四株海洋放线菌次级代谢产物的研究

本课题组自1999年以来，将培养条件优化、生物活性跟踪及化学跟踪技术应用到胶州湾海洋放线菌的次级代谢产物研究中，发现了一批具有生物活性的化合物，包括新型骨架等新颖结构的化合物。 本研究从海州湾分离出海洋放线菌172株，对其中70株菌的次级代谢产物进行了生物活性筛选和化学筛选，获得了它们对八种病原微生物的抑制活性数据。发现海州湾海洋放线菌对至少一种受试微生物具有拮抗能力的比例约为30%。从海洲湾分离到的海洋放线菌中筛选得到三株L083、L078和L158用于次级代谢产物的研究，同时本人又从合作实验室获得另一株海洋放线菌B7651，从这四株海洋细菌的发酵粗提物中共分离纯化得到26 个化合物， 其中10 个为新颖结构化合物。具体是，3-Hydroxy-6-[(Z)-3´-hydroxy-2´,4´-dimethyl-hept-4´-enoylamino]-2,4-dimethyl-5-oxo-hexanoic acid (4)，2-[5-(2-oxopropyl)tetrahydrofuran-2-yl]propanoic acid (5)，2-oxatricyclo-octane (10)，Huaiomycin (15)， 5-(6-hydroxy-6-methylheptyl)dihydrofuran-2(3H)-one (17), 6-Hydroxy-6-hydroxymethyl-6H-pyran-3-one (18), 1,6-dihydroxy-hex-3-ene-2,5—dione (19) (1’R, 2R, 4R)-2-(1-hydroxy-8-methylnonyl)-4-hydroxymethyl-butanolide (20) ， Bremeromycin A (22) ，Bremeromycin B (26)。生物活性实验结果表明Bremeromycin A (22)具有选择性的抗枯草杆菌(Bacillus subtilis ATCC 6051)活性和抗微藻Chlorella vulgaris活性。

Strain H-2-419-4 of Haematococcus pluvialis induced by ethyl methanesulphonate and ultraviolet radiation

Two strains H-2-410 and H-2-419 were obtained from the chemically mutated survivors of wild Haematococcus pluvialis 2 by using ethyl methanesulphonate (EMS). Strains H2-410 and H2-419 showed a fast cell growth with 13% and 20% increase in biomass compared to wild type, respectively. Then H-2-419-4, a fast cell growth and high astaxanthin accumulation strain, was obtained by exposing the strain H2-419 to ultraviolet radiation (UV) further. The total biomass, the astaxanthin content per cell, astaxanthin production of H-2-4194 showed 68%, 28%, and 120% increase compared to wild H. pluvialis 2, respectively. HPLC (High Performance Liquid Chromatography) data showed also an obvious proportional variation of different carotenoid compositions in the extracts of H2-4194 and the wild type, although no peak of carotenoids appeared or disappeared. Therefore, the main compositions in strain H-2-419-4, like its wild one, were free of astaxanthin, monoester, and diester of astaxanthin. The asexual reproduction in survivors after exposed to UV was not synchronous, and different from the normal synchronous asexual reproduction as the mother cells were motile instead of non-motile. Interestingly, some survivors from UV irradiation produced many mini-spores (or gamete?), the spores moved away from the mother cell gradually 4 or 5 days later. This is quite similar to sexual reproduction described by Elliot in 1934. However, whether this was sexual reproduction remains questionable, as no mating process has been observed.

