厚颌鲂人工繁殖初报及胚胎发育观察

从长江支流泸州龙溪河收集野生厚颌鲂 ,直接或经驯养后进行人工繁殖 ,并对胚胎发育过程进行了描述 ,旨在为厚颌鲂资源的增殖与开发提供参考。 3次未催产的人工授精实验 1次成功 ,受精率 12 0 % ;16次催产试验共注射了 32尾雌鱼 ,平均催产率 6 2 5 % ;12次有效催产的平均受精率 6 2 1% ,孵化率 4 4 7%。每千克鱼注射 3mgPG +3ugLRH A2 ,可以获得较好的催产效果。胚胎发育过程可分为 18个时期 ,温度对发育进程具有显著的影响。

兰州北山生物结皮中陆生藻种类组成与群落结构

通过对沙井驿、刘家堡、九州台、白塔山、小牛圈沟等样点采集的生物结皮样的培养和鉴定 ,研究了兰州市北山生物结皮中陆生藻种类组成及其群落结构 .结果发现 ,该地陆生藻共计 5 3种 ,其中蓝藻 34种 ,绿藻 7种 ,硅藻10种 ,裸藻 2种 .蓝藻中以丝状种类占优势 (6 5 % ) ,绿藻中仍以球状种类居多 (5 7% ) ,但也有不少丝状个体(43% ) .黄土结皮以非洲席藻为第一优势种 ,石崖表具鞘微鞘藻占绝对优势 ,人工草丛中小球藻最丰富 ;种类数在砾质黄土中最多 (2 3) ,黄粘土中最少 (16

土壤藻生物量及其在荒漠结皮的影响因子

土壤藻生物量方法方面的不统一和操作性误差已长时间影响着土壤藻的研究进展。以沙坡头不同龄荒漠土壤为样点 ,通过直接计数、培养计数、体积换算等方法的比较分析 ,提出了土壤藻生物量相对规范的测定和计量方法——体积法 ;测定当地无灌溉人工区结皮中生物量为 5 .99～ 8.5 8mm3/g dry soil,灌溉区1 .2 8mm3/g dry soil,最高值出现在 8月份 ,最低值出现在 2月份 ;与当地小气候、土壤理化性质等 33项环境因子逐步回归显示 ,它们与当地降水量、土壤中总钾、水解氮、Fe3+ 、粗

宁夏回族自治区沙坡头地区半荒漠土壤中藻类的垂直分布

对沙坡头地区半荒漠土壤中藻类植物的垂直分布进行了为期一年多的采样、分析 ,结果发现结皮层有藻类植物 2 4种 ,蓝藻及其丝状种类的比例最大 ;结皮下 0～ 5 0 mm和 5 0～ 1 0 0 mm层次分别有 1 5种、1 0种 ,且都以硅藻及单细胞种类最丰富 ;深层次出现的种类在浅层次都出现 ;1 0 0 mm以下层次没有任何藻种发现。生物量从表及里随深度的增加而锐减 ,99%的分布在结皮层 ;就结皮层中 78%的在 0～ 0 .1 mm层次 ,96%在 0～ 1 .0 mm深度。种类数变化在结皮层和结

乳头瘤病毒及协同因子与宫颈癌的关系

本研究旨在探讨宫颈癌前病变和宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒及协同因子 (HSV ,CMV)的关系。对81例不同宫颈病变组织进行HPV16 / 18和HPV6 / 11原位杂交 ,同时对 10 3例不同宫颈病变组织用DNA扩增法检测HPV、HSV和CMV。结果表明病毒DNA原位杂交信号的分布与HE染色中挖空细胞的分布一致。HPV16 / 18与不同宫颈病变组织原位杂交阳性率平均为 5 1% ,HPV6 / 11的则为 6 4%。经PCR检测 ,HPV16 / 18、HPV6 / 11、HSV、CMV在不同宫

藏北 3种裸鲤同工酶的电泳分析及物种分化的探讨(英文)

