组同期明显减轻.结论 CVF消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应起到了明显的抑制作用,从而延长移植心存活时间.
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从五步蛇蛇毒中纯化一种均一的酸性磷脂酶A_(2)。SDS-PAGE测得分子量为15.8KD, 按氨基酸残基计算其分子量为14.352KD, IEF-PAGE测得等电点为5.32。氨基酸组分分析表明磷脂酶A_(2)分子由128个氨基酸残基组成, 富含Asp和Glu, 不含中性糖。PLA_(2)酶活性 的最适温度为45℃, 最适pH为8.5左右, 没有抗胰蛋白酶的活性, 具有一定的热稳定性。K~(+)、Ca~(++)和Na~(+)离子激活, 而Ca~(++)、Sn~(++)、Cu~(++)、Li~(++)、Hg~(++)、Zn~(++)、Fe~(++)和Co~(++)离子可抑制或完全丧失酶活力。图5表2参 10