Toxicidade de produtos naturais para operárias de Atta sexdens rubropilosa Forel (Hymenoptera: Formicidae)

As formigas cortadeiras, pertencentes aos gêneros Atta e Acromyrmex, possuem esse nome pelo hábito que têm de cortar as folhas das plantas. Por este motivo, elas causam danos econômicos, principalmente em áreas de cultura agrícola. Para realizar o controle dessas pragas, existem inúmeros métodos; porém, os únicos que apresentam resultados satisfatórios são os que utilizam inseticidas tradicionais. O controle químico pode gerar efeitos maléficos ao ambiente, à fauna e à população humana. É por isso que há uma grande procura por métodos alternativos, utilizando produtos que tenham grande especificidade e sejam passíveis de rápida degradação, sendo, portanto, menos danosos ao ambiente. Uma destas alternativas é a utilização de produtos naturais presentes nos vegetais superiores, que podem constituir novas fontes de material com ação tóxica para estes insetos praga. Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade das plantas Magonia pubescens e Duguetia lanceolata para operárias de Atta sexdens rubropilosa. Para os testes, as formigas foram divididas em lotes de 50 operárias, distribuídas em 5 placas para cada tratamento e mantidas em B.O.D. durante os 25 dias do experimento. Nos bioensaios de ingestão, os extratos provenientes das plantas foram incorporados em dieta artificial e testados durante 25 dias. No bioensaio tópico, as substâncias eram colocadas no pronoto das formigas e era oferecida dieta pura em todos os dias do experimento. Após os testes, os dados foram transferidos para o software Prisma 3.0, para a confecção de curvas de sobrevivência e para a realização das análises estatísticas. Apesar de Magonia pubescens apresentar um bom resultado, não foi possível continuar com os testes, pois a alta polaridade dos extratos impossibilitava a separação das substâncias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Micro-fungos de interesse para o setor de petróleo, gás e biocombustíveis

Oil is a hydrocarbon mixture of various sizes, including saturated and aromatic compounds. Natural gas is a mixture of gaseous hydrocarbons and its main component is methane. In our society, the great demand for these fuels requires fast extraction, transportation and refining, increasing the number of accidents that compromise the environment. Oil is a finite resource and it is necessary to reduce the problems related to the question concerning environmental pollution which has encouraged the search for alternative fuel sources in our country. So today we have two major biofuels: ethanol and biodiesel. Concurrently, many studies have been done directed toward the isolation of microorganisms capable of degrading petrochemical industrial wastes, most of them using as a source of isolation soil and water collected in a contaminated environment. Isolation from alternative substrates has emerged as a new strategy that has provided satisfactory results. In this work, we present the leaf-cutter ants of the Attini tribe as a source for the isolation of micro-fungi with the potential for hydrocarbon degradation. These insects have a social way of life and a highly specialized system of intra and interspecific communication, which is based on the recognition of individuals through volatile chemical compounds, the majority hydrocarbons, stored in their exoskeleton. The micro-environment exoskeleton of Attini ants (genus Atta) used in this work proved to be a rich source of microbial biodiversity, as other studies have found. The flotation isolation technique applied here allowed the achievement of 214 micro-fungi, 118 representatives of the dematiaceous fungi group and 96 hyaline filamentous fungi. They were submitted to toluene degradation tests and at least one strain of each genus presented good results, namely Teratosphaeria, Exophiala, Cladosporium, Penicillium, Aspergillus... (Complete abstract click electronic access below)

Análise da distribuição dos subtipos de Linepithema micans (Formicidae: Dolichoderinae) na região sul do Brasil através da ferramenta molecular barcode