对藏北高原 3种裸鲤的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶 (MDH )和脂酶 (EST)进行电泳分析的结果表明 ,3种裸鲤酶谱均表现出种间的差别 ,而且在同一种群个体之间也存在着明显的分化 ,但无性别差异。 3种裸鲤被检测的 3种同工酶均有沉默基因表达的现象 ,重复基因LDH -A2 、LDH -B2 、s -MDH -A2 和m -MDH -B2 也在部分个体中表达。遗传距离分析表明 ,色林错裸鲤(G .selincuoensis)与错鄂裸鲤 (G .cuoensis)之间较之于与纳木错裸鲤 (G .n

Cloning, characterization, and gene expression analysis of a novel cadmium metallothionein gene in Tetrahymena pigmentosa

A novel cadmium-inducible metallothionein (MT) gene (Tpig-MT1) was cloned and sequenced from the ciliate Tetrahymena pigmentosa. The number of deduced amino acids is 118. The polypeptide possesses CCC and CC clusters characteristic of typical Tetrahymena Cd-inducible MTs. The structure of Tpig-MT1 is different from the reported Cd-MT in T. pyriformis, T. thermophila and T. pigmentosa. Tpig-MT1 contains two intragenic tandem repeats with 72.9% identity described as Tpig-MT1 (repeat A1) and Tpig-MT1 (repeat A2). The transcriptional response of Tpig-MT1 gene to different heavy metals (Cd, Cu, Zn, Hg, Pb) and oxidative stress (H2O2) was measured using real-time quantitative PCR. The results showed that the gene was quickly induced (1 h) by the five heavy metals and the order of expression level was Hg>Pb>Cd>Cu>Zn. The induction effect of H2O2 was 5-fold after about 15 min, but soon decreased to a non-significant level (30 min). The genetic diversity of Tetrahymena MT genes is discussed in relation to the unique structure of the Tpig-MT1 gene and other reported Cd-MT isoforms. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

Differential gene expression in fully-grown oocytes between gynogenetic and gonochoristic crucian carps

Silver crucian carp (Carassius auratus gibelio) is a unique triploid bisexual species that can reproduce by gynogenesis. As all other gynogenetic animals, it keeps its chromosome integrity by inhibiting the first meiosis division (no extrusion of the first pole body). To understand the molecular events governing this reproduction mode, suppression subtractive hybridization was used to identify the genes differentially expressed in fully-grown oocytes of the gynogenetic and gonochoristic crucian carp (gyno-carp and gono-carp). From two specific subtractive cDNA libraries, the clones screened out by dot blots and virtual Northern blots were chosen to clone, full-length cDNA by RACE. Four differentially expressed genes were obtained. Two are novel genes and are expressed specifically in the oocytes. The gyno-carp stores much more mRNA of cyclin A2, a new member of the fish A-type cyclin gene, in its fully-grown oocyte than in the gono-carp. The last gene is histone H2A. The histone H2As of these two closely related crucian carps are quite different in the C-terminus. Preliminary characterization of the four genes has been analyzed by nucleotide and deduced amino acid sequence and Northern analysis. (C) 2001 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

支持移动和普适应用的上下文感知框架

蕴涵着高度动态变化特性的移动和普适计算环境给分布式系统的设计提出了新的挑战,上下文感知框架汇聚了感知和处理各种易变因素的基础设施.依托框架开发移动和普适应用,能加快开发速度,提高应用程序的健壮性.本文分析了各种上下文信息及其作用,给出了上下文感知框架XAF的设计,探讨了框架中的关键技术,包括上下文转换和服务自适应选择.

基于CLIGEN和GCM模型预测未来40年黄土丘陵沟壑区的气候变化——以安塞为例

为预测3种温室气体排放情景(A2、B2和GGa1)下未来40年黄土丘陵沟壑区的气候变化,利用安塞试验站1986—2003年的气候观测资料以及1986—2049年GCM(HadCM3)栅格数据,通过空间转换和时间转换,利用CLIGEN和GCM模型,预测未来40年以安塞为代表的黄土高原丘陵沟壑区的气候变化。结果表明:与当前条件相比,到2049年,A2、B2和GGa1 3种情景下预测的降雨量分别增加37%、22%和12%;3种情景下预测的最大月均降雨量出现在夏季;到2049年,A2、B2和GGa1 3种情景下预测的月均最低气温和月均最高气温皆增加,但差异不明显,年均最低气温和年均最高气温分别增加1.41~1.56℃和0.92~1.57℃。

