High Altitude Adaptation and Phylogenetic Analysis of Tibetan Horse Based on the Mitochondrial Genome

研究测定了西藏那曲(4,500 m)、云南中甸(3,300 m)、云南德钦(3,300 m)地区3匹藏马线粒体全基因组序列.3个地区的藏马线粒体基因组全长以及结构均与韩国济州岛的马类似,但比瑞典马线粒体基因组短.藏马基因组在DNA序列上的两两相似性达99.3%.通过对线粒体蛋白编码区的分析发现,NADH6基因的蛋白序列在三匹藏马中均表现快速进化的现象.这表明NADH6基因在藏马高原适应进化过程中扮演着重要角色.此外,利用7匹藏马的D-loop区域序列以及与其亲缘关系较近的马的序列首次构建的藏马的系统发育树显示,那曲藏马与中甸、德钦藏马属于不同的分支,且存在较大的遗传多样性,表明藏马可能为多地区起源.

HIV-1感染对T和B细胞核内UNG2 mRNA表达的影响

目的:探讨HIV-1感染是否影响细胞中UNG2的表达.方法:采用四步法SYBR green Ⅰ实时定量RT-PCR,对HIV-1感染者的T和B淋巴细胞,以及HIV-1感染的C8166细胞核内UNG2 mRNA的表达进行测定.结果:UNG2 mRNA的表达在HIV-1感染者的T细胞和HIV-1感染的C8166细胞中被明显上调,分别是对照的8.76倍和8.14倍,而在HIV-1感染者的B细胞中却没有被上调.结论:HIV-1感染导致的UNG2表达上调,可能通过减少TCR的多样性削弱Th的功能,另一方面可能有利于病毒对UNG2的包装.

草鱼野生和养殖群体间遗传变异的微卫星分析

运用微卫星标记对江苏境内草鱼(Ctenopharyngodon idella)一个野生群体(邗江群体)和两个养殖群体(淡水中心群体和无锡前洲群体)遗传多样性进行了分析.在10个座位中,每个座位检测到的等位基因数2～8个.有效等位基因数、多态信息含量、期望杂合度、平均表观杂合度均以邗江草鱼野生群体最高,分别为3.9、0.506 8、0.693 9、0.7;无锡前洲草鱼养殖群体最低,分别为2.2、0.179 6、0.523 5、0.528 6;淡水中心草鱼养殖群体各参数均介于两者之间,分别为3.5、0.290 2、0.541 8、0.542 9.以上结果表明:草鱼野生群体遗传多样性更为丰富,而草鱼养殖群体存在杂合度降低,遗传多样性下降的现象.邗江草鱼野生群体与淡水中心草鱼养殖群体和无锡前洲草鱼养殖群体间遗传分化系数分别为0.219和0.246,而两个草鱼养殖群体间遗传分化系数为0.034.这表明草鱼野生群体与草鱼养殖群体间分化严重,而草鱼养殖群体间分化微弱.各座位分化程度的χ2检验结果表明,10个座位中有GM18、MFW1-1、MFW1-2三个座位群体间分化达到极显著水平,GM03-2、MFW5两个座位群体间分化差异显著,其他座位分化不显著.针对每个座位对各群体进行Hardy-Weinberg平衡检验发现:由于草鱼养殖群体在GM03-1、GM03-2、GM18三个位点杂合子缺失,草鱼野生群体在位点GM19杂合子过剩而严重偏离平衡.实验表明:近交容易引起草鱼遗传多样性下降,纯合速度加快.

眼镜蛇毒因子消耗补体对大鼠移植心急性排斥反应的抑制作用

目的 研究中华眼镜蛇毒因子(CVF)消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响.方法 以近交系BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立腹腔异位心脏移植模型.实验分为2组,每组8只.CVF组:心脏移植术前3 d、2 d时,经受者尾静脉注射CVF 50 μg/kg;术前12 h至移植心停跳时,经尾静脉注射CVF 20 μg/kg,每2 d注射1次.对照组:术前、术后不给予受者任何特殊处理.术后观察移植心的存活时间,测定术后第1、3、5和6d及移植心停跳时的血清总补体活性(CH50法)、移植心C3沉积及CD3+T细胞浸润情况,并观察移植心的病理变化.结果 CVF组和对照组的移植心存活时间分别为(11.69±0.72)d和(6.65±0.35)d,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).CVF组移植心组织内C3沉积和CD3+T细胞浸润程度均较对照组同期明显减轻,病理损害程度也较对照组同期明显减轻.结论 CVF消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应起到了明显的抑制作用,从而延长移植心存活时间.