Formigas do gênero Linepithema se encontram distribuídas amplamente por todo o globo, algumas delas, como Linepithema humile são muito conhecidas por sua ação invasora, comprometendo fauna e flora dos ambientes que invadem. Devido a notoriedade dessa espécie, há uma tendência em identificar erroneamente como L. humile as espécies próximas. Assim ocorreu com outras espécies da região Sul do Brasil com características próximas a ela. L. micans é a principal espécie que se associa com a pérola-da-terra Eurhizococcus brasiliensis (Hemíptera: Margarodidae), importante praga na vinicultura gaúcha. Análises preliminares revelaram a existência de três subtipos de L. micans. No presente estudo foram analisadas diferentes populações de L. micans das vinícolas do Estado do Rio Grande do Sul com a utilização de dois genes mitocondriais, utilizados para DNA Barcode de animais, com o propósito de estabelecer a distribuição dos diferentes mitótipos de L. micans. O resultado obtido revelou a existência de 14 haplótipos, sendo 12 novos e a análise da rede de haplótipos sugere a existência de dois possíveis grupos ancestrais

Papel de Syncephalastrum racemosum como antagonista do fungo cultivado pelas formigas cortadeiras

Currently, the major method for controlling leaf-cutting ants uses toxic baits containing the insecticide sulfluramide. Such compound presents harmful effects to the environment and to human health, which drive the community’s concerns towards new strategies for controlling these insects. Previous studies showed the occurrence of Syncephalastrum racemosum in nests of the leaf-cutting ants submitted to treatments using insecticides. In order to understand the role of S. racemosum in nests of leaf-cutting ants, the present work investigated the antagonism of S. racemosum towards the leaf-cutting ant-cultivar (Leucoagaricus gongylophorus). Using in vitro essays, we co-cultivated L. gongylophorus and S. racemosum (n= 6 lineages). For comparison, we also used the same setup to test one strain of Escovopsis weberi, since this fungus is considered a specialized parasite of the leaf-cutting ant cultivar. All S. racemosum strains inhibited the growth of L. gongylophorus (ANOVA 2 way, F= 23,61, P< 0,01). The same was observed for E. weberi. There were no significant difference between S. racemosum and E. weberi inhibition (Bonferroni test, P> 0,05). In addition, we verified that all S. racemosum strains colonized and sporulated over the fungus garden up to 96 h after garden fragments without workers were inoculated with spores suspensions. Similar results were observed on gardens that were inoculated with spores of E. weberi. The results indicate that S. racemosum act as antagonist of the leaf-cutting ant cultivar. The putative possibility for using S. racemosum as biological control agent of leaf-cutting ants is discussed in the present work

Anotação de 500 ESTs da saúva Atta laevigata

Leaf-cutting ants belonging to the genus Atta occur from the tropical to subtropical regions of the Americas. These insects are considered pests because they cause serious damage in agricultural areas. Among these, stands out Atta laevigata, species which the colony requires a huge amount of leaves to grow its symbiotic fungus which is the main food source of the nest. Thus, the study of the transcriptome of these ants becomes a useful tool, because it is possible to identify proteins potentially involved with their skills as insect pests and also those related to differences between the varieties present in the nests. In the present study we described results of the partial analysis of the transcriptome of the leaf-cutting ant pest A. laevigata, from cDNA sequences previously generated in the Laboratory of Evolution and Molecular (LEM). The results may also be used for molecular, ecological, metabolic and evolutionary studies about ants, and heterologous expression of important proteins as molecular targets for the control of some leafcutting agricultural pests.

Análise morfológica dos túbulos de Malpighi, do ventrículo e das glândulas pós-faríngeas de operárias adultas de Atta sexdens rubropilosa tratadas com hidrametilnona

O objetivo do presente estudo foi realizar bioensaios para avaliação da toxicidade da hidrametilnona, (solubilizada em acetona, com e sem óleo de soja) para operárias de Atta sexdens rubropilosa, bem como a análise morfológica dos órgãos dissecados dessa espécie de formiga, cujos indivíduos foram coletados em momentos específicos dos bioensaios de toxicidade. Por meio da análise morfológica, verificou-se o efeito toxicológico do composto químico nas glândulas pós-faríngeas, no ventrículo (intestino médio) e nos túbulos de Malpighi das formigas e, adicionalmente, foi possível correlacionar esses dados morfológicos com os dados da taxa de sobrevivência obtida nos bioensaios. O experimento com a hidrametilnona, solubilizada em uma mistura de acetona e óleo, indicaram uma via alternativa de ingestão do princípio ativo das iscas formicidas devido ao fato do óleo atuar como um coadjuvante, confirmando estudos prévios que sugerem a ação da glândula pós-faríngea na metabolização dos lipídios ingeridos. Dessa forma, o óleo presente na solução de hidrametilnona poderia estar envolvido no carregamento indireto da hidrametilnona para a glândula e, consequentemente, a diminuição da concentração desse princípio ativo no lúmen intestinal. Isto explicaria o menor grau de degeneração tecidual observada no intestino das formigas tratadas com hidrametilnona solubilizada em uma solução de acetona e óleo, em comparação com formigas tratadas com hidrametilnona solubilizada somente em acetona. Os controles com adição da acetona não apresentaram diferença significativa na porcentagem de sobrevivência em relação ao grupo testemunha e este solvente não interferiu na morfofisiologia das células. Os dados obtidos foram importantes para a melhor compreensão do efeito toxicológico da hidrametilnona nestes indivíduos

Fungos fitopatógenos associados às formigas cortadeiras (Formicidae: Tribo Attini)

The ants of genus Atta belong to the Attine tribe (order Hymenoptera, family Formicidae, subfamily Myrmicinae) and are commonly known as leaf-cutting ants for having the habit of cutting several vegetable species used as substrate for growing mutualistic fungus (Agaricales: Lepiotaceae). Recent studies showed that, in addition to that, other fungi may occur in the nests in a dorment state or participate in the functioning dynamic of this symbiosis. Researches related to surveys of fungus biodiversity in nests of different Atta species have found important phytopathogenic representatives. In Brazil, studies about integrated management of plagues, developed by Embrapa Meio Ambiente (Embrapa Environment), point out the need of higher investments in projects that involve the phytopathogenic transmission by insects in order to reduce costs to control them or minimize environmental impact. The purpose of this study was to broaden the knowledge about the ecology of these fungi, isolating and identifying species associated with Attine tribe ants, thus understanding the scope of pathogenic and phytopathogenic species spread by these ants. For that reason, gynes were collected from Atta laevigata and Atta capiguara anthills located at Unesp Botucatu (São Paulo, Brazil) campus. In order to isolate the fungus, the mineral oil floating technique was used. The identification of the isolated fungi was done based on microscopic and molecular characteristics using DNA ribosomal sequencing. The most highly abundant genera found so far were: Cladosporium, Exophiala, Penicillium, Acremonium, Phialophora and Teratosphaeria. Representatives of the genera Exophiala, Phialophora and Cladosporium may be human pathogens, whereas Teratosphaeria and Penicillium are related to diseases in Eucalyptus and citric fruits, respectively. The results show that these ants may host important fungal species besides the ones already... (Complete abstract click electronic access below)

Análise da susceptibilidade de leveduras isoladas de insetos sociais aos antifúngicos

A frequência de micoses invasivas causadas por fungos oportunistas, incluindo leveduriformes, vem aumentando significativamente nas últimas décadas e atinge principalmente indivíduos imunocomprometidos. A tribo Attini possui cerca de 230 espécies de formigas e todas possuem o hábito de cultivar e se alimentar de fungos. Algumas espécies cultivam o fungo mutualista em nódulos poligonais sólidos com 0,25 a 0,50mm de diâmetro, aproximadamente. No interior desses nódulos, encontram-se células na forma de leveduras, que quando semeadas em meio de cultura se desenvolvem como fungo filamentoso. Este tipo de fungicultura está restrito a algumas espécies do gênero Cyphomyrmex. Neste trabalho, isolamos 30 leveduras dos nódulos de oito ninhos de Cyphomyrmex transversus da região de Ilhéus (BA), e analisamos a susceptibilidade aos seguintes antifúngicos: Anfotericina B (AMB), Fluconazol (FCZ), Voriconazol (VCZ) e Itraconazol (ITZ). A caracterização das estirpes foi feita através de métodos morfológicos e moleculares, incluindo-se o sequenciamento dos domínios D1/D2 do rDNA. A avaliação da atividade antifúngica foi realizada através do método de microdiluição, de acordo com a norma M27-A2 (CLSI, 2002). Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida krusei ATCC 6258 foram utilizadas como controle. Os resultados foram interpretados segundo os pontos de corte (breakpoints) aplicados ao gênero Candida. As estirpes foram identificadas como Trichosporon asahii (18), T. coremiiforme (4), Candida carpophila (syn. C. guilliermondii) (4), Galactomyces candidum (syn. Geotrichum candidum) (3) e Cryptococcus laurentii (1). Todas as espécies são conhecidas por possuírem representantes que já foram relatados como patógenos oportunistas. Elas foram sensíveis aos azóis FCZ, VCZ e ITZ, com exceção de G. candidus, cujas estirpes apresentaram sensibilidade dose-dependente a FCZ e ITZ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Fungos melanizados associados a formigas cortadeiras (Formicidae: Tribo Attini)

Leafcutter ants are considered pests in agriculture for their impact in human crops, as they behave utilizing foliar fragments to raise their simbiont fungi (Agaricales: Lepiotaceae) inside their nest. Recent studies have noticed that other fungi may be associated to ants inside their nests, for instance, fungi with melanized wall, known by “dematiaceous”. Historically, many black fungi have been noticed as fitopathogens of many plant cultures with economic importance, highlighting dematiaceous ecological behavior importance in this study. This investigation had the purpose of amplifying ecological knowledge of this fungi, isolating and identificating dematiaceous fungi found in Attini nests, having the intention of understanding plant pathogens dispersion by ants. In this work, 66 isolates were characterized in the following genus: Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces, Oxyporus, Rhodotorula, Bipolaris, Curvularia, Fusarium, Giberella, Paraphaeosphaeria, and Cladosporium. The genus Bipolaris, Curvularia, Fusarium and Giberella are known for their opportunistic behaviour, with some published human infections in literature. Fusarium is a notorious fitopathogen, with wide number of descriptions and studies involving pathogenicity development, biochemistry and genetics. The isolates outline is of phyto – associated (phytopathogens, endophytic or epiphitic), fulfilling this work intention in alarming fungi capacity of dispersal by ants. The comprehension of phytopathogenical processes may be clarified based on the knowledge of oportunistics fungi that may utilize ants bodies for their own dispersal. The identification of isolates with capacity of infecting humans brings out public health issues.

Análise morfológica de operárias de Atta sexdens rubropilosa tratadas com thiamethoxam

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Alterações na dinâmica de colônias de Atta sexdens rubropillosa Forel, 1906 (Hymenoptera: Formicidae) submetidas ao tratamento com iscas tóxicas

As formigas cortadeiras são consideradas pragas por causarem diversos prejuízos em áreas agrícolas e, por este motivo, há um crescente interesse em métodos variados de controle destes insetos. Atualmente, existem diversos métodos de controle conhecidos, mas o mais utilizado é o controle químico, que apresenta diferentes estratégias de formulação e modos de aplicação. O principal método químico utilizado são as iscas tóxicas, que tem a melhor eficiência e já são utilizadas em escala comercial. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as alterações que ocorrem na dinâmica de colônias de Atta sexdens rubropilosa Forel, 1906 (Hymenoptera: Formicidae) submetidas ao tratamento com iscas tóxicas contendo os ingredientes ativos sulfluramida e hidrametilnona, as quais serão comparadas com uma colônia controle, que receberá isca sem ingrediente ativo. Para isso, foram utilizadas três colônias de A. s. rubropilosa, mantidas em laboratório, com aproximadamente 1000 mL de jardim de fungo cada. Elas foram dispostas em vitrais, interligados a dois potes plásticos, um para a câmara de forrageamento e outro para o lixo. Um dia antes de iniciar o experimento, todo o lixo foi retirado e as colônias foram deixadas sem o fornecimento de alimento. Após 24 horas sem alimentação, as iscas foram oferecidas na câmara de forrageamento de cada colônia. A colônia 1 recebeu 3g de isca sem ingrediente ativo; a colônia 2 recebeu 3g de isca contendo sulfluramida; e a colônia 3 recebeu 3g de isca contendo hidrametilnona. Durante 10 dias, foram avaliados aspectos como carregamento, incorporação e devolução das iscas, alterações comportamentais das operárias classificadas como sintomas de intoxicação, mudanças no aspecto físico dos jardins de fungo, como umidade e aparecimento de fungos contaminantes, e a extinção da colônia. A partir dos dados obtidos, foram feitas análises comparativas das atividades comportamentais...