新型靶向性磁共振成像造影剂的合成及性质研究

磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)以其分辨率高、对人体无电离辐射损伤、多参数成像等优点而得到迅速发展和广泛应用。目前，MRI已从单一形态学向分子影像学的深度发展，对医学临床和医学研究产生了巨大影响。为了提高病变部位与正常组织间信号的对比度，约30%~40%的诊断需要使用磁共振成像造影剂。它是一类能缩短成像时间、提高成像对比度和清晰度、显示组织器官功能状态的诊断用药。下一代磁共振成像造影剂的设计目标将集中在对特定组织或器官具有选择性或靶向性、高弛豫性能和减少用药剂量等方面。本论文在此领域的研究内容可归纳如下： (1) 以多糖为载体的MRI造影剂 设计合成了阿拉伯半乳聚糖修饰的Gd-DTPA配合物(Gd-DTPA-CMAG-An)和葡聚糖修饰的Gd-DTPA配合物(Gd-DTPA-CMDn-Cyst)。通过体外弛豫时间测试和体内磁共振成像实验研究了Gd-DTPA-CMAG-An弛豫性能、器官选择性、体内滞留时间和代谢情况，结合体外稳定性综合评价了其应用于临床的可能性。研究结果表明，Gd-DTPA-CMAG-An配合物在水溶液中弛豫性能为Gd-DTPA的1.4倍左右，Gd-DTPA-CMAG-A2对肝脏信号的增强效果是Gd-DTPA的2.0倍左右，并且能在较长时间内产生良好稳定的增强效果。这与肝脏表面的去唾液酸糖蛋白受体的专一性识别有关。Gd-DTPA-CMAG-A2良好的肝脏选择性和肾脏代谢能力，有望成为有前景的肝脏选择性造影剂。通过小鼠MRI实验初步评价了Gd-DTPA-CMDn-Cyst配合物造影剂对血管信号的增强作用。Gd-DTPA-CMD4-Cyst对血管产生了良好的增强效果，并且能在较长时间内对血管产生良好稳定的增强，从而有充分的时间优化成像窗口获得理想的成像效果。但造影剂在体内的分布和代谢是一个非常复杂的过程，Gd-DTPA-CMD4-Cyst在血液中的滞留情况及能否用于血管造影仍需进一步的实验证实。 (2) MnNaY 型分子筛作为胃肠道MRI造影剂 离子交换法制备了Mn2+交换的NaY分子筛MnNaY，从对造影剂的一般要求出发，对其酸性水溶液中的稳定性和离子交换选择性、体外弛豫性能和体内成像等方面进行研究，并对器官的选择性及体内滞留时间和代谢情况进行了分析，从而对其应用于临床的可能性进行了探讨。研究结果表明，MnNaY悬浮液能长时间在较低的酸性条件下保持良好的稳定性，其弛豫效率高于目前临床所用造影剂Gd-DTPA，随Mn2+的含量在NaY分子筛中的增加(3.2%~5.2%)，弛豫效率反而降低。MnNaY (3.2% Mn)对胃部具有良好的增强效果，并且能在较长时间内产生良好稳定的增强效果，有利于获得理想的成像效果。它是一种比较好的潜在口服胃肠道造影剂。 (3) 甘草酸为载体的MRI造影剂 合成了甘草酸为载体的配合物GL-(A-Gd-DTPA)3，对其体外弛豫性能和体内成像等方面进行了研究，结果表明，其在水中的弛豫效率约为目前临床所用造影剂Gd-DTPA的1.4倍，体内成像表明它能在较长时间内对大鼠肝脏产生良好稳定的增强效果，这是由于肝(实质)细胞膜表面存在GL和GA受体，Gd-DTPA 以GL为载体后具有良好的趋肝性与肝细胞靶向性。 (4) 中性的Gd-DTPA双酰胺衍生物 合成了两种中性的Gd-DTPA双酰胺衍生物Gd-DTPA-BBA和Gd-DTPA-BtBA，其弛豫效率与Gd-DTPA相近，对肝脏和肾脏具有较好的增强效果，由于这两种配合物均为电中性化合物，这样配合物溶液的渗透压值与血液的渗透压值较接近，可能更易为生物体所接受。

