52 resultados para EPHRIN-B2
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集约化养殖大量使用铜(Cu)作为饲料添加剂会在养殖废物的排放和利用中导致一定的环境问题。随着东北老工业基地产业结构的调整,畜牧业作为东北地区二次振兴的主要产业得到迅速发展,由此会产生大量的畜禽粪便用于农业土壤施肥。而东北地区又是我国重要的农副产品生产基地,研究畜禽粪便农用的健康及环境风险就显得殊为必要。黑土是东北地区最主要的土壤类型,本文以东北黑土为供试材料,通过在盆栽实验中添加不同Cu浓度的猪粪来模拟施肥年限不同的菜园土,研究土壤中Cu累积对小白菜(Brassica chinensis L.)地上部分生物量与Cu含量、土壤微生物生物量和土壤酶(脱氢酶、脲酶、酸性磷酸酶)活性、微生物群落功能多样性以及对土壤功能微生物——氨氧化古菌(AOA)和氨氧化细菌(AOB)等的影响,从而实现含Cu猪粪农用对食物链途径的健康风险以及土壤生态系统的生态风险的综合评价。 研究结果表明,施用猪粪显著地改善了土壤的pH,增加了小白菜地上部分生物量,对其体内Cu浓度则没有显著影响;小白菜地上部分Cu浓度与土壤全Cu和水溶态Cu浓度显著正相关(P<0.01),而地上生物量与土壤全Cu浓度显著负相关(P<0.05)。当土壤全Cu浓度达到300 mg kg-1后,小白菜地上部分生物量受到强烈抑制。 猪粪的施用在一定时期内显著地促进了脱氢酶和脲酶的活性,但随土壤Cu浓度的增加,脱氢酶、脲酶和酸性磷酸酶的活性逐渐受到抑制。当土壤全Cu浓度达到300 mg kg-1后,微生物生物量、脱氢酶、脲酶、酸性磷酸酶等均受到强烈抑制。 施加猪粪提高了土壤微生物群落功能多样性,当土壤Cu浓度达到170 mg kg-1后,显著地抑制了微生物群落功能多样性。种植小白菜后,各处理间微生物群落功能多样性没有显著差异,意味着植物能够维持微生物群落功能多样性。主成分分析(PCA)结果显示,当土壤全Cu浓度达到300 mg kg-1后,微生物群落功能多样性与其它处理显著不同。 猪粪显著地促进了土壤的硝化潜势速率(PNR)。随着Cu浓度的增加,硝化潜势速率逐渐受到抑制,当土壤全Cu浓度达到170 mg kg-1后,即与对照无显著差异。植物在维持硝化速率方面也起到重要作用。古菌amoA基因在每克干土中的拷贝数在9.4*106~2.59*107,细菌amoA基因在每克干土中的拷贝数约为1.48*106~1.41*107。猪粪在一定时期内显著地增加了AOA和AOB的数量,当土壤Cu浓度达到300 mg kg-1后,AOA和AOB的数量显著下降,并且AOA与AOB amoA基因拷贝数的比值增加,在小白菜栽种前(B1)和小白菜收获后(B2)分别为2.33和9.26,这意味着在高Cu浓度胁迫下,AOA的耐受性更强。古菌与细菌的amoA拷贝数与PNR之间则没有显著的相关关系,意味着AOA和AOB种群结构以及其中某些种群的活性可能发生了变化。 本文通过对东北黑土菜地土壤中Cu在作物体内的迁移积累及其对土壤微生物学指标(微生物生物量、酶活性、微生物群落功能多样性及功能微生物)的影响的综合研究,揭示了含Cu猪粪农用所造成的健康和生态风险,为建立适宜的土壤环境质量标准提供了一定的科学依据。通过本研究得出,黑土蔬菜种植中Cu浓度的阈值在170-300 mg kg-1之间。
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森林作为陆地生态系统的主体,在全球陆地碳循环中起着决定性作用。实测和模型研究均表明北半球的森林是重要的大气CO2汇,在缓解全球碳收支失衡中发挥着关键作用。过去几十年北半球所经历的显著气候变化,已经很大地改变了陆地生态系统的碳平衡状况。随着未来100年气候变化继续增大,对未来气候变化下森林生态系统碳平衡的预测研究就尤为重要。 北京山区森林属于典型的暖温带森林生态系统,前人对本区森林的植被特征、生态系统结构和功能、养分循环以及长期动态变化等都进行了深入的研究。然而长期的人类活动已使本区原生的地带性植被破坏殆尽。因此,对该区域森林生态系统碳平衡的模拟研究可以帮助我们认识其生态系统碳平衡变化特点及未来气候变化对其潜在的影响。 