云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子(Y-CVF)对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组,实验组(n=8)于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg/kg;对照组(n=7)不用Y-CVF。观察移植心的生存时间,移植心停跳后病理学检查排斥类型,免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1∶1028~1∶2056。对照组移植心存活时间为12·71h±13·94h,实验组移植心存活时间为99·50h±38·72h,与对照组比较差异有统计学意义(t=5·599,P<0·01)。病理检查结果证实,实验组均未发生急性体液排斥,仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性,C3染色对照组为阳性,而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。

Morphological Phylogeny of the Water Snake Subfamily Homalopsinae (Serpent: Colubridae)

水蛇亚科属于游蛇科,包含10个属。其中7个属为单型属。选取水蛇亚科14个形态学特征进行支序分析,并利用计算机软件Hennig86对水蛇亚科中8个属之间的系统发育关系进行初步探讨,结果显示水蛇亚科分为两支Gerarda和Fordonia两个属构成姊妹群,Cerberus、Erpeton和Homalopsis三个属也构成单系群,与Vorisetal(2002)的分子系统树相同,但Cantoria属的地位则与Vorisetal(2002)的明显不同。

与植物多糖硫酸酯结合的HIV-1ⅢB灭活病毒免疫小鼠的研究

目的：为了探讨植物多糖硫酸酯（’&&(）与)*+%$ 结合后，能否诱导,-./+#0 的)*+%$ 暴露出中和抗体的表 位，用它作为灭活疫苗以便诱导产生中和抗体。方法：用’&&( 结合的灭活,-./+#0 作为免疫原，与佐剂混和后，免疫 0(102 3 小鼠，制备出免疫血浆。用41-5( 检测血浆内抗,-./+ 特异性-)6 抗体的滴度，用改良的活细胞染色法中和试验检测 免疫血浆的抗,-./+#0 的中和活性。结果：从与’&&( 结合的,-./+#0 免疫组的动物获得的免疫血浆内抗,-./+ 抗体的滴 度（7 组：+8 # 9 +$" ；: 组：+8 # 9 +$" ）比未结合’&&( 的,-./+#0 免疫组（;8 < 9 +$# ）高，雌性小鼠的免疫血浆的特异性抗体滴 度比雄性的高& 倍。所有免疫组获得的免疫血浆均没有抗,-./+ 中和活性。结论：’&&( 与)*+%$ 相互作用不能诱导暴露出 )*+%$ 的中和抗体表位，但’&&( 可以增强机体免疫原的抗体反应强度，提示它可以作为免疫增强剂用于疫苗研究。

八种稀土金属配合物和铂配合物抗HIV 活性的研究

　为了寻找治疗艾滋病的新药,研究了8 种稀土金属(镧、铒、镝、钆、镨、镱、钐、钕) 配合物和铂 配合物的抗HIV 活性。我们以C8166 细胞系为指示细胞,测定样品对HIV - 1IIIB诱导的细胞合胞体形成 的抑制作用,并以MTT方法测定它们对细胞存活率的影响,以研究稀土和铂配合物对细胞的毒性。根 据公式,计算出其CC50和EC50值,并进一步计算出其TI 值。结果表明,镧配合物、钐配合物和铂配合物 的EC50值分别为0. 006μg/ ml 、74. 28μg/ ml 和21. 54μg/ ml ,它们的治疗指数分别为63、21 和45 ,具有一定的 抗HIV - 1 活性。其它的配合物具有很低或者不具有抗HIV - 1 活性。