固体表面的分子组装体和纳米结构

本文评叙了分子组装体和纳米结构在固体表面的自组装及其应用，并对控制其自组装过程中的分子间作用力和表面力进行了介绍．采用扫描探针显微学结合电化学的方法对自组装膜（SAMs）、仿生膜（biomimetic mebane），金属和聚合物纳米颗粒（nanoparticles）等分子组装体系进行了研究。主要结果如下：(l)我们研究了2-巯基，-3-烷基唾吩（MOT）在金电极表面的自组装行为。测量了MOT膜的电容，结果表面MOT膜能够选择性的透过溶液中的探针物种。交流阻抗和欠电位沉积研究表明湘T膜的覆盖度达99.9%以上。在硫酸溶液中评价了MOT膜的稳定性，MOT膜的电位窗阳极极限为1.2V。次外，我们还研究了一系列有机小分子在MOT膜上的通透行为，实验结果显示于MOT膜的选择性透过能力最密切相关的是探针分子的溶剂化程度，溶剂化程度约高通过能力越差。我们进一步研究呢MOT膜与表面活性剂的相互作用，发现表面活性剂分子能够在MOT膜表面强烈的吸附，并使MOT膜对电极的封闭作用大大地增强。（2）我们在基于MOT的单组分和电活性多组分的自组膜上进一步构筑了杂化:仿生双层膜，并且研究了双层膜的形成对其中电活性物质的氧化还原反应热力学的影响。跟踪了该双层的形成动力学并研究了其界面属性。得到交叉构象的双层膜．研究了重组其中的HRP的电活性以及磷脂酶A2对该膜的水解动力学。证明我们得到的双层膜比基于烷基硫醇的双层膜有更好的稳定性，而且在仿生膜基础研究和生物传感器应用的有很好的应用前景。（3）我们在MOT和C10SH自组膜上利用表面力，憎水力和电泳力协同作用组装了电活性金纳米粒子。用伏安法跟踪了纳米粒子在界面成膜的过程。用扫描探针显微术对表面得到的纳米结构经行了研究。结果表面这些弱相互作用力协同作用可形成二维纳米结构的表面。(4)我们在单晶Au（111）表面制备了分子导线和长链烷基硫醇的混合自组装膜。以该自组装膜为模板，我们在其表面选择性的生长了聚苯胺纳米结构，这些纳米结构可以作为为阵列电极，而且具有开关特性；同时这些结构为研究分子导线的导电性质提供了一个理想平台。

氧络铬卟啉配合物的合成结构及其氧化活性研究

本文选择不同配体（苯酚类和迭氮）通过Cr(III)(TPP)Cl (Al)的氧化还原取代，分别合成了四个新的铬（III）卟啉配合物，Cr(TPP)N_3P_Y(B_1), P-O_2NC_6H_4OCr(TPP)·THF (C1), P-CH_3OCoH_4OCr(TPP)·THF (D1), Cr(TPP)OC_6H_5·THF (E1)。通过元素分析，红外光谱、~1H NMR、ESR、MS和UV-Vis等分析、表征，确认了以上四种化合物。B1单晶进行了X－射线分析，得其晶体结构和分子结构，从而进一步证实了B1的组成。在CH_2Cl_2或C_6H_6中，氮气保护下，用PhIO直接氧化以上五种铬（III）卟啉配合物，合成并分离出了相应的高价氧络铬卟啉配合物，(PhI) O=Cr(▽)(TPP)Cl (A2), (PhI) O=Cr(▽)(TPP)N_3, (B2), P-O_2NC_6H_4O Cr(▽)(TPP) (1/2IPh) (C2), P-CH_3OC_6H_4O Cr(▽)(TPP) (1/2IPh) (D2), PhIO- Cr(IV)(TPP) (OC_6H_5)·P_Y (E2)。通过研究其元素组成，IR、UV－Vis、ESR、MS等分析，确定了以上五种化合物的组成。基中PhI和P_Y分子的位置尚无法确定。这两类高价氧络铬卟啉，是继右淑珍等第一次得到P450模型化合物的活性中间体－氧络铬（▽）四苯基卟啉对硝基苯甲酸配合物后，又一次得到的苯酸类和迭氮氧络铬卟啉配合物。不同的是，氧络铬（▽）卟啉配合物中都各有PhI分子，化合物E2是第一次得到的关键氧络铬（IV）卟啉配合物，类似于PhIO－Mn~(IV)(TPP)(P-H_2N C_6H_4 CO_2)。高价氧络铬卟啉配合物不稳定，室温下分解，暴露在空气中同时发生分解和还原。不过低温下比较稳定。在CH_2Cl_2或C_6H_6中，我们研究了上述五种氧络铬及Cr(TPP)ClPhIO对碳氢化合物和DNA碱基的氧化反应。不同摩尔比的PhIO-Cr(TPP)Cl对环已烷的氧化给出相同的产物，但转化率和产物分布不同。Al-PhIO和C_2-PhIO体内对碱基胞嘧啶，胸腺嘧啶，腺嘌呤的氧化反应呈阳性，氧化产物中都有尿素CO(NH_2)_2，其中胸腺嘧啶的氧化产物中含有CH_3CO-或CH_3CHOH。这说明氧络铬卟啉配合物能够氧化DNA碱基。氧络铬卟啉具有较高的氧化活性和立体选择性。比较不同轴向配体的氧络铬卟啉的氧化活性，其大小次序正好与其轴向配体的配位能力次序一致。这是由于轴向配体的给电子能力越强，通过中心离子铬向其周围转移的电荷就越多，导致氧络键的强度减弱，即其活性增加。上述研究结果表明，铬（III）卟啉配合物是P－450的较好的模型化合物，氧络铬卟啉配合物是其活性中间体。同时该研究结果支持了Groves等提出的定居卟啉配合物催化氧化机理。