本研究采用LPJ-GUESS植被动态机理模型,利用IPCC于2000年发布的《排放情景特别报告》(SRES)的A2和B2两种情景下不同气候模式对华北地区未来100年温度和降水预测的平均值以及相应大气CO2浓度变化情景进行驱动,模拟北京山区未来100年暖温带森林生态系统的净初级生产力和碳平衡,尽可能真实地反映未来百年的变化趋势。通过比较当前和未来气候情景下北京山区以辽东栎(Quercus liaotungensis)为优势种的落叶阔叶林、以白桦(Betula platyphylla)为主的落叶阔叶林和油松(Pinus tabulaeformis)为主的针阔混交林三种典型暖温带森林生态系统的碳平衡差异,了解未来北京山区这三种暖温带森林生态系统的碳源汇功能,认识气候变化和大气CO2浓度升高对净初级生产力(Net primary productivity, NPP)、净生态系统碳交换(Net ecosystem exchange, NEE)、土壤异养呼吸(Heterotrophic respiration, Rh)和碳储量(Carbon biomass, C biomass)的影响,以及不同生态系统碳平衡对气候变化响应的异质性。 结果表明,未来100年两种气候情景下三种森林生态系统的NPP和Rh均增加,并且A2情景下增加的程度更大。由于三种生态系统树种组成的不同,未来气候情景下各自NPP和Rh增加的比例不同,导致三者NEE的变化也相异:100年后辽东栎林由碳汇转变为弱碳源,白桦林仍保持为碳汇但功能减弱,油松林成为一个更大的碳汇。三种森林生态系统的碳生物量在未来气候情景下均增大,21世纪末与20世纪末相比:辽东栎林在A2情景下碳生物量增加的比例为27.6%,大于B2情景下的19.3%;白桦林和油松林在B2情景下碳生物量增加的比例分别为34.2%和52.2%,大于A2情景下的30.8%和28.4%。各森林类型碳平衡状况不同,原因除气候因素外,主要是由于树种组成的差异所导致。SRES A2和B2两种气候情景相比,相对较低的排放情景(B2)下,生态系统有更高的碳储量。
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我国北方温带草原地处干旱半干旱区,是欧亚大陆草原生物区系的重要组成部分,也是我国重要的畜牧业生产基地。土壤氮素作为陆地植物生长和生态系统初级生产力的主要限制因子之一,了解其矿化和可利用性对各种人为干扰因素的响应,有助于我们充分认识草地退化机理,维持草场生产力并进一步促进畜牧业的可持续发展,为草地恢复、重建和维护提供理论依据。本实验在中国科学院内蒙古草原生态系统定位研究站的多年围封退化样地,分别实施了火烧、施肥、刈割及其交互作用的人为干扰处理,利用原状土野外培养的方法,在两年时间中,研究不同的人为干扰因素(火烧、施肥、刈割及其交互处理)对土壤净氮矿化作用的影响。 火烧显著影响草原的氮循环过程,季节和年际的气候变化参与调节氮循环对火烧处理的响应。多年围封后的初次人工火烧处理显著降低了第一个生长季(2006 年生长季)和其后冬季的土壤净氮矿化速率,但是,火烧处理仅在冬季对土壤无机氮含量产生显著降低作用;2007 年生长季,火烧处理对土壤净氮矿化速率和土壤无机氮含量没有显著作用,但是在个别月份,不同的火烧频率对土壤净氮矿化速率和无机氮含量的影响表现出差异。2006 年生长季,未火烧样地和火烧样地净氮矿化积累量分别为3.07±0.26 g N m-2 和2.18±0.21 g N m-2;冬季,未火烧样地和火烧样地净氮矿化积累量分别为1.18±0.25 g N m-2 和0.51±0.08 g N m-2;2007 年生长季,未火烧样地(BC)、每年火烧样地(B1)和两年一烧样地(B2)净氮矿化积累量分别为1.32±0.21 g N m-2、0.54±0.30 g N m-2 和 0.77±0.24 g N m-2。较为湿润的2006 年生长季的净氮矿化积累量显著高于较为干旱的2007 年生长季,冬季也存在相当丰富的净氮矿化积累量。我们推论,长时间围封后的单次火烧处理对土壤净氮矿化作用的影响可能是短效的,但是年际间气候变化对土壤净氮矿化作用影响显著。 施肥显著提高了土壤的无机氮含量,并且与施肥梯度呈显著正相关关系。施肥对土壤无机氮含量的影响具有累加效应,第一次施肥和第二次施肥后的首次取样,+N5.25 、+N17.5 、+N28.0 三个施肥梯度的样地土壤无机氮含量比未施肥样地分别高出56%、219%、1054%和514%、891%、1811%。施肥处理在2006 年和2007 年对土壤净氮矿化作用都没有显著影响,仅在2007 年的个别月份有一定效果。以上结果说明,无机氮肥的添加可以明显提高土壤中无机氮的含量,满足植物生长的需求,但对于土壤氮转化过程的影响可能还要受其它环境和生物因子的制约。 刈割对土壤无机氮含量和净硝化速率没有显著作用,对土壤净氮矿化速率仅在个别月份表现显著效果。2007 年生长季,未刈割样地和刈割样地净氮矿化积累量分别为1.32±0.21 g N m-2 和1.08±0.35 g N m-2,不存在显著差异。我们推论,长期围封后的单次刈割处理在短期内对生长季的土壤氮动态仅有微弱影响,并且这种效果还可能受水分因素的制约。 火烧、施肥、刈割的交互处理在2007 年生长季对土壤无机氮含量产生显著作用,但是,对土壤净氮矿化速率和净硝化速率没有显著效果,然而,在不同的取样时间,火烧、施肥、刈割的交互处理对土壤无机氮含量、净氮矿化速率和净硝化速率的影响存在显著差异,说明火烧、施肥、刈割的交互处理对土壤无机氮和净氮矿化作用的影响可能受各种环境因子的制约,尤其是在水分相对缺乏的半干旱内蒙古草原,非生物因子和生物因子可能共同影响着土壤中的氮平衡。 本研究初步分析了长期围封后火烧、施肥、刈割及其交互处理对土壤净氮矿化的影响,初步探究了人为干扰和环境气候变化对土壤可利用性氮的调节作用,为科学地进行禁牧、割草、人工养份添加等草原管理提供了数据支持。
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:探索以Lentivirus为载体,构建同时表达绿色荧光蛋白(GFP)和神经营养因子一3(NT一3)的基因工程化鼠胚神经于细胞(NSC)的可行性。方法:体外分离培养鼠胚NSC,用同时携带NT一3和GFP的lentivirus转染构建工程化NSC;用荧光显微镜、鼠胚背根神经结培养(Dorsal Root Ganglion,DRG)、Westem blot等方法检测基因工程NSC 的转基因表达。结果:荧光显微镜观察到几乎100%的工程化NSC表达GFP:DRG培养和Westem blot检测到基因工程化NSC能高效分泌NT一3蛋白。结论:以IJentivirus为载体,构建同时携带并稳定表达GFP和N‘r_3的基因工程化鼠胚NSC是可行的,可为脊髓损伤基础研究提供有价值的细胞资源。
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研究烙铁头m小板活化索(TMVA)对大鼠血小板聚集的抑制作用以及对豚鼠
到大鼠的异种移植心存活时间的影响。方法(1)TMVA对血小板聚集率的影响:将Wistar大鼠随
机分为3组,每组5只,各组经阴茎背静脉注射不同剂量(20、50或100 pg/kg)的TMVA,于注射前
以及注射后0.5 h和24 h时抽血,测定血小板聚集率。(2)TMVA对豚鼠到大鼠的异种移植心存活
时间的影响:以豚鼠为供者,Wistar大鼠为受者,制作颈部异位心脏移植模型,实验组于移植心恢复
血液循环前0.5 h经静脉给予TMVA 50弘g/kg,另设不使用TMVA的对照组。观察移植心的存活
时间,停跳后的移植心组织行病理学检查,并用放射免疫法检测心肌组织内6一酮一前列腺素F,。
(6一keto-PGF。。)及血栓素B2(TXt笺)的含量。结果(1)静脉给予5()或100 pg/kg的TMVA后0.5
h即能完全抑制血小板聚集。(2)实验组移植心的存活时间为1()~135 min,中位数为42 min;对照组
为4~16 min,中位数为5 min,两组比较,差异有统计学意义(P
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利用置信度为95 的特征字研究了蛋白质二级结构以及其对应mRNA 二级结构, 发现 蛋白质二级结构和mRNA 二级结构有明显的相关性. 规则二级结构A2螺旋, B2折叠以及包含 有Turn 的边界明显倾向于mRNA 二级结构的茎区, 而避免出现在环区.
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目的 观察蛇毒出血毒素结构的变化对功能的影响。 方法 利用傅利叶变换红外光谱仪对尖吻 蝮蛇毒出血毒素(DaHT23) 在溶液中酰胺I 带吸收光谱的研究, 探测了此出血毒素在溶液中的自然构象 和加入EDTA 螯合剂除去金属离子后构象的变化。 结果 此出血毒素在水溶液中的自然构象分别是: A2 螺旋为3118%、B2折叠为5611%、转角为1211%; 而在去除金属离子情况下A2螺旋和B2折叠减少, 转角 和无规卷曲增加, 即加入螯合剂后其A2螺旋、B2折叠、转角和无规卷曲分别变为11%、2614%、4612% 和 1615%。由于结构的变化, 它的出血活性和蛋白水解酶活性均被丧失。 结论 金属离子, 特别是锌离子 在维系蛇毒出血蛋白酶分子中的二级结构中起着很重要的作用。
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对藏北高原 3种裸鲤的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶 (MDH )和脂酶 (EST)进行电泳分析的结果表明 ,3种裸鲤酶谱均表现出种间的差别 ,而且在同一种群个体之间也存在着明显的分化 ,但无性别差异。 3种裸鲤被检测的 3种同工酶均有沉默基因表达的现象 ,重复基因LDH -A2 、LDH -B2 、s -MDH -A2 和m -MDH -B2 也在部分个体中表达。遗传距离分析表明 ,色林错裸鲤(G .selincuoensis)与错鄂裸鲤 (G .cuoensis)之间较之于与纳木错裸鲤 (G .n
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Insect PGRPs can function as bacterial recognition molecules triggering proteolytic and/or signal transduction pathways, with the resultant production of antimicrobial peptides. To explore if zebrafish peptidoglycan recognition protein SC (zfPGRP-SC) has such effects, RNA interference (siRNA) and high-density oligonucleotide microarray analysis were used to identify differentially expressed genes regulated by zfPGRP-SC. The mRNA levels for a set of genes involved in Toll-like receptor signaling pathway, such as TLRs, SARM, MyD88, TRAF6 and nuclear factor (NF)-kappa B2 (p100/p52), were examined by quantitative RT-PCR (QT-PCR). The results from the arrays and QT-PCR showed that the expression of 133 genes was involved in signal transduction pathways, which included Toll-like receptor signaling, Wnt signaling, BMP signaling, insulin receptor signaling, TGF-beta signaling, GPCR signaling, small GTPase signaling, second-messenger-mediated signaling, MAPK signaling, JAK/STAT signaling, apoptosis and anti-apoptosis signaling and other signaling cascades. These signaling pathways may connect with each other to form a complex network to regulate not just immune responses but also other processes such as development and apoptosis. When transiently over-expressed in HEK293T cells, zfPGRP-SC inhibited NF-kappa B activity with and without lipopolysacharide (LPS) stimulation. (C) 2008 Elsevier Ltd. All rights reserved.
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In Drosophila, Toll signaling cascade, which resembles the mammalian Toll-like receptor (TLR)/IL-1R signaling pathways and regulates the expression of anti-microbial peptide genes, mainly relies on peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) for the detection of bacterial pathogens. To explore the effect of zebrafish peptidoglycan recognition protein 6 (zfPGRP6) on Toll-like receptor signaling pathway, RNA interference (siRNA) and real time quantitative PCR (RQ-PCR) methods were used to identify differentially expressed genes regulated by zfPGRP6. The target genes included TLR2, TLR3, TLR5, TLR7, TLR8, IL1R, Sterile-alpha and Armadillo motif containing protein (SARM), myeloid differentiation factor 88 (MyD88) and nuclear factor (NF)-kappa B2 (p100/p52). The results of RQ-PCR showed that RNAi-mediated Suppression of zfPGRP6 significantly down-regulated the expression of TLR2, TLR5, IL1R, SARM, MyD88 and p100/p52. The expression of beta-defensin-1 was also down-regulated in those embryos silenced by zfPGRP6. In challenge experiments to determine the anti-bacterial response to Gram-negative bacteria, RNAi knock-down of zfPGRP6 markedly increased susceptibility to Flavobacterium columnare. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.
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The Sox gene family is found in a broad range of animal taxa and encodes important gene regulatory proteins involved in a variety of developmental processes. We have obtained clones representing the HMG boxes of twelve Sox genes from grass carp (Ctenopharyngodon idella), one of the four major domestic carps in China. The cloned Sox genes belong to group B1, B2 and C. Our analyses show that whereas the human genome contains a single copy of Sox4, Sox11 and Sox14, each of these genes has two co-orthologs in grass carp, and the duplication of Sox4 and Sox11 occurred before the divergence of grass carp and zebrafish, which support the "fish-specific whole-genome duplication" theory. An estimation for the origin of grass carp based on the molecular clock using Sox1, Sox3 and Sox11 genes as markers indicates that grass carp (subfamily Leuciscinae) and zebrafish (subfamily Danioninae) diverged approximately 60 million years ago. The potential uses of Sox genes as markers in revealing the evolutionary history of grass carp are discussed.
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强制访问控制能有效地防止用户有意或无意地破坏系统的安全,能够有效地防止病毒和木马以用户的身份破坏系统的安全,是高安全需求操作系统的主要防护手段。业界对操作系统强制访问控制研究起步很早。然而,面对日新月异的应用场景,面对计算机系统及操作系统自身相关技术的迅猛发展,已有的针对操作系统强制访问控制的研究工作不足以兼顾安全性、可用性和灵活性。以上不足集中体现在:1) 当前广泛使用的强制访问控制机制从设计上难以同时满足实用系统对安全性和可用性的要求;2) 强制访问控制的设计缺乏对操作系统所处分布式、网络化环境的考虑;3) 操作系统强制访问控制研发保障技术需要进一步研究。 针对这些问题,本论文从强制访问控制的设计和保障出发,对操作系统强制访问控制关键技术展开研究,并取得了以下几个方面的成果: 第一:强制访问控制格策略模型机制简洁,安全性易验证,在安全操作系统和安全增强操作系统上应用广泛。然而严格地实施格策略会带来可用性的问题。本文针对机密性和完整性强制访问控制格策略模型,分别给出了可监控客体框架和Clark-Wilson可信主体特权状态跃迁监控框架。这些框架具有细的刻画粒度,好的扩展性和简洁性,我们对这些框架给出了数学描述,并对带Clark-Wilson可信主体特权状态跃迁监控框架的完整性格模型给出了理论证明; 第二:针对分布式应用环境,提出了基于可信计算技术和域型实施(Domain and Type Enforcement: DTE)策略的操作系统分布式强制访问控制方案。我们从理论上证明了策略的安全性。相比国内外同类工作,该方案具有细的访问控制粒度,在系统验证的简洁性和部署的灵活性方面是最好的; 第三:实施强制访问控制的中高等级安全操作系统的安全性需要利用形式化方法的严密性进行保证。本文按照TCSEC B2级别的要求,利用Z/EVES形式化工具对SECIMOS安全操作系统进行了形式化保障:给出了安全模型的形式化规范,给出了安全不变量和安全定理,证明了安全定理,描述了形式化安全模型与顶层设计的一致性; 第四:操作系统强制访问控制框架是强制访问控制机制在操作系统上实现的基础。本文提出了针对操作系统强制访问控制框架的自动测试用例生成方案。该方案利用编译器辅助审计代码插入,约束求解器辅助置乱参数生成,测试用例精简等技术为FreeBSD MAC框架生成了一套有效的回归测试用例套件。同时也为基于FreeBSD MAC框架的NFSARK系列安全操作系统提供了坚实的实施基础。 本文的研究成果向圆满解决当前国内操作系统强制访问控制的设计、实施和保障中遇到的问题的目标迈出了坚实的一步。
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为预测3种温室气体排放情景(A2、B2和GGa1)下未来40年黄土丘陵沟壑区的气候变化,利用安塞试验站1986—2003年的气候观测资料以及1986—2049年GCM(HadCM3)栅格数据,通过空间转换和时间转换,利用CLIGEN和GCM模型,预测未来40年以安塞为代表的黄土高原丘陵沟壑区的气候变化。结果表明:与当前条件相比,到2049年,A2、B2和GGa1 3种情景下预测的降雨量分别增加37%、22%和12%;3种情景下预测的最大月均降雨量出现在夏季;到2049年,A2、B2和GGa1 3种情景下预测的月均最低气温和月均最高气温皆增加,但差异不明显,年均最低气温和年均最高气温分别增加1.41~1.56℃和0.92~1.57℃。
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本文选择不同配体(苯酚类和迭氮)通过Cr(III)(TPP)Cl (Al)的氧化还原取代,分别合成了四个新的铬(III)卟啉配合物,Cr(TPP)N_3P_Y(B_1), P-O_2NC_6H_4OCr(TPP)·THF (C1), P-CH_3OCoH_4OCr(TPP)·THF (D1), Cr(TPP)OC_6H_5·THF (E1)。通过元素分析,红外光谱、~1H NMR、ESR、MS和UV-Vis等分析、表征,确认了以上四种化合物。B1单晶进行了X-射线分析,得其晶体结构和分子结构,从而进一步证实了B1的组成。在CH_2Cl_2或C_6H_6中,氮气保护下,用PhIO直接氧化以上五种铬(III)卟啉配合物,合成并分离出了相应的高价氧络铬卟啉配合物,(PhI) O=Cr(▽)(TPP)Cl (A2), (PhI) O=Cr(▽)(TPP)N_3, (B2), P-O_2NC_6H_4O Cr(▽)(TPP) (1/2IPh) (C2), P-CH_3OC_6H_4O Cr(▽)(TPP) (1/2IPh) (D2), PhIO- Cr(IV)(TPP) (OC_6H_5)·P_Y (E2)。通过研究其元素组成,IR、UV-Vis、ESR、MS等分析,确定了以上五种化合物的组成。基中PhI和P_Y分子的位置尚无法确定。这两类高价氧络铬卟啉,是继右淑珍等第一次得到P450模型化合物的活性中间体-氧络铬(▽)四苯基卟啉对硝基苯甲酸配合物后,又一次得到的苯酸类和迭氮氧络铬卟啉配合物。不同的是,氧络铬(▽)卟啉配合物中都各有PhI分子,化合物E2是第一次得到的关键氧络铬(IV)卟啉配合物,类似于PhIO-Mn~(IV)(TPP)(P-H_2N C_6H_4 CO_2)。高价氧络铬卟啉配合物不稳定,室温下分解,暴露在空气中同时发生分解和还原。不过低温下比较稳定。在CH_2Cl_2或C_6H_6中,我们研究了上述五种氧络铬及Cr(TPP)ClPhIO对碳氢化合物和DNA碱基的氧化反应。不同摩尔比的PhIO-Cr(TPP)Cl对环已烷的氧化给出相同的产物,但转化率和产物分布不同。Al-PhIO和C_2-PhIO体内对碱基胞嘧啶,胸腺嘧啶,腺嘌呤的氧化反应呈阳性,氧化产物中都有尿素CO(NH_2)_2,其中胸腺嘧啶的氧化产物中含有CH_3CO-或CH_3CHOH。这说明氧络铬卟啉配合物能够氧化DNA碱基。氧络铬卟啉具有较高的氧化活性和立体选择性。比较不同轴向配体的氧络铬卟啉的氧化活性,其大小次序正好与其轴向配体的配位能力次序一致。这是由于轴向配体的给电子能力越强,通过中心离子铬向其周围转移的电荷就越多,导致氧络键的强度减弱,即其活性增加。上述研究结果表明,铬(III)卟啉配合物是P-450的较好的模型化合物,氧络铬卟啉配合物是其活性中间体。同时该研究结果支持了Groves等提出的定居卟啉配合物催化氧化机理。
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1、喜树碱类衍生物抗HIV构效关系与作用机制研究 喜树碱为传统的抗肿瘤药物。本研究对经过化学结构修饰的喜树碱类衍生物进行抗HIV活性及作用机制的研究,并初步探讨了其抗HIV构效关系。 我们对喜树碱类衍生物A系列化合物A1(喜树碱)、A2(10-羟基喜树碱)及A3(7-羟基喜树碱)进行了抗HIV活性检测。化合物A1和A3有较好的抗HIV-1和抗HIV-2活性,化合物A2没有显示抗HIV活性。表明化合物A1的C-10位上-OH基团修饰可能会降低抗HIV活性,化合物A1的C-7位上-CH2OH基团修饰和C-20位-CH3缺失可能会提高其抗HIV活性。对化合物A3和A1的抗HIV机制研究发现:二者对整合酶有一定的结合活性,对慢性感染H9/HIV-1ⅢB 和Jurkat/HIV-1ⅢB细胞中病毒复制没有抑制活性、不能阻断H9/HIV-1ⅢB与正常细胞间的融合,对重组的HIV-1蛋白酶和逆转录酶没有抑制活性。化合物A1和A3不具有选择性杀伤HIV-1ⅢB慢性感染的H9和Jurkat细胞系的作用。进一步进行化合物A3诱导 H9和H9/HIV-1ⅢB、Jurkat和Jurkat/HIV-1ⅢB的凋亡实验显示,化合物A3诱导感染HIV-1ⅢB和未感染病毒细胞的凋亡没有选择性。据此我们初步认为化合物A3和A1的抗HIV作用可能与抑制整合酶活性有关,该化合物可能还作用于其它靶点。 喜树碱类衍生物B系列中化合物B1为20(S)-O - [-O-( 1'-氧基-2',2',6',6'-四甲基哌啶-4'-丁二酸)]-20-喜树碱酯,化合物B2为20(S)-O - [-N-( 1'-氧基-2',2',6',6'-四甲基-1',2',5',6'-四氢吡啶酰胺)-4'-丙氨酸)]-20-喜树碱酯)。我们对化合物B1和B2进行了抗HIV活性检测。结果显示:化合物B2有较好的抗HIV-1和抗HIV-21、喜树碱类衍生物抗HIV构效关系与作用机制研究 喜树碱为传统的抗肿瘤药物。本研究对经过化学结构修饰的喜树碱类衍生物进行抗HIV活性及作用机制的研究,并初步探讨了其抗HIV构效关系。 我们对喜树碱类衍生物A系列化合物A1(喜树碱)、A2(10-羟基喜树碱)及A3(7-羟基喜树碱)进行了抗HIV活性检测。化合物A1和A3有较好的抗HIV-1和抗HIV-2活性,化合物A2没有显示抗HIV活性。表明化合物A1的C-10位上-OH基团修饰可能会降低抗HIV活性,化合物A1的C-7位上-CH2OH基团修饰和C-20位-CH3缺失可能会提高其抗HIV活性。对化合物A3和A1的抗HIV机制研究发现:二者对整合酶有一定的结合活性,对慢性感染H9/HIV-1ⅢB 和Jurkat/HIV-1ⅢB细胞中病毒复制没有抑制活性、不能阻断H9/HIV-1ⅢB与正常细胞间的融合,对重组的HIV-1蛋白酶和逆转录酶没有抑制活性。化合物A1和A3不具有选择性杀伤HIV-1ⅢB慢性感染的H9和Jurkat细胞系的作用。进一步进行化合物A3诱导 H9和H9/HIV-1ⅢB、Jurkat和Jurkat/HIV-1ⅢB的凋亡实验显示,化合物A3诱导感染HIV-1ⅢB和未感染病毒细胞的凋亡没有选择性。据此我们初步认为化合物A3和A1的抗HIV作用可能与抑制整合酶活性有关,该化合物可能还作用于其它靶点。 喜树碱类衍生物B系列中化合物B1为20(S)-O - [-O-( 1'-氧基-2',2',6',6'-四甲基哌啶-4'-丁二酸)]-20-喜树碱酯,化合物B2为20(S)-O - [-N-( 1'-氧基-2',2',6',6'-四甲基-1',2',5',6'-四氢吡啶酰胺)-4'-丙氨酸)]-20-喜树碱酯)。我们对化合物B1和B2进行了抗HIV活性检测。结果显示:化合物B2有较好的抗HIV-1和抗HIV-2活性,而化合物B1的抗HIV活性差。表明化合物B1的C-4’位-CH2被-NH取代,同时C-3’位-CH3修饰可能会提高其抗HIV活性。对化合物B2的抗HIV机制研究发现,化合物B2对慢性感染H9/HIV-1ⅢB细胞中病毒复制没有抑制活性、不能阻断H9/HIV-1ⅢB与正常细胞间的融合,对HIV-1蛋白酶、重组的HIV-1逆转录酶及整合酶没有抑制活性。化合物B2不具有选择性杀伤HIV-1ⅢB慢性感染的H9细胞系的作用。化合物B2抗HIV的作用机制还需进一步研究。 2、HIV/AIDS患者疱疹病毒感染状况及性病患者的HIV感染状况分析 疱疹病毒是AIDS患者合并感染的常见病原体。引起人类疾病的8种疱疹病毒与HIV感染及AIDS进展、机会性感染、恶性肿瘤密切相关。为了解HIV/AIDS患者人类8型疱疹病毒感染状况,我们检测了30例AIDS患者、40例HIV携带者及70例正常对照的液标本中8型疱疹病毒感染状况。采用ELISA法检测单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)和巨细胞病毒(CMV);采用PCR法检测EB病毒(EBV)、疱疹病毒6型(HHV-6)、疱疹病毒7型(HHV-7)及疱疹病毒8型(HHV-8)。结果显示,HIV/AIDS患者中HSV-1、HSV-2、VZV、CMV、HHV-6、HHV-8 阳性率均高于健康体检者,其中AIDS患者VZV感染率与HIV携带者有显著性差异;在AIDS患者中多种疱疹病毒共感染普遍存在,必须重视HIV/AIDS患者合并疱疹病毒感染的防治。 性病可促进HIV的传播,了解性病患者的HIV感染状况及临床特征具有重要的意义。在自愿接受HIV咨询检测的基础上,对临床确诊的412例性病患者进行HIV-1/2抗体检测,并对其临床特征进行分析研究。结果显示412例性病患者的HIV检出率为2.9%。性病患者中检出HIV阳性率依次为:尖锐湿疣(6.2%)、生殖器疱疹(4.2%)、梅毒(3.4%)、淋病(1.5%)及非淋菌性尿道炎(1.0%)。83.3%合并感染HIV的性病患者存在多性伴,商业性行为普遍存在,安全套使用率极低现象。感染HIV的尖锐湿疣及生殖器疱疹患者以频繁复发为突出表现,1例合并感染HIV的梅毒患者半年即进展为神经梅毒。性病患者是HIV感染的重要高危人群,危险性行为是其感染HIV和其它性病的主要原因,应该加强性病患者的HIV检测。对临床上频繁复发的尖锐湿疣及生殖器疱疹患者、快速进展的梅毒患者应高度怀疑合并HIV感染的可能。