湖南产尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素性质和溶液构象的研究

经sephadex G-75凝胶过滤、QAE-Sephadex A-50和CM-Sephadex C-25离子交换步骤,从湖南产尖吻蝮（Deinagkistrodon acutus）蛇毒中纯化出两个出血毒素,被命名为HaHT-1和HaHT-2。用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定呈单一的蛋白染色带。两个出血毒素的分子量相同,均为 23.5kDa。等电聚焦电泳测定它们的等电点分别为5.6和5.2。HaHT-1和HaHT-2均具有较强的出血活性（MHD分别为0.5和0.8μg）,都有酪蛋白水解活力,无精氨酸酯酶、胆碱酯酶和磷脂酶A_2活力。用CD谱测定HaHT-l和HaHT-2的溶液构象,HaHT-1的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为36.9％、35.5％和27.6％,而HaHT-2的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为23.4％、31.3％和45.3％。pH的变化对它们构象有影响,在pH2-11范围内,酸性比碱性大。随着酸性或碱性的增加其α-螺旋含量减少,无规卷曲增加,β-折叠结构变化不大。

臭蛙群三种蛙类核型及染色体带型的比较(英文)

本文比较了3种臭蛙,即云南臭蛙（R. andersonii）、无指盘臭蛙（R.grahami）和滇南臭蛙（R.tiennanensis）的核型、C-带和银染核仁组织者区（Ag-NORs）。结果表明,3种臭蛙的核型均为2n=26（NF=52）,由5对大型染色体和8对小型染色体组成,与蛙科大多数种类的核型相似,但是染色体形态和次缢痕的位置和数目有差异。其中,云南臭蛙和无指盘臭蛙的核型相似程度比较大,与其他已报道的臭蛙类的核型相差不大,而滇南臭蛙的核型比较特殊,与其他臭蛙类的核型存在显著差异。 C-带技术显示的结果表明,3种臭蛙所有染色体的着丝点都有比较显著的C-带,而居间区C-带和端点C-带却存在明显的差异。3种中,滇南臭蛙的C-带带型比较特殊。有趣的是在研究中还发现,云南臭蛙的早中期细胞（染色体很长）染色体上发现了很多结构异染色质区,除着丝点C-带外,几乎所有的染色体上都有居间区或端点C-带,而在晚中期细胞中所观察到的C-带数目却较少,除着丝点外,只在少数染色体上发现了C-带。 云南臭蛙和无指盘臭蛙的Ag-NORs位于第10对染色体的长臂上,与该染色体上的次缢痕位置相对应,而滇南臭蛙的Ag-NORs位于第6...

蛇毒Ⅱ类磷脂酶A2 功能分化的分析研究

研究蛇毒Ⅱ类磷脂酶A2 (PLA2 ) 中D49 PLA2 和K49 PLA2 的功能分化及其功能分化决定位点的鉴定。方法: 运 用序列比较分析, 进化树构建和DIVERGE v1104 软件计算研究D49 PLA2 和K49 PLA2 的功能分化情况及其分化位点。结果: 序列比较分析, 进化树构建和DIVERGE v1104 软件计算结果表明蛇毒Ⅱ类PLA2 中D49 PLA2 和K49 PLA2 的确发生了功能分 化, 对于K49 PLA2 来说, 1S , 7K, 11Q , E12 , R34 , T56 , N88 , L92 , E108 , K116 , K128 可能为功能分化决定位点。对于 D49 PLA2 , L2 , G33 , G35 , F46 和Y118 可能为功能分化决定位点。结论: 我们首次通过序列比较分析, 进化树构建和DI2 VERGE v1104 软件计算鉴定出蛇毒Ⅱ类PLA2 中D49 PLA2 和K49 PLA2 可能的功能分化位点, 为今后通过基因重组和定点突 变方法研究蛇毒Ⅱ类PLA2 结构功能关系提供了线索。