大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤新型血小板活性蛋白及信号转导的研究

通过对两栖类动物大蹼铃蟾（B朋b了na勿日对朋）皮肤分泌物及匀浆物的分离，纯化，从其碱性组分中得到了全新的三叶因子多肤（BIn－－TFFZ）和膜联蛋白H相关蛋白（BAIIRP），它们分别具有诱导或抑制人血小板活化的全新功能。以血小板膜糖蛋白GPVI受体激动剂stejnulxin为对照，研究了Bm一TFFZ活化人血小板的信号传导途径。哺乳动物的三叶因子（TFF）蛋白的主要功能在于通过修复粘膜损伤，维持粘膜层的完整。它们在肿瘤抑制及癌症侵润方面也有一定程度的作用。我们从两栖类动物大蹼铃蟾皮肤分泌物分离，纯化而得到了一个全新的三叶因子多肤（Bm一TFFZ）。它是单亚基蛋白，表观分子量为13000，并具有全新的诱导人血小板活化的功能，我们研究了其诱导人血小板活化的活性的量效关系。它对血小板的激活涉及血小板整合素a：Ibp3的活化，Bm一TFFZ可诱导经阿斯匹林及三磷酸腺昔"双磷酸酶（Apyrase）处理的血小板的聚集，表明B，TFFZ的活性不依赖于血小板的ADP及血栓嗯烷A2（TXAZ）的自泌正反馈。F工TC标记的B爪一TFFZ蛋白能与血小板膜结合。通过专一性药理学抑制剂的研究，我们初步排除了Bm一TFFZ蛋白作用于血小板膜已知的G一蛋白偶联受体（如ADP，TXAZ及血小板活化因子受体）的可能性。以血小板GPVI激动剂stejnulxin为对照，我们仔细研究了Bm一TFFZ蛋白刺激血小板后的信号传导分子事件，发现其酪氨酸磷酸化图谱明显不同于血小板GPVI激动剂5tejnu1X如，尤其是磷脂酶CYZ并不磷酸化。因此，我们认为Bm一TFFZ蛋白激活血小板的信号传导通路是活化磷脂酶C，并刺激胞内钙离子的释放，活化血小板伪：。p3，进而导致血小板的聚集。从Bm－－TFFZ蛋白的cDNA克隆序列推知它由104个氨基酸组成，含有两个三叶因子结构域，与人TFFZ和非洲爪蟾xPZ序列中相同的氨基酸分别占28％及34％。为了确定两栖类的三叶因子蛋白具有诱导人血小板活化的功能，我们仔细地研究了整个分离纯化过程中所有组份的血小板聚集活性并比较了它们的相对活性差异。Bm一TFFZ是第一个来自两栖类动物的血小板激动剂，也是我们第一个报道的具有诱导血小板聚集活性的三叶因子多肤。·我们还通过阴离子交换，凝胶过滤和阳离子交换层析，从大蹼铃蟾皮肤匀浆物中纯化了一个表观分子量为33kD。的单链蛋白。N一末端序列比较分析显示，该·蛋白与来自非洲爪蟾、红色原鸡和人膜联蛋白H的N一末端序列相同的氨基酸分别占70％、64％和56％。该蛋白具有以钙依赖的方式抑制专一性血小板膜糖蛋白VI（GPVI）受体激动剂-Stejnu1Xin诱导洗涤人血小板聚集的生物学功能，最大抑制率达48％。结合其N一末端序列搜索结果及其活性的钙依赖性，推测该蛋白是与膜联蛋白H相关的一类蛋白质。