羊草生殖生物学研究

羊草 (Leymus chinensis (Trin.) Tzvel. ) ，隶属禾本科赖草属，是欧亚大陆草原区东部的重要草原建群种之一。羊草是牧草之王，属于我国有比较优势的战略性生物资源，对我国北方畜牧业发展以及保护生态环境均具有重要作用。 羊草较弱的有性生殖特性限制了其应用，本文从实验生物学角度，研究了羊草有性生殖的基本特点，并试图通过现代分子生物学手段探讨自交不亲和性的有关机理。本论文的主要结果如下： 1. 实验发现羊草具有自交不亲和性。以6 个羊草居群为材料，测定得知开放授粉时的结实率在6.5% - 56.7%之间，自交时结实率为0.6% - 4.3%，差异极其显著; FDA 染色法检测结果显示羊草成熟花药中有活性的花粉达到92.2% 以上;在发育时间顺序和空间结构上，羊草雌蕊、雄蕊适于异花和自花授粉;花粉柱头亲和性实验表明，自交花粉只有5.5%-11.7% 是亲和的，杂交花粉亲和率达到了60.0%-84.8%，说明自交花粉在柱头上萌发受到抑制，其次，荧光显微镜还观察到“不亲和花粉”在进入柱头后生长缓慢，或停止延伸。 2. 初步确定羊草自交不亲和性具有配子体型遗传特点。以不同居群羊草杂交后的姊妹系作为实验材料，观察到自交组合的亲和率变幅为0 % - 6.9 %，杂交组合的亲和率具有连续性变异和变幅较宽的特点（47.5％ - 96.0 %），且正反交结果具有一定的一致性（88.2％），表现出配子体遗传特性。 3. 羊草居群内结实率存在一定变异。以羊草单株为单位分别进行自交、随机互交和开放授粉，结果显示三者的平均结实率分别为4.6%，18.1% 和35.7%，株间的变异系数分别为33.4%，21.2%和17.1%，这些株间的变异均达到统计上的显著差异;同时羊草自交、杂交和开放授粉之间具有一定的相关性，显示羊草的这种株间差异与株系本身的生理特性相关。 4. 分离了羊草硫氧化还原蛋白 H 基因(ThioLc)并对其功能进行了分析。克隆了ThioLc全长和cDNA序列。序列分析结果显示，DNA全长2257 bp，包括3 个内含子和4 个外显子，与水稻Thio h 的cDNA 序列相比，具有 32.0% 的同源性;Southern 杂交显示 ThioLc 在羊草基因组中是单拷贝;Northern 杂交显示 ThioLc 在羊草根、茎、叶和幼小的雌蕊中没有表达, 在成熟雌蕊和幼小的花粉中微量表达, 在成熟花粉中大量表达，说明分离的羊草硫氧化还原蛋白H 基因具有花粉特异表达特点。 5. 原核表达的ThioLc 蛋白具有较高的催化活性。构建了ThioLc 基因的原核表达载体，检测证明ThioLc基因在大肠杆菌中正常表达;提取表达蛋白，纯化，用胰岛素和二硫苏糖醇反应体系进行硫氧化还原蛋白的催化作用反应，结果表明表达的蛋白具有催化活性。这一结果为进一步搜寻靶向蛋白和研究该蛋白的结构、功能和作用方式奠定了基础。

宁夏新建二代防护林网蛀干害虫发生特点和危害特性

本文以宁夏银川二代林网中林分和害虫调查资料为基础 ,研究了二代林网主要蛀干害虫——光肩星天牛 (Anoplophora glabripennis Mostch)和木蠹蛾 [Cossus cossus ori-entalis Gaede &H olcocerus vicarius(Walker) ]分别在新疆杨林和刺槐林中因不同的树龄、径粗、林向、郁闭度、林地类型 (林缘和林内 )而呈现出的相应发生特点和为害特性。结果显示 ,新疆杨大于 6年生、胸径超过 1 2 cm径阶受光肩星天牛危害频率高 ;实验用片林林缘到林内 2 m范围内新疆杨受光肩星天牛危害显著高于林内 ,而东、西、南、北 4个方向 ,以东边受害最轻 ;与其它树种组成的混交林林缘同样重于林内。刺槐易受木蠹蛾危害的树龄和径节分别是 6 a～ 1 2 a和 1 2 cm～ 2 0 cm;刺槐片林无论是纯林还是混交林均为林缘重于林内。以上蛀干害虫对树龄和径粗均有较强的一致性选择

聚合物整体柱微萃取与高效液相色谱联用检测水性化妆品中的性激素

建立了水性化妆品中睾酮、甲基睾酮和孕酮的聚合物整体柱微萃取和高效液相色谱联用检测方法。聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)毛细管整体柱作为萃取介质,表现出较大的萃取容量。实验优化了影响萃取效率的参数,包括萃取流速、样品溶液pH值、盐浓度以及有机相含量。样品经过磷酸盐溶液稀释和过滤后便可直接进行萃取分析。睾酮、甲基睾酮和孕酮在10～1000μg/L的浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.996;它们的检出限分别为2.3,2.8和4.6μg/L;日内及日间相对标准偏差分别小于7.7%和7.5%。本

