Antimicrobial capacity of plasma from anurans of the Atlantic Forest

The viability and interpretation of techniques for the evaluation of immunocompetence of animals in their natural environment has been largely debated. One of these methods is based on testing the antimicrobial capacity of the blood and/or plasma in vitro, which could rapidly and effectively assess the immunological conditions of natural populations. We tested the applicability of the antimicrobial capacity of plasma (ACP) assay in anuran amphibians from the Atlantic Forest. The assay was performed by measuring both the turbidity (in a spectrophotometer) and the colony forming units (CFU) of the remaining bacteria (Escherichia coli) following exposure to amphibian plasma. Although both assays were correlated, the ACP assay by spectrophotometry showed 10 times lower intra-assay variation. We also found interspecific variation in ACP, as well as the maintenance of ACP values in males from the same population, collected in different breeding seasons. Thus, the estimation of ACP by spectrophotometry provides a convenient and accurate method for evaluating innate immunocompetence in comparative and ecophysiological studies of anuran amphibians.

A viabilidade e interpretação de técnicas para a avaliaçao da imunocompetência dos animais em seu ambiente natural têm sido amplamente debatidas. Um destes métodos baseia-se em testes da capacidade antimicrobiana do sangue e/ou plasma, in vitro, o qual pode rápida e efetivamente promover a avaliação das condições imunológicas de populações naturais. Testamos a aplicabilidade do ensaio de capacidade antimicrobiana do plasma (CAP) em anfíbios anuros. O ensaio foi realizado tanto através da medição da turbidez (em espectrofotômetro) quanto através do número de unidades formadoras de colônias (UFC) de bactérias remanescentes após a exposição ao plasma dos anfíbios. Embora ambos os ensaios tenham sido correlacionados, o ensaio de CAP por espectrofotometria mostrou variação intra-ensaio 10 vezes menor. Encontramos também variação interespecífica nos valores da CAP, bem como a manutenção dos valores para machos de uma mesma população, coletados em diferentes estações reprodutivas. Assim, a estimativa de CAP por espectrofotometria constitui um método prático e preciso de avaliação de imunocompetência inata para estudos comparativos e ecofisiológicos de anfíbios anuros.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo, JP2006/546991

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo, 2011/105608

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico, 140272/20119

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior