Diferentes métodos de diagnóstico molecular na diferenciação das espécies de Sarcocystis spp

The Sarcocystis genus includes obligatory two-host life cycle protozoan parasites. It is the most numerous of the six genera of the Sarcocystidae family. The infection caused by parasites of this genus is a zoonotic and cosmopolitan disease known as sarcosistosis or sarcosporidiosis. The sarcositosis though frequently asymptomatic in its definitive hosts can be fatal in its intermediate hosts. The usual diagnoses of sarcosistosis takes place through a histological demonstration of schizonts in blood vessels and organs, and the presence of cysts in muscle tissue by necropsy or biopsy, this second method still more common and based on morphological features of the sarcocyst. However, these methods can be inadequate to a precise identification of the infector species once that, besides the genus being of numerous species, these often present similar morphological features. Another factor that makes the diagnostic more difficult is the non specificity of some Sacocystis species to their hosts. Consequently, molecular diagnostic methods have been used in order to identify the infector species and the parasite specific biological cycles, demonstrating also new species and coevolutive aspects between parasite and host. Among the most employed molecular techniques the Polimerase Chain Reaction (PCR), the nested-PCR and the Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) stands out

O gênero Sarcocystis agrupa protozoários parasitos obrigatórios heteroxenos. É o gênero mais numeroso dos seis que compõem a família Sarcocystidae. A infecção por parasitos desse gênero configura uma enfermidade denominada sarcocistose ou sarcosporidiose que possui um caráter zoonótico e cosmopolita. A sarcocistose embora, muitas vezes, assintomática em seus hospedeiros definitivos, pode ser fatal em seus hospedeiros intermediários. Os métodos de diagnóstico mais utilizados para a sarcocistose se dão através da demonstração histológica de esquizontes nos vasos sanguíneos e órgãos e da observação de cistos nos músculos à necropsia ou biopsia, este último, é o mais comum e baseia-se em caracteres morfológicos do sarcocisto. No entanto, essas técnicas podem não ser adequadas para a identificação precisa da espécie infectante uma vez que, além do gênero apresentar grande número de espécies, estas, muitas vezes, apresentam características morfológicas semelhantes. Outro fator que dificulta o diagnóstico é a não especificidade de algumas espécies de Sarcocystis aos seus hospedeiros. Sendo assim, métodos de diagnóstico molecular vêm sendo utilizados de modo a esclarecer qual a espécie infectante, quais são os ciclos biológicos específicos, identificar novas espécies e avaliar aspectos coevolutivos entre parasito e hospedeiro. Entre as técnicas moleculares mais empregadas destacam-se Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), nested-PCR e Técnica de Polimorfismo do Comprimento dos Fragmentos de Restrição (RFLP)