Antagonismo de actinobactérias isoladas de Trachymyrmex frente ao fungo parasita Escovopsis

As formigas da tribo Attini mantêm uma associação com actinobactérias encontradas nos biofilmes presentes no integumento desses insetos. Dentre as actinobactérias associadas às formigas Attini, os gêneros Pseudonocardia e Streptomyces são considerados prevalentes. Estudos indicam que essas bactérias auxiliam na defesa do jardim contra patógenos através da secreção de compostos antimicrobianos. Recentemente foi sugerido que tais bactérias podem ser importantes na defesa do próprio inseto, especialmente contra entomopatógenos. Duas teorias principais foram propostas para explicar as interações entre actinobactérias, formigas Attini e o microfungo parasita Escovopsis. Uma delas defende a coevolução entre esses organismos e a outra rejeita a existência da mesma, argumentando que a interação formiga-actinobactéria é uma simbiose aberta. Neste trabalho, avaliamos a interação entre actinobactérias e Escovopsis em experimentos in vitro. Um total de 14 linhagens de actinobactérias, compreendendo 12 de Pseudonocardia, uma de Streptomyces e uma de Actinoplanes, isoladas de Trachymyrmex (um gênero de formiga Attini não cortadeira) foram testadas frente a quatro linhagens de Escovopsis. Os Escovopsis foram isolados tanto de jardins de fungos de formigas Trachymyrmex quanto de cortadeiras de folhas (Acromyrmex e Atta). O crescimento micelial de Escovopsis (em cm²) foi medido na presença e na ausência (controle) das actinobactérias. Os resultados demonstraram que todas as actinobactérias testadas inibiram Escovopsis, mas as taxas de inibição foram variáveis dependendo da linhagem da actinobactéria (p < 0,05). A linhagem de Streptomyces foi a mais efetiva, corroborando dados da literatura que indicam que outros micro-organismos, além de Pseudonocardia, também apresentam ação inibitória frente à Escovopsis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Natureza do antagonismo entre fungos oportunistas e o fungo cultivado pelas formigas cortadeiras

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Comportamento predatório de operárias de Ectatomma opaciventre (Hymenoptera, Formicidae) sobre a mosca Hermetia illucens (Diptera, Stratiomyidae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Comunidade de formigas (Hymenoptera: formicidae) em cultivo de videiras no município de São Roque - São Paulo

The cultivation of grapes is one of the most traditional cultures and the world's oldest one. In Brazil, cultivars occupy an area of approximately 90 thousand hectares, covering the south, southeast and northeast, in latitudes ranging from 30 º 56 '15''S up to 5 º 11' 15''S. The culture of the vine may be the target of the attack of some diseases and pests, and currently the main concern for growers is the subterranean mealybug, Eurhizococcus brasiliensis (Hemiptera: Margarodidae), known as pearl-ground. This arthropod infests the roots causing a progressive languish of the vine, even causes its death. In southern Brazil it is known that some species of ants can disperse pearl-ground for short distances, however, there is no information about that in the State of Sao Paulo. Thus, it is extremely important to perform studies with this focus on wine regions in this State. Therefore, this study aimed to identify the species of underground ant community in different grape varieties found in vineyards in the town of São Roque – SP, Brazil. With that purpose, samples were collected within one year. We used underground pitfalls spread across twelve points. In each of the points were placed two traps, one containing honey and the other containing sardine as attractive. The results revealed the presence of three morphospecies of ants in Niágara Rosada and four in other grape varieties, there was no significant difference in the species richness among the cultivars (Kruskal-Wallis - 0.33, p = 0.5). In both trials, the most frequent species was Brachymyrmex sp.4, suggesting that there is no dominance of distinct species of Niágara Rosada and the other grape varieties. There was no dissimilarity in species richness of the ones visiting honey or sardines (Kruskal-Wallis - 0.08, p = 0.7) and the analysis of variance indicated a great similarity in species richness between the rainy and dry seasons (Kruskal-Wallis - 0.09, p = 0.7)