中国西南部三种湍蛙的核型与带型的比较研究

本文研究了中国西南部3种湍蛙的核型、C-带及Ag-NORs。就核型而言,除雄性棘皮湍蛙比较特殊,具有27条染色体外,3种湍蛙的核型基本形式都是2n=26（NF=52）,由5对大型染色体和8对小型染色体组成,与其他蛙科种类的核型相类似。但是染色体形态,如臂比值和次缢痕的位置和数目存在一定差异。C-带显示的结果表明,湍蛙类的染色体上结构异染色质区域比较多,尤其是居间区C-带比较多,这表明湍蛙类的核型是比较特化的。其中棘皮湍蛙的居间区和端部C-带最多。3种湍蛙的Ag-NORs都位于No.6的短臂上,与该染色体上的次缢痕位置相一致。比较3种之间的异同,认为棘皮湍蛙与金江湍蛙核型和带型的相似程度较大,而绿点湍蛙则比较特殊。 雄性棘皮湍蛙的二倍体染色体数是27, 即有一条染色体不能配对,经过对其形态、C-带等的研究,认为该染色体为性染色体,其相对长度介于No.6和No.7之间（RL=6.26）,臂比值为1.32（m）,C-带显示该染色体几乎完全异染色质化,表明该染色体为特化的Y染色体。在其余各对中未见异形现象。 金江湍蛙（A.jinjiansensis）被认为是凉山湍蛙（A.liangshanensis）的同物异名,...

丙型肝炎病毒基因和蛋白结构研究进展

　估计全球约有117 亿人口感染丙型肝炎,是一种严重影 响人类健康的传染病。丙型肝炎的病原为丙型肝炎病毒 (Hepatitis C Virus ,HCV) 。1989 年Choo 等人首先获得HCV 基因组的cDNA 全序列,使HCV 成为病毒学史上第一个首先 通过基因克隆技术确认的病毒〔1 ,2〕。此后,HCV 的分子生物 学研究进展迅速。现将HCV 病毒分子结构的最新研究状况 做一综述。

7 种蛇毒小肽对临床分离耐(多) 药结核分枝杆菌的体外活性研究

目的　检测7 种从蛇毒分离的小肽是否对临床分离的耐药性结核分枝杆菌菌株具有活性。方法　放射性方法检测蛇毒 小肽对结核分枝杆菌的最小抑制浓度,细菌存活计数确证放射性方法的结果。结果　7 种蛇毒小肽对耐药性结核分枝杆菌菌 株都有活性。其MIC 值分别为(μg·mL - 1) : Opiophagus hannah 5. 4 , Naja at ra 8. 6 , B ungarus f asciatus 6. 4 , Trimeresurus ste2 jnegri 12. 6 , Protobothrops mucrosquamatus 11. 8 , Protobothrops jerdonii 7 , A gksist rodon halys 4. 2 。结论　这些结果是首次报 道,为进一步设计和开发新来源的抗结核病新药提供了依据。

眼镜蛇毒高活性抗补体因子的体外溶血活性研究

　目的　了解云南孟加拉眼镜蛇毒高活性抗补体因子 的体外溶血活性。方法　采用由豚鼠血清、豚鼠红细胞和该 抗补体因子组成的体外溶血体系,对其溶血活性、溶血活性 稳定性以及多种二价金属离子、EDTA 对其溶血活性的影响 进行研究。结果　该抗补体因子溶血活性的比活力为1 391 KU·g - 1 ,其溶血活性对温度、酸碱表现出较好的稳定性,1 、 2 、5 mmol·L - 1的Ca2 + 、Mg2 + 、Mn2 + 能促进抗补体因子的溶 血活性,1 、2 mmol·L - 1的Zn2 + 、Co2 + 能促进抗补体因子的溶 血活性,而5 mmol·L - 1的Zn2 + 、Co2 + 则抑制抗补体因子的 溶血活性,Cu2 + 在1 、2 、5 mmol·L - 1时则强烈抑制抗补体因 子的溶血活性, EDTA 能强烈抑制抗补体因子的溶血活性。 结论　云南孟加拉眼镜蛇毒高活性抗补体因子具有一定的 溶血活性,并且具有较好的温度耐受性及酸碱稳定性。多种 二价金属离子及EDTA 能促进或抑制这种溶血活性。