Polychlorinated dibenzo-p-dioxins (PCDDs) and dibenzofurans (PCDFs) in surface sediment and bivalve from the Changjiang Estuary, China

Surface sediments and bivalves were collected from the Changjiang Estuary in December 2003 and November 2004, respectively. Polychlorinated dibenzo-p-dioxins (PCDDs) and dibenzofurans (PCDFs) in these samples were measured with high-resolution chromatography (HRGC)/High Resolution Mass Spectrometer (HRMS). The concentrations of total PCDD/Fs and toxic equivalent (TEQ) were 169.83 +/- 119.63 and 0.81 +/- 0.36 pg/g dry weight (dw) in sediments, and 580.33 +/- 240.17 and 7.24 +/- 3.65 pg/g dw in bivalves. The homolog compositions of PCDD/Fs were similar among samples, the most abundant congener was octa-chlorinated dibenzo-p-dioxin (OCDD) and then octa-chlorinated dibenzofuran (OCDF) and 1,2,3,4,6,7,8-hepta-chlorinated dibenzo-p-dioxin (HOCDD). The herbicide pentachlorophenol (PCP) and sodium pentachlorophenol (Na-PCP) were proved the main source of PCDD/Fs in this area.

低轮FOX分组密码的碰撞-积分攻击

FOX是最近推出的系列分组密码，它的设计思想基于可证安全的研究结果，且在各种平台上的性能优良．本文利用碰撞攻击和积分攻击相结合的技术分析FOX的安全性，结果显示碰撞-积分攻击比积分攻击有效，攻击对4轮FOX64的计算复杂度是2^45.4，对5轮FOX64的计算复杂度是2^109.4，对6轮FOX64的计算复杂度是2^173.4，对7轮FOX64的计算复杂度是2^237.4，且攻击所需数据量均为2^9；也就是说4轮FOX64／64、5轮FOX64／128、6轮FOX64／192和7轮FOX64／256对本文攻击是不免疫的．

共价氢化物在光度分析中的应用

本论文由两部分工作组成。第一部分（铋化氢-二乙氨基二硫化甲酸银分光光度法测定铋）提出一个测定铋的新的分光光度方法，对影响方法准确度和精密度的各种因素进行实验，确定了适宜分析条件。用硼氢化钾-氯化钠-铝粉（重量比2:1:5）还原片，0.5N盐酸介质、15-25 ℃时，将铋离子转化为铋化氢，用5.0毫升0.2%的二乙氨基二硫化甲酸银氯彷溶液吸收显色。有色溶液最大吸收波长为425毫微米，摩尔吸光系数为4.6 * 10~4升。厘米~(-1)·摩尔~(-1)。铋量0-20微克符合比尔定律。经过对发光材料、铝合金和矿石中铋的测定，证明此方法有较好的实用价值。第二部分（砷、锑、铋的氢化物与二乙氨基二硫代甲酸银形成的有色物质性质的探讨）针对文献中砷化氢与AgDDC形成有色物质性质的两种不同看法，结合我们在AgDDC分光光度法测定砷、锑、铋中观察到的现象，用分光光度法对三种有色溶液的吸收光谱进行分析和讨论。实验证明，砷、锑、铋的氢化物与AgDDC形成的有色物质不可能是下列络合物：1、砷、锑、铋与二乙氨基二硫代甲酸（简称HDDC）或其它配位体形成的络合物；2、砷、锑、铋或银与HDDC形成的同核或异核的多核络合物；3、砷、锑、铋与HDCC及有机碱形成的三元络合物。同时指出，砷、锑、铋的氢化物与AgDDC之间可能发生的氧化还原反应，反应形成的有色物质属於银溶胶。由於上述三种氢化物还原AgDDC的能力不同，故所产生的银溶胶分散程度不同，而具有各自特征的颜色及吸收光谱。我们结合实验现象对砷的吸收曲线有两个吸收峰的问题进行了讨论，指出410毫微米波长处的吸收峰是砷的有色物质本身固有的，是由另一种分散程度的银溶胶产生的。