非洲爪蟾早期胚胎发育中PEDF和PEDF-R的功能以及vestigial-like家族表达图式的研究

PEDF 蛋白（Pigment epithelium-derived factor）又名“色素上皮源因子”或 “色素上皮衍生因子”，为一个多功能性分泌糖蛋白，前人研究表明PEDF 蛋白 具有神经保护性、免疫调节、抑制新生血管生成以及抑制肿瘤恶化等多种功能。 PEDF-R 是PEDF 的受体， 属于PNPLA2 （ Patatin-like phopholipase domain-containing 2 family）蛋白家族的一个新成员，PEDF 蛋白与其结合后会激 活PEDF-R 的磷脂酶A2 活性。本研究中，我们描述了非洲爪蟾PEDF 和PEDF-R 基因的表达图式及其在胚胎发育中的可能功能。RT-PCR 结果显示PEDF 是非母 源性表达，而PEDF-R 则是母源性表达的。原位杂交实验表明它们均在神经系统 中特异表达，但PEDF-R 的表达区域更加广泛，在鳃弓、眼泡和耳泡中也有表达。 通过mRNA 过表达和Morpholino(MO)阻断蛋白合成等手段发现，PEDF 功能获 得和功能缺失后胚胎几乎不受影响。然而PEDF-R 过表达后胚胎向注射一侧弯 曲，TUNEL 凋亡检测实验发现这些胚胎在注射一侧发生了凋亡。这两个基因神 经表达的特异性表明它们可能在早期神经发育中有重要功能。TUNEL 结果暗示 着PEDF-R 可能是一个与凋亡信号通路相关的受体。PEDF 功能获得和缺失并未 导致胚胎明显的表型，这表明PEDF 在非洲爪蟾中可能还存在其他的受体来行使 与PEDF-R 不同功能的途径。 果蝇的vestigial 基因编码一个转录辅助因子，在果蝇中只有一个成员，即 vestigial(vg)基因。在脊椎动物中有四个vestigial 同源基因，即vestigial-like 1,2,3,4_(vgl-1,2,3,4)。Vestigial 蛋白能作为辅助因子与果蝇中的Scalloped(Sd)蛋白 或者哺乳动物中的TEF 蛋白结合成复合体，通过Sd/TEF 蛋白的TEA/ATTS 结构 域与DNA 结合，从而调节下游基因的转录。本研究中，我们克隆了非洲爪蟾 vestigial-like 家族的四个成员，并对其在爪蟾胚胎发育过程中的表达进行研究。 RT-PCR 显示vgl-2 和vgl-3 是合子型表达的，vgl-1、vgl-4 则是母源性表达。原位 杂交显示：vgl-1 主要在神经管背部、耳泡和眼泡中表达；vgl-2 则是在肌肉、第 一二鳃弓、脊索中特异表达；vgl-3 神经胚时期在后脑有强的表达信号，从神经 胚后期到尾芽期后脑部位的表达几乎消失了，而在胚胎的头部以及神经管中开始 有微弱的表达；vgl-4 的表达较广泛，在神经管、眼泡、耳泡、肌肉以及脊索中 均有表达。在爪蟾中这四个成员的表达图式各不相同，提示它们有可能与其行使 组织特异性基因调控的功能相关，上述结果将有助于对vestigial-like 家族基因在 胚胎发育中的功能研究。